荧光定量PCR仪的选购

荧光定量PCR技术已成为临床分子检测的重要手段之一,其以敏感性、特异性而被越来越多的科研人员所看好,荧光定量PCR仪的性能与检测结果的准确性密切相关.现将PCR仪选购过程中需注意的几点问题做一简单介绍.     

荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用

荧光定量PCR仪技术是一种新的核酸定量技术，该技术在PCR仪反应系统中引入了荧光标记探针，具有可实时监测、高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，极大地克服了原有PCR仪技术的不足，扩大了PCR仪的应用范围。     

探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析

目的:探讨实时荧光定量P C R仪器对流感病毒检测效果.方法:选择2019年6月～2020年6月本中心采集的流感病毒咽拭子及血液样本各116份,根据检测方法将其分为三个不同的组别,分别用实时荧光定量P C R仪、普通PCR仪、酶标仪进行检测、最终采用病毒分离培养法进行验证.结果:本次实验研究结果显示,使用实时荧光定量P...     

罗式荧光定量lightcycler PCR仪检修

我院购买的罗式荧光定量lightcycler PCR仪至今已三年多了,该仪器具有检测速度快,检测线性范围宽等特点.     

晶芯@RT-Cycler636实时荧光定量PCR仪

仪器简介：博奥生物有限公司暨生物芯片北京国家工程研究中心自主研发的晶芯@RT-Cycler636实时荧光定量PCR仪是致力于生命科学研究和分子诊断应用领域的新型产品。它采用离心式实时荧光检测方式，通过热循环PCR对特异性的靶基因进行扩增并定量。该仪器具有适用范围广，准确性高，体积小巧，操作简便等特点。     

荧光定量PCR仪的边缘效应与实验误差分析

目的:探讨荧光定量PCR分析仪边缘效应及实验误差的原因.方法:通过比较部分国外知名品牌荧光定量PCR仪的光路系统及加热模块设计原理,分析边缘效应及实验误差产生的原因.结果:传统荧光定量PCR仪光路设计缺陷和加热模块的孔间温度均一性不足会导致边缘效应和实验误差,是影响荧光定量PCR结果重复性的重要原因.结论:了解不同品牌荧光定量PCR仪的检测原理,选购性能优良的荧光定量PCR仪,尽量避免实验误差,以保证实验结果的准确性.     

荧光定量PCR仪(ABI7500)操作规程及日常维护

介绍了荧光定量PCR仪(ABI7500)操作规程,总结了其日常维护和注意事项,为其使用提供指导.     

实时荧光定量 PCR 仪原理与技术关键点分析

本文主要阐述实时荧光定量PCR技术的基本构成、测量原理,以及实时荧光定量PCR仪的部件构成、质量控制和影响其检测精密度的因素.     

荧光定量PCR在孕妇HCMV感染检测中的应用研究

目的使用荧光定量PCR检测孕妇尿液中HCMV-DNA,提高该人群中病毒检出率。方法对广西南宁和桂林两地共600名孕妇进行尿液HCMV-DNA检测,同时进行血清HCMV-IgG和HCMV-IgM检测,对比以上两种方法在产前诊断中的应用价值。结果尿液HCMV-DNA阳性率为8.50%(51/600),血清HCMV-IgG阳性率为98.8%(593/600),HCMV-IgM阳性率为1.83%(11/600)。结论相对于传统的酶联免疫检测法,荧光定量PCR可明显提高孕妇病毒检出率,并且提供定量数据,同时使用荧光定量PCR和ELISA将为临床提供更加准确的实验室诊断结果。     

三种PCR仪的特异性及灵敏度评价

目的：评价ABI7000、7300和7500型PCR仪的特异性及灵敏度。方法：随机双盲对照试验，选择HBsAg、HBVDNA阳性和阴性血清各30例，其中，阳性和阴性组各选3例重复检测。结果：阳性组30例均为阳性：阴性组30例均为阴性：但HBVDNA含量在各型PCR仪检测值有一定的差异，其相关系数分别为：ABI7000-ABI7300为0．89；ABI7000-ABI7500为0．89：ABI7300-ABI7500为0，98；而以ABI7300型检测值较高，其次为ABI7000型，最低为ABI7500型，其中．在低拷贝（10^4copies／ml）情况下，三型PCR仪结果无显著差异（p〉0．05），但在中拷贝（10^6copies／ml）、高拷贝（10^8copies／ml）情况下，三型PCR仪的结果均有显著性差异（p〈0．05）。结论：三型实时PCR仪间的检测值有一定的差异，提示不同型号仪器的检测值不能相互取代．因此，对于同一患者的HBVDNA定量监测及对抗病毒治疗疗效评价时，必须用同一型号的检测仪器（系统）。     

综合量化考评在医院科室考评中的作用与体会

年度综合量化考评是医院了解和掌握科室发展动态的重要方式。就如何有效运用考评办法中所涵盖的两大项指标（即综合指标和全院推荐）进行了探讨,以便更好地推进医院各项工作。     

医院中层干部量化考核实践

为了全面、真实地反映医院干部的职责履行情况,我院制定出中层干部量化考核指标。通过客观、规范的考核,营造良性竞争环境,提高了干部的工作效率和执行力。     

改良早期预警评分应用于急诊患者病情定量评估的研究

目的：探讨改良早期预警评分（MEWS）应用于急诊患者病情定量评估的疗效。方法：选取2010年1月－2012年12月本院收治的100例急诊患者,按护理方式的不同分为干预组和对照组。对照组50例采取常规护理措施,干预组50例采取改良早期预警分层护理干预措施。比较两组患者意外事件发生率的差异,并评价患者对护理满意度的情况。结果：MEWS评分在4分以下者30例,其经治疗后均好转出院或进行专科治疗,仅1例（3．3％）有动态病情变化,无死亡;MEWS评分在5～8分者12例,其中3例（25．0％）有动态病情变化,有1例（8．3％）出现死亡;MEWS评分大于或等于9分者为8例,其中有7例（87．5％）出现死亡。干预组意外事件发生率为10．0％,对照组为32．0％,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。干预组护理总满意率为96．0％,对照组为80．0％,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：改良早期预警评分有利于对急诊患者病情分层化,对不同病情程度进行针对性的护理干预措施,对危重患者进行优先治疗和护理。同时,改良早期预警评分有利于减少意外事件发生率,提高患者对护理满意度,促进患者疾病康复,增加其治疗依从性,值得临床选择。     

SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测西尼罗病毒

目的建立快速、敏感和特异的检测西尼罗病毒的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR法，用于西尼罗病毒（WNV）疾病的早期诊断。方法采用RT—PCR扩增WNV基因片段，将其克隆至T载体，重组质粒测序并进行同源性分析；阳性质粒用于替代WNV，以阳性质粒为模板，建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法，并进行敏感性和特异性检测。结果经测序证实扩增片段属于WNV，所建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR法可检测到10拷贝的西尼罗病毒RNA，而对其他黄病毒科成员日本脑炎病毒及登革热病毒的检测则为阴性，表明该方法特异。结论SYBRGreenⅠ荧光定量PCR简便快速，具有较高的敏感性和特异性，可以成为一种早期检测西尼罗病毒的新方法。     

广东省部分城市餐饮业推行食品卫生量化分级制度综合成效评价

目的：通过广东省部分城市在餐饮业和学生集体食堂中推行食品卫生监督质量化分极管理制度的区域性效果评价，了解我省在管饮业和食堂推行该制度取得的综合成效和检验所建立指标体系的可操作性及有效性，方法：利用建立的综合成效评价模型设计调查表格，随机抽取广东省部分城市进行量化分级管理实施效果的调研，通过统计分析确定各项指标的改善程度及综合得分，并进行成效比较和对评价指标体系进行外部信度和教度的检验。结果：调研的三市在改善食品卫生水平、科学监督管理和引导消费方面均取得一定的成效，特别是改善食品卫生水平成效显著，又以餐饮具消毒，环境卫生，卫生管理等改善程度最大；通过各项指标综合得分比较，珠海市、韶关市的学校集体食堂改善食品卫生水平程度显著高于餐饮单位，而惠州在两类单位中相近；珠海、韶关、惠州总体评价得分分别为77．7、77．9、81．8。结论：三市综合成效相近，接近显著水平，惠州市稍高，总体与实际情况相一致，说明该制度确实是一种科学有效的管理模式，同时也证明了成效评价指标体系具有一定的信度和效度。     

使用环介导等温扩增技术检测炭疽芽孢杆菌及其定量检测的研究

目的建立一种适合公共卫生机构现场使用的环介导等温扩增（LAMP）技术检测炭疽芽孢杆菌的方法。方法根据LAMP方法的原理,建立LAMP以及荧光定量LAMP检测方法,对方法的特异性、灵敏度、重复性及模板浓度与反应时间之间的线性关系进行评估。结果LAMP检测可在1 h内完成,检出限为103拷贝/反应,灵敏度比经典PCR高10倍,与其他杆菌群细菌无交叉反应,平均试验间变异系数小于5%。反应时间与模板浓度有良好的线性关系（R2=0.9891）。结论该方法快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点,适合基层医疗卫生机构和现场查验机构的广泛应用。     

三维度绩效考核实施效果评价

目的建立三维度考核方法并对实施效果进行评价。方法 通过实施前后的对照研究,从工作量、均次费用及成本等3个方面进行全面评价。结果工作量增加(门急诊人次、出院人次、手术人次),成本得到节约,均次费用降低。结论建立量化三维度绩效考核方法,可以有效提高职工积极性,促进医院发展。     

荧光定量PCR检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒 DNA

目的探讨定量检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)的临床意义.方法采用荧光定量PCR检测PBMC及血清中HBV-DNA含量.结果 49例慢性乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA阳性率分别为44.9%(22/49),51.0%(25/49),两者阳性率无统计学意义的差异(P＞0.05),具有一致性;血清HBV-DNA高水平组PBMC的HBV-DNA含量与低水平组比较,两者有统计学意义差异(P＜0.01);血清HBV- DNA高水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(100%)与血清低水平组PBMC的HBV-DNA阳性率(42.9%)比较,两者有统计学意义的差异(P＜0.05);在24例血清HBV-DNA阴性患者中,发现5例PBMC HBV-DNA阳性.结论 PBMC的HBV-DNA检测可反映病毒在体内的复制程度,是对慢乙肝患者血清HBV-DNA检测有意义的补充,有助于临床上对慢乙肝患者血清病毒复制状态的了解及指导治疗用药.     

口腔牙菌斑和胃液幽门螺杆菌荧光抗体检测方法的评价

目的寻求一种简便、准确的非创伤性检测方法检测幽门螺杆菌(Hp)感染。方法应用荧光抗体方法、细菌培养、尿素酶试验、Hp诊断卡4种方法对62例胃、十二指肠疾病患者胃液、口腔牙菌斑进行Hp检测,胃液采集采用胶囊采样法。结果4种方法胃液Hp检出率分别为85.5%、9.7%、61.3%、56.5%;口腔牙菌斑中Hp检出率分别为88.7%、25.8%、69.4%、90.3%。结论应用荧光抗体结合胶囊采样法检测胃液Hp,是一种无痛性非创伤性手段,其特异性强,灵敏度高,值得临床应用。     

三种检测泌尿生殖道沙眼衣原体方法的比较

目的　比较三种泌尿生殖道沙眼衣原体实验室检测方法。　方法　用单克隆抗体免疫荧光法 (IFA)、细胞培养法 (CC)和聚合酶链法 (PCR)平行检测 10 7例非淋泌尿生殖道炎症患者男性尿道或女性宫颈上皮细胞 ,比较三种方法的阳性检出率、敏感性、特异性和试验效率等。　结果　 10 7例标本经 IFA、CC、PCR检测 ,分别有 16 .8%、19.6 %、2 0 .6 %阳性 ;以细胞培养法结果为标准 ,IFA和 PCR的敏感性分别为 81.0 %和 10 0 % ;特异性均为 98.8% ;试验效率分别为 95 .3%和 99.1%。三种方法平行检测相同标本结果无差异。　结论　这三种方法均可应用于沙眼衣原体的诊断。