癌胚抗原化学发光免疫分析方法学研究

目的研制化学发光免疫分析法（CLIA）癌胚抗原（CEA）检测试剂盒。方法采用双抗体夹心法用2种不同的单克隆抗体分别与CEA分子上不同的抗原决定簇发生反应。用1株单抗包被微孔板制成固相抗体,用另1株单抗标记碱性磷酸酶（ALP）制成酶标抗体。在包被微孔中加入CEA校准品或待测血清及酶标抗体,温育后即形成固相抗体-抗原-酶标抗体的复合物,充分洗涤后加入化学发光底物液,于30～90min内测定其发光强度（RLU）,根据标准曲线即可算出标本中CEA的含量。结果该试剂盒其敏感性可达0．058ng／mL;批内和批间变异系数（CV）分别为5．5％～9．3％和10．2％-12．2％。经实验表明,CLIA与免疫放射分析法（IRMA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别呈高度相关,相关系数（r）分别为0．991、0．984;平均回收率为97．3％。结论新研制的CEACLIA试剂盒各项技术指标均达到了国外同类产品水平。     

化学发光免疫分析法检测黄体生成素、维生素B12和癌胚抗原的性能评价

目的评 价化学发光免疫分析法检测黄体生成素、维生素B12和癌胚抗原。方法 通过对不同浓度样品黄体生成素（LH）、维生素B12（VB12）、癌胚抗原（CEA）含量的测定，进行精密度、灵敏度、干扰、回收试验。结果 批内变异系数（CV）均小于10．0％．批间CV均小于14．0％；LH、VB12、CEA回收率分别为97．9％．102．2％、97．4％．102．5％、98．9％-102．4％，灵敏度分别达到2．4IU／L、57pg／ml、2．6ng/ml；无吸样间的交叉污染。结论 该方法各项指标结果准确，精密度好、灵敏度高、干扰小．具有广泛的应用前景。     

化学发光免疫分析法检测黄体生成素、维生素B12和癌胚抗原的性能评价

目的 评价化学发光免疫分析法检测黄体生成素、维生素B12和癌胚抗原.方法 通过对不同浓度样品黄体生成素(LH)、维生素B12(VB12)、癌胚抗原(CEA)含量的测定,进行精密度、灵敏度、干扰、回收试验.结果 批内变异系数(CV)均小于10.0%,批间CV均小于14.0%;LH、VB12、CEA回收率分别为97.9%～102.2%、97.4%～102.5%、98.9%～102.4%,灵敏度分别达到2.4IU/L、57pg/ml、2.6ng/ml;无吸样间的交叉污染.结论 该方法各项指标结果准确,精密度好、灵敏度高、干扰小,具有广泛的应用前景.     

雌二醇化学发光免疫测定法的建立

目的　建立灵敏度高 ,测定范围宽的检测人血清雌二醇 (E2 )的化学发光免疫分析法 (CLIA)。方法　采用竞争抑制法 ,用碱性磷酸酶标记抗原 ,金刚烷 (CSPD)增敏化学发光体系作为酶底物。结果　敏感度为 2 .0pg/ml;在 10～ 10 0 0pg/ml之间可以准确定量 ;用不同浓度的E2 质控血清测定精密性 ,批内变异 <8% (n =2 0 ) ,批间变异 <10 % (n =2 0 )。与雌醇、雌酮、雌三醇(E3 )的交叉反应 <1% ,与睾酮、可的松等无交叉反应。试剂具有良好的稳定性 ,在 4℃保存 14个月其整体变化幅度 <10 %。与BeckmanAccessTm及其配套试剂比较有较好的相关性。结论　方法灵敏度高 ,特异性强 ,稳定性好 ,检测范围宽 ,准确性和重复性好。     

化学发光免疫技术

化学发光免疫技术基于放射免疫分析的基本原理 ,将化学发光与免疫测定结合起来的一种高效检测手段。其特点是以化学发光物质为示踪物 ,是一种简便、快速、灵敏度高的测定方法 ,重复性好 ,无放射性污染 ,因而是值得推广的一种方法。化学发光免疫技术@罗云俐$重庆市中山医院检验科!重庆400013 @涂干卿$重庆市中山医院检验科!重庆400013     

化学发光磁微粒免疫分析法定量检测HBsAg

摘要：目的：建立定量检测HBsAg的化学发光磁微粒免疫分析法。 方法：2株抗HBs单克隆抗体分别标记吖啶衍生物和生物素化,生物素化的抗HBs通过链霉亲合素包被到磁珠上形成致敏磁珠。将待测标本加入吖啶标记的抗HBs（吖啶-抗HBs）与致敏磁珠的体系中,形成致敏磁珠-HBsAg-吖啶标记抗HBs夹心复合物,磁性分离清洗。重复加样1次,磁性捕获分离后激发吖啶衍生物发光,用化学发光分析仪检测光强度,计算标本中HBsAg的浓度。 结果：该法线性方程为Y=0.919X+4.28,相关系数r²为0.99,线性范围为0.019 7~250.00 IU/mL。灵敏度可达0.020 7 IU/mL。0.1、3.2和40 IU/mL样本各重复测定10次的变异系数（CV）值分别为2.70%、4.40%和2.70%。与Abbott公司HBsAg定量检测试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法) 检测40份标本浓度的线性相关方程为Y=0.980 8X+0.209 9,r²=0.99,两法结果差异无统计学意义（t=1.519,P＞0.05）。以10、50、100和200 IU/mL作为检定点,各检定点相对偏差分别为0.18%、1.50%、1.71 %和1.81%。 结论: 建立的方法有较高的灵敏度、合适的线性,同时具备良好的可重复性,与Abbott公司试剂盒检测结果高度相关。     

人血清癌胚抗原发光免疫分析方法的建立及性能评价

目的 建立一种人血清癌胚抗原(CEA)发光免疫分析方法并进行性能评价.方法 根据生物学上抗原与抗体会发生特异性反应的原理,将CEA捕获抗体包被在羧基磁珠表面,与血清中的CEA及吖啶酯标记的CEA抗体反应形成双抗夹心"三明治"免疫复合物,清洗复合物后,加入预激发液和激发液,用化学发光免疫分析仪检测反应过程中的发光强度,四...     

不同化学发光检测系统测定血清癌胚抗原水平的比对分析

目的 对Cobase E601和Maglumi 2000plus两种化学发光检测系统测定癌胚抗原(CEA)结果的可比性和相关性进行评价。方法 取含高、中、低3个浓度水平的90例患者双份血清,使用上述两种检测系统平行测定血清CEA浓度,对两组的测定结果和异常率进行比较,并对两组数据的相关性进行分析。结果 对两种检测系统用于CEA检测的结果进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);两种检测系统CEA的检测结果呈高度正相关(r=0.996,P<0.01);两种检测系统的CEA阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 两种检测系统对CEA的检测结果基本一致,具有较高的检测一致性和可比性,可在临床上使用。     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立

目的　建立检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)化学发光免疫分析方法。方法　用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体 ,经DEAE 2 3层析和 (NH4) 2 SO4沉淀纯化后 ,用碳化二亚胺 (EDC)法标记辣根过氧化物酶 ,SephadexG 2 0 0纯化。优化鲁米诺 H2 O2 肉桂酸发光体系 ,建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测 138例正常人及病人血清标本 ,确定正常值参考范围 ,并与ELISA法比较。结果　所得抗体的滴度为 1∶80 0 0。优化后的发光体系为 :鲁米诺 (4 .5mmol/L) ,H2 O2 (7.5mmol/L) ,四苯硼钠 (0 .8mmol/L) ,肉桂酸 (0 .4mmol/L) ,比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了 1.19和 1.0 5倍。本法检测灵敏度为0 .2ng/ml,线性范围为 0 .4～ 5 0ng/ml,批内CV平均 9.0 % ,批间CV平均 11.8% ,回收率为 10 4 .2 %。Hb浓度在 0～ 5 0nmol/L ,T Bil在 0～ 15 μmol/L ,TG在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较 ,两法结果一致 (P >0 0 5 ) ,相关系数r=0 .985 2(P <0 .0 1)。用BioCheck标准品为校正物 ,确定临床诊断参考范围为 <2 .12ng/ml,诊断符合率为 96 .2 %。结论　建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。     

自动化学发光免疫分析法测定血清T3T4TSH的评价

目的评价以■喧酯作为标记物的ACS－180自动化学发光免疫分析法测定血清T3、T4、TSH的方法特性。方法对此法的灵敏度、特异性、干扰性、回收率、批内误差、批间误差与放免的相关性进行了研究。结果此法灵敏度分别为：T3：0．2ng／ml,T4：5．0ng／ml,TSH：0．03μIU／ml;平均回收率：T3：104％,T4：102％,TSH：105％。与放免法有良好的相关性,r＝0．972－0．978。结论此法检测迅速,灵敏度高,准确性、特异性强,适合于临床应用。     

化学发光酶免疫分析法检测丙型肝炎抗体的临床评价

目的评价化学发光酶免疫分析法（CLEIA）检测丙型肝炎抗体在临床应用中的价值。方法用化学发光酶免试剂和ELISA试剂同时对我院2009年5月至8月124例输血病人的血清标本作丙肝抗体检测,以ELISA法为对照,对两种检测结果进行对比分析。结果 124例血清标本中,CLEIA法和ELISA法均检出阳性7例,阳性率都为5.65%（7/124）,但有2例结果不一致,用同两种方法复检,得出ELISA法有1例假阴性、1例假阳性,CLEIA法结果无变化。结论对两种方法检测所得的数据进行统计学分析,采用χ2检验,χ2=0.5,P〉0.1,两种方法差异无统计学意义。     

甲胎蛋白和癌胚抗原化学发光分析与放射免疫分析的对比研究

目的:比较甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)的化学发光分析(IM)与放射免疫分析(RIA)的优缺点。资料和方法:正常对照 40例,病人标本 110例。分别用 RIA、IM(DPC公司的 Im-mulite)测定了 AFP、CEA。以回收率,批间、批内变异,非特异性结合率表示各方法的准确度、精密度、特异性等性能指标,方法学比较采用直线回归方程。结果:AFP、CEA RIA、IM 回收率均在95％～105％这间,批间批内变异均小于10％,非特异性结合率小于5％、1％,灵敏度为2.0ng/ml、0.2ng/ml。AFP RIA与 IM的直线回归方程为 Y_(RIA)=1.2766X_(IM) 2.6538。CEA RIA 与 IM的直线回归方程为 Y_(RIA)=1.2271X_(IM) 3.7245。结论:结果显示 AFP、CEA的 RIA与 IM的试剂盒质量较好,测量结果可靠,重复性好。IM 的准确度、精密度、特异性、灵敏度更优于RIA。AFP、CEA RIA 与IM两方法测量结果差异明显(P<0.05)。     

癌胚抗原与先天免疫

癌胚抗原(CEA)是结肠癌的肿瘤标记物,在许多结肠恶性肿瘤中高度表达。许多正常组织中也发现癌胚抗原及其家族成员的表达,且其在正常组织中的表达常居于战略性位置。在慢性炎症中癌胚抗原的表达增多。这些正常组织或炎性组织中表达的CEA家族成员是很多病原菌的受体,介导粘附并吞噬病原菌。     

微粒子酶联免疫分析法与化学发光微粒子免疫法在检测甲肝病毒抗体IgM中的比较

目的比较微粒子酶联免疫分析法（MEIA）与化学发光微粒子免疫法（CMIA）检测甲型肝炎病毒（HAV）抗体IgM。方法对中日友好医院349份门诊或体检患者血清（包括10份含干扰物质的血清）,同时用MEIA和CMIA进行甲肝病毒抗体IgM检测,结果进行卡方检验统计。结果MEIA和CMIA检测的349份标本,两者之间阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为100％,一致性高,统计学上无差异。同时干扰实验显示：RF因子、高血脂、重度溶血、黄疸及急性乙肝感染（HBc—IgM抗体阳性）对甲型肝炎病毒抗体IgM检测无明显影响。结论MEIA法检测HAV抗体IgM与已荻认可批准上市的CMIA法具有临床等效性,可以用于HAV抗体IgM的检测,为临床甲型肝炎感染提供诊断依据。     

增强化学发光酶免疫分析法建立及测定血清中的胃泌素

自1977年Halman第一次把化学发光与免疫测定结合起来后，化学发光免疫分析（CLIA）成为一种重要的检测手段。比传统的RIA和ELISA具有更多的优越性，如与RIA相比，没有放射性传染，不会对人体产生损害，操作方便等，与ELISA相比，具有灵敏度高，能较好定量及达到检测要求，然而由于不断研究结果表明，一般的化学发光体系（Luminol—H2O2-HRP）在应用于免疫分析中由于大分子空间位阻作用，灵敏度还是不够理想。     

化学发光酶免疫法测定地高辛

建立地高辛血清浓度的非放射性检测方法。利用进口发光剂和自制的兔抗地高辛ＩｇＧ，建立了化学发光酶免疫测定血清地高辛浓度的方法，结果，最低检测限为０．０５６μｇ／Ｌ，平均回收率９８．７％，批内变异系数≤８．８％，临床常用甾体药物无明显干扰，与荧光偏振免疫法相关良好。结论，化学发光酶免疫法灵敏，准确，稳定，特异，可以作为地高辛血药浓度监测的非放射性常规方法。     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体检测中的应用价值

选取2014年5月~2016年3月我院收治的83例疑似乙型肝炎患者,对所有患者均抽取空腹血液并进行ELISA法及化学发光酶免疫分析法检测,对两种不同检测结果进行对比分析。结果化学发光酶免疫分析法抗Ig G抗体及抗Ig M抗体检出率均高于ELISA法检出率,差异具有统计学意义(P0.05)。对乙肝病毒及核心抗体行化学发光酶免疫分析法检测,可有效提高核心抗体检出率。     

硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的研制及性能评价

目的 研制硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法),并对其试剂盒性能进行评价. 方法 利用竞争抑制法,对原料进行筛选.建立硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒.并分别对本试剂盒的准确性、最低检测限、线性、重复性、特异性、参考范围及样本对比方面进行评价.结果 经过筛选,选用反应模式:磁微粒包被羊抗鼠IgG-鼠抗硫酸去氢表雄酮单克隆抗体-吖啶酯标记DHEAS-BSA;对此方法建立的试剂盒进行方法学评价,最低检测限可达1.84 μg/dL,线性在0～1 500 μg/dL之间,相关系数r=0.999 8,准确度的回收率为105.38％,重复性均小于8％;建立了健康人参考范围(女性:47.9～407.5 μg/dL,男性97.1～522.5 μg/dL),与西门子ADVIA Centaur测定结果显著相关,线性方程为y=1.078 13+0.992 16x,相关系数r=0.994 7,2种试剂盒的测定结果具有较高的一致性. 结论 本研究建立的硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)各项性能均达到了临床检验的要求,为国产化66硫酸去氢表雄酮定量测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的研发奠定了基础,有望用于临床血清硫酸去氢表雄酮的检测.     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值

目的:分析化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒(HBV)及核心抗体定性检测中的应用价值。方法:选取2014年10月~2016年11月我院收治的乙肝患者95例为研究对象,应用化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附测定法检测患者HBV、核心抗体(抗HBcAbIgM抗体、抗HBcAb-IgG抗体),比较两种检测方法的阳性检出率及诊断敏感度。结果:两种方法检测HBV阳性率比较无显著性差异(P>0.05);化学发光酶免疫分析法检测抗HBcAb-IgM抗体、抗HBcAb-IgG抗体阳性率及敏感度均高于酶联免疫吸附测定法(P<0.05)。结论:化学发光酶免疫分析法在HBV及核心抗体定性检测中具有较高的应用价值,对核心抗体阳性检出率和检测敏感度均较高。     

化学发光免疫分析法检测乙肝核心抗体的应用分析

目的探究乙肝核心抗体检测采用化学发光免疫分析法的临床应用价值。方法从时间段2017年11月-2018年11月期间,抽选我院收治的疑似乙肝患者50例,所有患者均进行血液样本采集,并分别采用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法对乙肝病毒及核心抗体进行检测,分析检测结果。结果在核心抗体抗IgM阳性率、抗IgG阳性率检测上,化学发光免疫分析法明显优于酶联免疫吸附法,P<0.05。结论乙肝病毒、核心抗体检测采用化学发光免疫分析法,临床应用价值显著,对核心抗体具有较高阳性检出率。