骨髓前体细胞在体外产生NK细胞

有关NK细胞调节的研究已有很大进展,但对其起源及其在干细胞水平上调节的认识还很缺乏。已知NK细胞起源于骨髓细胞并高度依赖于骨髓功能。本文报道一种简便且可高度重复的骨髓培养系统,它可使小鼠无细胞毒活性的前体细胞产生具有细胞毒活性的NK细胞。作者用4小时~(51)Cr释放实验测定NK活     

急性髓系白血病骨髓长期培养基质细胞生长特点

应用骨髓细胞长期培养方法动态观察１０例ＡＭＬ贴壁细胞生长特点，探讨了ＡＭＬ基质细胞在白血病发生，发展中的作用，发现５／１０例贴壁层较早形成完全融合，培养～３周各例ＡＭＬ贴壁层出现一些大型多角扁平细胞，其中２例Ｍ５出现一些大型巨噬细胞，培养至８～９周，６／１０例ＡＭＬ融合消失，贴壁层仅留下一种大型多角扁平细胞和大量由其介导获独立生长的造血细胞（为幼稚细胞）表明这些大型基质细胞功能较为活跃，我们认为基     

成人骨髓来源的多系分化持续应激细胞的培养及鉴定

目的:建立一套简便可靠的多系分化持续应激细胞(Muse)体外分离、培养和鉴定体系。方法:利用密度梯度离心法从健康成人骨髓中分离出人骨髓基质干细胞(hBMSCs),流式细胞仪对其进行鉴定;应用长时间胰酶应激法从hBMSCs中分离出Muse细胞;免疫荧光细胞化学法对其进行鉴定,并检测其多能干细胞特性及向三胚层分化的能力。结果:hBMSCs呈CD45~-/CD11b~-/CD90~+;长时间胰酶应激法成功分离出Muse细胞,悬浮呈球状生长;Muse细胞表达SSEA3~+/CD105~+,Nanog、Oct4、Sox2等多能干细胞标记物表达阳性,贴壁分化后表达三胚层标记物α-SMA、AFP和NF-M。结论:从成人骨髓中成功分离Muse细胞,Muse细胞具有多能干细胞特性及向三胚层分化的能力。     

生长激素缺乏的成年人NK细胞数目和百分数减少

生长激素缺乏的成年人ＮＫ细胞数目和百分数减少［英］／ＳｐａｎＪｐＴ…ＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌａｎｄＩｍ－ｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．一１９９６，７８（ｌ）．一９０～９２动物实验证明，生长激素（ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ）能调节免疫应答．两种垂体机能低下的动物...     

大鼠肾小球和系膜细胞产生转化生长因子β的研究

用标准的生物学方法检测了肾小球和系膜细胞培养上清中转化生长因子(TGF_s)的水平。结果显示:肾小球和系膜细胞均可产生一定量的TGF_s;肾小球产生的THF_s无活性,而系膜细胞产生的TGF_s大约10％有活性。鉴于TGF_s在调节细胞生长和细胞外基质代谢中的独特作用,肾小球和系膜细胞来源的rGF_s可能在维持正常肾小球结构和功能中起重要作用。     

人类B细胞在生理和病理情况下产生的细胞因子

人类Ｂ细胞在生理和病理情况下产生的细胞因子［英］／ＶｉｔｏＰｉｓｔｏｉａ／／ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＴｏｄａｙ．－１９９７，１８（７）．－３４３～３４９近几年来人们对Ｂ细胞产生的细胞因子进行了广泛的研究，本文作者综述了人类Ｂ细胞在生理和病理情况下产生细胞...     

在生长因子缺乏时,细胞凋亡的抑制允许多潜能造血细胞系的分化和发育

已有实验证实,造血细胞生长因子的功能之一是可能抑制细胞凋亡(apoptosis),如在细胞凋亡过程中缺乏这些生长因子则造血细胞加速死亡。本实验将人类bcl-2基因转染入IL-3依赖型的多潜能造血细胞系中,在缺乏IL-3,并在含血清和无血清条件下,这些细胞可以存活。同时这些存活伴随有多谱系的分化。更进一步实验发现,单个细胞实验显示:     

骨髓增生异常综合征中NK细胞相关研究进展

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome, MDS)是起源于造血干细胞的一组高度异质性髓系肿瘤性疾病,其发病机制复杂,研究表明,免疫异常在MDS的发生发展中发挥重要作用。目前临床上用于MDS治疗的药物种类较少,主要包括去甲基化药物和免疫调节剂,但其作用机制尚未完全阐明。NK细胞是人体固有免疫细胞,在针对肿瘤的免疫监视中发挥重要作用。同时,NK细胞相关免疫治疗也是当前肿瘤生物治疗领域的一大热点。因此,探究MDS中NK细胞的改变,可为靶向治疗MDS提供理论依据。该文将对近年MDS中NK细胞变化的研究进行综述,及其在相关药物治疗中的作用进行了总结。     

小鼠骨髓中NK细胞及其前体细胞的特征

本文对小鼠骨髓中NK细胞及其前体细胞的特征作了进一步探讨。作者先用牛血清白蛋白(BSA)密度梯度离心对小鼠骨髓细胞作了分离,将其分出     

大鼠骨髓基质细胞在脑内的迁移和分化

目的研究骨髓基质细胞(bMSCs)在大鼠脑内的迁移和分化情况。方法体外分离培养大鼠四肢骨的bMSCs,原代培养8~10 d后,同时用含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒上清转导bMSCs并进行抗性筛选,7~10 d可得到稳定表达EGFP的bMSCs,然后将EGFP标记的bMSCs通过侧脑室和尾静脉2种注射方式分别注入纹状体损伤的大鼠体内,进而观察bMSCs向脑内迁移和分化的情况。结果在移植后的大鼠脑内均观察到2种方式植入大鼠体内的bMSCs,这些EGFP阳性的细胞呈现出一些神经元和神经胶质细胞的形态并能表达一些神经元和神经胶质细胞的特异性标志物。结论骨髓基质细胞中确实含有能够向神经元方向分化的干细胞。     

NK细胞的发育分化与功能极化

近十年来,NK细胞的研究有两大重要进展,一是发现NK细胞的受体多样性,二是发现NK细胞的功能多样性[1,2]。NK细胞受体主要由两个基因复合体集中编码,分别是人第19号染色体上的白细胞受体复合体(Leukocyte receptor complex,LRC)和第12号染色体上的NK细胞受体复合体(NK re-     

碱性成纤维细胞生长因子诱导非贴壁骨髓基质细胞向成骨细胞分化

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞(NASP)的增殖分化作用。方法：分离骨髓前体细胞体外培养，用碱性磷酸酶化学染色及图象分析测定细胞克隆数；采用免疫组化(ABC法)进行骨钙素及碱性磷酸酶(ALP)测定，研究bFGF对NASP的促增殖作用。结果：bFGF能促进NASP细胞增殖，诱导NASP细胞产生碱性磷酸酶及骨钙素。结论：bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞，bFGF能增加骨的数量，促进骨样组织形成。     

骨髓体外长期培养的研究进展

长期骨髓培养（ＬｏｎｇＴｅｒｍＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＣｕｌｔｕｒｅ，ＬＴＢＭＣ）是一种骨髓细胞体外液相培养法。ＬＴＢＭＣ体系可视为体外模拟的造血微环境。它为造血微环境、细胞因子和造血干／祖细胞等造血调控理论的研究提供了一个重要手段；在再生障碍性贫血等血液病发病机理的研究、白血病骨髓净化以及早期造血细胞的体外扩增中也具有重要作用。     

Kupffer细胞在肝脏NK细胞亚群稳态维持和分化成熟中的作用探究

目的：探究Kupffer细胞对肝脏NK细胞的调控作用。方法：利用荧光成像技术分析小鼠Kupffer细胞和肝脏NK细胞的位置关系;通过注射氯磷酸盐脂质体构建体内清除Kupffer细胞模型,流式分选去除肝脏非实质细胞中的Kupffer细胞进行体外共孵育实验;通过抗生素水饲喂清除小鼠肠道共生菌;利用流式细胞术分析肝脏NK细胞亚群的比例、数量和成熟状态。结果：稳态下Kupffer细胞和肝脏NK细胞存在共定位,清除Kupffer细胞后肝脏驻留NK细胞和经典NK细胞数量减少;体内清除和体外共培养实验证实Kupffer细胞可促进肝脏驻留NK细胞和经典NK细胞的成熟,而抗生素处理过的小鼠在清除Kupffer细胞后,肝脏NK细胞亚群的数量和成熟状态无显著变化。结论：Kupffer细胞有利于肝脏NK细胞的数量维持,且以共生菌依赖的方式促进肝脏NK细胞的成熟分化。     

长期受低水平电离辐射者血中T细胞亚群和NK细胞活性的检测

<正> 研究对象为122例医院放射工作人员,其中男78例,女44例,年龄23～44岁,工龄1～32年。另 以45例未接受过X线照射的健康人作为对照,其中男33例,女12例,年龄22～52岁。各取血分离单个核细胞,用APAAP桥联酶标法(试剂购自北京军科院生物制剂发展中心)测T细胞亚群。NK细胞活性测定采用乳酸脱氢酶释放法测NK细胞活性。 如表1所示,从事放射工作人员组CD2~+、CD4~+、     

表达肝细胞生长因子的大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞

目的:探讨悬滴培养诱导稳定表达人肝细胞生长因子(hHGF)的大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)向肝样细胞分化的效应。方法:体外分离和培养rMSCs,采用流式细胞术检测干细胞表面标志分子CD44、CD90、CD34和CD45的表达率;构建重组逆转录病毒表达载体pLNCX2-hHGF,包装病毒感染rMSCs,获得稳定表达hHGF的细胞株hHGF-rMSCs;分别对rMSCs和hHGF-rMSCs进行悬滴培养,在培养第7、14和21天,通过RT-qPCR和免疫荧光技术检测白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(APF)和角蛋白18(CK-18)在mRNA和蛋白水平上的表达,此外,还利用ELISA的方法检测培养液上清中ALB的分泌。结果:第3代rMSCs高表达CD44和CD90,几乎不表达CD34和CD45;构建表达载体后,成功建立了hHGF-rMSCs细胞株,且经过悬滴培养后,在第7～21天都呈现ALB、AFP和CK-18在mRNA水平上的高表达(P0.01);免疫荧光结果显示,AFP蛋白在第21天出现阳性表达,而ALB和CK-18蛋白在第7天就呈现阳性表达;在第7～21天,ELISA法均检测到hHGF-rMSCs细胞培养上清中ALB的分泌增多(P0.01)。结论:将HGF基因导入rMSCs,经悬滴培养可诱导分化为肝样细胞,可能为临床肝脏疾病的细胞治疗和体外生物人工肝提供新型种子细胞。     

急性白血病患者治疗前后骨髓中NK细胞活性和数量的对比研究

通过比较急性白血病患者治疗前后骨髓中NK细胞活性和数量的变化,探讨其在白血病治疗中的意义和白血病治疗的免疫学方法.用淋巴细胞分离液分离骨髓和外周血中单个核细胞,用MTT法测定NK细胞的活性,用流式细胞仪测定NK细胞的数量.结果显示:30例初发组白血病患者NK细胞活性[(13.52±5.82)%]和数量[(6.63±2.95) %]与缓解组NK细胞活性[(30.50±9.67)%]和数量[(13.57±4.48)%]相比均明显降低,两者存在统计学差异(P＜0.01).结论:急性白血病患者完全缓解后骨髓中NK细胞的活性和数量均明显提高.     

骨髓基质细胞的体外培养和向成骨及软骨分化的实验研究

目的 研究骨髓基质细胞（BMSC）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的BMSC，用传至2－3代兔BMSC和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损，采用成骨诱导培养法研究儿童BMSC的成骨效应。结果 （1）Ⅱ型胶原和bFGF对兔BMSC的贴壁和生长是有效的。（2）用兔BMSC和Ⅱ型胶原治疗12周后，能使兔膝关节软骨缺损获得恢复，其软骨细胞分化明显；（3）用成骨诱导培养法，可使儿童BMSC骨钙素分泌水平比常规对照组升高8－10倍，并可见有典型的成骨化的黑色矿化细胞区。结论 骨髓基质细胞具有成骨和软骨分化功能。