改进型左侧精索静脉曲张对大鼠睾丸酶及增殖细胞核抗原的影响

Objective To evaluate the effects of improved left varicocele (ELV) on testis enzymes and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in rats. Methods ELV models of SD rats were established by the improved method in 21 SD rats, and another 15 were included in a sham operation group as controls. At the 3rd month, the activity of LDH, SDH and G6PDH was measured by colorimetry. The concentration of the PCNA was determined by enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA). Results The activity of LDH and G6PDH (8. 17 ± 3. 47), (34. 00 ± 16. 29) U/mg in left testes of experimental group was reduced remarkably as compared with that in right testes (12.69 ±3.97), (78.03 ± 25. 28) U/mg and control group (11. 98 ± 2. 26) , (54. 88 ± 20. 87) U/mg (P < 0. 05). The activity of SDH was reducd remarkably in left testes of experimental group ( 1. 22 ±0. 41 ) U/mg as compared with that in control group (1.74 ± 0.43) U/mg (P < 0.05), but there was no significant difference between the left and right testes ( 1.62 ±0. 56) U/mg in experimental group. The concentration of PCNA was reduced in left testes of experimental group (669. 10 ±205. 39) mU/ml as compared with that in right testes (800. 81 ± 172. 02) mU/ml and control group (776. 81 ± 231. 72) mU/ml, but there was no significant difference (P > 0. 05). Conclusion The reduction of LDH, SDH and G6PDH and the changes of PCNA in improved ELV may play an important role in the development of subfertility.     

改进型左侧精索静脉曲张对大鼠睾丸酶及增殖细胞核抗原的影响

Objective To evaluate the effects of improved left varicocele (ELV) on testis enzymes and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in rats. Methods ELV models of SD rats were established by the improved method in 21 SD rats, and another 15 were included in a sham operation group as controls. At the 3rd month, the activity of LDH, SDH and G6PDH was measured by colorimetry. The concentration of the PCNA was determined by enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA). Results The activity of LDH and G6PDH (8. 17 ± 3. 47), (34. 00 ± 16. 29) U/mg in left testes of experimental group was reduced remarkably as compared with that in right testes (12.69 ±3.97), (78.03 ± 25. 28) U/mg and control group (11. 98 ± 2. 26) , (54. 88 ± 20. 87) U/mg (P < 0. 05). The activity of SDH was reducd remarkably in left testes of experimental group ( 1. 22 ±0. 41 ) U/mg as compared with that in control group (1.74 ± 0.43) U/mg (P < 0.05), but there was no significant difference between the left and right testes ( 1.62 ±0. 56) U/mg in experimental group. The concentration of PCNA was reduced in left testes of experimental group (669. 10 ±205. 39) mU/ml as compared with that in right testes (800. 81 ± 172. 02) mU/ml and control group (776. 81 ± 231. 72) mU/ml, but there was no significant difference (P > 0. 05). Conclusion The reduction of LDH, SDH and G6PDH and the changes of PCNA in improved ELV may play an important role in the development of subfertility.     

不育男性双侧Ⅰ度精索静脉曲张对睾丸体积和生殖激素水平的影响

目的 评价不育男性双侧I度精索静脉曲张对睾丸体积和生殖激素水平的影响.方法 185例不育男性双侧I度精索静脉曲张(A组)和149例正常生育男性(B组),比较其睾丸体积、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)水平.结果 A组患者两侧睾丸体积均小于B组,但睾丸体积绝对差异和睾丸体积相对差异与B组比较,无统计学意义.A组患者血清FSH水平高于B组,而LH、T与B组相比,差异无统计学意义.结论 不育男性双侧I度精索静脉曲张可导致患者双侧睾丸体积减小,血清FSH水平升高.     

大鼠精索静脉曲张睾丸组织的蛋白质组学研究

目的精索静脉曲张是男性不育的首要病因,本课题利用蛋白组学技术筛选精索静脉曲张大鼠睾丸中表达变化显著蛋白,探索精索静脉曲张引起不育的可能分子机制。方法雄性Wistar大鼠16只,随机分为对照组和精索静脉曲张实验组。实验组大鼠施行左肾静脉部分结扎术来诱导产生精索静脉曲张,对照组行假手术作为阴性对照。30d后,收集全部大鼠的左侧睾丸。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）法检测两组大鼠生精细胞凋亡情况,进而比较两组生精细胞的凋亡指数。利用双向凝胶电泳技术（2-DE）寻找两组大鼠睾丸中表达有显著性差异的蛋白质点,然后进行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定（MALDI-TOFMS）。结果双向凝胶电泳结果显示21个蛋白质点在两组间存在显著性差异。在精索静脉曲张大鼠睾丸中有8个蛋白质点表达上升、13个下降,这些蛋白功能涉及蛋白质合成、加工、降解,基因表达调控,信号转导,能量代谢,凋亡,自由基代谢等。Tunel证实实验组大鼠睾丸中生精细胞凋亡指数显著高于对照组,且本实验筛选出14—3—3e、hnRNPF以及LZTFL1三种蛋白与凋亡相关。结论蛋白组学筛选出精索静脉曲张大鼠睾丸差异表达蛋白,并进一步证实精索静脉曲张促进睾丸生精细胞凋亡,其中相关凋亡蛋白对揭示精索静脉曲张引起男性不育的分子机制提供了可能。     

精索静脉曲张大鼠干细胞因子的变化及其意义

目的 探讨精索静脉曲张大鼠干细胞因子(SCF)的变化和意义.方法 将清洁级雄性SD大鼠20只喂养1周后,随机取10只应用左肾静脉部分结扎法进行造模,设为模型组;另外10只行左肾静脉分离后不结扎,设为假手术组.两组均于60d后处死大鼠,检测血清SCF、睾丸组织SCF及附睾精子的密度和活率.结果 模型组睾丸组织SCF为(654.6±30.5)ng/L,与假手术组(382.8±25.6) ng/L比较明显升高(P＜0.05);两组血清SCF比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠附睾精子密度为(2.36±1.58),与假手术组(4.07±1.40)比较明显降低(P＜0.05),两组大鼠精子活率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 检测睾丸组织SCF有助于判断生精细胞损伤.     

改进型实验性左侧精索静脉曲张的建立及其对大鼠卵泡刺激素及抑制素B的影响

目的:探讨改进型实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对大鼠血清卵泡刺激素(FSH)及抑制素B(InhB)的影响。方法:利用改进的方法建立青春期SD大鼠左精索静脉曲张的模型30只;假手术组SD大鼠30只作对照组。术后3个月,取大鼠血清,ELISA法分别检测FSH、InhB的浓度。结果:实验组大鼠血清中FSH浓度[(37.56±9.72)ng/ml]与对照组[(26.69±5.33)ng/ml]相比升高,具有统计学意义(P<0.05);而实验组大鼠血清中InhB的浓度[(349.93±99.48)pg/ml]与对照组[(768.83±146.96)pg/ml]相比下降,具有统计学意义(P<0.05)。结论:改进型ELV致FSH升高及InhB下降,这些变化可能是影响生育能力的机制之一。     

精索静脉曲张大鼠睾丸病理及前列腺素变化的研究

将大鼠左肾静脉部分结扎以建立精索静脉曲张动物模型，对双侧睾丸的形态学及睾丸内前列腺素Ｆ２α的变化进行研究。结果：睾丸组织学变化是生殖阻滞，阻滞在精子细胞和精母细胞为最常见，并有间质小血管的病变。精索静脉曲张可导致睾丸内ＰＧＦ２α逍度明显增高，高浓度的ＰＧＦ２α能引起曲细精管病变，最终导致不育。     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能保护作用的研究

目的探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的保护作用。方法观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响。测定各组实验大鼠睾丸超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱脂酶(ACE)活性和脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)含量。结果治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组,SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.01)。结论生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精子质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关。     

五羟色胺对精索静脉曲张患者睾丸生精功能的影响

５０只雄性Ｓ－Ｄ大鼠被分成五羟色胺（５－ＨＴ）组，精索精脉曲张模型给和对照组，观察睾丸生殖病理变化，进行组织学定量评价，并与人精索静脉曲张相比较。同时测定不同静脉血中５－ＨＴ含量。结果表明：精索静脉曲张者精索内静脉血中５－ＨＴ浓度明显增高，并与精子计数，精子活之间呈负相关。５－ＨＴ对模型鼠睾生精功能有毒性作用，其组织学改变和人精索静脉曲张相似。提示：５－ＨＴ对睾丸的毒性作用是精索静脉曲张不育的得要     

蜂胶对糖尿病大鼠创面愈合的影响

目的：观察蜂胶对四氧嘧啶造成的糖尿病大鼠伤口愈合的影响。方法：健康Wistar大鼠80只,随机分为对照组（n=36）和模型组（n=44）。2组又各随机分为生理盐水处理组和蜂胶处理组。模型组大鼠尾静脉注射四氧嘧啶制成糖尿病模型。4周后所有动物背部两侧制备直径为1.8cm的圆形全皮层伤口。生理盐水处理大鼠用生理盐水冲洗伤口,蜂胶处理大鼠在伤口表面滴加4滴蜂胶。伤口均用无菌纱布固定包扎,每日换药1次。观察各组的创面愈合时间,3、7、14、21d的伤口愈合率,于伤后3、7、14d进行组织病理学观察及免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：与盐水处理相比,对照大鼠和蜂胶大鼠经蜂胶处理能明显提高创面愈合率（P〈0.01）,缩短创面愈合时间（P〈0.05）.促进PCNA表达（P〈0.01）。结论：蜂胶可以促进糖尿病大鼠创面细胞增殖,加速伤口愈合。     

增殖细胞核抗原在脑胶质瘤中的表达

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)在不同类型胶质瘤细胞中的表达 ,以及与复发、预后的关系。方法　应用抗 PCNA单克隆抗体 (小鼠IgGza型 ) ,对 61例脑胶质瘤患者病理切片行免疫组织化学染色 ,不同类型胶质瘤PCNA标记指数进行差异分析。结果　不同类型胶质瘤的PCNA标记指数 (LI)不同 ,随着胶质瘤恶性程度增高而增大 ,两者呈显著正相关 (r =0 .895 ,P <0 .0 1) ,各级别间LI的差异非常有显著性 (P <0 .0 1) ;死亡组与存活组间LI差异有显著性 ;肿瘤首发与否、性别、年龄组间差异无显著性 ;恶性程度、PCNA标记指数和放疗与否与预后相关 (P <0 .0 5 )。结论　PCNA可以作为提示胶质瘤预后的指标 ,对确定胶质瘤的生物学特性和肿瘤的分级有指导作用。不同恶性程度胶质瘤间LI差异有显著性 ,与恶性程度正相关 ,与胶质瘤的预后关系密切 ,PCNA的过度表达提示肿瘤恶性程度高 ,预后差。     

增殖细胞核抗原表达与结直肠癌预后关系的研究

目的 探索增殖细胞核抗原（PCNA）与结直肠癌的组织学类型、临床分期及预后的关系。方法 收集外科手术切除的96例结直肠癌石蜡标本,采用LSAB免疫组织化学染色法检测PCNA;按阳性细胞所占比例分为1-4级,1、2级为PCNA弱级,3、4级为PCNA强级,结果 （1）PCNA在肠癌细胞中的表达明显增多,并与肿瘤的分化程度有关,分化差的肿瘤细胞PCNA表达增多;（2）PCNA表达与Dukes分期及淋巴结转移有关。DukesC期及有淋巴结转移,PCNA表达明显增多;（3）PCNA表达与患的性别、年龄、肿瘤部位、组织类型等因素无关;（4）PCNA表达与术后复发率及死亡率有关,PCNA强级术后复发率及死亡率均显高于弱级,结论 PCNA在常规的病理切片上能反映细胞的增殖活性。是判断结直肠癌患预后及指导临床治疗的一个较为理想的参考指标。     

增殖细胞核抗原在血管瘤及血管畸形组织中的表达

目的了解血管瘤的不同形态学类型和同一类型不同时期的内皮细胞增殖情况。方法采用免疫组织化学方法对４１例不同形态学类型的血管瘤标本进行了增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的检测和比较，其中包括婴幼儿期血管瘤标本２９例及成人期标本１２例。结果增生期草莓状血管瘤、增生期混合血管瘤以及部分婴幼儿海绵状血管瘤检测结果为阳性，提示其内皮细胞处于增殖状态，其余均为阴性，经统计学处理，不同类型的婴幼儿增生期血管瘤间的ＰＣＮＡ标记指数无显著差异，与消退期婴幼儿血管瘤及各类成人血管瘤有显著差别。结论ＰＣＮＡ的表达对血管瘤的分类、诊断及治疗选择都有意义。     

反义寡核苷酸防治移植物动脉硬化的作用

目的　探讨防治移植物动脉硬化的途径。方法　通过大鼠胸腹主动脉移植简化模型 ,用各种增殖细胞核抗原 (PCNA)寡核苷酸在脂质体介导下转染大鼠胸主动脉后 ,移植到大鼠腹主动脉 ,于术后 15、3 0和 60d取移植动脉作病理学检查及PCNA逆转录PCR检测。结果　病理学结果示 ,在 3个时相点 ,反义寡核苷酸组移植动脉再狭窄率 (8.3 %、12 .4%、19.5 % )均显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。逆转录PCR结果显示 ,在 3个时相点 ,反义寡核苷酸组PCNAmRNA的表达(5 9.2 4、80 .16、18.5 8)均明显低于对照组 (P >0 .0 5 )。结论　PCNA反义寡核苷酸可明显抑制移植动脉PCNA蛋白的表达 ,抑制动脉内膜增生 ,防治移植物动脉硬化。     

增殖细胞核抗原在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达及意义

探讨瘢痕和正常皮肤成纤维细胞原位增殖情况。方法　对 2 4例瘢痕疙瘩组织和周围正常皮肤行增殖细胞核抗原免疫组织化学染色 ,比较瘢痕疙瘩和正常皮肤增殖指数 (Proliferatingindex ,PI)。结果　 2 4例瘢痕疙瘩PI平均值为 1.44,两者经配对t检验 ,P <0 .0 0 1,两者具有显著性差异 ,表明瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖活跃。结论　成纤维细胞异常增殖在瘢痕疙瘩发生、发展中起重要作用。     

增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)在肝细胞肝癌的发生发展中的作用及作用机制.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测PCNA在肝细胞癌、相应癌旁组织和正常肝组织中mRNA和蛋白质的表达,正常肝组织、癌旁组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为20.0％、46.2％和85.7％;结合患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、有无淋巴结转移等临床病理学资料进行统计学分析,其表达与组织分化程度和淋巴结转移呈明显相关(P＜0.05).结果 PCNA在正常肝组织、癌旁组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为20.0％、46.2％和85.7％,在肝细胞癌中的阳性表达率显著高于正常肝组织和癌旁肝组织(P＜0.05);RT-PCR检测结果也证实PCNA mRNA在肝细胞癌中的表达明显高于正常肝组织和癌旁肝组织(P＜0.05).PCNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无明显相关(P＞0.05),与组织分化程度和淋巴结转移呈明显相关(P＜0.05).结论 PCNA在肝细胞癌组织中的表达高于正常肝组织和癌旁肝组织,并且与肿瘤的恶性程度密切相关.