人工神经网络在统计学中的应用

人工神经网络理论是多学科交叉发展的产物，也是计算统计学的一个分支。人工神经网络不要求变量满足正态性和独立性等条件。因此人们在传统多元统计方法所要求的假设条件不满足时可以考虑使用人工神经网络方法。人工神经网络应用于统计学所表现出的优良特性已引起众多学者的关注。本文详细介绍了一种重要的人工神经网络方法———ＢＰ神经网络的原理，并以应用实例进行了说明     

实时荧光定量PCR在医学遗传学方面的应用

实时荧光定量 PCR是近年来发明使用的一种核酸检测技术 ,因高精确度、高灵敏性、污染少 [2 ,3]等优点已在生物医学基础科研及医学临床中得到广泛应用 ,本文就其在遗传学方面的应用作简要综述     

促凋亡蛋白FasL在结肠肿瘤细胞外源性凋亡中的作用

目的探讨促凋亡蛋白Fas配体（Fas—ligand，FasL）在结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠黏膜的表达差异。方法应用免疫组织化学Max Vision^TM快捷法检测促凋亡蛋白FasL在62例结肠癌（肠癌组）、24例结肠腺瘤（腺瘤组）及21例正常结肠黏膜（正常组）组织中的表达。结肠癌Dukes分期为A期21例，B期10例，C期10例，D期16例。在光学显微镜下FasL的表达主要在细胞浆，细胞核和胞膜未见表达，表达程度采用半定量积分法。结果FasL在肠癌组阳性表达率为19．35％（12／62例），明显低于腺瘤组的62．50％（15／24例）和正常组的47．62％（10／21例）；其阳性表达肠癌组与腺瘤组及正常组相比，肠癌组明显低于腺瘤组与正常组，差异有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）；腺瘤组与正常组FasL阳性表达相比未见差异（P〉0．05）；FasL在肠癌组16．67％（2／12例）及腺瘤组26．67％（4／15例）均见有高表达。肠癌组的FasL阳性表达与组织学类型有关，而与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、血管浸润及远处转移等因素无关。结论结肠腺瘤是结肠癌的早期阶段，由于FasL缺失，细胞的凋亡程序不能正常进行,致使肿瘤细胞逃避免疫监视，在结肠癌的发生中发挥作用。     

Apelin和APJ在绒毛及胎盘组织中的表达及意义

目的探讨血管活性肽Apelin及其受体APJ在早期妊娠绒毛和晚期妊娠胎盘组织中的表达和定位。方法分别取10例妊娠7-9w妇女（早孕组）的绒毛组织和15例妊娠37-41w妇女的胎盘组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（FO-RT-PCR）及免疫组织化学染色分析法检测两组孕妇胎盘Apelin mRNA及其蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色图文分析系统（HPIAS-1000）对其进行定量分析。结果FQ-RT-PCR结果显示,足月妊娠胎盘Apelin mRNA显著高于早孕绒毛组织（P〈0.05）。免疫组化及高清晰度彩色图文分析系统结果显示,Apelin-36和APJ蛋白在早孕绒毛组织和足月妊娠胎盘组织中均有表达,二者在早孕绒毛组织中的表达部位主要位于绒毛内滋养细胞：在足月妊娠胎盘组织中,主要表达于胎盘合体滋养细胞及血管内皮细胞Apelin在足月妊娠胎盘组织中的表达强度要高于早孕绒毛组织,有极显著性差异（P〈0.01）,而APJ在早孕绒毛组织和足月妊娠胎盘组织中的表达强度无明显差异（P〉0.05）。结论Apelin在晚孕胎盘组织中表达增强,Apelin/APJ可能在子宫-胎盘血管的发育及功能调控过程中发挥重要作用。     

肿瘤细胞的分子适应

适应这一概念在病理学研究上有重要意义,对理解组织在内外环境改变时的形态变化有很大帮助.如心肌的肥大能够增强心脏的射血能力,适应高血压时后负荷的增加,食管下端的复层扁平上皮在胃液经常返流时会转化为胃的柱状上皮,从而增加其耐酸性.11我们用同样的原则观察细胞在不同的环境下,细胞内分子成分和含量的变化,发现其变化的原则同样是为了适应环境.如表皮表层的角质细胞表达大量的角蛋白以适应其保护性功能,而表皮基底层的细胞则表达较多的c-myc蛋白来保持较高的增殖活性以补充表层不断脱落的细胞.又如经常性的体力劳动和运动会使肌细胞的肌动蛋白等合成增多,反之,长期卧床等限制活动的措施会使肌细胞的肌动蛋白等合成减少,细胞发生自嗜.我们将细胞为适应环境及功能的需要所做的分子表达水平的改变甚至突变称为细胞的分子适应(molecular adaptation).本文重点阐述肿瘤细胞的分子适应.     

CDK1 siRNA干扰在Taxol诱导细胞凋亡中的作用

目的 研究转染细胞周期依赖性蛋白激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)siRNA、以及转染后进行凋亡刺激对细胞周期和凋亡的影响,探讨CDK1在细胞凋亡中的确切作用,揭示细胞周期与细胞凋亡协调的分子机制.方法 以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象,脂质体转染CDK1 siRNA,转染后48 h加紫杉醇(Taxol) (20 μg/ml)刺激凋亡,Western印迹检测CDK1和抗凋亡蛋白BCL2表达,AnnexinV/PI法检测细胞的凋亡,流式细胞仪分析DNA含量检测细胞周期.结果 转染CDK1 siRNA后,CDK1蛋白的表达下降,细胞周期G2/M期比例增加,细胞凋亡率与对照相比没有明显升高.只加Taxol刺激12 h后细胞凋亡率增加并伴有S期和G2/M期比例增加. 转染CDK1 siRNA后再用Taxol刺激,其细胞凋亡率没有明显改变,G2/M期阻滞效应也没有叠加.BCL2蛋白只在加Taxol刺激组表达下降,与CDK1表达减少没有相关性.结论 siRNA沉默导致的CDK1表达降低只导致细胞周期G2/M期阻滞,没有引起细胞凋亡;CDK1的表达降低对紫杉醇所诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡效应没有明显影响.     

频谱染色体组型（SKY）及其在肿瘤细胞遗传学中的应用

频谱染色体组型（Spectral karyotyping,SKY)技术是新出现的一种细胞遗传学方法,它可在一次杂交中分辨全部24种人类的染色体。与传统显带技术和荧光原位杂交相比,较方便,较全面的分析鉴定染色体的异常。本详细阐述了该方法的原理及其在肿瘤细胞遗传学中的应用。     

频谱染色体组型(SKY)及其在肿瘤细胞遗传学中的应用

频谱染色体组型 (Spectral karyotyping,SKY)技术是新出现的一种细胞遗传学方法 ,它可在一次杂交中分辨全部2 4种人类的染色体。与传统显带技术和荧光原位杂交相比 ,较方便 ,较全面的分析鉴定染色体的异常。本文详细阐述了该方法的原理及其在肿瘤细胞遗传学中的应用。     

丝/苏氨酸激酶Pim家族在细胞周期调控和肿瘤发生中的作用

丝／苏氨酸激酶Pim家族已发现3个成员:Pim-1、Pim-2和Pim-3,它们都是钙／钙调蛋白调节激酶(CAMP)。目前的研究发现,Pim激酶通过磷酸化不同的底物而在细胞凋亡、细胞周期调控以及肿瘤的发生中起着重要的作用。现就目前国内外关于Pim激酶的研究进展作一综述。     

实时荧光定量PCR在医学遗传学方面的应用

实时荧光定量PCR是近年来发明使用的一种核酸检测技术，因高精确度、高灵敏性、污染少^[2,3]等优点已在生物医学基础科研及医学临床中得到广泛应用，本文就其在遗传学方面的应用作简要综述。     

细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达

目的　探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和p16蛋白在肾母细胞瘤中的表达、相关性及其意义。方法　应用免疫组织化学方法检测 4 2例肾母细胞瘤患者组织中cyclinD1和 p16蛋白的表达情况。结果　 4 2例中cyclinD1蛋白过表达率为 4 5 .2 3% ,p16蛋白表达缺失率为 6 9.0 4 % ,p16阳性表达与病理组织类型、患儿预后明显相关 (P <0 .0 1)阳性表达者预后好。结论　 (1) p16 -cyclinD1- pRb通路异常与肾母细胞瘤的发病机制密切相关 ,(2 )cyclinD1过表达是肿瘤发生的早期事件 ,(3) p16蛋白表达可作为判断肾母细胞瘤预后的一项指标。     

脂联素对人乳腺癌细胞株T47D细胞周期及凋亡的影响

目的 研究脂联素对人乳腺癌细胞株T47D细胞周期及凋亡的影响,探讨脂联素在乳腺癌发生发展中的作用.方法 采用噻唑蓝比色法检测不同浓度脂联素干预下T47D细胞的增殖情况,流式细胞分析仪分析细胞周期的变化,Annexin Ⅴ-FITC/PI染色法检测细胞凋亡.结果 (1)不同浓度脂联素和作用时间尽管对T47D细胞的生长有所抑制,但差异均没有统计学意义(P＞0.05).(2)脂联素浓度500 ng/ml、2000 ng/ml与0 ng/ml浓度相比较,对T47D细胞在G0/G1期的作用,总体差异有统计学意义(F=29.277,P=0.011),S期及G2/M期差异无统计学意义(F=3.968,P=0.144;F=0.233,P=0.806),两组浓度间比较也无显著性差异(P＞0.05).(3)脂联素浓度为0 ng/ml、500ng/ml、2000 ng/ml作用24 h后,T47D细胞的早期凋亡率分别为18.52％、18.75％和18.78％,3组比较无统计学差异(F=0.419,P=0.691).总凋亡率分别为24.58％、24.69％、24.11％,经统计学处理差异无统计学意义(F=0.099,P=0.909).结论 脂联素可将T47D细胞周期阻滞在G0/G1期,使S期细胞数量下降,抑制肿瘤细胞DNA合成.     

食管癌中p53、p21、p16、cyclinD1、CDK4免疫组化检测

目的探讨p53、p21、p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管癌发生中的意义及其相互间的作用.方法采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p53、p21、p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记.结果在鳞癌组织中5种抗体的阳性物质存在于细胞核中和/或胞浆中,在正常鳞状上皮主要存在于核中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p53的阳性表达逐渐上升,p21的阳性表达却随之下降;cyclinD1、CDK4的阳性率则随p21的下降而呈上升趋势;另外,p16的阳性率逐渐下降;同样cyclinD1、CDK4的阳性率则随p16的下降而逐渐上升.统计学处理,正常上皮与癌组织之间五种抗体的阳性率有显著差异性(P<0.05);同时,随着癌分化程度下降, p53、p21、p16的阳性率在Ⅱ级与Ⅰ级鳞癌之间差异有显著性(P<0.05);但未检出cyclinD1、CDK4cyclinD1、CDK4与癌分化的关系.结论 p53、p21、p16、cyclinD1、CDK4cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,其分别构成的调节通路障碍可能参与了食管鳞癌的发生.     

用流式细胞仪检测鲨鱼软骨粉提取物对大鼠微血管内皮细胞的作用

研究鲨鱼软骨粉提取物对大鼠肺微血管内皮细胞的影响,方法用流式细胞仪测定体外培养的肺微血管内皮细胞中细胞周期和细胞凋亡的变化。结果体外培养的微血管内皮细胞与鲨鱼软骨粉全成份、成份Ａ、成份Ｂ一起培养２４ｈ后经流式细胞仪检测发现,成份Ｂ使细胞周期Ｇ２－Ｍ期细胞明显减少,成份Ａ使凋亡细胞明显增加。     

Expression of the regulatory cell cycle proteins p21, p27, p14, p16, p53, mdm2, and cyclin E in bone marrow biopsies with acute myeloid leukemia. Correlation with patients' survival

Cell cycle control is a crucial event in normal hematopoiesis, and abnormalities of regulatory cell cycle genes have been found to contribute to the development of many hematologic malignancies. The present study investigates the immunohistochemical expression of seven essential cell cycle proteins (p21, p27, p14, p16, p53, mdm2, and cyclin E) in paraffin-embedded sections from 42 bone marrow biopsies obtained from an equal number of patients with newly diagnosed acute myeloid leukemia (AML). This study revealed (i) a high frequency of p53+/mdm2-/p21-phenotype, which is probably a result of p53 gene mutation and/or inhibition of mdm2 action by p14(ARF); (ii) expression of p27+/cyclinE-phenotype in most cases, suggesting that p27 may act as a potent cyclin-dependent kinase inhibitor; (iii) expression of p16 only in very few cases; and (iv) no relationship between the expression of any of the above proteins and survival as well as histologic subtype.     

Colon cancer bears overexpression of OTUB1

ObjectiveOTUB1 is a member of deubiquitinating enzymes; however, its expression and function in colon cancer are still unclear. The present study aimed at investigating the expression of OTUB1 in colon cancer and the relationship between the expression and some clinicopathologic parameters.MethodsImmunohistochemistry and quantitative real-time PCR were carried out in selected colon cancer and normal mucosa tissues.ResultsThe expression of OTUB1 protein in the colon cancer was significantly higher than normal mucosa, and the OTUB1 mRNA in colon cancer was also 3.15-fold higher than the normal mucosa. The higher expression of OTUB1 in colon cancer was related with tumor size, differentiation and lymph node metastasis.ConclusionsOTUB1 may play an important role in colon cancer development and metastasis.     

Overexpression of cyclin D1, D3, and p21 in an infantile renal carcinoma with Xp11.2 TFE3-gene fusion

Renal carcinomas harboring the TFE-3 translocation are rare and occur predominately in children and adolescents. Here, we report a case of infantile renal carcinoma with TFE3 translocation and show that the cell cycle is deregulated in this type of carcinoma. It is characterized by nuclear accumulation of cyclin D1 and D3 in combination with high levels of cyclin-dependent kinase inhibitor p21Cip1/Waf1 but without accumulation of p53, p16INK4a, or mdm2. The combined overexpression of p21, cyclin D1, and cyclin D3 was found exclusively in this type but not in other, more common types of renal carcinoma/oncocytoma (n=27). These results further underscore that renal carcinomas with Xp11. 2 translocations/TFE3-gene fusion represent a special type of renal neoplasm showing deregulation of specific cell cycle components. The analysis of further cases has to prove whether the derangement of the cell cycle is uniform and correlates with the specific type of molecular genetic derangement.     

二烯丙基二硫化物诱导人肺癌H1299细胞凋亡机理研究

目的:研究大蒜提取物二烯丙基二硫化物(DADS)诱导人非小细胞性肺癌细胞H1299凋亡及细胞周期阻滞对此过程的影响,探讨DADS抗肿瘤的可能机制。方法:MTT法检测细胞活性、Hoechst 33258染色法计数凋亡细胞、流式细胞术检测细胞凋亡率及周期分布。结果:与未处理的对照组相比,DADS可诱导H1299细胞产生典型的凋亡细胞形态学变化,并呈浓度依赖性诱导H1299细胞凋亡;较高浓度的DADS能诱导G2/M期细胞百分率显著升高。结论:DADS能诱导H1299细胞发生细胞凋亡,并诱导H1299细胞发生G2/M期阻滞。