肉毒毒素的对流免疫电泳(CIE)测定法

1969年Dodin和Brygoo报告肉毒毒素和白喉毒素均可用CIE作出快速检测。我们通过实验证明本法是可行的。现介绍如下。1.材料:(1)DY—1型电泳仪。(2)pH=8.6μ=0.05巴比妥缓冲液:巴比妥钠10.30g,巴比妥1.84g,于800ml 蒸馏水中煮沸溶解,冷却后加蒸馏     

同时配制麝浊与锌浊缓冲液的简便方法

麝浊、锌浊试验所用巴比妥缓冲液可用下法配制:1.取巴比妥2.76g,巴比妥钠2.06g,加水800ml,加温至沸后冷却至室温,倒入1000ml 容量瓶加水至刻度,混匀.取出101ml 置另一容量瓶中,所剩余液加10%麝香草酚乙醇液9ml,混匀.此液即为麝香草酚巴比妥缓冲液,其PH 值在7.5～7.6之间.2.在含有上述巴比妥缓冲液101ml 的容量瓶中,加0.24g/dl 硫酸锌液10ml 后加水至1000ml 混匀.此液即为硫酸锌巴比妥缓冲液.     

反相高效液相色谱法同时测定血清中的新喋呤和生物喋呤

目的　建立同时测定血清中新喋呤 (NP)及生物喋呤 (BP)的反相高效液相色谱 (RP HPLC)方法。方法　血清标本经三氯乙酸去蛋白 ,低温、高速离心 ,用碱中和后直接进样 ,采用外标定量法 ,以甲醇 :水 =5∶95 (v/v)为流动相 ,经HypersilBDSC18反相色谱分离后用荧光检测 (Ex =36 0nm ,Em =4 4 0nm)。结果　线性范围 :BP为 0 .4 8～ 80 0 μg/L ,NP为 0 .12～ 80 0 μg/L。检测灵敏度 :BP为 0 .1μg/L ,NP为 0 .0 1μg/L。日内精密度 :BP为 3.96 % ,NP为 2 .87%。高、中、低浓度的平均回收率 :NP为 97.9%,BP为 94 .3%。NP和BP在血清中的线性回归方程分别为 :Y(NP) =1.0 2 5 5x - 0 .0 0 77(r2 =0 .9998) ;Y(BP) =0 .70 2 7x 0 .0 394 (r=0 .9995 )。正常人血清中的NP和BP的浓度分别为 :(5 .76± 2 .4 4 ) μg/L和 (1.81± 0 .5 7) μg/L ;急性心肌梗死患者血清中NP和BP的浓度分别为 :(12 .96± 6 .95 ) μg/L和 (3.36± 1.73) μg/L ,二者血清中的NP和BP浓度均有显著性差异 (P <0 .0 1)。 结论　该法简便、快速、精确 ,适于血清中生物喋呤及新喋呤的检测。     

UHPLC法检测血清中万古霉素的浓度

目的 建立通过超高效液相色谱（UHPLC）检测血清中万古霉素浓度的方法,指导临床安全合理用药.方法 使用Agilent 1290超高效液相色谱平台,采用Angilent Zorbax SB-Aq色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,以乙腈∶水（体积比为10∶90）为流动相进行梯度洗脱,检测波长为230 nm,柱温30 ℃,流速0.4 mL/min,进样量1 μL.结果 万古霉素在5~100 μg/mL质量浓度范围内线性良好（r=0.998 7）,检测下限为1 μg/mL.检测低浓度（5 μg/mL）、中浓度（60 μg/mL）、高浓度（90 μg/mL）三个浓度值的平均方法回收率均大于90%,各浓度值得日内、日内相对标准偏差（RSD）均小于8%.结论 利用UHPLC可以快速准确的检测血清中万古霉素的浓度.     

HPLC法测定人血中阿莫西林的方法学研究

目的 建立一种实用的HPLC法用于人血中阿莫西林含量测定.方法 采用含1%磷酸的甲醇溶液沉淀蛋白,高效液相色谱法测定.以替硝唑为内标,色谱柱为Waters XBridge C18,150 mm×4.6 mm,waters保护柱;流动相为:甲醇:0.01 mol/L磷酸二氢钾(pH2.3)=16:84,流速为1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长为225 nm.结果 血浆内源性物质对样品测定没有干扰.阿莫西林的线性范围为0.25～32.0 μg/mL(r=0.999 9).阿莫西林以及替硝唑各浓度点的稳定性实验的RSD均小于15%.结论 该方法样品处理简便,结果准确,灵敏度较高,可用于人血浆中阿莫西林含量的测定以及阿莫西林药代动力学研究.     

血清唾液酸快速测定及临床意义

报道用5—甲基间苯二酚显色法测定血清中唾液酸含量。实验结果:方法的线性范围为0～5.0mmol/L,回收率为98.1％～101.6％,批内CV=1.43％,批间CV=2.10％,由线性回归法求得摩尔吸收系数ε_(560nm)=0.776×10~4L·mol~(-1)·cm~(-1),最低检出极限浓度为5.4μmol/L,与硫代巴比妥酸法具有良好的相关性(r=0.99)。     

肾上腺素减少烧伤削痂术中出血量的临床观察

目的 :探讨减少烧伤削痂术中出血的方法。方法 :将 46例深Ⅱ度烧伤患者分成 2组 :痂下或供皮区皮下浸润注射 1∶2 0万 ( 5 μg/mL)的肾上腺素盐水 (治疗组 ,n =2 5 )及皮下或痂下浸润注射 0 9%盐水 (对照组 ,n =2 1)进行临床观察研究。结果 :治疗组平均失血量明显少于对照组 ,术后对照组血红蛋白浓度及红细胞压积明显低于治疗组。治疗组注射术后 0 5h出现一过性的血压及脉搏升高 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 :皮下或痂下浸润注射微量 ( 5 μg/mL)的肾上腺素可明显减少削痂术中出血量     

胃液唾液酸直接测定法

本文报道了用5-甲基间苯二酚显色法直接测定胃液唾液酸含量,本法线性范围在0～0.3881mmol/L,实验回收率94.7～101.0%,批内CV=1.43%,批间CV=2.10%,摩尔吸收系数ε569nm=0.8834×10~4L·mol-1·cm-1·与硫代巴比妥酸法具有良好的相关性(r=0.99)。方法简单、准确、快速,优于硫代巴比妥酸法。经临床测定对胃癌有较高的鉴别诊断价值。     

复方氨林巴比妥与络合碘存在配伍禁忌

本科(小儿急诊)在给高热患儿肌肉注射复方氨林巴比妥注射液(本品为复方制剂,其组份为:每支含氨基比林0.1 g,安替比林40 mg,巴比妥18 mg.辅料为注射用水.本品为无色或微黄色的澄明液体.生产厂家:国药准字H41025245河南华利药业有限责任公司)时,用络合碘(有效碘含量为5.0~6.0g/L,适用于外科洗手、皮肤、粘膜消毒.生产厂家:湘卫消字2009第0200号常德市医用消毒剂厂)棉签消毒皮肤,拔针时自针眼处流出药液立即发生变色反应,产生蓝黑墨色变化,说明复方氨林巴比妥与络合碘存在配伍禁忌,肌肉注射复方氨林巴比妥时,不能用络合碘消毒皮肤.现报道如下.     

火箭电泳法测定血清IgD

用火箭电泳法测定78名健康献血员血清中IgD 含量,为52.8±31.9μg/ml((?)±SD).部份哮喘、过敏性鼻炎、红斑狼疮病人含量增高.用pH8.8,离子强度0.03的Tris-巴比妥缓冲液配制0.9g/dl 琼脂糖和作电泳槽液,优于巴比妥缓冲液     

小剂量促肾上腺皮质激素刺激实验在危重病患儿肾上腺功能评估中的作用

目的 探讨小剂量(1 μg/1.73 m2)促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激实验在儿童危重症相关性肾上腺皮质功能障碍(CIRCI)评估中的意义.方法 对收入上海交通大学附属儿童医院儿童重症监护病房(PICU)患儿24 h内测定血液基础皮质醇(T0)后,静脉注射ACTH(1μg/1.73 m2),30 min后测定刺激后血液皮质醇(T1)水平,根据T0和皮质醇增值(Δmax=T1-T0)判断肾上腺功能,以T0＜ 10 μg/dL或Δmax≤9 μg/dL为判断肾上腺功能障碍标准.结果 95例患儿中,严重感染35例,非感染重症患儿30例,大手术患儿30例,总病死率为12.6％ (12/95).CIRCI发生率55.8％ (53/95),其中重症感染组、非感染重症组、大手术组患儿CIRCI发生率分别是60％、53.3％和53.3％,差异无统计学意义(P＞0.05).重症感染组、非感染重症组、大手术组、T0和71分别为(37.17±47.35) μ.g/dL、(31.52±52.78) μg/dL、(28.61±17.45) μg/dL和(50.26±48.21) μg/dL、(58.56±73.21) μg/dL、(42.41±13.56)μg/dL,3组差异无统计学意义(P＞0.05).CIRCI组和正常皮质醇反应组患儿病死率分别是7.5％和19.0％ (P＞0.05).T0和T1水平与儿童危重病例评分(PCIS)有关(P＜0.05).结论 危重症患儿存在肾上腺功能障碍,CIRCI发生率较高,小剂量ACTH刺激实验可以作为肾上腺功能功能判断的依据.本研究未发现危重病患儿CIRCI与病死率的显著相关性.     

少量酸微波消解-AFS法测定禽蛋中砷和汞

目的建立少量酸微波消解-原子荧光光谱仪同时测定禽蛋中砷、汞的方法。方法采用1mL硝酸、对禽蛋样品用微波消解进行前处理,消解过的样品以硫脲-抗坏血酸作为还原剂,无需赶酸,直接用原子荧光光谱仪测定禽蛋中砷、汞水平。结果该方法检出限:砷0.10μg/L、汞0.022μg/L。线性范围:砷0~30μg/L,汞0~5.00μg/L,相关系数均大于0.999 6。样品加标回收率:砷92.1%~97.0%,汞92.5%~97.1%。结论该方法试剂用量少,简便快速。具有较高灵敏度、准确度、精密度,能够满足禽蛋样品中砷和汞同时测定的要求。     

二苯乙烯苷对过氧化氢诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H₂O₂)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞给予H₂O₂(100 μmol/L)诱导细胞凋亡,实验分为空白对照组、H₂O₂损伤组、高剂量组(TSG 120 μg/L+H₂O₂）、中剂量组(TSG 60 μg/L+H₂O₂)和低剂量组(TSG 30 μg/L+H₂O₂)。TSG处理2 h后,加入H₂O₂损伤细胞,4 h后取细胞测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,噻唑兰(MTT)法检测细胞活力,免疫组织化学方法检测bcl-2的蛋白表达。结果TSG能提高细胞活力,降低LDH漏出和细胞凋亡率(P<0-05)。0-1～1 μmol/L TSG处理后bcl-2的蛋白表达降低(P<0-05)。结论TSG能减少H₂O₂对PC12细胞的损伤。     

紫外分光光度法快速测定消毒剂邻苯二醛

为建立紫外分光光度法测定消毒剂邻苯二醛的方法 ,用紫外分光光度计 ,在 2 6 0nm波长下 ,对样品进行了测定。结果 ,标准溶液在 10～ 10 0 μg/ml浓度范围内 ,相关系数r =0 .999,回收率 90 %～ 110 % ,相对标准偏差2 .5 % (n=6 )。测定值与配方值相符。邻苯二醛在 2 6 0nm处有特征吸收 ,可作为定性依据。此方法简便、快速 ,准确度好 ,灵敏度高 ,适宜大批样品测定。     

人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究

目的:探讨人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白的表达水平与西妥昔单抗细胞抑制率的相关性。方法:用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及HNE-1共7种细胞株中EGFR蛋白的表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率。结果:西妥昔单抗浓度为1500μg/mL时,EGFR蛋白表达水平与抑制率呈正相关(r=0.444,P=0.044),西妥昔单抗浓度增加至1800μg/mL时,两者呈负相关(r=-0.468,P=0.032)。结论:在NPC细胞株中,EGFR蛋白表达水平与西妥昔单抗的细胞抑制率之间无相关性,EGFR蛋白表达水平不能作为预测西妥昔单抗疗效的指标。     

镇静药催眠药急性中毒的诊断及抢救原则

1　药物的种类及中毒机制常用的镇静药、催眠药主要有三类 :1 .1　巴比妥类　根据其起效时间和作用持续时间分为 :①长效类 ,作用持续时间 6～ 8小时 ,有巴比妥和苯巴比妥 ;②中效类 ,3～ 6小时 ,有异戊巴比妥、戊巴比妥 ;③短效类 ,2～ 3小时 ,有司可巴比妥 (速可眠 ) ;④超短效类 ,30～ 4 5分钟 ,有硫喷妥钠。临床上常见误服或一次大量吞服本类药物 ,或静脉麻醉意外而引起急性中毒。一般服用量超过常用量5～ 1 0倍即可中毒。苯巴比妥成人中毒量 >0 5ｇ ,致死量 6～ 1 0ｇ ;巴比妥成人中毒量与致死量分别为 3～ 1 0ｇ ,5～ 2 0ｇ;戊巴比妥…     

HPLC法测定杯苋甾酮的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定杯苋甾酮在家兔血浆中的药物浓度。方法血浆样品用乙腈提取,流动相为乙腈20g、水80g、磷酸二氢钠1.20g,流速1mL/min,检测波长243nm。结果家兔口服给药后血浆中可检出杯苋甾酮,杯苋甾酮在0.565～9.040μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9990(n=5),日内RSD为±3.9%,日间RSD为±7.3%;血浆最低检测浓度为0.28μg/mL。结论本法快速、准确、重现性好,为该药物的药代动力学研究提供依据。     

右旋美托咪定联合舒芬太尼在术后静脉自控镇痛中的应用

目的:观察右旋美托咪定联合舒芬太尼在术后静脉自控镇痛中对镇痛效果和阿片类相关副作用的影响.方法:采用随机双盲对照研究,选择经腹子宫全切术ASA Ⅰ～Ⅱ级妇女100名,根据术后静脉镇痛泵中应用药物不同随机分成F组和D组,F组术后镇痛应用舒芬太尼1 μg/mL,D组应用舒芬太尼1 μg/mL和右旋美托咪定5 μg/mL.负荷量2 mL/次,锁定时间为10 min,无背景流量.记录术后24 h镇痛药物使用总量,疼痛强度及PCA相关并发症.结果:与F组相比,D组患者舒芬太尼术后0～24 h的需要量减少20%,且术后1～24 h疼痛强度明显低于对照组.而两组的镇静水平在各观察点无明显差异.结论:右旋美托咪定联合舒芬太尼在术后静脉自控镇痛产生了良好的镇痛效果,减少了舒芬太尼的用量及恶心呕吐的发生.     

应用高效毛细管电泳技术快速分离尿肌酐

目的　建立 1种快速测定尿中肌酐浓度的毛细管电泳方法。方法　用pH2 .5、0 .1mmol/L磷酸作为电泳缓冲液 ,利用非涂层石英毛细管 48.5cm× 5 0 μm(id) ,采用外标法定量 ,检测波长 191nm。 结果　本法在34 .5～ 8840 μmol/L浓度范围内呈良好的线性 (r =0 .998) ,日内和日间变异系数分别为 3.5 %、6 .2 %,平均回收率 94.7%。与苦味酸法有良好的相关性 (Y =1.0 0 4X 0 .0 0 4,r =0 .998,n =45 )。结论　本法线性范围宽、简单、快速 ,可应用于临床样品的检测。     

二烯丙基硫化物对百草枯中毒大鼠的抗炎机制

目的 探讨二烯丙基硫化物(DAS)对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺泡巨噬细胞(AM)中核转录因子-κB (NF-κB)蛋白的影响.方法 将45只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(NS)、PQ中毒模型组及DAS治疗组,每组15只.将百草枯溶液(70 mg/kg)一次性灌胃制备中毒模型;对照组灌胃等量生理盐水.制模后分别经腹腔注射DAS 100 mg/kg(DAS治疗组)、等量生理盐水(模型组和对照组),定时每日1次,共14 d.各组分别于制模后3、7、14d随机各组处死5只大鼠.根据不同时间将各组动物用3.6％水合氯醛腹腔注射麻醉,解剖胸腔暴露肺,行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液测定肺泡灌洗液中蛋白含量并分离培养肺泡巨噬细胞(AM);用免疫细胞化学方法测定AM中NF-κB的表达.结果 ①大鼠原代巨噬细胞的分离培养:采用差速贴壁的方法分离纯化肺泡巨噬细胞,30 min可以见到较多的巨噬细胞贴壁.②支气管肺泡灌洗液蛋白含量测定:NS组和PQ组比较,支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3 d(261.6±17.16) μg/mL vs.(673.4±151.9) μg/mL;7 d(265.6±18.37) μg/mL vs.(581.3 ±134.58)μg/mL;14 d(253.8 ±11.43) μg/mL vs.(589.07 ±33.85) μg/mL,均P＜0.05.PQ组和DAS组比较支气管肺泡灌洗液中蛋白含量3d (673.4±151.9) μg/mL vs.(342.9±39.03) μg/mL;7d(581.3±134.58) μg/mL vs.(383.7 ±7.37) μg/mL,P＜0.05;14 d(589.07±33.85) μg/mL vs.(282.9±15.59) μg/mL,P＜0.05.③免疫细胞化学结果NS组和DAS组肺泡巨噬细胞质有极少量NF-κB p65阳性表达;PQ组细胞核中有较多NF-κB p65阳性表达;DAS治疗组中NF-κB p65阳性表达较模型组明显减少,吸光度积分值NS组与PQ组比较,PQ组与DAS组比较,差异均有统计学意义,P＜0.05.结论 DAS能下调PQ中毒大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB的达,减少支气管肺泡灌洗液中蛋白量,故DAS具有一定抑制炎症介质释放,减少炎性渗出的作用.