HPLC／MS／MS测定恒河猴血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定恒河猴血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度。方法:液相色谱:色谱柱为Nucleocil ODS(5μm,50 mm×2.0 mm),流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸(20:20:60:1),流速为0.2 mL·min-1;质谱:离子源为Turbo Ionspray源,采用多反应监测(MRM)方式进行检测,m／z342.3→324.3(纳曲酮)、m／z 344.3→326.6(纳曲醇,代谢产物)、m／z 328.4→310.4(纳洛酮,内标)。样品经有机相提取纯化后进样。结果:纳曲酮和纳曲醇的线性范围分别为0.098-150 ng·mL-1和0.781-25 ng·mL-1,萃取回收率均大于75％,日内误差(RSD)均小于9.3％,日间误差(RSD)均小于12％。结论:本方法准确、快速、灵敏、专属性好,适用于动物试验及临床上测定血浆中纳曲酮及其代谢物纳曲醇的浓度和药代动力学研究。     

HPLC—MS测定人血浆中的依那普利及其人体药动学和相对生物利用度研究

目的:建立人血浆中依那普利的高效液相色谱-质谱测定方法,用于研究依那普利片的人体相对生物利用度。方法:血浆样品中加入内标阿普唑仑后,离心取上清液上固相萃取小柱,以甲醇洗脱,采用高效液相色谱-质谱法,电喷雾电离源正源选择离子峰检测。色谱柱为ODS C_(18),流动相为甲醇-0.1％甲酸(45:55),流速为0.8mL·min~(-1),毛细管电喷雾电压:3.81kV,取样锥孔电压:39.00 V。用建立的方法测定16名健康男性志愿者单剂量口服依那普利片实验制剂或参比制剂的体内经时过程,由血药浓度数据获得各自的主要药动学参数,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果:依那普利在2.5～400 ng·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系。r=0.999 6,平均回收率为102.2％,日内RSD≤4.6％,日间RSD≤8.2％。16名健康男性志愿者单次服用20 mg依那普利片实验制剂或参比制剂后的药动学参数AUC_(0→6)、C_(max)、T_(1/2)分别为(322.6±79.1)和(323.1±70.5)ng·h·mL~(-1)、(229.8±54.4)和(237.3±48.1)ng·mL~(-1)、(1.80±0.60)和(1.50±0.30)h。相对生物利用度为(99.7±8.2)％。结论:该方法灵敏度高,无杂质干扰,结果准确。测得的实验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,2种片剂为生物等效制剂。     

HPLC-MS同时测定4种新型抗抑郁药物的血药浓度

目的:建立一种快速灵敏的同时测定血浆中氟西汀、西酞普兰,帕罗西汀及文拉法辛浓度的 HPLC-MS 方法,监测这4种药物的血药浓度,为临床用药提供依据。方法:以氟伏沙明作为内标,样品碱化后固相萃取,用 MACHEREY-NAGEL C_(18)反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm,Germany)进行分离,以乙腈-缓冲盐(30 mmol 醋酸铵和0.6‰甲酸)(65:35)为流动相,柱温40℃,流速0.85 mL·min~(-1)。采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果:氟西汀、西酞普兰、帕罗西汀,文拉法辛及内标氟伏沙明在9 min 内完全分离;各物质在5～1000 ng·mL~(-1)时线性关系良好,相关系数均大于0.9964;萃取回收率均大于73.2%;方法回收率均大于95.0%;最低检测浓度:氟西汀0.5 ng·mL~(-1)、西酞普兰0.3 ng·mL~(-1)、帕罗西汀0.3 ng·mL~(-1),文拉法辛0.1 ng·mL~(-1);日内日间变异系数均小于15%。结论:本方法简便快速,灵敏准确,可用于血药浓度的临床监护、中毒分析,药物动力学以及代谢机制的研究。     

HPLC法同时测定注射用艾迪（冻干）中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量

目的:建立注射用艾迪(冻干)中人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re的含量测定方法。方法:色谱柱为Hypersil C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(19∶81),流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为203nm。结果:人参皂苷Rg_1浓度在20～200μg·mL~(-1),人参皂苷Re浓度在10～100μg·mL~(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9997和0.9996;平均回收率分别为100.3%和97.6%(n=9)。结论:本法快速,准确,重复性好,可作为注射用艾迪(冻干)的质量控制方法。     

LC-MS法测定人血浆中米氮平浓度以及药代动力学研究

目的:建立人血浆中米氮平浓度的HPLC—MS分析方法,用以测定健康受试者口服米氮平制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药代动力学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法:血浆中加入内标地西泮后,环己烷提取,HPLC—MS分离、分析。色谱系统:Shimadzu ODS柱(150 mm×4.6 mm),甲醇-醋酸铵溶液(0.01 mol·L~(-1))(75:25)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1),柱温30℃。质谱检测方式:SIM。结果:米氮平的线性范围为0.2—120 ng·mL~(-1)(r=0.9992),最低检测浓度达0.1 ng·mL~(-1),提取回收率≥85%。测定20名健康志愿者单剂量交叉口服试验制剂与参比制剂后的血药浓度经时过程,受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:C_(max)(71.53±10.5)ng·mL~(-1)和(73.48±17.8)ng·mL~(-1);T_(max)(2.0±0.8)h和(1.9±0.7)h;t_(1/2)(22.33±2.05)h和(22.97±3.56)h,无显著性差异;受试制剂的相对生物利用度为(101.3±16.2)%。结论:本法专属、准确、灵敏。统计学结果表明受试制剂和参比制剂生物等效。     

高效液相色谱法测定人参浸透液的含量

目的:用高效液相色谱法测定人参浸透液中人参皂苷 Rg_1与人参皂苷 Re 的含量。方法采用 C_(18)(150×4.6mm,5u)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(99:400),流速1.2ml/min,柱温为30℃,检测波长为203nm。结果人参皂苷 Rg_1、Re 这两种化合物分离度符合要求。结论本方法简便、准确、可以作为人参浸透液含量的测定方法。     

LC—MS／MS法测定人血浆中地氯雷他定及其代谢产物3-羟基地氯雷他定的浓度

目的:建立 LC-MS/MS 法测定人血浆中地氯雷他定及其主要代谢产物3-羟基地氯雷他定的浓度。方法:血浆样品经碱化后用乙醚提取,采用液相色谱-质谱联用法检测。色谱条件为分析柱 CAPCELL PAK C_(18)(50 mm×2.0 mm,5 μm),预柱Octadecyl C_(18)(4.0 mm×3.0 mm);流动相:甲醇-乙腈-5 mmol·L~(-1)甲酸铵水溶液(30:20:50);流速0.2 mL·min~(-1);柱温40℃;进样量10 μL。质谱条件为电喷雾离子源(ESI),正离子扫描;选择性监测质荷比(m/z)为311.1/259.1(地氯雷他定),327.1/275.1(3-羟基地氯雷他定),315.1/263.1(D_4-地氯雷他定,内标),331.1/279.1(D_4-3-羟基地氯雷他定,内标)带正电荷的分子离子峰。结果:地氯雷他定、3-羟基地氯雷他定的线性范围均为0.05～10.0 ng·mL~(-1),定量下限均为0.05 ng·mL~(-1),批内、批间 RSD 均小于10%。结论:该方法简便,灵敏度高,专属性强,可用于地氯雷他定及其代谢产物的临床药动学和生物等效性研究。     

RP-HPLC法同时测定西洋参含片中4种成分

目的建立同时测定西洋参含片中人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1及拟人参皂苷F11含量的RP-HPLC方法。方法色谱柱为Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.5 mL·L~(-1)磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:203nm;柱温:30℃。结果人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re及人参皂苷Rb_1在2.5~500μg·mL~(-1)、拟人参皂苷F11在5.0~1 000μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 4);平均加样回收率均大于95.0%。结论该方法简便、准确,重复性好,可作为西洋参含片的质量控制方法。     

液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆中浓 度的方法。方法血浆样品用固相萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多 离子反应监测方式检测人参皂苷Re。结果该方法人参皂苷Re线性范围为 1．05～1 050 ng·mL-1;定量下限为1．05 ng·mL-1;方法回收率在99．3％～ 104．3％;日内、日间变异系数(RSD)均<15％。结论该法准确、灵敏、特异, 适用于健康人血浆人参皂苷Re浓度测定。     

HPLC-MS/MS法同时测定三七须根总皂苷中人参皂苷Rg_1和Re的含量

目的:建立以液-质联用法同时测定三七须根总皂苷中人参皂苷Rg1和Re含量的方法。方法:色谱柱为BDS HYPERSUL C18(150mm×2.1mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),柱温为30℃;采用负离子多反应监测方法(MRM)测试。用于定量分析的对照品离子对分别为人参皂苷Rg1:m/z799.6→475.5;人参皂苷Re:m/z945.8→783.7;内标物紫杉醇m/z:852.5→525.3。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Re标准曲线的线性范围分别为0.173～17.3μg·mL-1和0.156～39.1μg·mL-1,精密度和准确度等均符合样品分析的要求。结论:本方法准确、灵敏、特异性强,适用于三七须根总皂苷及其制剂中人参皂苷Rg1、Re含量的同时测定。     

LC/MS/MS与GC/MS法分析鉴定小鼠尿中沙美特罗的代谢产物

目的:鉴定沙美特罗在小鼠尿中的主要代谢产物.方法:ig给药后,收集小鼠尿液,经固相提取,葡萄糖醛酸酶水解,进行LC/MS/MS分析和硅烷化后进行GC/MS分析同时分离鉴定沙美特罗代谢产物.结果和结论:在给药后尿样中发现沙美特罗原型和4种代谢产物M1～M4,其结构推测为19-羟基沙美特罗(M1)、2-羰基沙美特罗(M2)、19-羰基沙美特罗(M3)和19-羟基-8-甲氧基沙美特罗(M4).     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

HPLC/MS/MS联用技术测定全血中的瑞芬太尼

目的:建立全血中瑞芬太尼的HPLC／MS／MS测定方法,并测定围麻醉期患者体内瑞芬太尼的血药浓度。方法:全血样品中加入枸橼酸芬太尼作内标,用1-氯丁烷进行提取。以乙腈与三氯甲烷(V乙腈:V三氧甲烷= 1:1)混合液加乙酸铵(2 mmol·L-1)为流动相,色谱柱为Intersil ODS-3(50 mm×2．1 mm,3μm),流速0．3 mL·min-1。三级四极杆质谱采用正离子模式,离子采集方式为多反应监测模式(MRM),离子源温度200℃,离子源电离电压为5 000 V,雾化气流速8 L·min-1。采集离子(母离子／子离子)为瑞芬太尼377／228,芬太尼337／188。结果:瑞芬太尼在0．5～50．0 ng·mL-1浓度范围内呈良好的线性(r=0．9994)。日内、日间精密度均在15％以内,提取回收率大于67．3％,方法回收率在95．0％～97．6％。结论:本方法灵敏、准确,适合瑞芬太尼的体内分析。     

System suitability in bioanalytical LC/MS/MS

System suitability is widely recognized as a critical component of bioanalysis. This paper discusses a generic system suitability test that monitors instrument performance throughout a run when used for liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) in bioanalysis. This system suitability process is designed to ensure that the LC/MS/MS system is performing in a manner that leads to the production of accurate and reproducible data that can be submitted with confidence to regulatory agencies. This process contains tests for signal stability, carryover, and instrument response. This approach is integrated throughout an analytical run and has been used in the analysis of over 25,000 batches of clinical samples. Two case studies are presented in which quality control samples and standards meet all acceptance criteria (based on Standard Operating Procedures and the Food and Drug Administration's recommendations for bioanalytical method validation) but failed the proposed system suitability test, and thus were rejected. In these case studies, the concentrations of a significant number of clinical samples (over 35%) were affected, resulting in changes of more than 15% when the samples were reanalyzed. These data indicate that the poor performance of an LC/MS/MS system could adversely affect the calculated concentrations of unknown samples even though the results for quality control samples appear to be acceptable.     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆双氢青蒿素浓度

目的:建立液相色谱-质谱联用法测定健康人血浆中双氢青蒿素浓度的方法。方法:以青蒿素为内标,血浆样品采用液-液萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测双氢青蒿素。结果:该方法双氢青蒿素线性范围为1.01~2020 ng.ml-1;定量下限为1.001±0.072 ng.ml-1;方法回收率在93.0%~98.2%;批内、批间变异系数均<10%。结论:该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于健康人血浆双氢青蒿素浓度的测定。     

LC/MS/MS法测定辛伐他汀血浆浓度及其在健康人体内的药物动力学研究

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC/MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药物动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:采用两制剂双周期自身对照试验设计。18名男性健康志愿者随机交叉服用单剂量辛伐他汀试验片剂和参比片剂20mg,采用液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)分析方法测定血浆辛伐他汀的浓度。采用DAS2.0程序计算药物动力学参数和相对生物利用度,并进行等效性评价。结果:测定单剂量口服20mg辛伐他汀参比片剂和试验片剂的AUC_((0→24))分别为(14.90±5.86)和(14.37±4.94)ng·h·ml~(-1),AUC_((0→∞))分别为(15.62±6.29)和(14.78±5.02 )ng·h·ml~(-1);C_(max)分别为(4.54±2.11)和(4.00±1.34)ng·ml~(-1);T_(max)分别为(1.75±0.79)和(1.39±0.65)h。以AUC_((0→24))与AUC_((0→∞))计算相对生物利用度分别为(108.0±52.7)%和(106.4±52.5)%。结论:该法准确灵敏,测得的数据可靠,统计分析表明两种制剂生物等效。     

UPLC(超高效液相色谱)/MS/MS联用技术测定全血中的西罗莫司

目的 建立全血中西罗莫司的UPLC（超高效液相色谱）／MS／MS测定方法,方法 全血样品中加入他克莫司（FK506）作内标，用叔丁基甲醚进行提取。以乙腈与含千分之五甲酸的水溶液为流动相（40：50），色谱柱为AcquityUPLCTMBEHC。（50mm×2．1mm，1．7μm），流速0．5ml／min。三重四极杆质谱采用正离子模式，离子采集方式为多反应监测模式（MRM），离子源温度105℃，离子源电离电压为3300V，雾化气流速500L／h。采集离子（母离子／子离子）西罗莫司为931．2／864．1，FK506为822．0／577．0。结果 西罗莫司在1～240腿／L浓度范围内呈良好的线性（n=0．9995）。日内、日间精密度均在15％以内，提取回收率大于75．0％，方法回收率为95．0％～98．5％，最低检测限为0．2μg／L。结论 本方法灵敏、准确，适合临床西罗莫司的全血分析。     

氯吡格雷在人血浆浓度的液质联用测定法

目的建立测定人血浆中氯吡格雷(抗心肌及抗脑梗死药)血药浓度的HPLC/MS/MS法。方法血浆样品用叔丁基甲醚提取,内标为噻氯匹定;色谱柱用X-Terra MS C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm),柱温30℃,流动相:乙腈-水(含10 mmol·L~(-1)醋酸铵,调pH为4.0)为70:30,流量为0.3 mL·min~(-1);质谱用ESI离子源,定量分析的离子反应分别为m/z 322→z 212 (氯吡格雷),m/z 264→m/z 154(内标噻氯匹定)。结果氯吡格雷的线性范围为10×10~4～1.2×10~4pg·mL~(-1)(γ=0.9993),日内、日间RSD均小于10%,提取回收率约为80%。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可用于氯吡格雷血药浓度测定。     

LC/MS/MS的多反应监测方法定量测定灯盏乙素

目的：建立一种可靠的灯盏乙素定量分析方法。方法：用三级四极串联质谱(MS/MS)作为HPLC的检测器,其中MS/MS使用了多反应监测(MRM)扫描方式。选择母→子离子对m/z -461→m/z -285作为MRM监测的离子对;HPLC流动相为100％甲醇,流速0.9 mL.min^-1,色谱柱Beckman ODS-1。以测定短葶飞蓬提取物的灯盏乙素含量为例,对此方法进行了应用。结果：灯盏乙素在短葶飞蓬提取物中含量为6.98%。方法线性范围20～160 ng.mL^-1 (γ=0.999);加入灯盏乙素标准品20,60和160 ng的加样回收率分别为：96.5%,97.4%和97.3%。检测限为1 ng,每个样品的分析时间为4 min。结论：此法灵敏、快速、准确,可应用于灯盏乙素的各种药剂、药代的研究。