两种生长因子对人牙周膜成纤维细胞在钛金属表面附着和生长的影响

目的：研究两种生长因子对牙周膜成纤维细胞在然金属表面附着和生长的影响。方法：将纯钛、钛75试件入在12孔培养板内，取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞（PDLF）接种在试件表面，分别在接种后4h、12h、24h、72h进行贴壁细胞地数。结果：接种后4h、12h、24h、72h、bFGF组纯钛、钛75表面细胞附着数与空白对照组的差异均有显著性（P＜0．05），rhBMP－2组纯钛、然75表面细胞附着数在初期（24h）与空白对组无显著性差异（P＞0．05）。72h时与空白对照组差异有显著性（P＜0．05），表明bFGF促进细胞附着和生长作用显著，而rhBMP－2促进细胞生长作用较促附着作用明显。结果：PDLF在钛金属表面的附着和生长可被生长因子所增强，但不同的生长因子对细胞附着和生长的生物学效应不尽相同。     

人牙周膜成纤维细胞在纯钛表面附着的电镜观察

目的：研究人牙周膜成纤维细胞(PDLF)在纯钛金属表面的结合形式和超微结构。方法：将纯钛试件放在12孔培养板内，取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞接种在试件表面，培养72h后取出，原位包埋法制作透射电镜标本，透射电镜观察。结果：人牙周膜成纤维细胞在纯钛表面附着形式不同于上皮细胞在金属表面的附着形式，细胞与金属结合界面中未观察到典型半桥粒结构。人牙周膜成纤维细胞胞浆中，细胞器发达，富含与蛋白质合成、代谢及增殖等生物学功能有关的细胞超微结构，如粗面内质网、线粒体、核糖体、细胞核等。结论：人牙周膜成纤维细胞在钛金属表面的附着形式，不同于上皮细胞的附着形式，表现为蛋白合成旺盛，可能为细胞直接附着，其具体附着形式还待进一步研究。     

新型钛铌锆锡合金表面成骨细胞附着研究

目的：研究新型钛铌锆锡合金（Ti-24Nb-4Zr-7．9Sn）的表面能大小以及对成骨细胞在其表面的附着及骨架蛋白actin、vinculin表达的影响。方法：以纯钛为对照，采用表面接触角测量的方法对合金的表面能进行研究。将原代培养的成骨细胞接种到合金表面，观察第30min，60min，120min细胞在合金表面的附着情况，采用荧光显微镜观察骨架蛋白actin、vinculin在合金表面的表达。结果：表面能测试结果显示合金的表面能（67．40mJ／m^2）略高于纯钛的表面能（62．43mJ／m^2）；成骨细胞在合金表面的附着情况与对照组间无显著性差异，骨架蛋白actin、vinculin染色显示细胞在合金表面伸展良好。结论：成骨细胞在新型钛铌锆锡合金表面附着良好，其和成骨细胞在纯钛表面的附着未见显著性差异。     

人血清白蛋白对在纯钛表面粘附的人牙龈上皮细胞形态的影响

目的：探讨人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)对在纯钛表面粘附的人牙龈上皮细胞(human gingival cpithelial cclls,HGE)形态的影响。方法：HGE原代培养3—5代细胞接种于纯钛试件表面，部分纯钛试件用50g/L HSA预孵育，扫描电镜观察HGE的形态学特征。结果 ：细胞接种后第4h、12h、24h，HSA预孵育组及对照组的纯钛试件表面培养的HGE，细胞形态没有显著性差异。结论：人血清白蛋白对粘附在纯钛表面的人牙龈上皮细胞的早期形态学特征无显著影响。     

MinTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附影响的比较研究

目的：以胎牛血清（Fetal bovine serum,FBS）涂层为标准对照,研究minTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附的影响。方法：对商用纯钛进行minTBP-1-PRGDN双靶向融合多肽涂层,以无涂层的钛表面及胎牛血清涂层的钛表面分别作为空白对照和阳性对照,比较不同涂层处理对成骨细胞附着及伸展的影响。结果：成骨细胞粘附1h后,minTBP-1-PRGDN融合肽涂层的钛片上的细胞附着数量最多,FBS涂层表面次之,无涂层的钛片表面细胞数量最少、且与minTBP-1-PRGDN组比较有统计学差异（P〈0.05）;经形态计量学分析：FBS组细胞伸展面积最大,minTBP-1-PRGDN组次之,无涂层组细胞伸展最小。结论：minTBP-1-PRGDN融合肽涂层能提高成骨细胞在钛表面的附着和伸展能力。     

骨髓基质细胞在钙磷涂层纯钛表面早期粘附的实验研究

目的：探讨表面经仿生法涂层纯钛片对骨髓基质细胞粘附特性的影响，方法：取三代兔骨髓基质细胞，接种于经仿生法钙磷涂层纯钛片表面和商用纯钛片表面，MTT法比较接种为0．5h,1h,2h,4h各时间点细胞在不同表面的粘附情况，并以荧光染色揭示细胞在不同钛片表面上的形态学差异。结果：荧光染色研究结果发现，2小时时粘附于涂层钛片的细胞体积更大，更不规则的多角形，多个伪足向四周伸展，而且粘附于仿生法钙磷涂层纯钛片表面的相对细胞数从1小时开始显著高于商用纯钛片表面相对细胞数，2小时点为细胞粘附的最高峰，结论：仿生法钙磷涂层能促进细胞早期粘附，是研究种植体表面改性的一种值得进一步探讨的实验室方法。     

人血清白蛋白对人牙龈上皮细胞在纯钛表面粘附作用的影响

目的：探讨人血清白蛋白（human serum albumin，HAS）对人牙龈上皮细胞（human gingival epith-elial cells，HE）在种植体材料表面粘附作用的影响。方法：HE原代培养，免疫荧光染色法标记细胞，观察人牙龈上皮细胞在人血清白蛋白预孵育及普通纯钛试件表面的粘附。结果：使用角朊细胞无血清培养基和分离酶成功地培养出HE；HE经广谱细胞角蛋白单抗免疫组化染色为阳性；浓度为50mg/ml的HAS预孵充于纯钛表面，4h时处理组粘附的HE的数量显著少于对照组，12、24h处理组与对照组相比，粘附的细胞数量无显著性差异。结论：HAS预孵充纯钛表面，对HE的粘附在早期产生抑制作用。     

牙周韧带细胞及成骨样细胞在纯钛表面附着的形态学比较

目的：从形态学上比较牙周韧带细胞及成骨样细胞在纯钛表面的附着及增殖情况。方法：在相同的培养条件下，商用纯钛表面分别接种牙周韧带细胞和成骨样细胞，采用倒置显微镜及扫描电镜进行形态学观察。结果：两种细胞在纯钛表面均附着、生长良好，7天后细胞即连接成片，并在钛片边缘存在“细胞聚集”现象，呈现复层生长。扫描电镜显示两种细胞附着早期呈“伪足”样伸展，附着后期形成大量的细胞外基质成份。两种细胞在细胞形态、“伪足”形态及钛片周边聚集形态上均存在明显差异。结论：牙周韧带细胞和成骨样细胞与纯钛均有良好的生物相容性，在体外培养过程中，呈现不同细胞形态、“伪足”形态及钛片周边聚集形态，提示两种细胞在分化过程中可能存在差异。     

放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响

目的：观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响。方法：应用细胞计数法和扫描电镜观察法。结果：100mg/L组对人牙周膜成纤维细胞在根面附着有明显抑制作用,表现为正常牙根片上附着细胞数明显少于对照组（P＜0．05）;扫描电镜显示细胞生长数量减少,细胞突起伸展不充分。结论：此物质可抑制人牙周膜成纤维细胞在牙根面上的附着。     

2种金属表面处理剂对铸造纯钛试件与树脂黏固剂粘接强度的影响

目的研究2种金属表面处理剂对铸造纯钛试件与树脂黏固剂粘接强度的影响。方法用牙科铸钛的方法制作直径分别为4 mm和5 mm的钛棒,并切割成长度为3 mm的小钛片。将2种规格的钛片配对,粘接面用碳化硅砂纸在流水下打磨抛光,使之呈均匀一致的平面,50 μm Al2O3喷砂。试件随机分成3组进行表面处理：第1组不使用金属表面处理剂,第2组使用Alloy Primer进行表面处理,第3组使用V-Primer进行表面处理。然后每组再分为3个小组,分别使用Super-Bond C&B、Panavia F、Rely X Unicem 3种黏固剂粘接。黏固剂固化1 h后,经37 ℃恒温水浴24 h以及5 000次冷热循环后,测试粘接强度,并观察铸造纯钛的表面形态和粘接面的破坏形式。结果AlloyPrimer、Super-Bond C&B的配伍组合与铸造纯钛获得的粘接强度在冷热循环前、后分别为（31.23±4.86）、（34.08±3.36）MPa,高于其他表面处理剂与树脂黏固剂配伍组合获得的粘接强度（P<0.05）。结论金属表面处理剂和树脂黏固剂的组合不同会导致粘接强度不同,经Alloy Primer处理的铸造纯钛试件与Super-Bond C&B的粘接强度最高。     

The effect of titanium surface roughness on the adhesion of monocytes and their secretion of TNF-alpha and PGE2

Dental implant surfaces are important in determining the tissue/surface interaction. One of the first cells to adhere to the implant surface is the monocyte. This study examines the effect of surface roughness on monocyte adhesion and cytokine secretion. Monocyte adherence to titanium discs of 4 different degrees of surface roughness and plastic surfaces was assayed. Blood mononuclear cells were incubated for 1.5 h in 16 mm culture wells into which titanium discs had been placed. Non-adherent cells were washed off and the numbers of remaining adherent monocyte determined by DNA quantification. TNF-alpha and PGE2 secretion in media from overnight cultures of attached monocytes stimulated with lipopolysaccharide (LPS) was quantified using ELISA and RIA, respectively. Monocyte adherence to rough titanium surfaces was greater than to turned titanium surfaces, while the lowest adherence was to the plastic surface. No significant differences in adherence to 250, 75 or 25 microm blasted surfaces could be detected. The number of adherent monocytes increased with time, with maximum adhesion after 2 h of incubation. Incubation of monocytes adherent to titanium surfaces resulted in a decrease of less than 30% in their numbers over 7 days, whereas cells attached to plastic surfaces decreased to non-detectable numbers after 48 h. Porphyromonas gingivalis LPS stimulation upregulated TNF-alpha and PGE2 secretion into the media. The LPS-induced TNF-alpha and PGE2 secretion was independent of the titanium surface roughness, however the lowest amounts of TNF-alpha and PGE2 were secreted from cells attached to plastic surfaces. The results of this study indicate that the number of monocytes attached to blasted titanium surfaces is significantly greater than to machined titanium surfaces. PGE2 and TNF-alpha secretion is less influenced by titanium surface roughness.     

不同钛表面对血管内皮细胞早期粘附与增殖活性的影响

目的:观察血管内皮细胞在两种纯钛表面(光滑表面和粗糙表面)上的粘附情况.方法:医用纯钛片预备成光滑表面和粗糙表面两组,将猪血管内皮细胞接种于两组钛片表面,分别培养24、48和72 h后,通过吖啶橙染色和MTT活性测定,观察细胞在两种不同表面上的粘附和增殖活性.结果:荧光显微镜显示两组钛片上的内皮细胞均随着培养时间延长而增多,24 h时粗糙表面钛片上粘附的内皮细胞明显多于光滑表面组,而且细胞形态伸展好、成梭形.MTT结果显示粗糙表面组24 h和48 h的0D490值显著高于光滑表面组,而在培养72 h时,两组间没有统计学差异.结论:纯钛经双酸蚀处理形成的粗糙表面较其光滑表面更有利于血管内皮细胞的早期粘附,并促进其增殖.     

The effects of scaling titanium implant surfaces with metal and plastic instruments on cell attachment

This study examined the ability of tissue culture fibroblasts to attach and colonize on the surface of pure titanium dental implants following instrumentation of the implant surface with curettes of dissimilar composition. Pure titanium dental implants were scaled with a plastic, titanium-alloy, or stainless steel curette and then immersed in a cell suspension of 3T3 fibroblasts. Counts of attached cells were made at 24 and 72 hours; the implants were then processed for scanning electron microscopy (SEM). At 24 hours, only surfaces scaled with a stainless steel curette showed a significant reduction in number of attached cells relative to untreated control surfaces. At 72 hours, both stainless steel and titanium-alloy curette instrumented surfaces showed significantly fewer attached cells than untreated control surfaces, with the greatest reduction in cell attachment observed on the stainless steel curette instrumented surfaces. SEM observations showed that fibroblasts on stainless steel instrumented surfaces tended to show a somewhat rounded morphology and a relatively reduced degree of spreading: while fibroblasts on untreated control, plastic, or titanium-alloy instrumented surfaces showed a well-spread, polygonal morphology, more typical of fibroblasts in favorable culture conditions. To the extent that such observations of cell attachment and morphology are indicative of in vivo biocompatibility, these findings could have clinical implications for the proper maintenance of titanium dental implants.     

流体切应力下不同形貌钛表面成骨细胞的扫描电镜观察

目的研究流体切应力下不同钛表面成骨细胞的形态变化规律。方法采用不同处理方法将纯钛钛片分为机械打磨（PT）组、喷砂（SB）组、喷砂-酸碱（SB-AB）组,在各组钛片表面培养成骨细胞,施以14 dynes·cm-2的流体切应力,扫描电镜下观察0.5、4、7.5 h时各组钛片表面成骨细胞的形态变化。结果切应力作用0.5 h,各组细胞形态均未发生明显变化。作用7.5 h,各组细胞大量脱落,很少有可见的细胞。作用4 h,各组成骨细胞形态发生明显变化,PT组细胞不同程度的被拉长并沿流体方向排列,SB-AB组细胞由悬空生长的长梭形变为伸出很多细小突触附着在二级孔隙中的多角形,紧密贴附于钛表面。SB组与SB-AB组类似,但部分细胞还表现出顺流体方向被拉长同时伸出细长的突触附着于孔洞边缘隆起处。结论在适当生理切应力的作用下,细胞的形态变化与切应力作用时间和材料表面形貌关系密切。     

等离子渗氮后纯钛的耐磨性能的研究

目的:模拟口腔环境,研究在牙刷磨耗机的磨擦下,等离子渗氮对纯钛的耐磨性能的影响。方法:铸造纯钛试件24片,随机分为0.2%NaF渗氮组、0.2%NaF未渗氮组、人工唾液渗氮组、人工唾液未渗氮组,在牙刷磨耗机上刷洗75 000次,对比刷洗前后的粗糙度Ra增加值及色彩变化,并在扫描电镜下观察试件表面形貌。结果:与未渗氮组比较,0.2%NaF等离子渗氮后纯钛的表面粗糙度Ra增加值及色彩变化差异均有显著性(P<0.05);不同混合液比较,0.2%NaF溶液对试件的耐磨性能影响较人工唾液的影响大(P<0.05)。SEM观察表明:在0.2%NaF溶液中刷洗后未渗氮组纯钛试件表面磨耗现象严重。结论:等离子渗氮后纯钛的耐磨性能得到提高;含氟溶液能降低纯钛表面的耐磨性能。     

纳米银羟基磷灰石复合涂层的生物安全性研究

目的 研究纳米银羟基磷灰石的细胞毒性。方法 采用能快速、准确、敏感地评价细胞增殖率和细胞毒性的MTT比色法,以纳米羟基磷灰石为对照组,纳米银羟基磷灰石为实验组,在材料浸提液中,分别检测人牙周膜成纤维样细胞的相对增殖率。另观察细胞在扫描电镜中的形态,从而分析比较涂层表面对细胞的毒性。结果 与纳米羟基磷灰石相比,纳米银羟基磷灰石涂层中的纳米银粒子直径在200～400nm时体外细胞培养显示表现出较高的细胞增殖率,细胞毒性趋于0级,显示其具有良好的生物活性。结论 纳米银羟基磷灰石涂层无细胞毒性。     

含银羟基磷灰石种植体的细胞毒性研究

目的：在钛种植体表面构筑羟基磷灰石钠米银涂层并进行生物学评价。方法：采用恒电位电化学法在纯钛表面构建纳米级羟基磷灰石／纳米银（HAp／Nanosilver）涂层。采用扫描电镜（SEM），检测手段对涂层进行理化性能的表征。考察了涂层的结构组分和表面的微观形貌，而后将人牙周膜成纤维样细胞培养于涂层表面，采用细胞毒性评价及其形态观察，分析比较不同表面涂层对牙周膜成纤维样细胞粘附率及增殖率的影响。结果：羟基磷灰石纳米银涂层体外细胞培养显示其具有良好的生物活性。结论：本实验构筑的涂层具有良好的生物相容性和细胞粘附性，应用前景广阔。     

紫外线照射对两种钛种植体表面形貌体外炎症反应的影响

目的:紫外线照射的抛光试件和TiO2纳米管试件对巨噬细胞增殖和细胞因子分泌的影响.方法:抛光组和纳米管组试件避光保存后,各取一半经紫外线照射获得抛光+紫外线组和纳米管+紫外线组试件.测量各组试件表面接触角;在各组试件上培养RAW264.7巨噬细胞,另设空白对照组.检测培养4、24和72h时巨噬细胞黏附和增殖情况;液相芯...