体外循环中心肌磷脂酶A2的变化及其对心肌细胞膜磷脂的影响

在动物模型上观察体外循环（CPB）缺血再灌注过程中心肌细胞磷脂酶A2（PLA2）的变化规律及其对细胞膜磷脂组份的影响,并评价两种心肌保护方法对心肌细胞膜的保护效果。结果发现,心肌细胞膜总磷脂、卵磷脂、脑磷脂出现降解前先有PLA2的激活;主动脉阻断60min期间,各心肌保护组PLA2I活性、总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量无明显变化;再灌注早期,PLA2活性迅速升高,总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量则迅速减少,均于再灌注30～60min后出现程度不一的恢复;CPB期间,常温体外循环温血停搏液持续灌注PLA2活性、总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量变化幅度较小。提示CPB中心肌细胞膜的损伤可能是PLA2激活的结果,常温体外循环温血停搏液持续灌注对心肌细胞膜的保护效果较佳,但仍需进一步改进。     

糖尿病对大鼠心肌缺血预处理保护作用的影响

目的 探讨糖尿病对缺血预适应(IPC)在大鼠缺血再灌注心肌保护作用中的影响.方法 取糖尿病SD大鼠及非糖尿病SD大鼠各30只,分为非糖尿病对照组(A组)、非糖尿病缺血再灌注组(B组)、非糖尿病IPC组(C组)、糖尿病对照组(D组)、糖尿病缺血再灌注组(E组)、糖尿病IPC组(F组),每组10只.动物处死后建立离体心脏Langendorff灌注模型.对照组采用全心灌流90min,余不做任何处理;缺血再灌注组采用心脏平衡灌流30min后,缺血30min,再复灌30min;IPC组采用心脏平衡灌流10min,经2次缺血5min再灌注5rnin后,缺血30min,再复灌30min.比较各组复灌30min后心排血量(CO)、左室发展压(LVDP)、左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)的恢复率,检测缺血前及复灌30rain后冠脉流出液中肌酸激酶(CK)的活性和心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,并计算心肌含水率.结果 与非糖尿病缺血再灌注组比较,非糖尿病IPC组CK活性、MDA含量、心肌含水率均明显降低,SOD含量明显增加,CO、LVDP、 dp/dtmax、-dp/dtmax恢复率明显增加(P<0.05).而糖尿病IFC组与糖尿病缺血再灌注组比较上述变化均不明显(P>0.05).结论 糖尿病可抑制IPC对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用.     

缺血预处理对肾脏缺血/再灌注时P-selectin表达的影响

目的 :观察缺血预处理对肾脏缺血再灌注的保护作用及对P -selectin表达的影响。方法 :建立大鼠肾脏缺血模型 ,随机分为假手术组 (S组 ) ,缺血再灌注组 (IR组 ) ,预处理组 (IPC组 ) ,于再灌注 2 4h检测大鼠血肌酐 (Scr)、尿素氮 (BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD) ,光镜下观察肾组织学改变 ,免疫组化检查肾细胞P -选择素 (P -selectin)表达。结果 :①血Scr、BUN、MDA :IPC组明显低于IR组 (P <0 .0 5 ) ;②血SOD :IPC组明显高于IR组 (P <0 .0 5 ) ;③形态学 :IR组可见大量肾小管坏死 ,超微结构不可逆性改变 ,IPC组肾小管坏死较少 ,超微结构可逆性改变 ;④P -selectin :IPC组肾脏P -selectin表达水平低于IR组。结论 :缺血预处理减轻肾脏缺血 /再灌注损害的机制可能是降低P -selectin在肾脏的表达。     

DADLE对体外循环后猪肺再灌注损伤的影响

目的探讨δ-阿片受体激动剂DADLE对体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)后肺缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法选取雄性幼猪28只,随机分为四组,即假手术组(S组),体外循环模型组(C组),DADLE预处理组(D组),ATP敏感钾通道阻断剂Glibenclamide同时伍用DADLE预处理组(G组),制作CPB肺缺血再灌注模型,观察气道峰压(peak inspiratory pressure,PIP)、动脉血氧分压(PaO2)、血清中MDA含量、肺光镜下形态学改变。结果CPB前各组间PaO2,PIP,MDA差异无显著意义(P>0.05),再灌注后C组和G组PaO2较CPB前和S组明显降低,PIP较CPB前和S组升高,与D组和S组相比差异有显著意义(P<0.05)。C组与G组再灌注后MDA的含量与CPB前、S组和D组相比明显升高,差异有显著意义(P<0.05),D组再灌注后MDA的升高明显低于C组、G组(P<0.05),虽高于S组但差异无显著意义(P>0.05)。光镜下C组、G组、D组肺组织再灌注后形态学改变较S组明显,但D组形态学改变明显轻于C组、G组。结论DADLE具有减轻CPB后肺再灌注损伤和保护作用。这种作用能部分被Glibenclamide阻断。     

缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤时黏附分子表达的影响

目的 探讨缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时黏附分子ICAM-1表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、缺血再灌注(IR)组和缺血预处理(IPC+IR)组,每组10只.采用流式细胞技术、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting等观察肢体缺血再灌注后肺损伤发生过程中,血液中CD18阳性的多形核白细胞(PMN)百分率,以及肺组织ICAM-1在mRNA和蛋白水平的变化;测定肺组织湿/干重值(W/D);检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)含量;观察肺组织形态学的改变及缺血预适应对上述指标的影响.结果 大鼠肢体缺血再灌注后W/D及CD18阳性细胞数均明显增加,肺组织MPO活性增加,ICAM-1表达明显升高,预适应可以明显抑制这些变化,从而对肺起一定保护作用.结论 缺血预适应对肢体缺血再灌注后肺损伤的保护作用与下调黏附分子表达有关.     

SOD对高原犬体外循环心肌再灌注损伤的保护作用

目的：探讨SOD在高原地区体外循环中的心肌保护作用。方法：将20只杂种犬随机分成A组（对照组，n=10）和B组（试验组n=10)，模拟临床浅低温体外循环，B组停博液中加入SOD6万U/100ml，分别于CPB前、30min,60min及CPB后2h取样测定心肌组织中的MDA，冠状静脉血中CPK浓度以及心肌组织的病理改变，比较两组的差异。结果：A组心肌组织中MDA含量在CPB60min及CPB后2h明显高于B组；A组冠状静脉血中CPK浓度在CPB60min及CPB后2h明显高于B组；CPB后A组心肌发生了更明显的损伤性病理改变。结论：SOD具有减轻高原体外循环心肌再灌注损伤的作用。     

体外循环中猫心肌细胞膜微粘度的变化

应用荧光偏振法观察中度代温体外循环冷晶体停搏液间断顺灌和冷血停搏液持续顺灌组,常温ＣＰＢ温血停搏液持续顺灌组猫心肌细胞膜微粘度η的变化。结果表明,主动脉阻断期间和再灌注早期,各组η均显著增大,心肌细胞膜流动性显著减小;其中Ｂ组改变最大,Ｄ组最小且再灌注后期恢复最快。     

腺苷后适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的初步探讨腺苷后适应对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用及机制。方法48只健康雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IPTC组)及腺苷后适应组(ADOP组),每组12只,建立大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型。实验终点测定心肌梗死面积(TTC染色),心肌核因子-κB(NF-κB)mRNA的表达水平(RT-PCR),同时观察心肌组织中白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化,并行心肌组织病理学检查。结果Sham组心肌组织形态改变不明显,IR组心肌损伤较重,IPTC组及ADOP组中心肌组织病理学损伤较IR组明显减轻。与IR组比较,ADOP组的心肌梗死面积、NF-κBmRNA的表达水平及IL-6、MDA含量明显降低(P<0.01),而SOD含量则显著升高(P<0.01);而ADOP组与IPTC组相比,除NF-κBmRNA的表达及IL-6的分泌稍许降低(P<0.05)外,其他均无统计学差异(P>0.05)。结论腺苷后适应可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成及NF-κB活化所诱导的早期炎症反应,增强心肌抗氧化能力,从而发挥保护效应。     

磺脲类药物受体亚型在缺血及缺血预适应大鼠心肌中的定位与分布研究

目的　探讨缺血再灌注及缺血预适应 (IPC)状态心肌磺脲类药物受体 (SUR)亚型SUR2的分布及表达特征。方法　建立大鼠心肌在体IPC模型及缺血再灌注模型 ,采用体外受体放射自显影技术检测正常对照、缺血再灌注及IPC时大鼠心肌中SUR2的定位与分布模式 ,并用图像分析仪对其表达密度作半定量分析。结果　①与对照区相比 ,缺血再灌注缺血区相对透光度增高 ,其平均增高幅度为 (4 1.0± 9.3) % ;②IPC区与对照区相比相对透光度也增高 ,其平均增高幅度为 (17 1±2 3) % ;③IPC组相对透光度增高幅度小于缺血再灌注组 (χ2 =5 .2 73,P <0 .0 5 )。结论　缺血再灌注及IPC时SUR2表达密度均降低 ,但后者降低幅度小于前者     

用99Tcm-MIBI评价腺苷预适应对缺血心肌细胞的保护作用

目的 探讨99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)评价腺苷预适应对心肌缺血/再灌注(L/R)损伤的保护作用及其机制.方法 应用Langendorff装置建立离体兔心脏I/R模型,18只离体灌注兔心脏随机分成I/R组6只、腺苷预适应+I/R组(AD)6只、缺血预适应+I/R组(IPC)6只.用含99Tcm-MIBI(55.5 MBq)的Krebs-Henseleit(KH)液灌注40 min,测定99Tcm-MIBI摄取相和洗脱相心肌的放射性变化.观察左心室血流动力学变化、心肌细胞肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的变化、心肌梗死面积,用透射电镜观察心肌受损程度.采用SPSS 11.5软件和Excel软件对数据进一行分析.结果 AD和IPC组MIBI摄取率和滞留分数明显高于I/R组(t=2.614～7.730,P均＜0.05).而AD和IPC组摄取率和滞留分数差异均无统计学意义(t=0.614～2.227,P均＞0.05).左心室功能恢复、心肌CK和LDH漏出量、心肌梗死面积、电镜分析结果均表明,AD和IPC组心肌受损程度较I/R组轻.心肌99Tcm-MIBI放射性与心肌冠状动脉血流量呈明显正相关(r=0.793,P＜0.001);而与梗死心肌/缺血心肌质量百分比呈明显负相关(r=-0.86,P＜0.0001).结论 腺苷预适应与缺血预适应对I/R心肌具有相似的心脏保护效应.心肌99Tcm-MIBI血流动力学变化与心肌活力密切相关,可以作为评价心肌腺苷预适应及其机制的有效指标.     

Evaluating the protective role of ischaemic preconditioning in rat hearts using a stationary small-animal SPECT imager and 99mTc-glucarate

OBJECTIVE: To examine the protective role of ischaemic preconditioning (IPC) in rat hearts using Tc-glucarate (GLA) and a stationary SPECT imager, FastSPECT. METHODS: Twenty-four rats with 30 min myocardial ischaemia and 150 min reperfusion (IR) were studied as follows. The IPC group (n=6) underwent IPC (five cycles of 4 min ligation of the left coronary artery and reflow) before IR. The control group (n=7) was treated by IR without IPC. The SPT group (n=6) was subjected to IPC and an adenosine antagonist, 8-(p-sulfophenyl)-theophylline (SPT). The vehicle group (n=5) received IPC and SPT carrier vehicle. GLA was delivered intravenously 30 min post-reperfusion, and 2-h dynamic cardiac images were acquired by FastSPECT. RESULTS: GLA showed 'hot-spot' accumulation in the ischaemic area-at-risk (IAR) and exhibited lower retention (% 5 min peak) in the IPC and vehicle groups (33.8+/-2.6 vs. 35.7+/-9.2, P>0.05) than in the control and SPT groups (63.1+/-5.3 vs. 54.8+/-4.8, P>0.05). The infarct size (% IAR) was larger in the control and SPT groups (48.2+/-6.3 vs. 41.7+/-6.3, P>0.05) than that in the IPC and vehicle groups (21.0+/-1.9 vs. 19.1+/-4.6, P>0.05). In terms of the ex-vivo IAR-to-normal radioactivity ratio, there was a statistical difference between the control and IPC groups (7.4+/-0.9 vs. 3.0+/-0.4), as well as the SPT and vehicle groups (7.4+/-1.0 vs. 3.4+/-0.5). CONCLUSION: IPC offers cardioprotection and relates to the activation of adenosine receptors in rat hearts. FastSPECT GLA imaging is not only useful in detecting early ischaemia-reperfusion injury, but also valuable in evaluating cardioprotection.     

环磷酸腺苷葡胺对心脏瓣膜置换术患者心肌缺血/再灌注损伤心肌保护作用的研究

目的：研究环磷酸腺苷葡胺（M-cAMP）对体外循环下换瓣手术患者心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法：选择30例在体外循环下行换瓣手术的患者,随机分为M-cAMP组（A组）和对照组（B组）,A组入预充液中经转机进入体内;测定切皮前（T0）、主动脉开放后5min（T1）、术毕（T2）、术后6h（T3）和术后18h（T4）血浆CK-MB、TNF-α、SOD、MDA含量。结果：两组血浆中SOD均明显下降,以对照组更为明显（P〈0.05）,血浆CK-MB、TNF-α、MDA含量较术前上升,以对照组为明显（P〈0.05）。结论：M-cAMP可保护缺血/再灌注损伤心肌SOD活性,减少心肌细胞MDA产生,有效保护心肌功能。     

Kinetic analysis of 99mTc-sestamibi evaluates the protective effects by ischaemic preconditioning on ischaemic myocardium in an isolated rabbit heart

OBJECTIVE: To analyse the kinetic changes of uptake, washout and retention of Tc-sestamibi in order to evaluate the protective effects and possible mechanism of ischaemic preconditioning and adenosine preconditioning on myocardium injured by ischaemia/reperfusion. METHODS: Isolated ischaemia/reperfusion rabbit heart models, as established by Langendorff, were used. Eighteen rabbit hearts perfused in Krebs-Henseleit (KH) buffer were randomly assigned to three groups: ischaemia/reperfusion (I/R, n=6), adenosine preconditioning (AD, n=6), and ischaemic preconditioning (IPC, n=6). Tc-sestamibi (55.5 MBq) in KH was perfused for 40 min and washed out for 40 min. The kinetic changes of Tc-sestamibi within myocardial tissue was monitored during the uptake and washout phases. Cardiac haemodynamic parameters, creatine kinase and lactate dehydrogenase leakage in coronary effluent, and myocardial infarct size were measured to assess myocardial injuries in rabbit hearts. RESULTS: In the early phases of uptake, there were no significantly different uptake rates of Tc-sestamibi between AD (before 20 min), IPC (before 15 min) and I/R myocardium (all P>0.05). Uptake rates of Tc-sestamibi in myocardium of the three groups all tended to increase, with the uptake time increasing. In the late phases of uptake, AD and IPC were significantly higher than I/R (all P<0.05). In the washout phases, the retention fractions of Tc-sestamibi in myocardium of the three groups all showed a descending tendency with washout time increasing. The retention fractions in AD and IPC were all higher than I/R (all P<0.05). There were no statistical differences in uptake rates and retention fractions of Tc-sestamibi between AD and IPC (all P>0.05). Cardiac haemodynamic parameters, creatine kinase and lactate dehydrogenase leakage, and myocardial infarct size demonstrated there is lighter injury in AD and IPC myocardium than in I/R (all P<0.05). The retention of Tc-sestamibi and myocardial infarction weight were significantly negatively correlated (r=-0.8384, P<0.001). CONCLUSION: Adenosine preconditioning has similar myocardial protective effects on ischaemia/reperfusion myocardium as does ischaemic preconditioning. Tc-sestamibi may be a sensitive and reliable measure for evaluating the importance and mechanism of ischaemic preconditioning and adenosine preconditioning.     

川芎对飞机噪声致小鼠心肌酶变化的影响

为观察川芎对飞机噪声暴露后小鼠心肌酶改变的保护作用，将纯种雄性小鼠35只，随机分为3组：对照组、暴露组和川穹 暴露组。噪声暴露前60min，分别给对照组和暴露组用生理盐水灌胃，川芎 暴露组用川芎液灌胃，尔后在强度106dB（A）、主频率4.0kHz的噪声下暴露90min，检测此两组及未经噪声暴露的对照组小鼠血清心肌酶含量。结果：口服川芎的噪声暴露组小鼠血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶和谷草转氨酶含量显著低于服用生理盐水的暴露组和对照组（P＜0．05），后两组间比较无显著性差异（P＞0．05），说明飞机噪声可致小鼠血清心肌酶升高，川芎对抗心肌酶的升高起预防作用。     

心肌毛细血管六胺银染色法及缺血预适应对心肌毛细血管的影响

探讨显示心肌毛细血管的方法及用该法观察缺血预适应（ischemic preconditioning,IP)对毛细血管的影响,制备套扎前降支 脉犬模型,缺血再灌注（ischemia-reperfusion,IR)组予缺血1h,再灌注2h;IP组在缺血与再灌注之前,予缺血和再灌注各5min反复4次, 实验终点取缺血心肌进行六胺银染色显示毛细血管,并定量比较,结果六胺银法染色显示心肌毛细管清晰;IP组缺血心肌毛细血管数、周长和面积密度较IR一增加。认为六胺银法显示心肌毛细血管可靠实用;IP减轻缺血后毛细血管的破坏,提示具有毛细血管保护效应。     

参附注射液对兔心肌缺血再灌注损伤内皮功能的影响

目的观察兔心肌缺血再灌注(I/R)损伤中内皮功能的改变以及参附注射液(SFI)对其的影响和作用机制。方法 21只日本大耳白兔随机分为假手术对照组(A组)、心肌I/R模型组(B组)及心肌I/R SFI治疗组(C组) ,每组7只。检测指标:①检测结扎前、缺血40min、再灌注40min三个时相点血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、一氧化氮代谢产物(NOP)和血浆内皮素(ET)含量;②检测再灌注40min后心肌组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)和丙二醛( MDA)含量;③电镜观察心肌超微结构。结果①B组与A组比较,缺血40min、再灌注40min血清eNOS、NOP明显降低,血浆ET显著增高,后两者呈显著负相关(均P<0·01) ;再灌注40min后心肌组织T-SOD明显降低,MDA明显增高(均P<0·01) ,NOP与T-SOD、ET与MDA均呈显著正相关(P<0·05) ,NOP与MDA、ET与T-SOD均呈显著负相关(P<0·05) ;心肌超微结构发生异常改变。②C组与B组比较,缺血40min、再灌注40min eNOS、NOP水平明显增高(均P<0·01) ;再灌注40min ET水平明显降低(P<0·01) ;再灌注40min后心肌组织T-SOD显著增高,MDA显著降低(均P<0·01) ;心肌超微结构的异常改变明显减轻。结论 SFI具有改善兔心肌I/R中自由基介导的内皮功能紊乱作用,并能减轻心肌I/R损伤。     

婴幼儿心内直视手术中应用环磷酸腺苷葡胺后血浆炎性细胞因子的变化

目的观察婴幼儿先心病患者在心内直视手术麻醉过程中应用环磷酸腺苷葡胺后血清中TNF-α、IL-6、IL-10的动态变化。方法选择实施心内直视手术的婴幼儿先心病患者40例,随机分为M-cAMP治疗组(A组)和对照组(B组)每组各20例,A组给予M-cAMP3 mg/kg,其中1 mg/kg于诱导前静脉注射,1 mg/kg稀释后输注至CPB开始,另1 mg/kg剂量加入预充液中经转机进入体内,B组给予等量生理盐水。分别于诱导前(T0)、主动脉开放后5 min(T1)、术毕(T2)、术后12 h(T3)采桡动脉血。结果40例婴幼儿先心病心内直视手术患者在转流前后开始CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-10均有不同程度的升高,A组与B组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论婴幼儿心内直视手术麻醉过程中应用环磷酸腺苷葡胺可降低CK-MB、TNF-α、IL-6的产生,提高IL-10的活性,改善术后心功能不全及感染。