甲壳素涂层PGLA神经导管修复兔面神经缺损的实验研究

目的:探讨甲壳素涂层PGLA神经导管修复兔面神经缺损的效果。方法:成年雄性新西兰兔24只,无菌条件下切断双侧面神经下颊支,制成15mm的兔面神经下颊支缺损模型。左侧用甲壳素涂层聚丙交脂-乙交脂共聚物[poly(L-lactide-co-glycolide),PGLA]神经导管修复;右侧用翻转自体神经修复作为对照。术后5周、10周和14周行大体观察、电生理检查、组织学、电镜观察评价修复效果。结果:术后5周观察到神经导管中有新生轴索通过,再生神经发育不成熟;右侧自体神经修复近段有髓神经纤维均匀疏散分布,远段未见明显再生神经束形成。术后14周左侧再生神经已通过神经导管长入远端,电生理检查结果表明自体神经修复侧再生神经质量优于神经导管修复侧,差异有统计学意义(P<0.01)。自体神经修复再生纤维密度优于神经导管修复侧,差异有统计学意义(P<0.01),但自体神经修复侧近段神经髓鞘部分空泡样变性及脱髓鞘改变,远段再生神经纤维束形成少,面肌联带运动程度较导管修复侧严重。结论:甲壳素涂层PGLA神经导管能有效修复周围神经缺损,有望替代自体神经移植。     

α-氰基丙烯酸酯医用胶在几丁质室修复兔颞骨内面神经缺损中的应用

α-氰基丙烯酸酯医用胶应用于几丁质室修复颞骨内面神经缺损神经固定的可行性及神经再生的效果。方法 成年大耳白兔48只，左耳颞山脚内面神经缺损均用几丁质室桥接，固定颞骨内面神经的方法为实验组采用α-氰基丙烯酸酯医用胶粘合法，对照组采用缝合法及自然放置法，术后1、3个月进行功能测试和组织形态学研究。结果 医用胶粘合作用强，能将颞骨内面神经固定于几丁质室内而不引起几丁质室变形，豁裂；粘合法神经再生成功率高，再生神经纤维排列整齐，密集，功能恢复良好，优于缝合法和自然放置法，结论 几丁质室修复兔颞骨内面神经缺损应用α-氰基丙烯酸酯医用胶固定颞骨内面神经切实可行，方法简便，省时，神经再生质量高。     

神经生长因子和雪旺氏细胞分泌的神经营养活性物质促进周围神经再生的实验研究

在桥接大鼠坐骨神经２０ｍｍ缺损的肌移植体中，于术中、术后１０天、２０天分３次分别注Ａ２．５Ｓ神经生长因子（ＮＧＦ）纯品和雪旺氏细胞分泌的神经营养活性物质（５Ｃ－Ｄ－ＮＴＳ）。术后５个月经组织形态学、神经电生理和肌肉收缩功能测定等，发现两者均能促进周围神经再生，其中注入ＳＣ－Ｄ－ＮＴＳ组能增加再生有髓神经纤维的数目、直径和髓鞘厚度，提高腓肠肌Ｍ波幅值，增强比目鱼肌收缩力；而注入ＮＧＦ组仅增加再生有髓神经纤维数口。     

肌基膜管结合神经生长因子修复脊髓缺损的实验研究

本实验应用肌基膜结合神经生长因子（ＮＧＦ）移植修复脊髓缺损。３０只大白鼠，于下胸段切断脊髓组织，造成５ｍｍ的脊髓缺损，分别进行：（１）１２只自体肌基膜管移植修复脊髓缺损；（２）１２只自体肌基膜管浸泡ＮＧＦ液移植；（３）６只脊髓切除后不作处理为对照组，术后１０～１２周分别取脊髓标本进行组织学评价，结果表明，肌基膜管结合ＮＧＦ移植组明显地好于单纯肌基膜管移植组，前者移植物与脊髓连接紧密，移植物中有较多     

酸性成纤维细胞生长因子促进引导性骨再生的实验研究

目的　研究酸性成纤维细胞生长因子（α Ｆ Ｇ Ｆ）对引导性骨再生（ Ｇ Ｂ Ｒ）的作用,增强 Ｇ Ｂ Ｒ 修复骨缺损的能力。方法　１６ 只新西兰白兔分为四组,每组 ４ 只,造成兔双侧桡骨干１０ ｍ ｍ 节段性骨缺损,以硅胶管桥接骨缺损,实验侧管内置入人基因重组酸性成纤维细胞生长因子（ｈｒａ Ｆ Ｇ Ｆ）２４ μｇ,对侧管内注入生理盐水作对照。于术后２、４、６ 及８ 周各处死一组兔,作 Ｘ 线、大体、组织学观察。结果　实验侧术后２ 周即在骨断端髓腔、骨内膜及皮质断面处有新骨形成,并长入管内血肿,术后４ 周新骨长入血肿中心,８ 周完全骨愈合。对照侧在各阶段新骨形成均不如实验侧,８ 周时仅出现部分骨愈合。结论　酸性成纤维细胞生长因子（ａ Ｆ Ｇ Ｆ）可促进 Ｇ Ｂ Ｒ,增强其修复骨缺损的能力。     

神经生长因子（NGF）促进挤压伤坐骨神经再生

作者就神经生长因子（ＮＧＦ）对挤压伤坐骨神经再生和作用进行了研究．３０只大鼠分为６组，每组各５只，双侧１０条坐骨神经．其中３组为对照组，３组为ＮＧＦ治疗组，观察期分别为１２、２８和５６天．结果显示ＮＧＦ治疗可使神经肌肉动作电位出现提早，运动神经传导速度加快，再生有髓神经纤维直径增粗及早期再生有髓神经纤维数量增加，表明ＮＧＦ可促进挤压伤坐骨神经再生．     

关节—干端软骨细胞移植修复免桡骨缺损

目的 研究组织工程 软骨移植于成年兔桡骨缺损后的生长分化与转归特点，以及引导性骨再生和骨缺损的修复机制。方法 取自一日龄新生兔关节－干端复合物的软骨细胞在几丁质纤维网中增殖２１ｄ后装入硅胶管内，套接在成年兔桡骨干１ｃｍ的缺损处（实验组１２只）；对照组１０只在缺损处套接空硅胶管，２只仅填入裸几丁质纤维。术后４周两组各处死３只动物取材，其余在术后１６周取材。结果 实验组术后４周３只动物的工程软骨组织在     

兔同种异体颜面复合组织移植后面神经再生的初步研究

目的 建立兔颜面部复合组织同种异体移植的实验动物模型,观察移植后面神经的再生情况.方法 选取日本大耳白兔16只,随机配对后分别作为供、受体,分为8对.建立兔同种异体颜面复合组织移植的实验动物模型,FK506与皮质激素联合应用作为免疫抑制治疗方案.术后14、28、40d取移植面神经吻合口处标本分别行HE染色光镜和透射电镜观察,术后28、40d分别行神经肌电图检测,分析移植后兔面神经的再生情况.结果 8例移植手术中,6例获得成功.移植后14d神经纤维以变性改变为主,有少量神经纤维长入吻合口,28d移植神经的吻合口有较多的神经纤维长入,神经束排列较前规则,40d再生神经纤维变得较前成熟,有髓神经的数量增多,但仍可见到变性的神经纤维.术后28d未测得明显的神经动作电位,40d测得的神经动作电位波形离散,表现为明显的传导阻滞.结论 同种异体颜面复合组织移植后面神经的再生是个极为缓慢的过程,需要经历一系列的病理生理过程.移植后40d神经吻合口可出现组织结构上较为成熟的再生神经纤维,但要达到功能上的恢复尚需更长时间.     

同种异体神经复合体修复兔坐骨神经缺损的研究

目的 用种植胎兔雪旺细胞的去细胞同种异体神经复合体修复兔缺损的坐骨神经,观察坐骨神经再生及功能恢复.方法 健康成年新西兰白兔48只,体质量1.5-2.0 kg,随机分成2组.两组动物均切除一段坐骨神经,造成2.0 cm长的缺损.实验组:用种植胎兔雪旺细胞的同种异体神经复合体修复坐骨神经.对照组:仅用去细胞同种异体神经修复.术后4、8、16周进行大体观察、标本光镜和电镜观察且进行量化分析、肌湿重检测.结果 手术区局部均未出现明显的排斥反应,实验组足部溃疡愈合情况优于对照组,实验组再生神经纤维数目、有髓神经纤维轴突直径、髓鞘厚度4、8、16周分别为(906.25±30.68,1726.25±51.89,2825.13±22.79)、(5.35±0.62,5.46±0.38,5.59±0.80),(1.65±0.37,1.75±0.41,1.83±0.49)均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).小腿三头肌湿重于术后4周两组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组术后8、16周分别为(5.62±0.99,7.38±0.26)恢复优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 种植雪旺细胞的去细胞同种异体神经复合体对神经再生及功能恢复有更好的促进作用.     

联合运用冻融法和化学法去细胞同种异体神经修复兔面神经缺损

目的：通过对去细胞同种异体神经处理方法的改进,找出一种修复兔面神经缺损的理想替代材料。方法：取24只兔子,将兔左侧面神经上颊支切断以造成面神经缺损1.0cm的模型,根据修复方法不同,随机分成2组：实验组为联合运用冻融法和化学法去细胞同种异体神经修复组,对照组为自体面神倒置修复组,每组12只。术后3个月行大体观察、神经电生理检测、有髓神经纤维计数以及电镜观察,采用SPSS17.0软件包对数据进行t检验,对面神经恢复情况进行综合评价。结果：两组兔子均存活,切口愈合良好,兔面形基本对称;实验组与对照组左侧面神经上颊支传导速度分别为（55.74±10.56）m/s及（61.34±9.72）m/s,差异无显著性（P〉0.05）;实验组与对照组移植体远端吻合口邻近4.0mm段有髓神经纤维数量分别为（18173.62±918.38）n/mm2及（18601.21±982.31）n/mm2,差异亦无显著性（P〉0.05）;电镜检查结果相似。结论：联合运用冻融法和化学法去细胞同种异体神经能满意修复一定长度的面神经缺损,可以作为自体神经的一种有效替代物。     

Autogenous standard versus inside-out vein graft to repair facial nerve in rabbits

Objective： To evaluate autogenous vein grafts and inside-out vein grafts as conduits for the defects repair in the rabbit facial nerves. Methods： The 10 nun segments of buccal division of facial nerve were transected for 48 rabbits in this study. Then the gaps were immediately repaired by autogenous vein grafts or inside-out vein grafts in different groups. All the animals underwent the whisker movement test and electrophysiologic test during the following 16 weeks at different time points postoperatively. Subsequently, the histological examination was performed to observe the facial nerve regeneration morphologically. Results： At 8 weeks after operation, the facial nerve regeneration has significant difference between the experimental group and the control group in electrophysiologic test and histological observation. However, at the end of this study, 16 weeks after operation, there was no signifi- cant difference between inside-out vein grafts and standard vein grafts in enhancing peripheral nerve regeneration. Conclusion： This study suggest that both kinds of vein grafts play positive roles in facial nerve regeneration after being repaired immediately, but the autogenous inside-out vein grafts might accelerate and facilitate axonal regeneration as compared with control.     

去细胞异种神经复合神经生长因子修复神经缺损的实验研究

目的 应用含有神经生长因子(NGF)的去细胞异种神经基膜管作为神经移植替代物桥接大鼠坐骨神经缺损,观察其对神经再生的作用.方法 选用Wistar大鼠45只,随机分为3组,每组15只,于术制成右后肢坐骨神经长10 mm的神经缺损,取兔胫神经制成去细胞神经基膜管,电镜及HE染色观察神经基膜管超微结构,流式细胞仪检测去细胞前后神经主要组织相容性抗原Ⅱ(MHC Ⅱ)的变化情况.A组以含有NGF的去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,B组单纯采用去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,C组采用自体神经移植修复神经缺损.术后1个月行神经电生理检测即胫后肌群运动诱发电位,用HE染色、免疫组化染色、透射电镜等方法对移植体远端吻个口再生神经纤维进行形态学观察,并对再生有髓神经纤维的数量、密度、直径及雪旺细胞的密度进行量化分析.结果 移植前新鲜神经组MHC-Ⅱ检测值为72.14±19.88,去细胞组MHC-Ⅱ检测值为4.19±3.11,两组比较差异有统计学意义(t=3.817,P＜0.05);透射电镜观察显示为胶原性管道,无细胞成分.术后4周,处死前行运动诱发电位检测,神经传导速度A组为(21.16±2.31)m/s,B组为(13.37±1.89)m/s,C组为(21.43±2.18)m/s,A组与 C组比较差异无统计学意义(P＞0.05),A组与 B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).组织学观察见3组移植体远端吻合口横切面再生神经纤维呈微束状,透射电镜观察再生神经纤维具有正常的形态和结构.A、C组再生神纤纤维数量及直径均优于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经化学萃取的去细胞兔胫神经基膜管能够移植于大鼠,成功修复大鼠坐骨神经缺损,而且复合NGF的去细胞基膜管在神经修复质量上优于单纯的去细胞神经基膜管,更加接近自体神经移植的效果.     

再生小室内间断给予蛋白激酶C激动剂对周围神经表达NGF及损伤修复的影响

目的探讨大鼠坐骨神经再生小室内间断给予蛋白激酶C激动剂-佛波醇酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)后,坐骨神经蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)mRNA、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)mRNA表达变化规律及轴突数目变化. 方法 SD大鼠42只行双侧坐骨神经中段切断约5 mm,"T"形硅胶管套接,随机分为6组,分别为损伤1、3天,1、2、3和4周组.右侧间断给予1×10-9mol/L PMA(PMA侧);左侧注射等量生理盐水(对照侧).采用组织切片核酸原位杂交(in situ hybridization,ISH)技术检测各组术后各不同点PKC mRNA和NGF mRNA在坐骨神经表达的动态变化及轴突数目变化. 结果对照侧大鼠坐骨神经PKC mRNA在损伤后表达上调,第2周达高峰后下降;NGF mRNA在损伤后表达上调,第3周达高峰值后下降.PMA侧PKC mRNA于第2、3和4周表达较对照侧明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);NGF mRNA第2、3和4周表达也较对照侧明显增强,差异有统计学意义(P＜0.01).轴突数目在2、3和4周时多,差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 PKC介导了周围神经损伤修复中的NGF mRNA表达及神经再生,而且PMA能够促进NGF mRNA表达及促进轴突生长.     

外消旋聚乳酸复合神经生长因子缓释导管促周围神经再生的形态学研究

目的 建立外消旋聚乳酸复合神经生长因子（poly-D，L-lactic acid／nerve growth factor，PDLLA／NGF）可吸收性缓释导管桥接修复大鼠坐骨神经缺损的动物模型，观察复合导管对大鼠坐骨神经缺损再生的促进作用。方法利用溶剂挥发法制备PDLLA单纯导管和PDLLA／NGF缓释导管，每根缓释导管含NGF450U。SD大鼠40只随机分成4组，每组10只，切除中段坐骨神经10mm之后分别行自体神经移植（A组）、单纯导管桥接（B组）、单纯导管加一次性给药（C组）、PDLLA／NGF缓释导管桥接（D组）修复坐骨神经，除A组外，均保留10mm缺损。术后3个月观察神经再生情况，比较各组光镜、电镜及图像分析等指标。结果术后3个月导管与周围组织粘连松，并开始降解，但外形仍保持完整。再生神经均顺利通过导管腔，组织学观察A组和D组内神经纤维数目多，大小均匀，成熟良好；B组和C组纤维结缔组织多，神经纤维细小，髓鞘薄。图像分析显示除神经纤维计数D组高于A组外，A组和D组在纤维直径、轴突直径和髓鞘厚度方面差异均无统计学意义（P〉0．05），并明显优于B组和C组（P〈0．05）。结论 PDLLA／NGF缓释导管能够有效促进大鼠坐骨神经缺损再生，组织学观察指标接近自体神经移植。     

复合神经生长因子的纳米纤维导管促神经再生的初步研究

目的 探讨应用同轴静电纺丝技术制备复合神经生长因子的神经导管的可行性,检测神经生长因子的活性及对神经再生的作用.方法 应用同轴静电纺丝技术制备以可降解生物材料乳酸己内酯共聚物[P(LLA-CL)]为壳层材料、神经牛长冈子(NGF)和牛血清蛋白(BSA)为芯层材料的纳米纤维,纺织成神经导管复合体.模拟体内环境进行体外降解缓释8周,在不同时间点,应用PCI2细胞培养法检测缓释液中NGF的生物活性.构建大鼠坐骨神经10 mm缺损模型.分别采用自体神经移植(A组)、P(LLA-CL)/BSA/NGF导管(B组)、P(LLA-CL)/BSA导管加一次性注射NGF(C组)、P(LLA-CL)/BSA导管(D组)桥接神经断端,术后12周进行再生神经形态学等观察.结果 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管在体外8周尚末完全降解.能够持续释放NGF,并保持牛物活性.解剖观察可见再牛神经均通过神经导管,B组再生神经的卣径最均匀一致,达到正常神经的直径.透射电镜图片显示,A组和B组神经纤维数日多、大小均匀、成熟良好,C组和D组纤维结缔组织多、神经纤维细小、髓鞘薄.结论 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管具有良好的组织相容性和生物活性,能够诱导并促进神经再生,提高神经再牛的质量,其移植效果接近于自体神经移植.     

REPAIR OF FACIAL NERVE WITH ALGINATE SPONGE WITHOUT SUTURING: AN EXPERIMENTAL STUDY IN CATS

A bioabsorbable material, alginate, was used to repair a defect in the facial nerve. In five cats a 5-mm gap was created in the dorsal ramus of the facial nerve on one side selected at random, which was repaired by implantation of alginate sponge without suturing. In the control group, two cats had a similar nerve injury but without implantation of alginate. Behavioural, electrophysiological, and histological examinations were made over a period of 16 weeks postoperatively. Movement of the upper eyelids and electrophysiological function were restored 12 weeks postoperatively, and many myelinated axons were observed both in the gap of facial nerve and its branches 16 weeks after operation, whereas no alginate residue was detected remaining within gap. In the control group, no movement or electrophysiological restoration was recorded, and there were few regenerated axons accompanied by a large amount of scar tissue. The nerve repaired with alginate showed remarkable regeneration. These results suggest that alginate is a promising material for facial nerve repair, and sutureless repair with alginate is a possible option for treating defects in the facial nerve.     

微囊化转NGF基因3T3细胞修复大鼠周围神经损伤的实验研究

目的 探讨微囊化转NGF基因3T3细胞移植促进神经再生的可行性。方法 带有小鼠NGF基因的质粒pcDNA3．1 ／NGF经FuGENE^TM6转染NIH 3T3细胞，用APA(海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠)微胶囊包埋后，进行体外培养，定期检测微囊化细胞活性和NGF分泌量变化。同时，将转基因细胞移植于大鼠坐骨神经切断吻合处，于手术后4、8、12周检测神经再生和功能恢复结果。结果 微囊化转NGF基因3T3细胞在体外培养条件下可存活3个月并能稳定表达，移植于损伤坐骨神经的微囊化转NGF基因细胞组再生神经密度大，排列有序，吻合口瘢痕少，单核细胞浸润少，水肿轻，动作电位幅值和传导速度显著增大，坐骨神经功能指数明显升高。结论 微囊化转NGF基因3T3细胞移植可显著促进神经再生和降低异体细胞移植免疫反应。     

早期应用神经营养因子对周围神经损伤修复的研究观察

[目的]研究探索神经生长因子(nervegrowth factor NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor bFGF)联用对大鼠坐骨神经钳夹损伤后神经纤维再生修复的促进作用和对失神经支配的小腿三头肌的保护作用。[方法]手术钳夹损伤坐骨神经后，损伤处神经内注射NGF和bFGF，对照组注射等量生理盐水，术后每日在术侧腓肠肌内注射药物，术后4、8、12周，进行足印分析及坐骨神经功能指数测定，取小腿三头肌称湿重，取脊髓及神经肌肉行组织病理观察。[结果]联用NGF bFGF，能显著改善神经损伤后引起的神经功能指数，有效地减轻由于失神经支配后肌肉的萎缩，促进神经纤维的修复与再生。[结论]联用NGF、bFGF对大鼠坐骨神经钳夹损伤后神经纤维再生修复具有显著的促进作用，可减轻失神经支配的小腿三头肌的萎缩。     

促红细胞生成素促进大鼠坐骨神经再生作用的实验研究

目的 探讨促红细胞生成素(Erythoropoietin,EPO)对大鼠坐骨神经损伤修复后神经再生的影响,为周围神经损伤的临床治疗提供实验依据.方法 雄性SD大鼠40只,随机分为两组,即EPO组和神经生长因子(NGF)组,用硅胶管桥接10 mm的坐骨神经缺损,EPO组和NGF组分别注射EPO和NGF.术后4周和8周时每组分别提取10只大鼠,以坐骨神经功能指数(SFI)、运动神经传导速度(MNCV)、形态学观察和蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)免疫组织化学染色,评估EPO对大鼠坐骨神经再生的影响.结果 术后4周SFI,EPO组为[(-78.85±3.87),x-±s,下同],NGF组为(-79.98±4.58),差异无统计学意义(P>0.05);术后8周SFI,EPO组为(-60.26±2.91),NGF组为(-64.65±4.11),差异有统计学意义(P<0.05).术后4周和8周时,EPO组MNCV、有髓神经纤维数目以及PGP9.5免疫阳性神经纤维的平均光密度和积分光密度均优于NGF组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EPO 能促进大鼠坐骨神经损伤后的修复与再生.