检测肿瘤McAb新技术DELFIA的建立

DELFIA(dissociation enhancement lanthanide fluoroimmunoassay)是近年来发展的最新一代免疫分析技术,其全名为解离放大镧系荧光免疫分析法或Tr-FIA(time-resolved fluoroimmuno-assay),即时间分辨荧光免疫分析法,其与传统放射免疫法比较具有更高的灵敏度和精确度.作者从8611卵巢癌细胞株获得McAb F_(11)、C_4、F_(10)、H_1-F_8及H_1-F_7,并分别成功地建立了前4种McAb的DELFIA,本文报告F_(11)及G_4 DELFIA的建立.     

2009～2010年河池市新生儿疾病筛查结果分析

目的:对广西河池市2009～2010年新生儿疾病筛查结果进行分析,探讨存在的问题,提出河池市有效开展新生儿疾病筛查工作的对策.方法:采用时间分辨荧光免疫分析法(DELFIA),对2009～2010年在全市各医院出生的27 395例新生儿进行先天性甲状腺功能减低症(CH)和苯丙酮尿症(PKU)筛查.结果:共筛查新生儿27...     

AutodelFIA在FT3、FT4测定中的应用

目的:评价运用AutodelFIA(全自动时间分辨荧光免疫分析)检测FT3、FT4对于甲状腺功能的评估价值,以及与其它免疫分析技术的比较.方法:用RIA法测定TT3、TT4,用AutodelFIA法测定FT3、FT4.结果:运用AutodelFIA检测FT3、FT4在正常人、甲亢病人、甲低病人,其灵敏度,特异性均优于用RIA法检测TT3、TT4.结论:通过本实验,可认为AutodelFIA测定甲状腺激素可以替代放射免疫分析法测定评估甲状腺功能,对放射免疫法形成极大的挑战,有着广泛的临床应用前景.     

人血浆抗利尿激素放射免疫分析法

用抗利尿激素抗血清建立人血浆抗利尿激素放射免疫分析法,用Iodogen法制备标记化合物~(125)I-sAVP,比放射强度达1369mCi/mg,-25℃可储存1个月。标准曲线灵敏度为0.15pg/管,血浆AVP最小可测量为0.6pg/ml,测定范围为0.6～11.0pg/ml。用丙酮—石油醚法提取血浆AVP,回收率为75.6％,批内和批间变异系数分别为9.8％和16.8％,提示提取是放射免疫法测定人血浆AVP的必须步骤。本法所得结果能充分反映正常人血浆AVP的生理波动。     

血清促甲状腺素免疫检测技术

血清促甲状腺素(TSH)是反映甲状腺功能最敏感的指标.血清TSH测定方法 有多种,从最初的放射免疫分析法和免疫放射分析法到临床逐渐普及的免疫化学发光分析法、电化学发光免疫法和时间分辨荧光免疫法等,乃至近年出现的微流控芯片技术,血清TSH检测的灵敏度显著提高.文章就临床较为常用的血清TSH检测技术及存在的问题作一综述.     

时间分辨荧光免疫分析测定六盘水地区正常人甲状腺相关激素

用放射免疫分析法（RIA）测定甲状腺相关激素的应用已经很广泛，随着生物标记技术的不断进步，免疫分析技术逐步由放射免疫分析技术向非放射免疫技术转变。时间分辨荧光免疫分析技术正是这类非放射免疫技术的一个典型代表，在部份地区正在取代RIA。本院现已采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）测定甲状腺相关激素，为建立其正常参考值，便于临床诊断。     

CA50时间分辨荧光分析法的方法学评估

目的评估所建立的CA50时间分辨荧光免疫分析法(CA50TRFIA)的技术指标及应用价值。方法建立CA50时间分辨荧光免疫分析法,分析其曲线的性质参数,研究该方法的特异性、精密度和回收率、灵敏度、稳定性、平行性,以及和免疫放射分析方法(IRMA)法间的相关性。结果10批标准曲线拟合相关系数均值R为-0.9978±0.0022,最大结合比Bm/Bo为127.26±9.85,批内和批间变异分别为2.6%和3.5%,平均回收率为108.61%,灵敏度为1.08U/mL,测定结果与进口CA50IRMA药盒测定值比较相关系数为0.94,其他肿瘤标志物无明显干扰,同批试剂连续6个月应用分析结果稳定。结论CA50TRFIA本底低干扰小,特异性强、稳定性好,灵敏度高,无放射性污染,是一种非放射性的标记免疫新方法,值得推广应用。     

时间分辨荧光免疫分析法检测甲胎蛋白的临床应用

目的:评价时间分辨荧光免疫(TRF)分析法检测甲胎蛋白(AFP)的临床应用。方法:对血清标本做批内批间重复性测定、回收试验及TRF分析法与放射免疫分析法进行AFP对比测定。结果:用高、中、低3种浓度AFP标准品进行批内测定,n=10 ,所得结果计算CV值,分别为2 .8% ,3.1%和3.6 % ;批间连测10 d,CV值分别为3.36% ,3.8%和4 .2 %。回收试验回收率为95 .8%～10 2 .6 %。2种方法呈正相关,回归方程Y=0 .988+0 .938X,r=0 .986 9。临床应用对16 1例临床血清标本(其中女性87例,男性74例)进行检测,结果稳定可靠。结论:酶免疫法作定量检测,误差较大且酶标记物不稳定;放射免疫法因其具有放射性而污染环境;化学发光免疫法其灵敏度、精密度高,但其仪器、试剂价格较高,不适用于中小医院开展。TRF分析法检测AFP灵敏度高、重复性好、不污染环境是取代酶免疫法和放射免疫法的最佳免疫分析技术。     

~(125)Ⅰ—cAMP放射免疫分析法

本文介绍了~(125)I-ScAMP-TME的制备方法和cAMP的放射免疫分析法。标记时所需的ScAMP-TME由碳化二亚胺法合成后用纸层析法提纯,~(125)I标记则采用氯胺T法。经降低标记时的温度和pH、缩短标记时间后,减少了标记过程中ScAMP-TME的分解产物的形式,所得~(125)I-ScAMP-TME的比放射性可达350ci/mmol。cAMP放射免疫分析法灵敏度为37fmol,标准曲线工作范围为62.5-2000fmol/管,批内变异系数为7.13％,批间变异系数为8.71％,与cGMP的交叉反应<0.0042％。     

Wallac 1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪维护

时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子(镧系元素:铕、铋、钐等)及其鳌合物为示踪剂来标记抗原、抗体、核酸探针或生物活性细胞等为特征的超灵敏度检测技术.三价稀土离子与抗原、抗体络合后,经过增强剂的增效处理,产生半衰期长、荧光度强的荧光,从而大大提高了检测的灵敏度.此方法具有灵敏度高、操作简便、示踪物稳定、有效期长、标准曲线范围宽、不受自然荧光干扰、无放射性污染等许多优点,已成为现代生物医学研究和临床超微量检验中的一项最有发展前景的分析手段.目前是核素体外检测的顶尖技术和方法.     

时间分辨免疫荧光分析检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的 时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)是当前标记免疫分析研究应用领域的热点之一,具有高灵敏性和高特异性,用于生物分子的超微量检测.本研究者在建立一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法.方法 以Eu-DTTA{N1-(P-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸铕钠}为示踪物,建立了用TRFIA检测乙型肝炎血清学标志物乙型肝炎病毒表面抗原的方法.结果 所建立的标准曲线分析范围分别为0.2～300 ng/ml,分析灵敏度为0.05 ng/ml,检测参考标准品的批内变异系数均小于10%,与免疫放射测定同时定量检测多份血清样本,相关系数高达95%.结论 TRFIA分析范围宽,灵敏度高,操作简便,具有优越的定量检测能力,价格适中,十分适合临床推广应用.     

类固醇激素竞争性时间分辨荧光免疫分析方法

时间分辨荧光免疫分析(time-resol-ved fluoroimmunoassay,TRFIA)是继酶免疫分析和发光免疫分析之后,在荧光免疫分析的基础上发展起来的一种新型的非放射性配基分析技术。因其具有 RIA 的特点,灵敏度高、特异性强、操作简便,而且克服了RIA 中使用放射性物质不利之处。使用镧系元素作标记,具有标记物稳定,标准曲线量     

液相酶免疫分析法测定血清甲状腺素(T_4)

目前测定甲状腺素(T_4)多采用放射免疫分析法(RIA)。虽然操作较简便,灵敏度和特异性均较高,但以~(125)I-T_4为示踪物,需要专门设备,在基层开展常受条件限制。近年来有些作者在研究新的示踪物的基础上,建立了一类非放射性免疫分析技术。其中包括酶免疫分析(EIA)和荧光免疫分析(FIA)测定血清T_4。EIA 具有 RIA 相同的灵敏度和特异性,但克服了 RIA 中示踪     

血清促甲状腺素的时间分辨荧光免疫分析试剂盒的初步应用

放射免疫分析(RIA)检测血清促甲状腺素(TSH)水平,对诊断甲状腺功能及研究下丘脑-垂体-甲状腺轴生理与病理机制是一项重要指标,因受检测方法灵敏度和稳定性波动的影响,有待探索新的检测手段来克服。时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)是国外八十年代初期发展起来的一项新型超微量分析技术。以检测灵敏度高,标准曲线测定域宽,稳定性好,应用范围广等特点更优于RIA。本文对41例诊断甲状腺功能异常血清样品,同时采用TrFIA及RIA进行对照测定,对结果试作比较分析,报告如下。材料和方法.①样品来源:41例门诊或住院患     

时间分辨荧光免疫分析定量检测HBsAg的临床价值

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的一个检测指标，其定量检测对乙肝的研究和防治，特别是观察疗效具有重要的意义。目前，临床上测定HBsAg的方法主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、胶体金免疫层析法(GICA)、斑点金免疫渗滤法(DIGFA)等，其中以ELISA为主，但其灵敏度只有1μg／L，且属于定性分析。时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)作为一种高灵敏的定量免疫测定方法，     

血清促甲状腺素免疫检测技术

血清促甲状腺素（TSH）是反映甲状腺功能最敏感的指标。血清TSH测定方法有多种,从最初的放射免疫分析法和免疫放射分析法到临床逐渐普及的免疫化学发光分析法、电化学发光免疫法和时间分辨荧光免疫法等,乃至近年出现的微流控芯片技术,血清TSH检测的灵敏度显著提高。文章就临床较为常用的血清TSH检测技术及存在的问题作一综述。     

两种方法检测乙型病毒性肝炎实验结果比较

目的：比较时间分辨荧光免疫法与微粒子酶免疫分析法检测乙型病毒性肝炎实验结果的检出率。方法：以2012-01～2013-01来我院部就诊的100例乙肝患者为研究对象。采用时间分辨荧光免疫法与微粒子酶免疫分析法对患者乙型病毒肝炎血清学标志物进行检测,并对检出结果进行统计学分析。结果：微粒子酶免疫分析法与时间分辨荧光免疫法检测Hb-sAg,HbsAb,HbeAg检出率,差异无统计学意义（P〉0.05）,但两种方法对HbeAb与HbcAb的检测,差异有统计学意义（P〈0.05）。对于五种乙型肝炎血清标志物检测,微粒子酶免疫分析法的阳性检出率要高于时间分辨荧光免疫方法,并在HbeAb与HbcAb的检测中更加明显,并且微粒子酶免疫分析法的灵敏度和特异性高于时间分辨荧光免疫法。结论：与时间分辨荧光免疫方法相比,微粒子酶免疫分析法检测乙型肝炎血清学标志物（HBVM）更为灵敏且特异性强,值得在临床上推广应用。     

高活性高纯度抗生物素蛋白研制成功

抗生物素蛋白—生物素系统(ABS)免疫检测法是当前最新的免疫检测技术,己开始应用于酶联免疫、病理免疫、放射免疫和荧光免疫等方法中,使传统的标记免疫灵敏度提高数十倍,甚至数百倍,从而为微量抗原抗体的检测开辟了新的途径。海军医学研究所科研人员采用先进工艺研制出一种高纯度、高活性的抗生物素蛋白,其聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条蛋白沉淀带,迁移率与美国 Vector 实验室的标准抗生物素蛋白完全相同,蛋白比活性达14.7～     

血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的 建立血清游离β-HCG时间分辨荧光免疫分析法.方法 采用双抗体夹心一步法建立游离β-HCG试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价.结果 试剂盒的可测范围为3～200 ng/mL,灵敏度为0.12 ng/mL,CV分别为4.23%和5.73%,与hLH、hFSH、hTSH的交叉反应低,与2000 U/L的hCG的交叉反应结果小于100 ng/ml.51份血样用本试剂盒与国外同类试剂同时检测,其相关系数为0.95.结论 时间分辨荧光免疫分析法是目前血清游离β-HCG检测中最灵敏的方法.该分析法稳定性好,具有很好的应用前景.     

放射免疫操作中的质量控制

放射免疫分析的质量控制主要取决于两个方面,即放射免疫分析药盒的质量和操作者的质量水平。当试剂盒、放免测定仪及检测程序均处于正常状态时,操作的好坏是产生误差的主要因素之一[1]。放射免疫中随机误差来源于稀释药盒、操作者加样的手法、温育与时间、离心与分离。以下3点可使检测结果获得最大的可信度,从而提高检测质量和效率。1　曲　　线正常时标准曲线斜度呈反向抛物状曲线,各标准管结合率数值点应在曲线上,不能偏离±2SD,一般B0/T应在20%～50%之间,N/T3～5之间,双抗法为<10%。修改多处结合率标准点,曲线将产生的误差都会对检测…