应用芯片技术对非霍奇金淋巴瘤标志物的研究

目的应用蛋白质组学技术寻找非霍奇金淋巴瘤与健康对照组血清中差异表达的蛋白。方法选择山西省肿瘤医院72例非霍奇金淋巴瘤患者,男性47例,女性25例;年龄11～83岁,中位年龄52.5岁。正常对照组32例,男性17例,女性15例;年龄10～74岁,中位年龄26.5岁,均为健康志愿者。应用SELDI-TOF-MS技术通过WCX-2蛋白芯片检测他们血清中的蛋白质谱,运用Ciphergen Proteinchip 3.0版本的分析软件自动采集数据,结果采用Biomarker Wiz-ard软件分析二组间蛋白质谱中的差异蛋白。结果笔者在非霍奇金淋巴瘤患者的血清中找到了一系列特异表达的蛋白质,其质荷比分别为3193 Da,3398 Da,7974 Da,8564 Da,8693 Da和15934 Da。72例NHL患者与30例正常人的血清中有5个差异明显的潜化标志蛋白,患者血清中高表达且正常人血清低表达的蛋白质的相对分子量为15 934 Da,患者血清中低表达且正常人血清高表达的蛋白质相对分子量为3193 Da,3398 Da,8564 Da,8693 Da。结论质荷比3193 Da,3398 Da,8564 Da,8693 Da和15 934 Da的蛋白质可能是非霍奇金淋巴瘤的生物学标志物。     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

良性前列腺增生的前列腺液中低相对分子质量前列腺特异抗原及乳铁蛋白的表达

目的:检测良性前列腺增生患者和正常男性的前列腺液中低相对分子质量前列腺特异抗原(lw-PSA)及乳铁蛋白的表达水平.方法:采用蛋白双向电泳的方法,对20例良性前列腺增生患者和20例正常男性前列腺液的蛋白表达进行检测,并通过质谱分析方法确定蛋白点的性质.随后采用Western blotting的方法来验证蛋白的表达水平.结果:在良性前列腺增生患者的前列腺液中发现了相对分子质量为10×103、等电点(pI)为8.5～9.3的蛋白点A和相对分子质量为35×103、pI为7～7.5的蛋白点B.进行质谱分析后确定、蛋白点A为lw-PSA,蛋白点B为乳铁蛋白(lactoferrin).Western blotting检测进一步确定良性前列腺增生患者的前列腺液中有lw-PSA表达,而前列腺癌组织中和正常男性的前列腺液中未见lw-PSA的表达.另外,Western blotting检测还发现,良性前列腺增生患者前列腺液的乳铁蛋白表达水平高于正常男性,而前列腺癌组织中无乳铁蛋白的表达.结论:良性前列腺增生患者的前列腺液中有lw-PSA表达,而正常男性的前列腺液中未见lw-PSA表达,lw-PSA可能与良性前列腺增生的病理变化存在一定关联,或许可以作为良性前列腺增生的蛋白标志物.另外,良性前列腺增生患者前列腺液的乳铁蛋白表达水平增高,正常男性前列腺液的乳铁蛋白表达水平较低,而前列腺癌的乳铁蛋白表达缺失.     

血清蛋白指纹图谱技术筛查前列腺癌患者特异性血清标志物的应用价值

目的 应用蛋白指纹图谱技术筛查前列腺癌患者血清蛋白质表达谱,寻找血清中的特异性标志物.方法 选择前列腺癌患者22例和前列腺增生患者26例以及同期正常对照者25例,用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术检测各血清样本的血清蛋白指纹图谱,比较血清蛋白指纹图谱的差异.结果 前列腺癌组的血清蛋白质谱图中质荷比为3 165、3 982、4 291的蛋白质相对含量(9.794±4.449、3.968±2.247、11.020±6.069)高于正常对照组(5.062±2.245、1.823±1.432、6.525±5.270),而质荷比为2 747、10 268的蛋白质相对含量(22.390±12.179、0.953±0.338)低于正常对照组(42.231±16.970、1.932±0.864);质荷比为10 268的蛋白质的相对含量前列腺癌组(0.953±0.338)低于前列腺增生组(1.314±0.493),差异均有统计学意义(均P<0.05).但前列腺增生组与正常对照组差异均无统计学意义(均P >0.05).PSA阳性的前列腺癌组质荷比为3 960的蛋白质相对含量(3.447±1.434)高于PSA阳性的前列腺增生组(1.473±0.971),而PSA阳性的前列腺癌组质荷比为10 268的蛋白质相对含量(0.847±0.408)低于PSA阳性的前列腺增生组(1.538±0.182),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 血清蛋白质谱图存在差异的6个不同质荷比蛋白质组成的蛋白质组有可能成为前列腺癌筛查的血清标志物.质荷比为10268Da的蛋白指纹峰有助于区分前列腺癌患者与前列腺增生患者和正常人群.     

大肠癌SELDI—TOF—MS蛋白质组图谱的分析

目的:筛选并建立大肠癌血清蛋白质组图谱的诊断模型并探究其临床价值.方法: 将102例血清标本(大肠癌53例,正常对照49例)随机分成训练组75例,测试组27例.用CM10蛋白芯片及SELDI-TOF-MS技术对训练组75例血清标本(大肠癌37例,正常对照38例)进行蛋白质组图谱检测,经留一法交叉验证后建立诊断模型,并对测试组27例未知的血清进行血清蛋白质谱测定,盲法验证该模型.结果: 通过ZUCI-蛋白芯片数据分析系统软件包运算,用6个质荷比峰(3 951.147 3、4 364.486 5、5 926.628 6、8 103.635 6、8 964.429 9、11 709.016 8 m/z)建立了大肠癌蛋白质组图谱诊断模型,经过交叉验证其准确度96.00%,灵敏度94.59%,特异度97.37%,阳性预测值97.22%.经盲法验证该方法的检出率为81.25%,排除率为100%.结论: 本组建立的诊断模型可以有效区分大肠癌和非癌正常人,为大肠癌的诊断与筛查提供了一条崭新途径.     

SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断中的临床应用性研究

目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI—TOF—US）筛选肝癌患者血清标志蛋白，探讨作为临床诊断指标的最佳标志蛋白组合模式。方法 对40倒肝癌、20例肝硬化和60例健康志愚者的血清进行分析，并反复分析寻找合理运算规则以确定能够区分肝癌和健康志愿者与肝硬化患者的蛋白组学图谱。结果 肝癌、肝硬化患者与健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白在肝癌患者血清中高表达，1个标志蛋白在肝癌患者血清中低表达。其中2个蛋白质峰[8943Da和4477Da质荷比（m/z）]组合构建的诊断模型Ⅰ鉴别肝癌和健康志愿者，灵敏度为90％（36／40），特异性为100％（60／60）。3个蛋白质峰（4477Da、13761Da和4097Da m／z）组合的诊断模型Ⅱ鉴别肝癌组与肝硬化组的灵敏度为85％（34／40），特异性为90％（18／20）。结论 SELDI—TOF—MS技术的特异性及敏感度远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断。其结果对进一步研究肝癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义。     

蛋白质芯片技术在前列腺癌诊断中的应用

目的通过应用蛋白质芯片和生物信息学技术筛选前列腺癌患者的血清标志蛋白,诊断早期前列腺癌.方法以集团普查诊断的83例前列腺癌患者血清和95例正常人血清为研究对象.采用SELDI（surfaced enhanced laser desorption/ionization）蛋白质芯片技术检测血清的蛋白质谱.以蛋白质芯片阅读机读取谱图数据,后者应用Biomarker Wizard 和Biomarker Pattern软件进行分析比较.结果与正常人血清蛋白质谱比较发现,前列腺癌患者血清有18个标志蛋白,其中4个标志蛋白呈高表达（15 265,15 868,16 003,16 068）,14个标志蛋白呈低表达.Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件在设定条件下自动选取8个标志蛋白用于建立前列腺癌诊断的分类树模型.此模型可正确划分96.386%的前列腺癌患者和92.632%的正常人.结论 SELDI蛋白质芯片技术可筛选出前列腺癌标志蛋白并建立前列腺癌诊断分类树模型,可能成为前列腺癌诊断的有效方法.     

应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选大肠癌血清特异标志物

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据.方法 应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大肠癌患者(大肠组)血清中蛋白含量.结果 在质荷比为2 000Da～30 000Da的范围内,两组样本检测到了对照组82个蛋白峰.其中3 604.240 Da蛋白峰大肠癌组明显高于对照组(P＜0.05),而12 861.368 Da的蛋白峰对照组明显高于大肠癌组(P＜0.05).利用这两个蛋白筛查大肠癌的特异度为86.11%(31/36),敏感度为77.78%(28,36),阳性预测值为87.5%.结论 质荷比为3 604.240 Da与12 861.368 Da的两个蛋白峰可以作为大肠癌早期诊断的备选标志物.     

检验血清中miRNA-34b在前列腺癌早期诊断的价值

目的本研究通过实时荧光定量PCR检测前列腺癌患者、前列腺增生患者及正常人血清中miRNA-34b表达水平,探讨miRNA-34b在前列腺癌早期诊断中的价值。方法收集2017年12月至2018年10月期间在我院泌尿外科经病理活检确诊的前列腺癌患者、前列腺增生患者术前血清及健康男性血清。其中前列腺患者30例,年龄59~91岁,平均年龄为(77.8±7.4)岁;前列腺增生患者30例,年龄60~82岁,平均年龄(75.3±6.0)岁;健康男性30例。所有患者术前未行任何治疗。采用实时荧光定量PCR检测受试者血清中miRNA-34b及PSA,计算miRNA-34b在各组患者中的相对浓度。结果 miRNA-34b在各组中均有表达,但前列腺癌组中表达最多,与前列腺增生组和健康男性组比较有统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-34b在各组中均有表达,但在前列腺癌中表达最高,可用来特异性标记前列腺癌,能够临床诊断早期前列腺癌。     

应用蛋白质指纹图谱建立炎性和非炎性早产诊断模型

目的 建立炎症早产和非炎症早产血清蛋白质组诊断模型.探讨应用蛋白质指纹技术进行早产的早期预警并区分炎症早产.方法 从2008至2010年在解放军第三○六医院住院分娩的产妇中挑选250例作为研究对象,根据人选条件和分娩后胎盘胎膜的病理结果,分5组每组50例:炎症早产组,非炎症早产组,盲法验证组和炎症足月产组;用正常足月产组做对照.各组标本50例,共250例.应用SELDI-TOF-MS蛋白质指纹技术和生物信息学方法,建立炎症和非炎症早产诊断模型并经过盲法验证和统计学分析;同时将炎症早产组和炎症足月产组建模所用差异蛋白进行比较分析.结果 炎症早产组与对照组质谱比较,得出36个差异蛋白,使用相对分子质量为1089、6635、2875、10 068、4405、4971、36 665、9713的标志蛋白建立模型.其特异度80.85％,敏感度84.44％,阳性预测值93.33％,阴性预测值46.67％;非炎症早产组共有15个差异蛋白,使用相对分子质量为3941、5808、6858、4289的标志蛋白建模,其特异性75.68％,敏感性64.44％,阳性预测值80.00％,阴性预测值66.67％.诊断炎症早产和诊断炎症足月产所用的模型比较得知,两者所用的差异蛋白完全不同.结论 应用血清蛋白质组诊断模型预测早产,能够将炎症早产和非炎症早产加以区分,具有指导个性化治疗的临床应用前景.炎症早产和炎症足月产的诊断模型完全不同,推测在妊娠的不同时期,绒毛膜羊膜炎所导致的相关蛋白质的表达不同.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。