苓苯二甲酸正丁酯净化自体骨髓移植治疗白血病

邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）在体外具有选择性杀伤白血病细胞的特性，白血病骨髓体外培养体系中加入ＤＢＰ会加速白血病祖细胞的清除。在骨髓体外长期培养基础上，利用ＤＢＰ对１４例急性非淋巴细胞白血病病人骨髓进行体外净化并自体骨髓移植，骨髓细胞经过５～９ｄ与５０μｇ／ｍｌＤＢＰ共培养后，骨髓有核细胞回收率为６８％，ＣＦＵ－ＧＭ回收率达７０．１％。回输骨髓细胞悬液中检测不出残留ＤＢＰ。净化后骨髓回输给放、化疗预处理后病人，骨髓造血全部重建。至今１４例病人平均存活时间已达１５个月，２例复发，３例非白血病死亡，其余均无病存活。初步证明ＤＢＰ结合骨髓体外培养是一种安全有效的体外净化措施。     

气相色谱分析邻苯二甲酸正丁酯与人血浆共孵育后的浓度变化

邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）能选择性地抑制肿瘤细胞的生长，并已应用于体外净化人骨髓细胞中残留白血病细胞〔１，２〕。前文报道了ＤＢＰ与人骨髓细胞共孵育后的浓度变化〔３〕。本研究用气相色谱法分析ＤＢＰ与人血浆孵育前后的浓度变化，了解ＤＢＰ进入血液后的分解情...     

邻苯二甲酸正丁酯结合骨髓体外培养净化白血病细胞方法的建立①

邻苯二甲酸正丁酯结合骨髓体外培养净化白血病细胞方法的建立①１００８５０北京军事医学科学院放射医学研究所徐黎，王立生，裴雪涛，吴祖泽中国图书资料分类号７３３．７体外净化骨髓中的白血病细胞是降低自体骨髓移植后白血病复发率的重要措施。我们在实验研究中证明邻...     

骨髓的体外净化并自身移植5例报告

我们用单克隆抗体(McAb)和兔补体体外净化骨髓中残留白血病细胞后对5例普通型急性淋巴细胞性白血病(CALL)患者进行了自身骨髓移植(ABMT)。抽出的骨髓细胞经McAb55加兔补体两次处理后,CALL抗原(CALLA)阳性细胞清除率可达2～3个对数级,骨髓有核细胞及CFU-GM回收率分别为48.7％～96.9％和39.5％～95.7％。外周血白细胞于移植后11～16d开始回升,14～29d升至1×10~9/L以上。23～53d出洁净室。例3于移植后4个月白血病复发, 8.2个月死亡。另4例无病活存分别为19~+、18~+、12~+和6~+个月,远期疗效正在定期随访中。     

重组人γ─干扰素联合肿瘤坏死因子或高热体外净化实验研究

用重组人γ－干扰素（ＩＦＮ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）体外净化骨髓中残存的白血病细胞时，１０００Ｕ／ｍｌＩＦＮ或１００Ｕ／ｍｌＴＮＦ单独应用时仅能清除大约８０％左右，而二者联用时则能起到协同抗白血病的效应，可清除９０％以上残存的白血病细胞，但对ＣＦＵ－ＧＭ的形成却没有协同抑制作用，抑制率仅为５４％。在高热体外净化研究中，单独加热到４１℃作用２ｈ，清除率达９０％，若同时加入１０００Ｕ／ｍｌ的ＩＦＮ，可大大增强高热的净化效果，清除率可达９８％以上，且减轻了高热对ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用，ＣＦＵ－ＧＭ的抑制率下降为２４．５％，与单纯高热净化时的３２．８％相比，Ｐ＜０．０５。因此可以利用提高温度的办法来进一步达到体外净化的目的     

大容量骨髓体外净化初步临床应用

应用补体介导细胞毒法体外净化骨髓中残留白血病细胞后，对普通型急性淋巴细胞白血病（CALL）患者4例进行了自身骨髓移植（ABMT）。单个核细胞经单克隆抗体55（McAb55)加兔补体两次处理后，CALL抗原阳性细胞清除率可达3个对数级，骨髓有核细胞及CFU－GM回收率分别为25．8％－64．8％和40．0％－62．4％，外周血细胞于移植后第11－13天开始回升，15－29天升至10^9／L以上。第23－53天出洁净室，现无病存活时间分别为8^ 、7^ 、3^ 和1．5个月，远期疗效仍在定期随访中。     

CD34~ 细胞富集净化外周血应用于自体外周血干细胞移植

大剂量放疗化疗结合自体外周血造血干细胞移植(ＡＰＢＳＣＴ)是治疗高危组恶性淋巴瘤的有效方法,这是近年来治疗学上的一大进展;但是恶性淋巴瘤易侵犯骨髓,瘤细胞也难免释放入外周血,行ＡＰＢＳＣＴ时有可能将少量肿瘤细胞回输给预处理后的患者,从而增加患者复发的机会。ＣＤ34 细胞是造血干细胞的表面标记,而瘤细胞常常无此表面标记。ＣＤ34 细胞富集仪利用此特性清除瘤细胞,达到净化外周血的目的。我院自1999年1月开始使用ＣＤ34 细胞富集仪并获得成功,现报道如下。1　临床资料及治疗方法患者,男性,23岁,1997年7月出现右颈部肿块,无发热、…     

邻苯二甲酸正丁酯与人骨髓细胞共孵育中的浓度变化

邻苯二甲酸正丁酯与人骨髓细胞共孵育中的浓度变化曹菊荣吴祖泽王作华裴雪涛军事医学科学院放射医学研究北京１００８５０邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）是一个增塑剂，它有一个特殊的药理功能，即选择性杀伤肿瘤细胞〔１〕。这一药理特性已被应用于体外净化人骨髓细胞中的残...     

大容量骨髓体外净化及初步临床应用

应用补体介导细胞毒法体外净化骨髓中残留白血病细胞后,对普通型急性淋巴细胞白血病(CALL)患者4例进行了自身骨髓移植(ABMT)。单个核细胞经单克隆抗体55(McAb 55)加兔补体两次处理后,CALL抗原阳性细胞清除率可达3个对数级,骨髓有核细胞及CFU-GM回收率分别为25.8％～64.8％和40.0％～62.4％,外周血白细胞于移植后第11～13天开始回升,15～29天升至10~9/L以上。第23～53天出洁净室,现无病存活时间分别为8~+、7~+,3~+和1.5个月,远期疗效仍在定期随访中。     

高热治疗白血病的研究——Ⅱ.正常造血细胞及白血病细胞对热杀伤敏感性的体外研究

观察了不同高热处理前后正常骨髓细胞与白血病细胞形态,组化及GM-CFU白血病祖细胞生长的变化,证实40～43℃热处理半小时后GM-CFU生长较前无明显变化,而L-CFU的生长则随温度升高而呈进行性下降。提示L-CFU对热杀伤的敏感性明显较GM-CFU高。为临床用高热治疗白血病,特别在体外用高热净化骨髓后作ABMT提供了重要的有用资料。     

低分子天然抑瘤物净化的自体骨髓移植治疗白血病一例报告

利用某些生物因子抑制肿瘤细胞生长或诱导其分化的特性是净化白血病骨髓的一条可行途径。吴祖泽等的研究发现,在人胎儿组织中存在着一类低分子量的天然肿瘤抑制物(LMW-NTS),它对人或小鼠的多种白血病细胞株以及髓系白血病病人原代白血病祖细胞(L-CFU)均有明显的、不可逆的抑制作用,而对正常造血细胞影响较轻,从而在体外液体培养条件下可用于净化骨髓中残留的白血病细胞。我们利用这一选择性抑瘤作用,对一例 AML 病人缓解期的骨髓作了体外净化后的自体骨髓移植,获得成功,现报告如下。     

自体骨髓基质细胞体外扩增促进病人造血功能恢复的研究

２２例骨髓象完全缓解的急性早幼粒白血病（Ｍ３）接受相同的方案化疗，１２例在化疗结束后第２天回输体外扩增的自体骨髓基质细胞。结果：回输基质细胞的实验组化疗后１、２、３周粒、红系祖细胞产率均高于单纯化疗的对照组（Ｐ＜００５），化疗后实验组外周血象较对照组下降缓慢，且下降到最低点的时间提前，而达到最低点的血象值显著高于对照组（Ｐ＜００１），血象恢复至正常的时间也较对照组提前。提示：骨髓基质细胞输注能促进化疗后造血功能的恢复，缩短骨髓抑制期     

小鼠脾基质细胞特性与功能研究

作者用体外液体单层和器官培养技术研究了小鼠脾基质细胞某些特性和功能。结果发现，大剂量照射后骨髓细胞与脾基质细胞混输组较单输ＢＭＣ组受体ＣＦＵ－Ｓ及ＣＦＵ－Ｆ数明显增高（Ｐ＜０．０１）；脾ＣＦＵ－Ｆ的Ｄ０值为２．８Ｇｙ；低剂量照射后对基质细胞增殖有刺激效应；基质细胞周围可见有造血免疫细胞生长。     

重组人γ—干扰素联合肿瘤坏死因子或高热体外净化实验研究

用重组人γ－干扰素和肿瘤坏死因子体外净化骨髓中残存的白血病细胞时，１０００Ｕ／ｍｌＩＦＮ或１００Ｕ／ｍｌＴＮＦ单独应用时仅能清除大约８０％左右，而二者联用时则能起到协同抗白血病的效用，可清除９０％以上残存的白血病细胞，但对ＣＦＵ－ＧＭ的形成却滑有雷同抑制作用，抑制率仅为５４％。     

移植培养表皮细胞片时创面局部抗生素的合理选用

目的：优选出适于移植培养表皮细胞片（ＣＥＡ）的局部抗菌用药方案。方法：将培养的人表皮细胞置于含不同浓度抗生素的培养液中培养３天后，用噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定其细胞生长率，同时采用定量铂环法和Ｋ－Ｂ纸片扩散法分别测定其在创面上和在体外的抗菌效果；并以此分别准备烧伤或肉芽创面，观察了对ＣＥＡ早期成活的影响。结果：对培养的人表皮细胞毒性作用为：碘伏（ＰＶＰ－Ⅰ）＞磺胺嘧啶银（ＡｇＳＤ）氟哌酸银（ＡｇＮ）＞丁胺卡那霉素（ＡＫ）／ＡＫ与ＰＲ复合抗生素（ＤＡＢ）＞氧哌嗪青霉素（ＰＲ）；ＡｇＮ和ＤＡＢ在临床使用浓度时抗菌效果较好，以此分别准备烧伤或肉芽创面，显著地提高了ＣＥＡ早期成活率。结论：烧伤创面外用１％ＡｇＮ、肉芽创面外用０．１％ＡＫ和０．２％ＰＲ的ＤＡＢ液湿敷、术后局部预防性应用０．０１％ＡＫ和０．０２％ＰＲ的ＤＡＢ液，可有效地提高ＣＥＡ的早期成活率。     

来源于骨髓与脐带血的基质细胞基本特性比较研究

目的 比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性，为基质细胞的选择应用提供依据。方法 用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞，以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面抗原及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞为指标，比较两者的生长特性、成分及功能。结果 生长特性：出现贴壁细胞时间，骨髓细胞为培养3d，脐带血细胞为培养5-6d；细胞融合成片时间，骨髓细胞为培养10～14d，脐带血细胞为培养12—18d；第21天细胞增殖数，骨髓比脐带血细胞增殖少。细胞成分：21d培养后细胞成分，骨髓来源者以成纤维细胞为主，其次是巨噬细胞与内皮细胞，脂肪细胞最少；而脐带血细胞来源者，以巨噬细胞为主，其次是内皮细胞、成纤维细胞，偶见脂肪细胞；细胞化学与上述结果基本一致；细胞表面抗原检测，CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞。细胞功能：骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞明显多。结论 ①生长特性：形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短，骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短。②细胞成分特性：骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主，脐带血来源者以巨噬细胞为主。③细胞功能特性：骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于鹅卵石造血区、长期培养起始细胞生长。     

小鼠15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响

目的 研究烧伤情况下骨髓造血基质细胞支持粒单系造血的功能变化。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞融合培养和粒单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养的方法,动态观察１５％Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响。结果 当在烧伤组基质细胞层上培养正常骨髓细胞的ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１,３,５,７,１０天均明显低于正常对照组,而同时培养的烧伤小鼠骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１     

粒细胞集落刺激因子对骨髓移植及外周血祖细胞保护的骨髓造血重建

１１ 例急性白血病及中－ 高恶性度非何杰金氏淋巴瘤患者，采用自体／异基因骨髓移植和外周血造血祖细胞保护的大剂量化疗。骨髓或外周血造血祖细胞回输后，开始使用Ｇ－ ＣＳＦ ２．５－ ５ μｇ／ｋｇ，１／日。Ｇ－ＣＳＦ使用天数分别为：外周血造血祖细胞保护组１１±２ ｄ；自体骨髓移植组１８±２ ｄ；异基因骨髓移植组２０±２ ｄ。骨髓涂片显示：骨髓增生活跃。外周血象恢复时间缩短，骨髓及外周血ＣＦＵ－ＧＭ ，ＢＦＵ－Ｅ， ＣＦＵ －ｍ ｉｘ 培养和ＣＤ３４＋ ＣＤ３８＋ 、ＣＤ３４＋ ＣＤ３８－ 细胞检测表明造血祖细胞恢复良好。Ｇ－ＣＳＦ能促进骨髓造血重建，缩短骨髓空虚期，减少严重感染的发生     

PHA—LCM净化骨髓混合培养中HL—60细胞的实验研究

植物血凝素刺激的人外周血白细胞条件培养液(PHA-LCM)可以在体外诱导 HL-60细胞分化为单核-巨噬细胞。在混合的人骨髓细胞与 HL-60细胞悬液中加入PHA-LCM,有明显的选择性抑制 HL-60细胞生长的效果,从而,为在自体骨髓移植中体外净化髓系白血病细胞提供了一个实验研究的模型。     

抗hBMP单抗的制备及在临床中的初步应用

本研究以１１．８ＫＤｈＢＭＰ为抗原，通过脾内直接免疫法对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠进行免疫。用３０％ＰＥＧ１５００对ＳＰ２／０骨髓瘤细胞：免疫脾细胞（１∶５）的混合细胞悬液进行融合。融合后将２４孔板中每孔种植含１×１０６个细胞的混合细胞悬液，可使融合率达１００％。通过筛选，从２５００株杂交瘤中选出５株杂交瘤，它们能产生特异性较好的抗１１．８ＫＤｈＢＭＰ的单克隆抗体。用抗１１．８ＫＤｈＢＭＰ单抗对颈椎骨赘、项韧带异位骨化标本、滑膜软骨瘤病的瘤结节进行ＡＢＣ免疫组化染色。结果显示，颈椎项韧带异位骨化、颈椎椎体骨赘形成及滑膜软骨瘤病的发病与ＢＭＰ的异常表达有关。