P14(INK4a/ARF)蛋白在非小细胞肺癌组织中表达的意义

目的 检测非小细胞肺癌组织中P14蛋白的表达，研究其预后价值。方法以P14抗体FL-132蛋白对39例患者肺癌组织进行免疫组化染色。结果39例患者中25例(64．1％)P14蛋白表达阳性；临床Ⅰ～Ⅱ期患者的P14蛋白表达率显著高于Ⅲ～Ⅳ期患者(78．0％比43．8％，P=0．043)；有、无远处转移患者的P14蛋白表达率分别为78．3％和43．8％，P=0．043；无P14蛋白表达者的3年生存率明显低于有P14蛋白表达者，中位生存期分别为17月和45月，P=0．0235。结论肺癌组织中P14蛋白表达阳性的患者有较好的预后，检测肺癌组织中P14蛋白表达有助于预测肺癌预后。     

野生型INK4a/ARF基因共转染对A549细胞生物学行为的影响

背景与目的INK4a／ARF基因是重要的细胞周期调控基因，其表达产物p16INK4a和p14ARF蛋白分别在Rb和p53通路中发挥重要调节作用。本研究将野生型INK4a／ARF基因同时转染到该基因位点缺失的人肺腺癌A549细胞中，研究其对该细胞生物学行为的影响。方法利用阳离子脂质体介导的基因转染技术，将含有人全长野生型INK4a／ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3-p16INK4a和pcDNA3-p14ARF同时导入A549细胞系中，确定所编码蛋白p16INK4a和p14ARF稳定表达；在设立空白组和空质粒转染组的情况下，进行了转染前后细胞生长曲线、克隆形成率、周期分布、凋亡指数等指标的检测和分析。结果转染INK4a／ARF基因后的细胞G0／G1期比例为59．9％，与未转染（51．2％）及空质粒转染（50．3％）细胞相比差异显著（P值分别为0．043和0．025），同时S期和G2／M期的比例下降；转染后细胞克隆形成率为63％，未转染细胞和空质粒转染细胞分别为85％和87％（P值均〈0．01），凋亡指数明显增加，转染INK4a／ARF基因后的细胞凋亡率为8．0％，另两种细胞均为2．7％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论阳离子脂质体可以有效地将INK4a／ARF基因导入A549细胞，并可以抑制A549细胞的生长，促进凋亡作用的增强，为将来肺癌的基因治疗提供了实验依据。     

非小细胞肺癌中P14ARF与P16INK4a和p53蛋白表达及其相互关系的研究

目的:检测p14ARF、p16INK4a和p53蛋白在非小细胞肺癌中表达情况,对它们在非小细胞肺癌发生过程中的作用及其相互关系进行初步探讨方法:应用免疫组化方法检测了40例非小细胞肺癌组织标本的p14AHF、p16INK4a和p53基因的表达水平.结果:非小细胞肺癌组织中p14ARF、p16INK4a和p53蛋白总阳性率分别是72.5%,50.0%和52 5%,与癌旁正常组织(分别是95.0%,92.5%,2.5%)有显著性差异(P＜0.01);非小细胞肺癌中p14ARF和p53蛋白表达异常与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移情况无显著相关性;p16INK4a蛋白表达水平与组织分化程度相关(P＜0.05),但与肿瘤分期、组织类型、淋巴结转移情况无关;p14ARF和p53蛋白在组织中表达呈负相关,r2=-0.475(P＜0.0),而p14ARF和p16INK4a蛋白表达无关;p14ARF蛋白在Ⅰ期病例中强阳性( )占阳性比例为41.7%,在Ⅲ期中强阳性( )比例为10.0%.结论:p14ARF、p16INK4a和p53三个基因在NSCLC发生过程中起重要作用,特别在肿瘤早期可能起到更为重要的作用;p14ARF和p53基因在同一调节通路上;p14ARF、p16INK4a和p53蛋白可以作为非小细胞肺癌早期生物学检测指标.     

INK4a基因与肺癌关系的研究

p16^INK4a和p19^ARF是INK4a基因编码的两种不同的蛋白产物，它们在功能和结构上不同，p16^INK4a在多种肿瘤中发生频率很高的变异，与非小细胞肺癌的形成和发展密切相关。最近研究表明，p19^ARF是一种抑癌基因，能诱导细胞G1期、G2期阻滞，依赖p53-MDM2途径发挥作用，它在肺癌中表达为部分缺失。这提示INK4a基因座的损伤也许同时会影响p16^INK4a和o19^ARF的正常功能，促进肺癌的形成和发展，现就INK4a基因与肺癌的关系作一综述。     

肺癌p14ARF和p16INK4a基因协同表达缺失及其意义

目的：研究抑癌基因位点ＩＮＫ４ａ－ＡＲＦ在肺肿瘤细胞中的表达状况,揭示ｐ１４ＡＲＦ和ｐ１６ＩＮＫ４ａ协同表达缺失与肺癌发生发展的相关性。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ对６株肺癌细胞（ＳＰＣ－Ａ－１,Ｃａｌｕ－１,Ｈ４４６,ＳＨ７７,Ａ５４９,Ｈ４６０）的ＩＮＫ－４ａ－ＡＲＦ基因位点在ｍＲＮＡ、蛋白水平上进行检测,对ＰＣＲ产物进行纯化和测序分析。结果：６株肺癌细胞中,有３株细胞（Ｈ４     

细胞周期调控基因INK4a—ARF与肿瘤

INK4a—ARF基因功能的失活与该基因位点的缺失、点突变和5′-CpG岛异常甲基化密切相关。由于INK4a—ARF基因编码的抑癌蛋白p16^INK4a、p14^ARF分别对cyclin D-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能，提示其将成为肿瘤基因治疗的重要靶点。     

INK4a／ARF抑癌基因与食管癌的研究进展

  INK4a／ARF基因位于染色体9p21的CDKN2A位点，它编码两种蛋白p16INK4a和p14ARF，这两个蛋白均为细胞周期调控因子，分别通过p16INK4a／pRB途径和p14ARF／p53途径履行调控细胞周期的职责，对INK4a／ARF位点p16INK4a和p14ARF的结构功能以及与食管癌的关系进行综述。     

SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法用免疫组化SP法和甲基化特异性PCR法检测60例非小细胞肺癌组织,21例肺良性疾病肺组织中SFRP1基因甲基化及SFRP1蛋白的表达情况。结果肺癌组织SFRP1基因甲基化阳性高于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.001);SFRP1基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);非小细胞肺癌中SFRP1蛋白阳性率低于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.004);SFRP1蛋白表达与非小细胞肺癌临床分期、细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);SFRP1甲基化和SFRP1蛋白表达缺失存在相关性(P=0.002)。结论 SFRP1基因甲基化可能是导致SFRP1蛋白表达降低的重要机制,进而导致非小细胞肺癌的发生发展。     

非小细胞肺癌p14ARFp16INK4a蛋白共表达及其临床意义

目的:探讨p14ARF、p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达、意义及相关关系.方法:采用免疫组织化学SP方法对103例NSCLC组织中p14ARF和p16INK4a蛋白的表达进行检测.结果:103例NSCLC组织中p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性率分别为70.87%和43.69%,差异有显著性(P＜0.01).其中35例p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性,共阴性率达33.98%(35/103),鳞癌中共阴性率明显高于其它组织类型(P＜0.01).p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性相互间无显著相关性(P＞0.05).临床Ⅲ Ⅳ期病例两种蛋白表达阴性率明显高于临床Ⅰ Ⅱ期(P＜0.05).结论:NSCLC组织p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性具有明显的组织学类型特异性,两种蛋白阴性表达是各自独立的事件.     

p16基因甲基化对非小细胞肺癌发病的影响

目的探讨p16基因甲基化对非小细胞肺癌发病的影响。方法原发性肺癌患者47例及同期无呼吸系统疾病又未患任何肿瘤同性别者94例作对照,采用甲基化特异性PCR等技术,检测p16基因甲基化。结果p16基因甲基化在肺癌组织和正常肺组织中检出率分别为44.7%(21/47)和17.0%(8/47),两者有显著差异(P<0.05)。37例非小细胞肺癌吸烟者中有21例肺癌组织发生p16基因甲基化,而10例非小细胞肺癌非吸烟者中无一例肺癌组织发生p16基因甲基化。p16基因甲基化与年龄、饮酒、肺癌病理分型及肺癌临床分期之间均无明显的相关性(P>0.05)。结论p16基因甲基化与非小细胞肺癌发生的关系非常密切,p16基因甲基化与吸烟有关。检测p16基因甲基化与否,可能有助于肺癌的诊断。     

p16^INK4a和p14^ARF蛋白在宫颈癌和肺癌中的差异表达

[目的]研究宫颈癌和肺癌中p16INK4a和p14ARF蛋白表达水平的差异及意义。[方法]应用免疫组化方法检测50例宫颈癌和127例肺癌组织中p16INK4a和p14ARF蛋白表达。[结果]50例宫颈癌中,p16INK4a和p14ARF蛋白全部阳性表达;127例肺癌中,p16INK4a和p14ARF蛋白阳性表达率分别为61.42%和30.79%;宫颈癌和肺癌中p16INK4a和p14ARF蛋白表达差异均有显著性（P〈0.01）。[结论]p16INK4a和p14ARF蛋白在宫颈癌中过表达,而在肺癌中缺失表达。提示p16INK4a和p14ARF蛋白在宫颈癌和肺癌的发生发展中所起的作用和作用机制可能不同。     

Ratio of Expression of p16INK4a to p14ARF Correlates with the Progression of Non-small Cell Lung Cancer

The CDKN2 gene is located on the short arm of chromosome 9p and encodes two unrelated proteins, p16^INK4a and p14^ARF, through the use of independent first exons and shared exons 2 and 3. p16^INK4a is a cyclin‐dependent kinase inhibitor, whereas p14^ARF regulates the cell cycle through a p53 and MDM2–dependent pathway. We have examined the expression of p16^INK4a and p14^ARF using competitive RT‐PCR in 60 non‐small cell lung cancers (NSCLCs) and matching normal lung tissues. The intensities of bands for p16^INK4a and p14^ARF were nearly equal or the intensity of the p16^INK4a band slightly exceeded that of p14^ARF in the normal lung tissues (n=60). In 38 tumors the intensity of the p16^INK4a band was similar to or slightly weaker than that of p14^ARF. In 6 tumors the intensity of the p16^INK4a band was weaker than that of p14^ARF. In 15 tumors the intensity of the p14^ARF band was very strong and the p16^INK4a band was barely visible. In only one tumor was the intensity of the p16^INK4a band very strong, while the band of p14^ARF was barely visible. The ratio of the intensity of p16^INK4a to p14^ARF had an interesting correlation with the tumor's clinicopathological characteristics. The p stage II‐IV tumors had significantly lower p16^INK4a to p14^ARF ratios than the p stage I tumors (P=0.036). The T2–4 tumors had significantly lower p16^INK4a to p14^ARF ratios than the T1 tumors (P=0.005). The N1–3 tumors had significantly lower p16^INK4a to p14^ARF ratios than the NO tumors (P=0.014). Our results suggest that the ratio of expression of p16^INK4a to p14^ARFtends to decrease during the progression of NSCLC.     

非小细胞肺癌患者血浆DAPK基因甲基化检测及其临床意义

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因异常甲基化及其在NSCLC筛查和诊断方面的临床意义。方法用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nMSP)检测112例NSCLC患者癌组织、癌旁组织、外周血血浆和112例正常对照组血浆样品中DAPK基因的甲基化情况,并比较各组检测结果。结果癌组织DAPK基因甲基化率为59.8%,高于癌旁组织的8.0%(P<0.001),其中鳞癌、腺癌、腺鳞癌癌组织和癌旁组织间的甲基化检出率比较差异均有统计学意义(P<0.001);NSCLC患者血浆中DAPK基因甲基化检测率为21.4%,对照组血浆未检测到DAPK基因甲基化(P<0.001)。血浆中DAPK基因甲基化检出率与NSCLC临床分类、临床分期和病理类型无明显相关性。结论利用nMSP法对血浆样本DAPK基因甲基化检测可为非小细胞肺癌的筛查和诊断提供有价值的信息。     

血小板增高与非小细胞肺癌患者预后的关系

目的探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者血小板增高和预后的关系。方法回顾性分析2000年1月～2005年12月间我院492例NSCLC患者的临床资料,采用Kaplan-Meier和Cox回归方法分析血小板增高及其他临床因素对肺癌患者预后的影响。结果肺癌患者血小板增高发生率为20.12%。血小板增高与肺癌的临床分期和组织分化相关。血小板增高的肺癌患者1、3、5年生存率分别为30.30%、10.10%和8.08%,明显低于血小板正常者的58.52%2、9.77%和18.58%。单因素分析显示,临床分期、组织分化、病理类型、治疗方式和血小板增高显著影响患者生存,而年龄、性别对生存期无显著影响。多因素生存分析显示,临床分期、治疗方式及血小板增高是影响预后的独立因素。结论血小板增高是影响NSCLC患者生存的独立预后因素。     

非小细胞肺癌患者淋巴结转移与E-CD mRNA 表达异常关系的探讨

目的:观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中E-CD基因的转录表达水平,分析肺癌转移与该基因表达异常的关系。方法:采用半定量RT-PCR方法,以正常肺组织为对照,观察了24例原发性NSCLC中E-CD基因的mRNA表达情况。结果:24例NSCLC患者中,E-CDmRNA表达异常10例(10/24,41.7%),其中15例淋巴结转移的患者中E-CDmRNA表达降低9例(9/15,60.0%),明显高于无淋巴结转移的非小细胞肺癌(1/9,11.1%),P<0.05。结论:E-CD基因为一种可在肺癌转移过程中发挥负调节作用的转移抑制基因,检测E-CDexon8-9mRNA的表达有助于肺癌的病理学诊断。     

非小细胞肺癌患者外周血和肺癌组织中ZIC1启动子甲基化检测的临床意义

目的 探讨ZIC1基因在NSCLC患者外周血和肺肿瘤组织中的甲基化状态,及其对NSCLC的预后评估意义.方法 选取95例NSCLC患者外周血、癌和癌旁组织,另选取95例健康体检者外周血为对照组.用MSP法比较外周血和癌组织的ZIC1甲基化检出率;分析ZIC1在外周血和癌组织的甲基化和NSCLC临床病理因素的相关性.结果...     

VEGF-C和E-cadherin在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨VEGF-C和E-Cadherin在非小细胞肺癌中的表达特点及意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测77例非小细胞肺癌组织及10例正常肺组织中VEGF-C、E-cadherin的表达,并分析两者表达与临床病理因素的关系及其之间的相关性.结果 VEGF-C、E-cadherin在77例肺癌组织中表达的阳性率分别为63.6％(49/77)和32.5％(25/77),与在10例正常肺组织中表达阳性率(分别为10％和100％)的差异有统计学意义(P＜0.05).VEGF C的过表达与肺癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移、病理分型有关(P＜0.05),E-cadherin的低表达与肺癌的临床分期、淋巴结转移、病理分型有关(P＜0.05).VEGF-C、E-cadherin在肺癌组织的表达存在负相关(P＜0.01),相关系数rs=-0.571.结论VEGF-C高表达或E-cadherin低表达可能与肺癌的发生.