生物发光法检测CD4+T细胞内ATP的意义及在器官移植中的应用

细胞免疫（CMI）由T淋巴细胞和它们的效应因子反应,以及与其他免疫细胞的交互作用调节。CMI在器官移植、传染病控制及抗肿瘤等作用中具有重要意义。细胞免疫功能检测方法包括体内检测方法 （如皮试）和体外检测方法（细胞活性信号检测、淋巴细胞增殖试验、细胞毒性试验和细胞因子检测等）。     

评价细胞免疫功能的指标—PHA皮试,OT皮试,E玫瑰花结试验和淋巴细胞转化之间的关系

随着免疫学研究的进展,人们发现机体的免疫反应与许多疾病的发生发展有密切关系。为进一步探索机体细胞免疫功能,近年来已建立了许多检测的技术,这些技术大致可归纳为体外及体内法二大类,体外法主要有(1)测定T淋巴细胞的E玫瑰花结试验、植物血凝素(PHA)淋巴细胞转化试验;(2)测定淋巴因子的细胞毒试验、巨噬细胞     

811例E—玫瑰花结形成试验初步观察

E——玫瑰花结形成试验是体外检测人体细胞免疫的一种简单易行的方法,已被临床广泛应用.人体血液T——淋巴细胞表面有能与绵羊红细胞结合的E受体,在体外可与绵羊红细胞结合形成玫瑰花结,利用这一特点来测定人体血液T——淋巴细胞的含量.以了解机体细胞免疫功能.     

白细胞粘附抑制试验对胰腺癌诊断的研究

Halliday和Miller于1972年首先介绍了白细胞粘附抑制试验(Leukocyte Adherence Inhibition Test,简称LAIT),这是一种检测细胞免疫的体外试验方法。他     

白细胞移动抑制试验及临床应用

近年来由于细胞分离技术和培养方法的不断改进,使得细胞免疫的研究异于往日,相继建立了一些测定细胞免疫的体外试验方法。白细胞移动抑制试验(LMIT)就是其中之一。 1932年Lenis等证实,对结核菌素具有超敏反应动物的脾脏细胞或淋巴细胞,当与特异性抗原相孵育时,其移动受到抑制。这是人们首次观察到细胞的移     

用MTT比色分析法检测淋巴细胞转化

淋巴细胞转化试验通常是用 PHA 刺激体外培养的 T 细胞使其转化为淋巴母细胞的一种试验。根据 T 细胞的转化程度可判断机体的细胞免疫功能。该试验是临床常用的细胞免疫检测指标之一。如何测定 PHA 刺激     

三种“活性”玫瑰花(Ea)和“总”玫瑰花(Et)试验方法的研究对比

T 淋巴细胞在体外能与羊红细胞自发形成 E 玫瑰花已得到公认,尽管试验方法尚未统一,实用价值仍有争议,但从一些实验资料看来,其结果基本上与理论相符,仍有一定的参考价值,且由于方法简便,故该试验仍为目前检测机体细胞免疫水平最广泛使用的方法.     

病毒性肝炎的植物血凝素皮肤试验观察

检测机体细胞免疫功能的方法,现有体内法与体外法两种。植物血凝素(PHA)是测定细胞免疫功能的体内法之一。为了探索病毒性肝炎的PHA皮试的临床意义,我们初步对正常人157例和各型肝炎病人205例进行PHA皮试,并对228例肝炎病人作了玫瑰花结形成试验(RFT)、白细胞移动抑制试验(LMIT)与PHA皮试对照,初步观察结果如下:     

免疫学知识介绍(十五)

体外细胞免疫测定细胞免疫反应的表现往往并非单纯是 T细胞的作用,而会牵涉到其他免疫细胞,故细胞免疫的检测除针对 T 细胞外,也需要对其他免疫细胞进行检测,以便比较全面地了解体内的免疫状况。1、淋巴细胞转化试验:T 细胞在体外培养时,在培养液中加入特异性抗原或非特异性的促分裂因子(PHA、Con—A 等),T细胞能被激活而发生转化,形成体积较大,代谢旺盛,并能进行分裂的淋巴母细胞。淋转反应与机体的细胞免疫水平有密切关系。PHA 等非特异淋转率反映机体总的细胞免疫情况。特异性抗原的淋转率则可反映机体对该抗原的细胞免疫水平。此法可用于某些慢性传染病免疫功能的测定及癌肿的治疗和预后的判断。治疗效果好者,淋转率上升,缓解期延长;病情恶化者,转化率下降。     

正常人PHA及OT皮肤试验结果初步报告

检测机体细胞免疫功能有体内法和体外法两类,植物血凝素(PHA)皮肤试验和结核菌素(OT)试验都是体内法,也是目前国内外常用的简便方法。我们在对肝炎病人实行免疫疗法的过程中,进行了正常人PHA皮肤试验222例和OT皮肤试验279例。现将检测结果作初步报告,并对几个有关问题加以讨论。试验方法 1.皮试方法:本文报告二种试验均采用前臂掌侧皮内注射法。 2.皮肤试验液的制备及用量: PHA试液:用广东医药工业研究所制的PHA冻干注射液(每支含10毫克),以     

107例外周血淋巴细胞促凝血活性的初步观察

目前研究虚症与免疫的关系时,常检测非特异性细胞免疫功能,如花环、淋转试验、酯酶染色法以及测定特异性细胞免疫功能的巨噬细胞游走抑制试验(MIF)等。但上法操作繁琐,所需细胞量大,试验重复性较差。Geczy等介绍一种测定人外周血淋巴细胞促凝血活性(简称LFCA)的方法。其原理是致敏淋巴细胞在体外接触致敬抗原时,可被激活并产生一种结合在淋巴细胞膜上的促凝血活性因子,可使正常人血浆凝固时间缩短。国内黄宇烽等研究并介绍了LPCA试验方法。我们参照此     

特异性玫瑰花试验检测抗麻疹细胞免疫功能——麻疹疫苗接种前后的变化

先天性无丙球蛋白症儿童感染麻疹后临床过程与正常人相似,而胸腺功能缺陷者麻疹往往导致死亡,说明细胞免疫功能在抗麻疹免疫中十分重要。目前用于体外测定抗麻疹细胞免疫功能的方法有特异性淋巴细胞转化试验和移动抑制试验等,但所得结果不一。     

植物血凝素和双链酶皮试反应及其与淋巴细胞转化率和E—玫瑰花结形成率的关系

检测机体细胞免疫功能的方法有体外法与体内法两种,为了确定一种简单易行,实用于儿科临床的细胞免疫功能测定方法,我们选择了332例自出生6小时至42周岁的正常小儿和成人,作植物血凝素(PHA)和双链酶(SK-SD)皮内试验,PHA皮试剂量采用66.7μg/0.1μ1;SK-SD为6.25μg/0.1μ1,24小时观察结果,测量红斑直径。皮试同时取静脉血作淋巴细胞转化试验和E—玫瑰花结形成试验,以资比较。结果:PHA皮试全部阳性,新生儿组红斑最小,平均直径为l0.1mm,95％可信限     

尘螨变应原皮内试验与血清IgE检测结果的相关性

目的 探讨变应性鼻炎粉尘螨及户尘螨变应原体内检测与体外检测的相关关系.方法 选择变应性鼻炎患者34例, 体内检测采用皮内试验法, 体外检测采用血清特异性IgE检测法, 根据皮内试验结果分为:极强阳性组、强阳性组、中阳性组、阳性组及阴性组5个级别;应用Excel软件进行统计分析.结果 粉尘螨、户尘螨变应原皮内试验分别与体外血清lgE检测具有高度相关性;变应原皮内试验 (即户尘螨与粉尘螨的平均值) 与IgE检测具有高度相关性, 相关系数r=0.8532 (P<0.01, n=20) .结论 粉尘螨和户尘螨变应原皮内试验与体外血清lgE检测具有高度相关性, 临床上可以在患者条件允许的情况下先做皮内试验作为筛查, 然后再用体外检测进一步验证;对于高敏患者或其他不接受皮内试验的患者, 可直接进行体外检测.     

创面分泌液对表皮干细胞体外趋化作用的实验研究

目的 观察创面分泌液对体外培养表皮干细胞(ESCs)的趋化作用,并初步探索其作用机制.方法 细胞免疫荧光化学、流式细胞仪技术检测表皮干细胞表达趋化因子受体CXCR4的情况;采用Transwell 培养体系,观察创面分泌液对ESCs的趋化作用.结果 细胞免疫荧光化学结果显示,表皮干细胞胞膜及胞浆内FITC染色呈阳性表达;流式细胞仪检测结果,表皮干细胞表达CXCR4阳性率为43%;体外趋化试验结果显示, 创面分泌液组从Transwell 培养体系微孔膜上层迁移至下层的细胞数约为87±9.12,明显多于受体拮抗组21±2.71和K-SFM对照组15±3.28(P＜0.05);受体拮抗组迁移细胞数虽稍多于K-SFM对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本实验通过Transwell培养体系初步验证了人创面分泌液对体外培养的表皮干细胞具有趋化作用,检测到人表皮干细胞表达趋化因子受体CXCR4,因此推测创面分泌液中可能含有CXCR4的惟一配体SDF-1,并通过SDF-1/CXCR4介导完成对表皮干细胞的趋化效应.     

用玫瑰花试验判断白血病予后的探讨

近年来,多认为细胞免疫功能与癌症的发生及转归有密切关系。特别是关于癌患者免疫功能降低的报告很多,且主要是细胞免疫(T细胞)功能下降。目前用于测定血液中T细胞数量的体外试验方法很多,其中以玫瑰花试验最为简便、易行。国内外用该试验检查癌及其他疾病患者的细胞免疫功能的报告中,对检查效果的评价颇不一致,有人认为该试验系反映血液中的T细胞总数,在肿瘤患者体内常变化不显著。但我们在观察白血病患者细胞免疫功能状     

植物血凝素皮试对血液病患者免疫功能测定的观察

目前国内外多应用植物血凝素(PHA)作体内或体外淋巴细胞转化试验,作为测定机体细胞免疫状态的重要指标~(1、2)。我们应用比较简便有效的 PHA 皮试对血液系统疾病56例和健康人120人的细胞免疫功能状态作了体内检测,现将检测结果初步报告如下。材料和方法材料:我们应用武汉市中心血站制造的PHA,每毫升含3.5毫克,稀释成每0.1毫升含10微克,放置冰箱中备用。     

白细胞粘附抑制试验在诊断卵巢癌上的应用初步报告

白细胞粘附抑制试验(LAI)是一种具有肿瘤组织类型特异性的体外检测细胞免疫方法。目前多数报导对乳癌、恶性黑色素瘤、甲状腺癌和消化道癌瘤的诊断,具有一定的敏感性,但在妇科癌瘤中的应用报导极少。本文报导最近我院应用此试验于诊断“卵巢癌”的初步小结。     

白细胞粘附抑制试验研究进展

近年来,细胞免疫的体外测定技术发展极为迅速,但往往由于测定方法的烦琐、耗血量大、设备较多、费时等因素而限制了它们在临床的应用和推广,因而迫切需要方法简便、敏感、能重复而特异的肿瘤细胞免疫测定技术来研究肿瘤的早期诊断、治疗效果及预后判断。1972年Halliday等在白细胞移动抑制试验基础上发展起来的白细胞粘附抑制(Leukocyte Adherence Inhibition Test简称LAI)试验,由于初步具备上述条件而受     

体外诱导恒河猴皮肤干细胞分化为结膜上皮细胞的实验研究

目的诱导体外培养、纯化的恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化,探索皮肤干细胞的可塑性。方法体外培养恒河猴皮肤干细胞,用Ⅳ型胶原纯化,纯化前后用流式细胞仪检测β1整合素和角蛋白15阳性细胞比例,纯化后的皮肤干细胞用细胞免疫荧光和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术鉴定β1整合素和角蛋白15。皮肤干细胞转染绿色荧光蛋白基因,24h后挑选出有荧光的细胞,与人结膜上皮细胞共培养10d,再进行结膜上皮细胞的特异性抗原黏蛋白4和角蛋白4的鉴定,检测方法包括细胞免疫荧光和RT—PCR。结果体外培养的皮肤干细胞纯化后比例接近90％。细胞免疫荧光和RT—PCR检测β1整合素和角蛋白15阳性。转染绿色荧光蛋白基因24h后,细胞呈现绿色荧光,与结膜上皮细胞共培养10d后,细胞免疫荧光和RT—PCR检查黏蛋白4和角蛋白4阳性。结论在体外培养纯化的灵长类动物恒河猴皮肤干细胞,在适宜条件下,可诱导分化为有结膜上皮细胞特征的细胞。