胰腺癌患者血浆k-ras基因突变的检测

近年来,胰腺癌的发病率不断上升。早期诊断是提高胰腺癌病人生存率的关键。ｋｒａｓ基因突变在胰腺癌相当常见,并且主要位于ｃｏｄｏｎ12编码区[1]。慢性胰腺炎等则极少发生ｋｒａｓ基因突变[2]。ｋｒａｓ基因突变在胰腺癌早期就已出现,细针穿刺组织、抽取胰液或十二指肠液提取ＤＮＡ检测ｋｒａｓ基因突变已被临床应用[3]。最近的研究表明,胰腺癌患者血中ＤＮＡ浓度明显升高,含有突变的ｋｒａｓ基因[4]。我们应用高度敏感的突变等位基因特异性扩增(ＭＡＳＡ)方法对胰腺癌患者血浆中ｋｒａｓ基因突变进行了研究。一、对象和方法1病人:胰腺癌1…     

胰腺癌患者胰液中K-ras基因突变的检测及其意义

目的 通过对经逆行胰胆管造影（ＥＲＣＰ）所获胰液的Ｋ－ｒａｓ基因突变检测,以探索胰腺癌诊断的新方法。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－限制性片段长度多态性的方法检测胰腺良、恶性疾病组织物、胰液上清和细胞的Ｋ－ｒａｓ突变。结果 胰腺癌和胰腺良性疾病标本分别有７１％（１５／２１）,而胰腺良性疾病无一例有Ｋ－ｒａｓ的突变。用胰液细胞有４％ＰＣＲ未能获得成功,胰腺癌胰液细胞Ｋ－ｒａｓ的突变率为６５％（１１     

K—ras基因在胰腺癌诊断治疗中的意义

Ｋ－ｒａｓ基因在胰腺癌中突变率很高（７５－１００％），且仅在胰导管源性肿瘤中存在，在与内分泌源性肿瘤等无关，有研究 胰导管的某些粘液性增生病灶中即存在Ｋ－ｒａｓ基因的突变。这些突变绝大部分集中在Ｋ－ｒａｓ基因的１２密码子，该痊点碱基穴变的类型则呈现地域性差异，可能与不同地区不同致病因子有关。检测活检标本或胰液中Ｋ－ｒａｓ的突变，有望作为胰腺癌早期诊断的方法，且这一广泛存在的突变可作为胰腺癌基因的治     

胰腺癌患者血清肿瘤标志物蛋白质芯片检测及其意义

目的:检测胰腺癌患者血清中多种肿瘤标志物水平,评价肿瘤标志物蛋白质芯片对胰腺癌的诊断价值.方法:应用自动化蛋白质芯片系统分别检测42例胰腺癌和35例胰腺良性疾病患者血清中12种肿瘤标志物水平.结果:胰腺癌血清中肿瘤标志物糖链抗原199(u/ml)、神经元特异性烯醇化酶(ng/ml)、糖链抗原242(u/ml)、癌抗原125(u/ml)、癌抗原15-3(u/ml)水平分别为530.47±337.11、22.83±42.62、106.45±92.26、32 89±24.32、33.23±16.82;胰腺良性疾病中分别为37.24±28.71、1.89±1.14、8.62±8.67、12.97±14.62、7.67±5.32.这5种标志物在胰腺良恶性疾病血清中表达水平差异有显著性(P＜0.05).肿瘤标志物蛋白质芯片诊断胰腺癌的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为78.6%、79.1%、64.7%、88.3%.结论:肿瘤标志物蛋白质芯片对胰腺良恶性疾病的鉴别诊断和肿瘤筛查具有一定的价值     

肿瘤标志物、K-ras和p53突变对胰腺癌诊断的价值

目的评价血清肿瘤标志物CA19-9、CA242、CA50、癌胚抗原和粪便K-ras以及p53基因突变对胰腺癌诊断的价值。方法收集2002年2月至2004年3月在北京协和医院、中国医学科学院肿瘤医院和沈阳军区总医院确诊的新发胰腺癌患者136例,良性消化系统疾病患者240例,进行血清肿瘤标志物和粪便K-ras、p53基因突变的检测。根据结果绘制不同检测方法的受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积,并确定最佳阳性分界值。结果血清CA19-9和CA242的ROC曲线下面积分别为0·855±0·031(95%可信区间0·794~0·916)和0·859±0·031(95%可信区间0·799~0·920),最佳阳性分界值分别为68U/ml和25U/ml,其诊断胰腺癌的敏感性分别为84·4%(98/116)和88·4%(84/95),特异性分别为84·3%(145/172)和79·1%(144/182)。粪便K-ras和p53基因突变诊断胰腺癌的敏感性分别为77·8%和27·8%,特异性分别为82·2%和95·2%。将粪便K-ras和p53基因突变与血清CA19-9和CA242测定相结合计算胰腺癌诊断评分,绘制有序分类资料的ROC曲线,其曲线下面积为0·946±0·017(95%可信区间0·912~0·980),最佳阳性分界值为2分。结论血清CA19-9及CA242对胰腺癌诊断具有相似价值;联合粪便K-ras及p53突变的检测,通过胰腺癌可能性积分,可以显著提高胰腺癌的诊断效率。     

肿瘤抑制基因P^53与胰腺癌

近年研究发现，肿瘤抑制基因Ｐ＾５３的突变失活与胰腺癌发生，发展有某些关系。本文从ＤＮＡ，ｍＲＮＡ蛋白质三个不同水平综述Ｐ＾５３基因在胰腺癌研究中的进展。     

血浆k-ras基因突变检测对胆道系统癌的诊断意义

探讨胆道系统癌患者外周血中是存在ｋ－ｒａｓ基因突变及其诊断价值。方法 提取血浆ＤＮＡ,通过ｍｕｔａｎｔａｌｌｅｌｅｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ（ＭＡＳＡ）方法检测ｋ－ｒａｓ基因ｃｏｄｏｎ１２突变。结果 ７例胆囊癌中５例－ｒａｓ基因突变阳性（１７．４％）,６便肝内胆管细胞癌和３例总胆管癌中分别有２例（３３．３％）及１例（３３．３％）ｋ－ｒａｓ基因突变检测阳 性。ｋ－ｒａｓ基因突变检测     

胰腺癌基因肿瘤标记物研究进展

癌基因与抑癌基因的失衡导致了胰腺癌的发生。这些癌基因和抑癌基因肿瘤标志物在早期诊断胰腺癌方面具有一定的敏感性和特异性，联合检测这些基因肿瘤标记物有助于胰腺癌早期诊断。     

胰腺癌肿瘤标志物

1 肿瘤胚胎性抗原标志物 癌胚抗原（CEA）在多种消化道肿瘤患者中高表达,约30％的胰腺癌血清CEA升高,故CEA可作为胰腺癌术后复发和转移的预测指标。     

胰腺癌相关的生物活性标志物和基因标志物研究进展

胰腺癌由于受解剖学和生物学特征等影响,早期没有明显和特异的症状体征,缺乏简便、可靠的诊断方法,故确诊时多属晚期,治疗效果不理想.近几年来有关胰腺癌的生物活性标志物和基因标志物的研究取得了较大进展,有望筛选出灵敏性和特异性均较高的标志物,提高早期诊断率.     

胰液K-ras密码子点突变联合血清CA 199水平与胰腺癌复发关系的研究

目的探讨胰液中K-ras 12密码子点突变联合血清CA199检测与胰腺癌病程的关系。方法测定32例临床及手术证实的胰腺癌患者血清CA199水平,并采用内镜ERCP从胰管收集的胰液标本,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测胰液K-ras 12基因12密码子点突变,分析胰液中K-ras 12密码子点突变及血清CA199联合检测与胰腺癌术后复发的关系。结果(1)胰液中K-ras 12密码子点突变率为56.3%,与肿瘤大小密切相关(P<0.05)。K-ras 12密码子点突变阳性、阴性表达病例3年复发率分别为66.7%和33.3%。(2)高血清CA199水平且K-ras 12密码子点突变阳性病例组3年复发率为69.2%,而低血清CA199且ras阳性病例组3年复发率为20.0%,差异显著(P<0.05)。结论联合胰液中K-ras 12密码子点突变及血清CA199检测可作为判断胰腺癌术后复发的有效指标,多因素分析对胰腺癌术后复发的判断更有价值。     

肺癌化疗前后肿瘤标记物变化及其意义

目的 探讨化疗前后肿瘤标记物变化对于肺癌化疗效果评价的价值。方法 20例肺癌经3个疗程的VAP方案化疗，监测第1次化疗前和第3次化疗后肿瘤标记物AFP、CEA、CA50、CAl9—9、CAl25、CAl53、CA242、SCC及NEC的变化。结果 3次化疗后CA50和CAl25水平较化疗前减低，其中CA50对于小细胞肺癌，CEA对于肺腺癌化疗后效果的评定具有一定价值。而化疗后CAl25的减低与肿瘤分类关系不大。结论 通过监测肿瘤标记物CEA、CA50和CAl25水平改变可以协助肺癌化疗后疗效的判断，具有简便、经济的特点，在临床中具有一定的价值。     

肿瘤标记物联合检测诊断肝癌的临床价值研究

目的 探讨肿瘤标记物联合检测诊断肝癌的临床价值.方法 采用化学发光免疫分析法检测60例肝癌患者及60例健康体检者的血清甲胎蛋白、癌胚抗原、CA125、CA153、CA199进行对照分析.结果 观察组甲胎蛋白、癌胚抗原、CA125、CA153、CA199水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 联合检测肿瘤标记物在肝癌的诊断中具有较高的临床价值,可增加其准确性.     

K-ras基因点突变对胰腺癌的诊断价值

背景传统的放射或超声检查早期诊断胰腺癌非常困难.目的研究胰腺良、恶性病变中的K-ras基因12密码子点突变情况,探讨K-ras基因点突变对早期胰腺癌的诊断价值.方法取23例胰腺癌和12例胰腺良性病变标本,经DNA提取后,行半巢式聚合酶链反应(PCR),扩增产物借助聚丙烯酰胺凝胶电泳检测有无K-ras基因点突变.结果胰腺癌和胰腺良性病变石蜡包埋组织的K-ras基因12密码子点突变率分别为65.2%(15/23)和33.3%(4/12)(P＜0.05).结论K-ras基因12密码子点突变的检测可能有助于胰腺癌,尤其是早期胰腺癌的诊断.     

四种肿瘤标志物血清水平的联合检测对肺癌诊断的临床价值

目的探讨血清肿瘤标志物细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）联合检测对肺癌诊断的临床价值。方法采用瑞士罗氏公司cobas e 411型全自动电化学发光免疫分析系统检测经病理确诊的52例肺癌患者、30例肺部良性疾病患者及35例正常人血清CYFRA21-1、NSE、CEA、CA125水平,并计算阳性率、特异度及准确度。结果肺癌组血清4种肿瘤标志物水平显著高于肺良性疾病及健康对照组。其中单项检测CYFRA21-1阳性率以鳞癌最高（70.8%）,NSE阳性率以小细胞肺癌最高（75.0%）,CEA阳性率以腺癌最高（65.0%）,与其他型肺癌相比差异有统计意义。4种肿瘤标志物联合检测阳性率、特异度及准确度明显高于单项检测结果。结论 4种肿瘤标志物对于肺癌的辅助诊断均具有实用价值,且联合检测有助于提高肺癌诊断的阳性率、特异度及准确度。     

肺癌患者血清和胸水中常用肿瘤标志物的检测

目的探讨肺癌患者血清和胸水中6种肿瘤标志物的检测意义，并选择较理想的肿瘤标志物组合。方法应用ELISA检测120例肺癌患者和90例肺部良性疾病患者血清和胸水中以及50例健康人血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前体（pro-GRP）、细胞角质蛋白19（CYFRA21-1）、鳞癌抗原（SCC）、p53抗体和癌胚抗原（CEA）的水平含量。结果肺癌患者血清和胸水6种肿瘤标志物水平均明显高于健康人组和肺部良性疾病组（P〈0．01）。肺部良性疾病组胸水中NSE、CYFRA21—1和CEA的假阳性率较高。血清NSE、pro—GRP在小细胞肺癌中的水平和敏感性明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01）；血清CYFRA21-1、SCC在肺鳞癌中的水平和敏感性明显高于其他类型的肺癌（P〈0．01）。6种血清肿瘤标志物经组合后，在特异性下降不大的情况下。敏感性明显高于任一单项肿瘤标志物（P〈0．01）。结论6种肿瘤标志物的检测对于肺癌的辅助诊断有一定的临床意义。血清NSE、pro-GRP可作为联合检测小细胞肺癌的标志物组合；血清CYFRA21-1、SCC可作为联合检测肺鳞癌的标志物组合；血清NSE、CYFRA21-1、CEA可作为联合检测非小细胞肺癌的标志物组合。     

多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断价值

目的 探讨多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断价值。方法 用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统测定30例胰腺癌患者和30例健康人群血清12项肿瘤标志物(CA19-9、CA242、CEA、CA15-3 CA125、AFP、PSA、F-PSA、NSE、β-HCG、HGH、Fer)的含量。结果 30例胰腺癌患者中有27例上述血清肿瘤标志物阳性，阳性率为90％，健康人血清有3例肿瘤标志物阳性，阳性率为10％。从12项肿瘤标志物中筛选出有诊断意义的标志物是CA19-9、CA242和CEA。其中CA19-9敏感度和特异度最好，分别达80％和90％，联合检测可提高敏感度，达93．3％。结论 多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断有一定的价值。     

联合检测生化标志物在急性冠脉综合征患者中的相关性比较

目的 观察急性冠脉综合征(ACS)患者中炎症标志物白介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、B型尿钠肽(BNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及肌钙蛋白I(cTnI)水平及相关性的比较.方法 选取2009年4-9月158例入院初步诊断为冠心病并接受冠状动脉造影患者,根据临床表现、心电图、心肌酶谱及冠状动脉造影结果 分为4组,不稳定型心绞痛(UAP)48 例、急性心肌梗死(AMI)42 例、稳定型心绞痛(SAP)34 例,冠脉造影正常者34例作为对照组.检测患者外周静脉血清IL-6、MMP-1、hs-CRP及cTnI水平,并比较各组IL-6、MMP-1、BNP、hs-CRP及cTnI水平并分析 IL-6、MMP-1、BNP、hs-CRP及cTnI之间的相关性.结果 (1)UAP组和AMI组血清 IL-6、MMP-1、BNP、hs-CRP水平明显高于对照组和SAP组,差异有统计学意义(P＜0.01);UAP组与AMI组、对照组与 SAP组血清IL-6、MMP-1水平差异均无统计学意义(P＞0.05);AMI组血清BNP与hs-CRP水平高于UAP组,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)ACS患者中IL-6及MMP-1与hs-CRP、BNP与cTnI分别呈正相关;ACS患者中hs-CRP与cTnI无直线相关.结论 急性冠脉综合征患者中明显高表达炎性生化标志物,联合检测多生化标志物可能对急性冠脉综合征早期诊断具有积极的临床意义.     

k-ras基因寡核苷酸芯片的研制及在胰腺癌组织中检测应用研究

目的建立ras基因寡核苷酸芯片对胰腺癌基因突变的检测系统。评估16例胰腺癌组织k-ras基因12、13、61位密码子变突检测。方法采用双重或单独不对称PCR扩增标本中的目的DNA。扩增产物加杂交液后与芯片进行杂交、清洗、扫描。结果16例胰腺癌组织中k-ras为75%,突变都发生在12密码子,k-ras以12密码子第2位核苷酸突变发生率高(8/12)。结论k-ras基因芯片系统具有高度的灵敏性和准确性、快速简便、自动化程度高等优点,可同时检测胰腺癌k-ras多个突变位点基因,有利于临床应用。