强直性脊柱炎患者外周记忆性T细胞亚群及功能初探

通过分析强直性脊柱炎患者外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞亚群比例和产生细胞因子IFN-γ的能力,探讨记忆性T细胞在强直性脊柱炎发病中的作用。流式细胞术检测强直性脊柱炎患者外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞亚群分布和分泌IFN-γ的记忆性T细胞百分比。强直性脊柱炎患者外周CD4+和CD8+记忆性T细胞的比例和正常对照组相比,无差异,进一步比较效应型(TEM)和中央型记忆性T细胞(TCM)在CD4+和CD8+亚群中的分布,发现CD4+TEM及CD4+TCM与正常人相比无明显差异(P>0.05),而CD8+TCM与正常人相比显著升高(P<0.05),CD8+TEM与正常对照相比则明显下降(P<0.05)。同时,强直性脊柱炎患者外周CD4+和CD8+记忆性T细胞分泌细胞因子IFN-γ的细胞比例与正常人相比显著下降(P<0.05)。强直性脊柱炎患者在疾病活动期状态下,其外周CD8+记忆性T细胞的亚群分布发生异常,同时CD4+TM和CD8+TM的数量虽然没有变化,但是其产生细胞因子IFN-γ的功能下降。这可能与患者对感染的易感性提高有一定关联。     

CD4+T细胞亚群与RA发病机制关系的研究进展

RA是一种慢性、长期的自身免疫性疾病,以关节滑膜炎为特征,可导致手、足等小关节的多关节、对称性受累,甚至关节畸形,常伴有贫血、发热和其他系统受累。CD4~+T细胞在免疫系统中起着核心作用,一方面辅助B细胞产生抗体,另一方面协助CD8~+T细胞对抗多种病原微生物。根据其特定的转录因子、细胞因子谱和归巢受体表达等,可将其分为几个亚群:Th1、Th2、Th17和滤泡辅助T细胞(follicular helper T cell,Tfh)。近年来还发现了2个新的亚群:Th9和Th22。RA患者关节病理区域常出现大范围CD4~+T细胞浸润,提示二者之间存在关联。文章将结合近期的研究进展,探讨CD4~+T细胞亚群失衡与RA发病机制的关系。     

结缔组织疾病患者外周血T细胞亚群测定

<正> 本文采用人T细胞单克隆抗体OKT系列的直接血球测定法,检测了类风湿性关节炎(RA)及全身性红斑狼疮(SLE)患者共45例,以了解该病治疗前后,T细胞亚群的变化。     

慢性炎症状态对强直性脊柱炎外周CD8~+记忆性T细胞的影响

本研究通过分析不同组别强直性脊柱炎患者外周记忆性CD8~+T细胞比例、亚群、IFN-γ,IL-2分泌及抗原特异性记忆性T细胞比例与正常对照的差异,探讨自身免疫性炎症反应对强直性脊柱炎患者记忆性T细胞的影响;主要通过流式细胞术检测强直性脊柱炎患者外周血CD8~+记忆性T细胞分布和分泌IFN-γ、IL-2的记忆性T细胞百分比及产生IFN-γ的抗原特异性记忆性T细胞百分比。结果发现与正常对照组相比,强直性脊柱炎各组患者外周总CD8~+记忆性T细胞的比例无显著差异,但亚群比例分析显示疾病组中央型记忆性T细胞比例升高,效应型记忆性T细胞比例有所下降。进一步研究发现各组强直性脊柱炎患者分泌IFN-γ的外周CD8~+记忆性T细胞比例与正常对照相比显著下降(P0.05),而IL-2的分泌细胞比例无统计学差异;并且疾病组抗原特异性记忆性T细胞比例较正常对照明显升高(P0.05)。因此强直性脊柱炎患者在疾病状态下,CD8~+TM的数量虽然没有变化,但其产生IFN-γ的功能下降,且抗原特异性记忆性T细胞的比例升高,这可能与患者感染高发相关。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义.方法 采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4+CD25+ Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture, MLC)分析其免疫抑制功能.结果 AS活动期患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+ T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%,MLC中CD4+CD25+ Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关,CD4+ Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05).AS患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关.结论 AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病.     

肺癌患者外周血T淋巴细胞及亚群CD28表达和活化的改变

目的检测共刺激分子CD28在肺癌患者外周血T淋巴细胞及亚群中的表达密度和细胞活化程度的变化,并探讨该变化与肺癌临床分期的关系.方法用三色荧光直标流式细胞法分别检测38例正常人与42例肺癌患者中血T淋巴细胞亚群中CD28的阳性率以及CD28+T淋巴细胞亚群活化率.结果与正常人相比,肺癌患者外周血中的CD3+CD28+,CD4+CD28+,CD8+CD28+淋巴细胞百分比均有下降(P＜0.05).淋巴细胞及其T亚群中的CD25+CD28+,CD38+CD28+淋巴细胞百分比亦有所下降(P＜0.05),但在不同临床分期的患者之间无显著性差异(P＞0.05).结论肺癌患者外周血T淋巴细胞的CD28表达密度及CD28+T细胞的活性均有降低,但下降幅度与临床分期无关.     

强直性脊柱炎的外周血CD4+T淋巴细胞双向电泳技术

目的 优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于强直性脊柱炎的外周血CD4+ T细胞的双向凝胶电泳技术.方法 对双向电泳实验中的关键环节:样本处理,上样方法,聚焦条件等进行调整与优化,硝酸银染色后进行凝胶图像比较.结果 采用pH4-7胶条,用免疫磁珠分离外周血CD4+ T 淋巴细胞,Cleaning-up试剂盒沉淀蛋...     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞亚群的分析

目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者不同时期外周血Treg和Th1、Th2、Th17细胞以及中性粒细胞上CD64的表达水平,及它们与RA的活动性指标和自身抗体的相关性.方法 采集78例RA患者和21例健康人外周静脉血,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群(Treg,Th1、Th2、Th17细胞)的变化.结果 RA的CD3+ CD4+T细胞和CD4+ CD25+T细胞增多,活动期RA组Treg比率高于缓解期RA组和健康对照组,缓解期RA组Th2细胞减少,RA中Th1,TH17细胞与健康对照组相比无统计学意义,Treg和Th1、Th2、Th17细胞与RA的活动性指标(ESR,CRP和PLT)均无关联.结论 CD4+T细胞亚群数量异常可能与RA疾病发展有关.     

艾滋病患者外周血T细胞亚群CD28、HLA-DR分子的表达及其临床意义

人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染致使机体免疫功能缺陷和免疫细胞异常激活。为了了解艾滋病进展中不同T细胞亚群上CD28和HLA-DR分子的表达特征以帮助判断艾滋病(AIDS)的病情进展．我们观察了43例艾滋病患者外周血,此二分子在CD4^ 、CD8^ T细胞上的表达情况,现报道如下：     

梅毒病人外周血T细胞亚群特点的探讨

为了解被梅毒螺旋体感染后病人的细胞免疫功能的变异情况，对４０例梅毒病人进行了Ｔ细胞亚群的检测。先用ＴＲＵＳＴ筛选出阳性者，以再生ＴＰ，ＰＡ确诊试验的阳性者为对象，与正常组进行比较。用ｔ检验进行统计学处理。阳性组，Ⅱ组ＣＤ３，ＣＤＥ４无显著差异，ＣＤ８显著高于对照组，ＣＤ４／ＣＤ８比值显著低于对照组。     

非霍奇金淋巴瘤患者T细胞亚群、NK细胞检测的临床意义

目的：研究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测结果的变化与该病的关系及与慢性淋巴腺炎患者细胞免疫功能的不同变化。方法：采用流式细胞仪（FCM）检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者、慢性淋巴腺炎及正常人外周血T淋巴细胞亚群比例、NK细胞的变化。结果：非雹奇金淋巴瘤患者与正常人比较总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显下降（P〈0．05），细胞毒性T淋巴细胞明显升高（P〈0．05），NK细胞则无明显变化（P〉0．05）。非霍奇金淋巴瘤患者与慢性淋巴腺炎患者比较，细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞明显升高（P〈0.05），而总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞无明显改变（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比值略有下降但无明显统计学意义。结论：非霍奇金淋巴瘤患者细胞免疫功能明显受到抑制，T细胞亚群及NK细胞的检测对NHL的诊断、治疗、预后判断有一定的临床价值。     

再生障碍性贫血患者外周血T细胞亚群和T细胞受体表达水平及其意义

采用流式细胞仪及间接免疫荧光法检测30例再生障碍性贫血患者外周血中T细胞亚群及T细胞表面受体表达水平,并与健康对照组相比,结果表明:70％再障患者存在CD4/CD8比例倒置及CD8~+％异常增高;50％再障患者外周血γδ-T细胞亚群及其在T淋巴细胞总体中所占比例均显著增高;而αβT细胞亚群及TirA~+细胞百分率与正常对照组相比无显著性差异。提示:半数以上再障患者外周血中存在异常增多的γδT细胞及Ts细胞亚群。并可通过其直接或间接作用抑制造血,从而导致再障的发生。     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群极化状态的研究

目的:分析强直性脊柱炎患者外周血中T细胞亚群的极化状态,进一步阐明强直性脊柱炎的免疫学发病机制.方法:运用流式细胞(FCM)技术,通过CD3/CD4或CD3/CD8设门,检测早、晚期AS患者和健康对照者外周血淋巴细胞的CD3 CD4 CD30 、CD3 CD4 CD30ˉ、CD3 CD8 CD30 、CD3 CD8 CD30ˉT细胞的百分率,分别表达Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞,并进行比较分析.结果:在早期AS患者CD4 T细胞和CD4 T/CD8 T细胞的比值均明显低于健康对照组(P＜0.05),Th1细胞百分率及Th1/Th2比值明显降低(P＜0.05),CD8 T细胞的百分率明显高于健康对照组(P＜0.05),Tc2细胞明显升高(P＜0.05),且Tc1/Tc2比值明显降低(P＜0.05);在晚期AS患者Tc2细胞明显升高(P＜0.05),Tc1/Tc2比值明显降低(P＜0.05).结论:早期AS患者外周血CD4 T细胞、CD8 T细胞、CD4 T/CD8 T的变化与健康对照比较具有显著性意义,阐明了AS早期患者体内的免疫功能紊乱,呈现一种免疫功能低下的状态.重要的是Th1细胞、Th1/Th2、Tc1/Tc2的明显减少,提示在早期AS患者体内Th1/Th2、Tc1/Tc2的失调,且以Th2、Tc2占有优势,而晚期AS患者因Tc1/Tc2明显降低导致比例失衡,这些显示Th1/Th2、Tc1/Tc2的比例失衡可能是导致AS发病的重要因素,是AS发病机制之一.     

过敏性紫癜患者T细胞亚群和体液免疫功能的检测

过敏性紫癜 (Ｈｅｎｏｃｈ Ｓｃｈｏｎｌｅｉｎｐｕｒｐｕｒａ,ＨＳＰ)的基本病理改变是全身弥漫性小血管炎症反应。由ＨＳＰ引起的肾损伤是常见的肾小球疾病 ,但其发病机制尚不明确。本研究应用多色流式细胞仪 ,检测了ＨＳＰ患者外周血ＣＤ3+ 、ＣＤ4 + 及ＣＤ8+ Ｔ细胞亚群的数量变化 ,并对血清免疫球蛋白和补体Ｃ3、Ｃ4进行了测定 ,旨在探讨其发病机制。1　材料和方法1.1　研究对象　ＨＳＰ患者 4 0例均为 1998年 1月～ 2 0 0 1年6月间的住院患者 ,年龄 2～ 2 5岁 ,平均 9.1岁 ,男 19例 ,女 2 1例 ,其中 15例在经治疗 2～ 4ｗｋ病情有所…     

人T细胞亚群的微量全血染色法

本研究建立了人T细胞亚群的微量全血染色法,观察了红细胞溶解液、血细胞与OKT McAb共育时间、洗液及OKT McAb用量等因素对染色率的影响。本法只需0.4ml全血即可得到CD_3、CD_4、CD_8亚群的百分率,同时避免了传统的Ficoll分离法用血量多、淋巴细胞部分选择性丢失等缺点。     

胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及临床意义

目的研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞频数的变化,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤的病理类型及临床分期的相关性.方法应用流式细胞仪分析胃癌患者和健康对照组外周血中单个核细胞(pBMCs)的CD4+CD25+调节性T细胞频数,并探讨该种细胞频数的变化与胃癌的相关性.结果32例胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞19.40%±8.76%,高于25例健康对照组的10.68%±3.57%(P＜0.01).分化较好的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞16.79%±4.21%,低分化胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞20.02%±10.42%,两者之间差异显著(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞22.43%±8.36%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期的胃癌患者(CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的15.27%±6.85%,P＜0.05).结论CD4+CD25+T细胞在胃癌患者中比例升高,可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25+T细胞的高表达可作为胃癌患者肿瘤进展的重要标志.     

海洛因依赖者外周血T细胞亚群观察

数年前著者曾观察过海洛因依赖者外周血中CD3 、CD4 、CD8 细胞及CD4 /CD8 比值,现报告如下。1　对象及方法30例调查对象来自昆明4所康复医院或戒毒所。年龄14～40岁(多为年青者),其中男23例,女7例。全部系静脉注射“4号海洛因”(纯度>85%)成瘾者,平均日用量0.4～1.9g,平均吸毒时间19.6个月,符合海洛因依赖之条件;HIV血清学检测阴性反应,并排除慢性肝病、免疫性及内分泌性等疾病。对照组为青年健康者,男20例,女15例。CD系列MCAb试剂系武汉生物制品研究所产品。方法为IFA。资料经t检验。2　结果海洛因依赖者CD 细胞的表达及其与正…     

B细胞对T细胞及其亚群CD25、CD30表达的影响

目的 探讨Ｂ淋对Ｔ淋巴细胞的抗原提呈作用方法 分离外周血Ｔ、Ｂ细胞及ＣＤ４￣ＣＤ８Ｔ淋巴细胞,分别用ＬＰＳ、ＰＰＤ、ＰＷＭ刺激Ｂ细胞,选去刺激原后与Ｔ细胞及亚群共同培养。最后用流式细胞仪检测Ｔ细胞及其亚群ＣＤ２５、ＣＤ３０表达水平。结果 ＰＰＤ刺激组Ｔ细胞ＣＤ２５、ＣＤ３０表达水平明显升高,而ＰＷＭ、ＬＰＳ刺激组与对照组间无差异。ＰＰＤ刺激组ＣＤ４＾Ｔ细胞ＣＤ２５、ＣＤ３０表达与对照组间有显著差异     

三色流式细胞术在检测人外周血CD4+CD25+CD62L+调节性T细胞的应用

随着流式细胞术(FCM)在淋巴细胞亚群分析及免疫状态分型技术领域的应用日益成熟,多参数FCM分析,已能区分不同的细胞亚群,由间接免疫荧光标记法,过渡到采用直接免疫荧光标记且从单色荧光发展到双色及多色荧光标记.