EGCG降低P糖蛋白表达逆转白血病多药耐药的研究

[目的]探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对人白血病细胞K562/A02多药耐药性的逆转作用及相关机制.[方法]采用MTT法确定EGCG的非细胞毒性剂量,以及对K562/A02细胞药物敏感性的影响.以流式细胞术测定EGCG作用前后细胞内阿霉素浓度的变化;同时采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法分别检测经典多药耐药基因(MDR1)mRNA及其产物P糖蛋白的表达.[结果] EGCG在低于103.2μmol/L时对K562/A02细胞的生长抑制率小于10%.40μmol/L、60μmol/L及80μmol/LEGCG均可增加K562/A02细胞对阿霉素的敏感性,使阿霉素对K562/A02细胞的IC50由原来的113.34μg/ml降低至9.66μg/ml、7.67μg/ml和4.68μg/ml,其逆转倍数分别为11.73、14.77和24.23倍.流式细胞术结果表明EGCG可增加细胞内阿霉素浓度,并呈剂量依赖性.RT-PCR及Western blot结果显示不同浓度的EGCG均可抑制K562/A02细胞MDRlmRNA及P糖蛋白的表达.[结论]EGCG可部分逆转人白血病细胞K562/A02对阿霉素的耐药性,其逆转机制与增加细胞内化疗药物浓度、抑制经典多药耐药基因MDRlmRNA及其产物P糖蛋白的表达有关.     

雷公藤红素逆转K562/A02细胞多药耐药的实验研究

目的探讨雷公藤红素逆转人慢性粒细胞白血病红白血病急变细胞株K562/A02多药耐药的效果。方法采用CCK-8法测定细胞的药敏性及耐药逆转性,应用流式细胞术检测细胞内ADM浓度、P-gp蛋白表达。结果雷公藤红素对K562/A02、K562的半数抑制率浓度（IC50）分别为（295.58±23.288）μmol/L、（411.59±26.551）μmol/L。K562/A02细胞对ADM的耐药性是K562细胞的79.78倍。细胞毒剂量的雷公藤红素作用后,ADM对K562/A02细胞的IC50显著下降（P〈0.05）,逆转倍数为117.860倍。细胞毒剂量（IC50）和非细胞毒剂量（IC10）的雷公藤红素处理后的K562/A02细胞内的ADM浓度显著增加（P〈0.05）,增加倍数分别为1.537倍和1.102倍。雷公藤红素能明显下调K562/A02细胞的P-gp表达。结论雷公藤红素对逆转K562/A02细胞的耐药性有一定的作用,其机制可能与下调P-gp表达有关。     

马钱子碱对白血病K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用

目的：研究马钱子碱（vauqueline）对人白血病K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用。方法：采用噻唑蓝（MTT）法检测马钱子碱的细胞毒作用;采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹（Western blot）分别检测非细胞毒浓度（IC10）的马钱子碱对K562/A02细胞MDR1 （multidrug resistance gene 1）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP）、拓扑异构酶Ⅱ（topoisomeraseⅡ,TopoⅡ）、谷胱苷肽-S-转移酶（glutathione s-transferase,GST-π）mRNA及其蛋白表达的影响。结果：非细胞毒浓度（IC10）的马钱子碱作用后,K562/A02细胞中MDR1mRNA及P-gp表达降低（P<0.01）。而MRP、TopoⅡ、GST-π mRNA及其蛋白的表达无明显变化（P>0.05）,同时马钱子碱能增加化疗药物在白血病细胞内的积累。结论：马钱子碱能部分逆转K562/A02细胞的耐药性,其作用机制可能与下调K562/A02细胞MDR1 mRNA的表达,导致细胞膜上P-gp的表达量减少,化疗药物从细胞内溢出减少有关。     

5-溴汉防己甲素与汉防己甲素对K562/A02细胞多药耐药性逆转作用的比较

背景与目的:5-溴汉防己甲素(5-bromotetrandrine,BrTet)是汉防己甲素(tetrandrine,Tet)的溴化产物,具有逆转P-糖蛋白(P-glyeoprotein,P-gp)介导的肿瘤多药耐药(muhidrug resistance,MDR)的作用。本研究旨在比较BrTet与Tet对人白血病细胞K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)法检测不同浓度BrTet对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应;检测阿霉素(adfiamycin,ADM)对K562细胞和K562/A02细胞增殖的抑制作用,以及加用BrTet、Tet时上述抑制作用的变化,并计算半数抑制浓度(IC50)及逆转倍数。Westernblot法检测各组细胞P-gp的表达,流式细胞仪检测各组细胞内ADM的蓄积。结果:K562/A02细胞对ADM的耐药倍数为49.51倍。2.0μmol/L及更低浓度的BrTet和1.5μmol/L及更低浓度的Tet对K562细胞和K562/A02细胞抑制率均小于10%,无明显细胞毒性作用。加入1.0μmol/L的Tet后,K562/A02细胞对ADM的耐药倍数为12.17倍。加入0.25、0.5和1.0μmol/L的BrTet后,K562/A02细胞对ADM的耐药倍数分别为17.88、9.97和4.24倍。1.0"mol/L的BrTet和Tet分别使K562/A02细胞内ADM浓度提高了69.0%和51.6%,使P-gp表达分别下调了51.1%和43.73%,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:BrTet及Tet均可逆转K562/A02细胞耐药,且前者较后者逆转作用更强,逆转机制与抑制P-gp的表达、增加细胞内抗肿瘤药物浓度有关。     

川芎嗪联合三氧化二砷逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的探讨川芎嗪与三氧化二砷联合逆转耐药人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药的效果。方法采用WST-8法测定细胞的药敏性及抗药性逆转,应用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ADM浓度、P-gp蛋白的表达,采用免疫细胞化学二步法检测细胞GST-π表达。结果非细胞毒性浓度的TMP（20μg/ml）及As2O3（0.5μmol/L）可降低ADM对K562/ADM细胞的IC50（P〈0.05）,2种药物联合应用对ADM的逆转倍数明显高于两者单独应用（P〈0.05）,而且也高于两者单独应用之和;两者以非细胞毒性浓度联合应用提高K562/ADM细胞内ADM浓度和细胞凋亡百分率,作用大于两药单独应用,并且明显下调细胞P-gp和GST-π表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论非细胞毒性剂量的TMP和As2O3,均可部分逆转有多药耐药表型的细胞株K562/ADM对阿霉素的耐药性,两者联合应用效果优于单独应用,具有协同作用,其机制可能与下调P-gp和GST-π表达有关。     

硼替佐米增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性

目的:观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米是否可以增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性.方法:MTT法计算硼替佐米逆转耐药倍数,流式细胞术(FCM)检测细胞调亡比及细胞内药物浓度.结果:表柔比星单独及联合硼替佐米作用于K562/DNR细胞株的IC50分别为417.0μg/ml和210.4 μg/ml,逆转倍数为1.98倍;柔红霉素单独及联合硼替佐米作用于K 562/DNR细胞株的IC50分别为457.7μg/ml和324.9 μg/ml,逆转倍数为1.4倍.单独应用表柔比星组细胞调亡比为(28.74±4.6)％,联合硼替佐米组细胞调亡比为(39.14±9.6)％.硼替佐米能使K562/DNR细胞内柔红霉素含量增加,而对K562/S细胞无类似影响.结论:蛋白酶体抑制剂硼替佐米能增加耐药白血病细胞株K562/ DNR的化疗药物的敏感性,逆转耐药性.     

肿瘤坏死因子α和干扰素α逆转K562/A02耐药性的研究

目的：研究肿瘤坏死因子a(TNF-a）和干扰素a(IFN-a）对耐阿霉素（ADR）K562细胞株耐药性的逆转作用。方法：应用MTT法,分析TNF-a和IFN-a（均为10U/ml）分别处理K562/A02前后,K562/A02对ADR敏感性的变化。采用半定量RT-PCR和免疫组织化学染色法,观察mdr1基因的表达;应用流式细胞技术检测细胞内ADR浓度的变化。结果：TNF-a与IFN-a分别处理K562/A02细胞,24h后逆转倍数为6和5,处理48h后,逆转倍数分别为10倍和8倍,均具有显著差别;但72h后,逆转倍数反而减小。在TNF-a和IFN-a孵育后2h,K562/A02细胞内ADR的积累分别增加2.2和1.8倍,而对K562/S无明显增加ADR积累作用。结论：TNF-a和IFN-A（100U/ml）对K562/A02的耐药性具有明显的逆转活性,其作用似乎呈时间依赖性。由于低剂量TNF-a和IFN-a毒性微小,因此,具有一定的实际临床应用意义。     

多药耐药细胞系K562/A02裸小鼠皮下移植瘤模型的建立与鉴定

目的建立一种耐药特性稳定的裸小鼠移植瘤动物模型,为进行体内肿瘤耐药机制研究和逆转药物的筛选提供实验模型和实验基础.方法将具有典型MDR表型的K562/A02耐药细胞接种于裸小鼠右侧背侧皮下,而亲本K562细胞接种裸小鼠左侧背侧皮下,接种细胞数为1×107细胞/只,观察肿瘤成瘤情况及生长特性,并比较裸小鼠移植瘤细胞和体外培养细胞对化疗药物的敏感性,同时利用RT-PCR和免疫组织化学染色对裸小鼠K562/A02移植瘤基因表型进行鉴定.结果1)K562/A02裸小鼠移植瘤的成瘤率为100%,大约于第6～9天成瘤(体积＞100mm3),敏感肿瘤生长速度与耐药肿瘤无明显差别;2)裸小鼠K562/A02移植瘤肿瘤细胞和体外培养原代细胞对阿霉素的IC50分别为185.24μg/ml和235.25μg/ml,而K562/A02移植瘤肿瘤的IC50分别为3.07μg/ml和3.26μg/ml;阿霉素治疗组能够明显减慢K562敏感移植瘤的生长,而对K562/A02耐药移植瘤的生长几乎无作用;3)K562/A02裸小鼠移植瘤肿瘤细胞具有mdr1/Pgp表达,而K562裸小鼠移植瘤肿瘤细胞则无mdr1/Pgp表达.结论以K562/A02细胞建立的裸小鼠耐药移植瘤模型,仍保持近似体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转研究提供了良好的体内模型.     

增加细胞内三氧化二砷浓度恢复耐三氧化二砷的K562细胞对其敏感性的研究

目的 探讨耐受三氧化二砷（ATO）的白血病ATO耐药K562细胞（K562/AS2细胞）内砷浓度与耐药性的关系.方法 亲代敏感K562细胞（K562/S细胞）按照逐步增加ATO浓度诱导,建立K562/AS2细胞.采用原子荧光光谱法检测细胞内砷浓度.采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度ATO对细胞的毒性作用.结果 1μg/ml ATO培养24、48、72h后,K562/S细胞内的砷浓度比K562/AS2细胞增高[（15.63±0.42） μg/L比0μg/L、（22.27±0.15） μg/L比（3.51±0.12） μg/L、（24.31±0.21） μg/L比（3.61±0.11） μg/L;均P＜0.05].随着ATO浓度的增加及培养时间的延长,K562/AS2细胞内砷浓度逐渐增加（P＜0.05）,在1μg/ml和2μg/ml间砷浓度增加较快.K562/AS2细胞生长抑制率也逐渐增加（P＜0.05）,在1μg/ml和2μg/ml间增加较快.直线相关分析显示,当K562/AS2细胞与ATO接触分别为24、48和72 h时,其细胞生长抑制率均与细胞内ATO浓度呈正相关.结论 增加ATO浓度或延长ATO作用时间均可增加耐药细胞内ATO浓度,细胞内ATO浓度与ATO对细胞的毒性呈正相关,增加细胞内ATO浓度能够增强耐ATO K562细胞对ATO的敏感性.     

低频超声对阿霉素杀伤人白血病多药耐药细胞K562/A02作用的影响

背景与目的:有研究表明,超声可增加化疗药物对肿瘤细胞的敏感性.从而抑制细胞增殖.本研究中我们观测不同剂量的低频超声波联合阿霉素(adriamycin,A02)对人白血病耐药细胞株K562/A02的生物学影响,并探讨可能的机制.方法:将对数生长期的K562/A02细胞分为空白对照组、单纯阿霉素组、单纯超声组、阿霉素加超声组.24孔培养板上进行超声照射,台盼蓝拒染法、MTT法检测细胞活性,应用瑞姬氏染色法和流式细胞仪榆测细胞凋亡和药物浓度,免疫细胞化学检测细胞膜P-糖蛋白的表达变化.结果:频率20 kHz、声强0.25 W/cm2、辐射时间60 s的超声辐射联合7.5 ug/mL阿霉素可诱导细胞凋亡,当超声频率20 kHz,声强0.5 W/cm2时,对细胞有急性杀伤作用.与单纯阿霉素组相比较.超声辐射增加了细胞内阿霉素的药物浓度,促进细胞凋亡的发生;但超声辐射没有影响细胞膜P-糖蛋白变化.结论:频率20 kHz、声强0.25 W/cm2、辐射时间60 s的超声可以增强阿霉素对耐约细胞K562/A02的杀伤作用.     

NF-κB信号通路的激活对白血病细胞K562／A02多药耐药的影响

 目的　研究K562细胞株及其耐药细胞株K562／A02 NF-κB活性的差异性表达,探讨白血病多药耐药（MDR）发病机制。方法　用MTT法检测K562／A02的耐药倍数,观察细胞生长的形态学变化,PI单染法检测K562／S、K562／A02细胞周期分布,并用RT-PCR 方法检测mRNA的表达、流式细胞仪检测P糖蛋白（P-gp）表达及其功能,Western blotting方法检测细胞核NF-κB p65表达,比较K562与K562／A02白血病耐药细胞株之间的差异性。结果　与K562细胞不同,耐药细胞株K562／A02细胞生长特性发生改变,呈半贴壁生长,与K562／S细胞相比,K562／A02细胞的 G0／G1期、S期比例增高,G2／M期细胞比例减低,差异有统计学意义（P＜0.05）,凋亡细胞比例差异无统计学意义（P＞0.05）,且检测到mdr1 mRNA及细胞膜P-gp表达增高以及细胞核内NF-κB p65表达明显增加。结论　NF-κB信号通路的激活即NF-κB p65细胞核内转位可能参与了白血病MDR的形成。     

PLK1基因沉默增强K562/A02细胞对阿霉素敏感性的实验研究

背景与目的:Polo样激酶1(polo-likekinase1,PLK1)是一种重要的细胞周期调节分子,在多种肿瘤细胞中高表达且与肿瘤发病、治疗和预后密切相关。本研究探讨PLK1基因沉默增强K562/A02细胞对阿霉素敏感性的作用。方法:构建针对PLK1mRNA的siRNA真核质粒,将其导入经阿霉素诱导的K562/A02细胞中,通过RT-PCR和Westernblot分析PLK1基因在转染前后的表达差异;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度;流式细胞术检测细胞内阿霉素积累量和阿霉素诱导后的细胞凋亡。结果:与对照组相比,转染pEGFP-PLK1质粒的K562/A02细胞PLK1mRNA和蛋白水平分别下降(61.9±2.5)%和(65.3±2.4)%,对阿霉素敏感性的相对逆转率为67.8%。经阿霉素诱导96h后,空白对照组的细胞凋亡率为11.33%,转染pEGFP-PLK1质粒组凋亡率达到54.39%。结论:PLK1基因沉默能明显增加K562/A02细胞内阿霉素的累积量,增强细胞对阿霉素的敏感性并诱导凋亡,从而逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药性。     

多药耐药基因、谷胱甘肽S-转移酶特异性siRNA逆转K562／A02细胞多药耐药.

 目的　研究多药耐药基因（mdr1）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTπ）特异性siRNA逆转K562／A02细胞多药耐药性。方法　以mdr1 mRNA第79～99和GSTπmRNA第308～327核苷酸为作用靶点，合成针对靶区域序列的siRNA，克隆入pSilence2.1-U6 neo，克隆产物为pSilence-mdr1和pSilence-GSTπ，脂质体介导下转染K562／A02细胞。用实时荧光定量PCR检测K562／A02细胞 mdr1和GSTπ mRNA的表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；MTT法检测多柔比星的半数抑制浓度（IC50）。结果　经酶切、测序分析表明，成功构建siRNA真核表达载体。经pSilence-mdr1转染后的K562／A02细胞株mdr1 mRNA表达量下降了71.5 %，从（2.8±1.65）×108拷贝／μg RNA下降至（3.9±2.37）×107拷贝／μg RNA（P＜0.01）；同时pSilence-GSTπ 作用后，K562／A02细胞 GSTπmRNA表达量较显示空载体pSilence2.1-U6 转染组下降了39.8 %，从（2.3±1.14）×105拷贝／μg RNA下降至（5.4±2.45）×104拷贝／μg RNA（P＜0.01）；流式细胞仪显示空载体pSilence2.1-U6 转染组细胞凋亡率为（11.65±4.06）%，pSilence-mdr1和 pSilence-GSTπ共转染组细胞凋亡率为（44.98±11.27）%（P＜0.01）；空载体转染组耐药指数为23，pSilence-mdr1和pSilence-GSTπ共转染组耐药指数降低为7，IC50值从转染前的（1.16±0.38）mmol／ml下降为（0.33±0.04）mmol／ml（P＜0.01）。结论　siRNA 真核表达载体pSilence-mdr1、pSilence-GSTπ对K562／A02细胞株多药耐药性具有明显的下调作用。     

miR-139过表达降低急性髓系白血病TRAIL耐受性

目的:探讨miR-139过表达对急性髓系白血病肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)耐受性的影响。方法:采用浓度为100、200、300和400 ng/ml TRAIL处理人急性髓系白血病K562、HL-60细胞及相对应的多药耐药K562/A02和HL-60/ADM细胞,采用CCK8法计算IC50值,以IC50法评价急性髓系白血病细胞对TRAIL的敏感性。RT-PCR检测miR-139在 TRAIL敏感细胞和耐药细胞中的表达。采用脂质体2000将miR-139 mimics转染至TRAIL耐药细胞株,RT-PCR检测转染效果,CCK8法检测细胞活力及IC50值,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:在K562、K562/A02、HL-60和HL-60/ADM细胞中,HL-60/ADM细胞对TRAIL最为敏感,而K562细胞对TRAIL的耐药性最强。与敏感细胞株HL-60/ADM相比,miR-139在耐药细胞株K562中表达显著下降。转染miR-139 mimics后,K562细胞中miR-139表达和细胞凋亡率明显升高,而细胞存活率及IC50值明显降低。结论:miR-139在TRAIL耐药细胞株K562中低表达,过表达miR-139可能通过促进TRAIL诱导的细胞凋亡降低K562细胞对TRAIL的耐受性。     

MDR1基因短发卡样RNA表达载体逆转K562/A02人白血病细胞多药耐药的研究

目的构建MDR1基因短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,观察对K562/A02人白血病细胞株MDR1基因的沉默作用以及对P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响。方法以基因重组技术构建表达质粒,转染重组质粒pEGFP-C1/U6/MDR1-A和pEGFP-C1/U6/MDR1-B至K562/A02细胞株,通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹法,检测MDR1基因表达及P-gp表达水平的变化;以MTT法检测阿霉素(ADM)对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC_(50));高效液相色谱(HPLC)法检测细胞内ADM含量。结果构建的2种重组质粒pEGFP-C1/U6/MDR1-A和pEGFP-C1/U6/MDR1-B均明显抑制K562/A02细胞株MDR1基因表达,抑制率最高为48．2%±2．5%;同时抑制P-gp蛋白的表达,抑制率最高为50．67%。对ADM药物敏感性的相对逆转效率分别为40．8%和62．4%;同时使K562/ A02细胞内ADM含量增加。结论shRNA表达载体可明显抑制K562/A02细胞MDR1 mRNA的转录和P-gp蛋白的表达,增加K562/A02细胞内ADM含量,恢复K562/A02细胞对化疗药物的敏感性,逆转MDR1基因编码蛋白P-gp介导的多药耐药。     

K562多药耐药细胞系中肿瘤干细胞样细胞对伊马替尼耐药机制的初步研究

Objective： To characterize a novel chronic myeloid leukemia （CML） cell line and to further elucidate the mechanisms of resistance to STI571. Methods： A novel K562 cell line （K562NP16） was achieved after exposure of the K562 cells to VP16. A small subpopulation （K562NP16 SP） that was capable of excluding Hoechst 33342 in the K562NP16 cell line was isolated by fiow cytometry sorting. The rest of the K562NP16 cells were classified as non-SP K562NP16. The mechanisms involved in K562NP16 SP cells which became resistant to STI571 were studied. Results： The levels of Bcr-Abl and Abl proteins were similar in the K562 cell line and in non-SP K562NP16 and K562NP16 SP cells. The multidrug-resistant gene 1 （MDR1） expression of the 170 kDa P-glycoprotein （P-gp） was detected in K562NP16 non-SP and K562NP16 SP cells but not in K562 cells. The expression levels of P-gp in the two K562NP16 cell lines were similar. Compared with non-SP K562/ VP16, the K562NP16 SP cells were more resistant to STI571. This resistance could hardly be reversed by many multidrug resistance inhibitors. In addition, in vivo study showed that the K562NP16 SP cells induced tumorigenesis in mice, while the K562NP16 non-SP cells failed to do so. Conclusion： A novel K562 cell line, K562NP16, was generated. A small side population K562NP16 SP cells, had high resistance to STI571 treatment and more tumorigenic than the K562 cells. It may represent the cancer stem cells of the K562NP16 cell line.     

屈洛昔芬与他莫昔芬对K562/A02耐药性影响的比较

目的:比较屈洛昔芬 (droloxifene,DRO)和他莫昔芬 (tamoxifen,TAM)对K562/A02耐 药性的逆转作用。方法:应用 MTT法、RT PCR和免疫细胞化学 染色观察细胞毒活性和MDR1、 GSTpi耐药基因表达变化,采用流 式细胞仪测定细胞内多柔比星 (ADR)浓度。结果:在20、10和5 mmol/L浓度时,DRO和TAM均 显著逆转K562/A02的耐药性, DRO和TAM的逆转倍数相比较 差异无统计学意义。MDR1和 GSTpi的mRNA和蛋白表达在 DRO和TAM处理后第2天开始 降低,第5天出现明显降低。20 mmol/L浓度的DRO和TAM分别 孵育K562/A02,可使其细胞内 ADR积累分别增加2.9和3.0 倍。结论:DRO与TAM类似,有 较强的逆转活性,可明显抑制 MDR1和GSTpi基因的表达及增 加细胞内ADR的积累。     

Overexpression of glucosylceramide synthase in associated with multidrug resistance of leukemia cells

Ceramide, as a second messenger, initiates one of the major signal transduction pathways in tumor apoptosis. Glucosylceramide synthase (GCS) catalyzes glycosylation of ceramide and produces glucosylceramide. Through GCS, ceramide glycosylation allows cellular escape from ceramide-induced programmed cell death. Here we investigated the expression of GCS in human leukemia cells and an association between GCS and multidrug resistance of leukemia cells. Using RT-PCR technique the level of GCS gene was detected in 65 clinical multidrug resistance/non-resistance cases with leukemia, and in K562 and K562/A02 cell lines. AlamarBlue Assay was applied to confirm the multidrug resistant of K562/A02 cells. PPMP, which is a chemical inhibitor for GCS, was used to determine the relationship between GCS and drug-resistance in K562/A02 cells. In addition, multidrug resistance gene (mdr1), Bcl-2 and Bax mRNA was also analyzed by RT-PCR. The expression of GCS and mdr1 mRNA in clinic multidrug resistance samples exhibited significantly increased compared with clinic drug sensitive group (P<0.05). There was the positive correlation both the expression of GCS and mdr1 genes in leukemia samples (P<0.01, gamma=0.7). AlamarBlue Assay showed that the K562/A02 cell line was 115-fold more resistant to adriamycin and 36-fold more resistant to vincristine compared with drug-sensitive K562 cell line. There also was significant expression difference of GCS and mdr1 genes between K562 and K562/A02 cells. Bcl-2 gene exhibited higher expressions whatever in clinic drug-resistance samples or K562/A02 cells, whereas the expressions of Bax gene were higher in drug-sensitive samples and K562 cells. PPMP increased sensitivity to adriamycin toxicity by inhibiting GCS in K562/A02 cells. Therefore, it is suggested that a high level of GCS in leukemia is possible contributed to multidrug resistance of leukemia cells. Abnormally expressions of the genes in associated with cell apoptosis might be one of the main molecular pathology mechanisms of multidrug resistance caused by GCS gene.