原代乳腺癌细胞培养及药敏试验

目的 探讨手术过程中取乳腺癌组织制备单细胞悬液进行原代细胞培养及药敏试验指导治疗的效果.方法 应用四种抗癌药物对原代乳腺癌细胞进行药物敏感性试验,MTT比色法检测原代乳腺癌细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化.结果 5-FU、MTX对原代乳腺癌细胞敏感性强,对乳腺癌细胞有明显的增殖抑制作用,流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多.结论 化疗前进行肿瘤细胞敏感性试验,对于提高肿瘤治疗效果、减少毒副作用、避免多药耐药的产生具有重要意义.     

雷帕霉素对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

将不同浓度雷帕霉素作用于肺腺癌A549细胞。用MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果雷帕霉素对肺腺癌细胞有显著的抑制作用,呈剂量-效应和时间-效应关系;流式细胞仪检测示雷帕霉素可将肺腺癌细胞阻滞于G1期,S期合成减少;同时细胞凋亡率随着雷帕霉素浓度增加而增加。认为雷帕霉素能有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,阻滞细胞周期并诱导其发生凋亡。     

莱菔硫烷对人肺腺癌细胞生长的抑制

背景与目的近年许多研究表明．十字花科蔬菜可以减少患一些癌症的危险．因为十字花科蔬菜中含有异硫氰酸盐类抗癌物质。莱菔硫烷是迄今从蔬菜中发现的最强的抗癌成分。该研究旨在探讨莱菔硫烷对人肺腺癌细胞的体内外的抑制作用。方法集落形成抑制试验用以检测莱菔硫烷对A2细胞的体外抑制作用。流式细胞仪检测莱菔硫烷对A2细胞周期及凋亡的影响。A2细胞裸小鼠异种移植瘤用来研究莱菔硫烷对人肺腺癌细胞的体内疗效。结果莱菔硫烷对A2细胞处理24h的半数抑制浓度IC50为6．25μmol。延长处理时间或提高莱菔硫烷浓度可进一步增强莱菔硫烷的抑制作用。莱菔硫烷可引起明显的S期阻滞和A2癌细胞凋亡。腹腔注射莱菔硫烷50～75mg／kg体重，能减少A2细胞裸小鼠皮下异种移植瘤瘤重约50％。结论莱菔硫烷对人肺癌A2细胞的抑制显示有时间依赖性和浓度依赖性双重特征腹腔注射莱菔硫烷可抑制人肺腺癌A2细胞裸小鼠异种移植瘤的生长。     

survivin—siRNA对肺癌细胞A549增殖抑制的影响

目的探讨survivin—siRNA对肺癌细胞A549的增殖抑制作用。方法将针对survivin的siRNA表达载体与脂质体和pSi—scrambled两个对照组一起分别转染肺癌细胞A549后，利用半定量RT—PCR和Western印迹法分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平，MTT法测定细胞的增殖能力，流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果转染72h后，实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体对照组的31.1％，蛋白表达水平是脂质体对照组的29．2％。MTT检测实验组细胞的生长速度是脂质体对照组的36．6％，流式细胞术发现实验组G1期细胞比例明显高于两个对照组，而G2期和S期细胞比例减少，细胞出现凋亡。结论利用survivin—siRNA可明显抑制肺癌细胞A549的增殖，细胞受阻于G1期，诱导细胞凋亡。     

卵巢癌个体化治疗的可行性

目的探讨原代人卵巢癌细胞对4种化疗药物的敏感性。方法应用原代人卵巢癌细胞为靶点,观察其对4种化疗药物的敏感性。MTT法检测原代卵巢癌细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化,透射电子显微镜观察其亚细胞结构改变。结果 MTT结果显示,斑蝥酸钠维生素B6、顺铂对培养的卵巢癌细胞敏感性较强,而紫杉醇、环磷酰胺敏感性次之,组间比较差异显著(P0.05)。流式细胞仪结果显示不同的化疗药物诱导原代卵巢癌细胞周期分布表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高,组间比较差异显著(P0.05)。透射电子显微镜下可见细胞核染色质趋边凝集、线粒体肿胀,可见凋亡小体改变。结论原代人卵巢癌细胞培养及药物敏感性实验为卵巢癌术后个体治疗提供重要参考依据。此对降低化疗药物的毒副作用,避免多药耐药的产生,尤其对远端微小转移灶的治疗有重要意义。     

肺腺癌A549细胞KDR基因沉默后对厄罗替尼敏感性的影响

目的研究激酶功能区受体(KDR)基因沉默对人肺腺癌A549细胞增殖和对化疗药物厄罗替尼敏感性的影响。方法设计合成KDR的si RNA序列,LipofectamineTM2000转染人A549细胞。RT-PCR和Western印迹检测KDR在干扰后m RNA和蛋白的表达情况,通过流式细胞仪检测细胞周期。MTT法和细胞克隆形成试验观察KDR基因沉默后A549细胞对厄罗替尼的敏感性。结果 KDR基因沉默48 h后,A549细胞的KDR基因和蛋白表达明显降低(P<0.05)。细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数明显减少(P<0.05)。KDR基因沉默组细胞对厄罗替尼的敏感性显著性增强。结论 KDR特异性si RNA能显著沉默A549细胞KDR基因,抑制细胞增殖,并增强A549细胞对厄罗替尼的敏感性。     

茶多酚对肺癌SPC-A1细胞增殖的影响

目的探讨茶多酚对人肺癌SPC—Al细胞增殖的影响。方法体外培养人肺腺癌SPC—A1细胞，以50—300mg／L茶多酚作用12、24、36h后，MTT法测定细胞的增殖活性，琼脂糖凝胶电泳、透射电镜观察细胞凋亡情况，流式细胞仪检测对细胞周期的阻滞作用。结果茶多酚可抑制肺癌细胞的增殖活性，其抑制作用随时间的延长而增强，以36h抑制作用最强。浓度50～150mg／L，抑制作用随浓度增高而增强；浓度〉150mg／L，抑制作用随浓度增高反而减弱。茶多酚可使肺癌细胞阻滞于G1期，以150mg／L阻滞作用24h最强。结论茶多酚可诱导人肺癌SPC-Al细胞的凋亡，并使细胞周期阻滞于G1期，抑制肺癌细胞的增殖。     

西咪替丁对人胃癌细胞MKN45的生长抑制和促凋亡的研究

目的 探讨西咪替丁对胃癌细胞MKN45生长的抑制和凋亡作用。方法 采用MTT比色法测定不同浓度西咪替丁作用下胃癌细胞MKN45培养液的OD值，并用流式细胞仪测定西咪替丁对MKN45的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 西咪替丁作用72小时，抑制胃癌细胞。MKN45的生长并呈剂量依赖趋势。胃癌细胞MKN45细胞周期发生改变，G1期百分比减少，S期百分比增加，并出现明显的细胞凋亡峰。结论 西咪替丁可能通过诱导胃癌细胞。MKN45凋亡从而抑制其细胞增殖。     

三氧化二砷对肺腺癌化学治疗敏感性的影响及其机制

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3)对肺腺癌细胞生长过程及化学治疗 (简称化疗 )敏感性的影响。方法　应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色、免疫组织化学、流式细胞仪、逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)等方法 ,观察不同浓度As2 O3 对人肺腺癌A549细胞株生长、化疗敏感性、细胞周期 ,及凋亡基因Fas/FasL、抗凋亡基因B淋巴细胞白血病 2 (bcl 2 )和多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (LRP)表达水平的影响。结果　 1、2 μmol/L的As2 O3 对人肺腺癌A549细胞株的生长抑制作用较弱 ,但能显著提高A549细胞对顺铂的敏感性 (P <0 .0 5)、提高A549在G1期细胞的比率 ,上调Fas、下调bcl 2及MRP、LRP的表达水平。 5μmol/L的As2 O3 对人肺腺癌A549细胞有一定的抑制作用 ,并可上调bcl 2、MRP、LRP的表达水平 ,但不能提高A549细胞对顺铂的敏感性。结论　低浓度的As2 O3 可能通过提高A549细胞在G1期的比率 ,上调Fas基因和下调bcl 2、MRP、LRP基因的表达水平 ,提高肺腺瘤细胞对化疗的敏感性     

刺五加叶皂甙诱发肝癌细胞凋亡的研究

探讨刺五加（ASS）叶皂甙诱导体外培养肝癌细胞凋亡的作用。流式细胞仪检测ASS对HepG2 肝癌细胞的细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响，并用维甲酸（RA）作为对照药和的。结果ASS和RA均作用于细胞周期的S期，抑制肝癌细胞的DNA合成。ASS还减少G2M期细胞数量，抑制细胞有丝分裂，诱发细胞凋亡率显著高于RA的作用，上述效应与其作用时间和剂量有关。ASS可促进体外培养肝癌细胞凋亡，有必要进一步探索ASS对肝癌的治疗价值。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.