尼古丁对血管内皮细胞PAI-1表达水平的影响

目的 研究尼古丁对人脐静眯内皮细胞(HUVECs)表达纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响.方法 HUVECs培养后接种于25 cm2培养瓶,随机分为对照组(培养液中不加任何干预)和尼古丁组(培养液中加入尼古丁.使其终浓度100 μmol/L),分别孵育12 h后收集各组细胞及细胞上清液,采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析法(ELISA)测定各组细胞上清液中PAI-1的抗原浓度;采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组细胞PAI-1mRNA的表达水平.结果 尼古丁组PAI-1含量在12 h显著升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.01),且PAI-1mRNA的表达显著升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.01).结论 尼古丁损伤血管内皮细胞,显著上调HUVECs PAI-1mRNA的转录和PAI-1蛋白的分泌,抑制内皮细胞的纤溶活性.     

血管紧张素Ⅱ及缬沙坦对培养人脐静脉内皮细胞产生纤溶因子的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）对内皮细胞纤溶功能的影响及缬沙坦的干预作用。方法用酶消化法收集并培养人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs），将10^-6，10^-7，10^-8，10^-9mol／L AngⅡ分别与HUVECs共同孵育12h；10^-7 mol／L AngⅡ和HUVECs分别孵育0，2，6，12，24，48h；10^-7 mol／L AngⅡ和10^-5，10^-6，10^-7，10^-8 mol／L缬沙坦（与HUVECs孵育12h；10^-6 mol／L缬沙坦与HUVECs孵育12h）。用酶联免疫吸附法测定上清液中组织型纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator，tPA）和1型纤溶酶原激活物抑制剂（plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）抗原浓度。结果 AngⅡ呈浓度依赖性升高HUVECs的PAI-1水平，最大效应浓度10^-7 mol／L；10^-7 mol／LAngⅡ对HUVECs作用，孵育2h PAI-1含量即升高，12h达高峰（198μg／L）；缬沙坦呈浓度依赖性降低AngⅡ促HUVECs分泌PAI-1，缬沙坦最大效应浓度10^-6mol／L；AngⅡ和缬沙坦对HUVECs分泌tPA没有明显影响。结论 AngⅡ通过促进HUVECs分泌PAI-1而降低纤溶活性；缬沙坦通过抑制AngⅡ的促PAI-1分泌作用而提高纤溶活性，提示有助于动脉粥样硬化血栓性疾病的防治。     

血管紧张素II对培养的人脐静脉内皮细胞产生纤溶因子的影响

摘要：　目的 探讨血管紧张素II(angiotensin II，Ang II)对内皮细胞纤溶功能的影响及缬沙坦的干预作用。方法 用酶消化法收集并培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)，将10-6，10-7，10-8，10-9mol/L Ang II分别与HUVECs共同孵育12 h；10-7mol/L Ang II和HUVECs分别孵育0，2，6，12，24，48 h；10-7mol/L Ang II和10-5，10-6，10-7，10-8mol/L缬沙坦(与HUVECs孵育12 h；10-6mol/L缬沙坦与HUVECs孵育12 h。用酶联免疫吸附法测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator，tPA)和1型纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)抗原浓度。结果 Ang II呈浓度依赖性升高HUVECs的PAI-1水平，最大效应浓度10-7mol/L；10-7mol/L AngII对HUVECs作用，孵育2 h PAI-1含量即升高，12 h达高峰 198μg/L；缬沙坦呈浓度依赖性降低Ang II促HUVECs分泌PAI-1，缬沙坦最大效应浓度10-6mol/L； AngII和缬沙坦对HUVECs分泌tPA没有明显影响。结论 AngII通过促进HUVECs分泌PAI-1而降低纤溶活性；缬沙坦通过抑制AngII的促PAI-1分泌作用而提高纤溶活性，提示有助于动脉粥样硬化血栓性疾病的防治。     

化瘀通络中药对5/6肾切除大鼠纤溶系统的影响

目的 观察化瘀通络中药肾络通对5/6肾切除大鼠纤溶系统的影响.方法 46只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、苯那普利组、肾络通组.复制5/6肾切除肾衰大鼠模型,采用免疫组织化学及原位杂交方法检测各组大鼠肾组织纤溶酶原激活物组织型(t-PA)、纤溶酶原激活物尿激酶型(u-PA)、纤溶酶原激活物的抑制物-1(PAI-1)及PAI-1 mRNA的表达,并进行病理学检测.结果 模型组t-PA、u-PA的相对含量及ILD值均显著低于假手术组(P＜0.01),而PAI-1及PAI-1 mRNA则显著高于假手术组(P＜0.01);肾络通组、苯那普利组与模型组相比,t-PA、u-PA的相对含量及ILD值均明显升高(P＜0.01或P＜0.05),而PAI-1及PAI-1 mRNA则明显降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 化瘀通络中药肾络通能纠正5/6肾切除大鼠纤溶系统的紊乱,延缓肾脏疾病的进程.     

尼古丁对脐静脉内皮细胞释放IL-6及PAI-1的影响

目的:探讨尼古丁干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,白介素-6(IL-6)和纤溶酶原激活物抑制物-I(PAI-1)抗原的表达变化,并分析其相关性.方法:将4-6代HUVECs接种于24孔培养板.随机分为对照组与不同浓度尼古丁组.尼古丁浓度分别为0.1μmol/L、1.0μmol/L、10μmol/L与100μmol/L.12h后收集各组细胞上清液.采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析法(ELISA)定各组细胞上清液中IL-6、PAI-1抗原浓度.结果:各浓度尼古丁组HUVECs释放IL-6抗原呈浓度依赖性增高,各尼古丁组IL-6含量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).100μmol/L尼古丁组PAI-1含量与对照组比较升高(P<0.05).HUVECs释放PAI-1与IL-6呈正相关(P<0.05).结论在体外,尼古丁可诱导HUVECs释放IL-6、PAI-1增多,参与内皮损伤、炎症与纤溶活性紊乱.     

脑梗死患者急性期血浆PAI-1与t-PA比值的变化及临床意义

目的研究脑梗死患者急性期(发病7 d内)血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)与血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)比值的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测67例脑梗死患者急性期血浆PAI-1t、-PA、计算PAI-1/t-PA(P/t)值,并与50名健康对照组作对照。结果脑梗死患者急性期血浆t-pA活性及PAI-1活性均升高,与正常对照组比较有统计学意义(P0.05),P/t值较正常对照组降低(P0.05)。结论脑梗死患者急性期体内纤溶活性相对亢进。在判定体内纤溶活性指标中,P/t值较t-PA、PAI-1稳定可靠。P/t值与纤溶活性呈反比关系。     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞纤溶系统的影响

目的探讨同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）对血管内皮细胞纤溶系统影响。方法（1）将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）分为10个实验组（0、10、50、200、500μmol／L Hcy组及叶酸和上述各Hcy点共同培养组）,培养24h后,酶联免疫吸附实验法（ELISA）测定各组细胞上清液中纤溶酶原激活剂（plasminogen activator,tPA）及纤溶酶原激活物抑制剂1（plasminogen activator inhibitor1,PAI-1）抗原含量,逆转录聚合酶链反应分析（RT-PCR）法分析各组tPA及PAI-1的mRNA表达水平。（2）急性心肌梗死（AMI）患者53例及健康对照组48例,ELISA测定空腹血浆tPA及PAI-1含量,高效液相色谱法测定血浆Hcy水平。结果（1）500μmoL／L Hcy组PAI-1抗原及mRNA表达水平均明显增高（P〈0．05）。（2）以单纯培养基为对照组,生理浓度Hcy组内皮细胞tPA抗原合成及mRNA表达明显增高（P〈0．05）,而以10μmoL／L Hcy组为对照组时,500μmoL／L Hcy组tPA抗原合成及mRNA表达水平则明显减少（P〈0．05）。（3）500μmoL／L Hcy与叶酸共同培养组和单纯Hcy组相比,可以明显提高内皮细胞tPA抗原的合成及mRNA表达,减少PAI-1抗原合成及mRNA表达（P〈0、05）。（4）AMI组Hcy、tPA及PAI-1均明显高于健康对照组（P〈0．05）。结论在体外细胞时,超生理浓度Hcy可以通过下调tPA、上调PAI-1的mRNA表达,减少内皮细胞tPA抗原的分泌及增加PAI-1抗原的合成,可能降低纤溶系统的活性。叶酸则可以减少Hcy引起内皮细胞纤溶系统的损害,起到保护作用。Hcy是AMI的一个独立危险因素。     

不同条件下香烟提取物对血管内皮细胞纤溶平衡的影响

目的 研究不同条件下香烟提取物(CSE)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)含量的影响.方法 选用第4代～6代HUVECs,接种于24孔培养板中,分为3组:①对照组;②不同浓度(5%、10%、20%)同一时间点CSE组:6 h后收集各组细胞上清液;③同一浓度不同时间点CSE组:5%CSE刺激HUVECs,于不同时间点(4 h、6 h、8 h、12 h、24 h)分别收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析(ELISA)法测定各组上清液中t-PA和PAI-1的抗原浓度.结果 与对照组相比,不同浓度(5%、10%、20%)同一时间点CSE组中,6 h后各浓度CSE组PAI-1含量均显著增高(P<0.05),但各组间差异无统计学意义,10%与20%CSE组t-PA含量变化明显降低,而5%CSE组t-PA含量变化无统计学意义.同一浓度不同时间点CSE组中,5%CSE组PAI-1含量较对照组升高,且呈时间依赖性;t-PA含量变化无统计学意义.结论 CSE可直接损伤血管内皮细胞,并抑制其纤溶活性,从而增加血栓病的发生.     

2型糖尿病患者血浆t-PA、PAI-1水平与颈动脉粥样硬化关系

探讨2型糖尿病患者血浆纤溶活性因子组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平与颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis,CAS)的关系.将91例2型糖尿病患者根据颈动脉超声内膜中层厚度分为4组并设健康对照组,分析CAS程度与血浆t-PA、PAI-1水平的关系.结果显示CAS程度与t-PA水平呈明显负相关(r=-0.723,P＜0.01),与PAI-1水平均呈明显正相关(r=0.851,P＜0.01).提示2型糖尿病患者纤溶功能异常可能参与了大血管粥样硬化的发生、发展过程.     

益气活血复方对动脉粥样硬化家兔PAI-1及t—PA影响的实验研究

目的 观察益气活血复方对动脉粥样硬化家兔组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、组织型纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)及超微结构的影响.方法 40只雄性新西兰大耳白兔随机分为正常组、模型组、中药对照组、西药对照组、中药治疗组,每组8只.适应性喂养1周后,模型组、中药对照组、西药对照组、中药治疗组行颈总动脉球囊损伤术.术后正常组给予普通饲料,其他组给予高脂饲料喂养4周.实验第4周末开始分别予与益气活血复方、血脂康胶囊和辛伐他汀片,持续给药4周.在治疗前、后分别取血检测PAI-1、t-PA.8周末处死动物,取家兔左右颈总动脉,用透射电镜观察颈总动脉的超微结构.结果 4周末与正常组比较,模型组PAI-1水平持续升高,t-PA略有升高.8周末中药治疗组与模型组相比较,PAI-1水平明显下降(P<0.01),t-PA水平明显升高(P<0.01).各给药组组间PAI-1、t-PA水平无统计学意义(P>0.05);电镜水平证实益气活血中药能够改善颈内动脉的超微结构.结论 益气活血复方能促进动脉粥样硬化家兔纤溶酶原激活物的分泌,减少纤溶酶原激活物抑制物的分泌,从而增强纤溶活性,减少动脉粥样硬化的发生.     

Enhanced clearance of Abeta in brain by sustaining the plasmin proteolysis cascade

The amyloid hypothesis states that a variety of neurotoxic beta-amyloid (Abeta) species contribute to the pathogenesis of Alzheimer's disease. Accordingly, a key determinant of disease onset and progression is the appropriate balance between Abeta production and clearance. Enzymes responsible for the degradation of Abeta are not well understood, and, thus far, it has not been possible to enhance Abeta catabolism by pharmacological manipulation. We provide evidence that Abeta catabolism is increased after inhibition of plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) and may constitute a viable therapeutic approach for lowering brain Abeta levels. PAI-1 inhibits the activity of tissue plasminogen activator (tPA), an enzyme that cleaves plasminogen to generate plasmin, a protease that degrades Abeta oligomers and monomers. Because tPA, plasminogen and PAI-1 are expressed in the brain, we tested the hypothesis that inhibitors of PAI-1 will enhance the proteolytic clearance of brain Abeta. Our data demonstrate that PAI-1 inhibitors augment the activity of tPA and plasmin in hippocampus, significantly lower plasma and brain Abeta levels, restore long-term potentiation deficits in hippocampal slices from transgenic Abeta-producing mice, and reverse cognitive deficits in these mice.     

蛛网膜下腔出血后知浆t—PA、PAI—1变化的临床意义

对28例蛛网膜下腔出血（SAH）后患者的血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）变化进行了观察,并与30例健康者进行对照。结果显示,与对照组比较,SAH后1～14天患者血浆纤溶性明显增高;其中伴发脑血管痉挛（CVS）者出血第7天、14天血浆PAI-1活性均明显高于无CVS者;出血量多者血浆t-PA、PAI-1活性较高。提示血浆t-PA、PAI-1活性在SAH后呈动态变化,二者可能均参与SAH的发生、发展、其活性测定可望成为监测SAH、CVS及出血量的有效指标。     

Clinical significance of urokinase-type plasminogen activator activity in hepatocellular carcinoma

BACKGROUND AND METHODS: The plasminogen activation system plays a crucial role in the process of cancer invasion and metastasis. To evaluate the most effective factor in the invasion, metastasis and prognosis of hepatocellular carcinoma (HCC), we examined urokinase-type plasminogen activator (uPA), plasminogen activator inhibitor (PAI)-1, PAI-2 and uPA activity by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) in HCC tissues obtained from 46 patients. The results were compared with the patients' clinicopathological features and prognoses. RESULTS: Of the clinicopathological features, only histological portal involvement or intrahepatic metastasis, or both (INV), was significantly correlated to the disease-free survival rates (DFS; P < 0.05). The levels of uPA, PAI-1 and PAI-2 antigens were significantly associated with INV and histological grade. The DFS was not different, however, between cases with uPA, PAI-1 and PAI-2 values above and below the median. The high levels of uPA activity were closely related to INV (P < 0.001), and the activity gradually raised histological grades (P < 0.0001). The DFS was significantly different between patients with uPA activity below and above the median (0.70 ng/mL; P = 0.0092); it was also significantly different between such patients without INV (P < 0.05). CONCLUSIONS: Urokinase-type plasminogen activator activity may be the most sensitive factor affecting HCC invasion in the plasminogen activation system and a strong predictor for the recurrence of HCC. We suggest that cases with uPA activity of more than 0.70 ng/mL should be carefully followed up for possible HCC recurrence.     

急性心肌梗死患者内皮纤溶储备功能的研究

目的 :探讨急性心肌梗死 (AMI)患者全身纤溶状态及内皮纤溶储备功能的变化规律。方法 :2 1例 AMI患者于入院第 1天和入院后第 10天采集静脉血测定纤溶指标 ,并与 15例正常人作对比 ,同时做静脉闭塞试验以确定最大内皮组织纤溶酶原激活剂 (t PA)释放。结果 :AMI患者 t PA含量、纤溶酶原激活剂抑制物 - 1(PAI- 1)活性均较正常人明显为高。最大内皮 t PA释放于入院第 1天降低为 (2 .3± 0 .9) μg/ L(P<0 .0 1) ,第 10天恢复至(4.5± 1.2 ) μg/ L(P >0 .0 5 )。结论 :内皮纤溶功能紊乱与血管内血栓形成的联系要比全身纤溶指标的变化更为密切 ,在 AMI早期纠正内皮纤溶功能异常更为重要     

马来酸罗格列酮对大鼠血浆tPA和PAI-1活性的影响

STZ诱导的糖尿病大鼠研究显示，罗格列酮治疗（每日4mg／kg，3周）能增加组织型纤溶酶原激活物（tPA）的血浆水平，降低PAI—1的活性，降低PAI-1／tPA的比值。因此，罗格列酮可能有心血管保护作用。     

急性脑梗死患者血浆及脑脊液t-PA及PAI-1含量测定及其临床意义

采用双抗体夹心固相酶联免疫吸附法（ELISA）检测35例急性服梗死患者血浆和其中31例患者脑脊液t－PA及PAI-1抗原含量，与35例对照组血浆和其中20例对照组脑脊液进行比较。结果：急性脑梗死组血浆t－PA含量高于对照组，PAI-I含量显著高于对照组；其脑脊液t－PA、PAI－1含量均显著高于对照组；脑脊液中t－PA、PAI－1的含量分别与血浆中t－PA、PAI－1含量呈正相关，认为急性脑梗死患者纤溶活性明显下降；t－PAE及PAI－1参与了脑梗死之病理过程；t－PA及PAI－1抗原含量是反映体内纤溶活性的两个重要指标，可用血浆或脊液t－PA、PAI－1的含量作为判断病情的参考指标之一。     

缬沙坦治疗原发性高血压对内源性纤溶活性的影响

目的 :观察缬沙坦治疗原发性高血压 (EH)的同时对内源性纤溶活性的影响。方法 :用发色底物分解显色法测定 6 4例EH患者 (EH组 )和 35例正常对照者 (对照组 )的组织型纤溶酶原激活因子 (t PA)、纤溶酶原激活抑制物 (PAI 1)的活性 ,然后EH组口服缬沙坦 80mg ,每日 1次 ,共 8周 ,比较治疗前后的t PA和PAI 1活性变化。结果 :EH组治疗前t PA活性较对照组明显降低 ,PAI 1活性明显升高 (P <0 .0 5 )。经缬沙坦治疗 8周后 ,t PA活性较治疗前显著上升 ,PAI 1活性降低 (P <0 .0 5 )。结论 :缬沙坦在降低血压的同时 ,有改善内源性纤溶活性的作用。     

恶性肿瘤患者血液中尿激酶型纤溶酶原激活系统测定的临床意义

目的 研究恶性肿瘤患者血液中尿激酶型纤溶酶原激活物（ＵＰＡ）及其特异性受体（ＵＰＡＲ）和纤溶酶原激活物掏抑制物－１（ＰＡＩ－１）含量对肿瘤转移和预后的影响。方法用ＥＬＩＳＡ法测定５０例恶性肿瘤患者和２０例正常人血液中ＵＰＡ、ＵＰＡＲ和ＰＡＩ－１含量。结果 淋巴瘤ＵＰＡ,肺癌ＵＰＡ、ＰＡＩ－１,食管癌、肠癌和乳腺癌ＵＰＡ、ＵＰＡＲ和ＰＡＩ－１均显著升高（Ｐ〈０．０５～０．０１）;肿瘤组中,中、晚期组     

脑梗死患者血浆纤溶指标的动态观察

目的　探讨脑梗死患者血浆中纤溶分子标志物———组织纤维蛋白溶酶原激活剂 (TPA)和纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)含量的动态变化及其临床意义。方法　采用酶免疫定量法对 30例首次急性脑梗死患者急性期和恢复期的血浆TPA和PAI 1含量进行测定 ,并选择 30名正常人作为对照。同时对比首次急性脑梗死 30例和再发脑梗死 2 8例急性期血浆TPA及PAI 1含量。结果　首次急性脑梗死患者恢复期的TPA低于急性期 ,高于正常对照组 ;PAI 1含量脑梗死恢复期明显高于急性期。再次发病急性脑梗死患者比首次发病急性脑梗死患者的PAI 1高。结论　PAI 1与脑梗死的发生与发展有着重要关系 ,应作为临床的重要危险因素对待。     

Effect of a Change in the Sleep/Wake Cycle on the Diurnal Variation of Fibrinolytic Parameters

The mechanism underlying the circadian rhythm of fibrinolysis is not well understood. To evaluate the influences of wakefulness and of the intrinsic circadian rhythm on fibrinolytic activity, we examined diurnal changes (8:00 am vs. 8:00 pm) in plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) activity, tissue plasminogen activator (t-PA) antigen levels, and t-PA activity, as well as in plasma serum cortisol levels, in 10 healthy males (21 ± 2 years) for two consecutive days. On the first day, subjects remained awake all day and night. They slept during the daytime (8:30 am to 5:30 pm) on the following day. PAI-1 activity and cortisol levels were significantly decreased, and t-PA activity tended to increase during the daytime on the first day. On the morning following overnight wakefulness, PAI-1 activity and cortisol levels did not return to the levels of the previous morning. On the second day, the afternoon decrease in PAI-1 activity, but not cortisol levels, was still observed, although its magnitude was substantially attenuated. No significant diurnal changes were observed in the levels of t-PA antigen throughout the study period. These findings suggest that the diurnal variation of fibrinolytic activity may be governed by an intrinsic circadian rhythm of PAI-1, which can be modified by a change in the time of wakefulness.