第1O号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因在IGFBPrPl诱导的大鼠肝纤维化中的作用

第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（phosphatase and tensin homolog deleted onc hromosome ten,PTEN）是目前发现的第1个具有蛋白磷酸酶活性和脂质磷酸酶活性的抑癌基因,其中脂质磷酸酶活性是其最主要特征[1]。     

微小 RNA-301b-3p靶向第 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-301b-3p(miR-301b-3p)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 本研究起止时间为2019年3—9月.人成骨细胞(hFOB)和骨肉瘤细胞U2OS、MG63购自美国菌种保藏中心.U2OS细胞分为miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-301b-3p抑制物(anti-miR-301b-3p)组、anti-miR-301b-3p+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、anti-miR-301b-3p+第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)小干扰RNA(si-PTEN)组;实时荧光定量PCR(RT-qP-CR)检测miR-301b-3p表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-301b-3p和PTEN的靶向关系.结果 与hFOB细胞相比,U2OS、MG63中miR-301b-3p表达水平[(0.89±0.09),(0.70±0.07)比(0.20±0.02)]显著升高.与anti-miR-NC组比较,anti-miR-301b-3p组U2OS细胞活性[(0.59±0.06)比(1.33±0.13)]显著降低,而凋亡率[(22.06±2.31)％比(7.48±0.78)％]、PTEN蛋白表达[(0.69±0.07)比(0.35±0.03)]显著升高.PTEN是miR-301b-3p的直接靶基因.与anti-miR-301b-3p+si-NC组比较,anti-miR-301b-3p+si-PTEN组U2OS细胞活性[(1.16±0.12)比(0.56±0.06)]显著升高,而凋亡率[(10.28±1.16)比(22.12±2.34)]显著降低.结论 抑制miR-301b-3p表达可通过调控PTEN抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡.     

细胞周期素E和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因在大肠癌中的表达与预后的关系

<正>肿瘤的浸润和转移是一个多因素、多步骤的极为复杂的过程,它是肿瘤细胞、宿主细胞及细胞外基质之间的一系列复杂的多步骤相互作用的结果,涉及众多的基因产物及分子事件。研究肿瘤细胞恶性潜能的生物学标志以预测肿瘤转移趋势,已成为目前肿瘤防治研究的一个重点。大肠     

血小板反应蛋白-1在大鼠肝纤维化中表达的意义

目的研究血小板反应蛋白-1(TSP-1)在肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达,探讨TSP-1在肝纤维化发病机制中的作用。方法选择健康雄性大鼠30只,随机分为正常组10只,模型组20只,选用四氯化碳(CCL4)、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合因素诱导肝纤维化模型,造模8周,取两组大鼠肝组织HE染色病理观察、纤维化分级,测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量及免疫组化法测定肝组织中TSP-1的表达量。结果复合因素大鼠肝纤维化模型造模成功,肝组织病理显示炎症明显、纤维化形成,模型组大鼠肝脏指数、血清HA肝组织Hyp及TSP-1较正常组显著升高,TSP-1在肝组织的表达量与肝纤维化程度成正比。结论TSP-1在肝纤维化发生发展过程中可能发挥了病理作用。     

抑毒调肝合剂抗大鼠肝纤维化的作用及机制研究

目的:研究抑毒调肝合剂抗大鼠肝纤维化的作用及机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(阳性对照,0.2 mg/kg)和抑毒调肝合剂低、中、高剂量组(2.7、5.4、10.8 m L/kg)。除正常组外,其余各组大鼠均复制肝纤维化模型,并于造模同时ig相应药物,每天1次,连续8周。检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2、MMP-13、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、TGF-β1、TNF-α水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、HA、PCⅢ、CⅣ、TIMP-1、MMP-2、TGF-β1、TNF-α水平显著升高,MMP-1、MMP-13水平显著降低(P<0.05);肝组织中Hyp、TGF-β1、TNF-α、MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px、CAT水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,抑毒调肝合剂中、高剂量组和秋水仙碱组大鼠血清中ALT、AST、HA、PCⅢ、CⅣ、TIMP-1、TNF-α水平以及肝组织中Hyp、TGF-β1、TNF-α、MDA水平均显著降低(P<0.05);抑毒调肝合剂高剂量组和秋水仙碱组大鼠血清中MMP-1、MMP-13水平以及肝组织中CAT水平均显著升高(P<0.05),且血清中MMP-2、TGF-β1水平显著降低(P<0.05);抑毒调肝合剂低剂量组大鼠上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抑毒调肝合剂抗大鼠肝纤维化的作用机制可能与调节TIMP/MMP平衡、抗氧化应激、降低TGF-β1水平和减少细胞外基质沉积有关。     

微RNA-132-3p靶向第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物调控葡萄膜黑色素瘤细胞增殖与凋亡

目的 研究微RNA(miR)-132-3p在葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡中的作用及其作用机制。方法 该研究起止时间为2018年2月至2019年7月。定量聚合酶链反应（qPCR）检测正常葡萄膜上皮细胞ARPE-19和葡萄膜黑色素瘤细胞SP6.5、M23中miR-132-3p表达。SP6.5细胞中转染miR-132-3p干扰质粒（anti-miR-132-3p）、第10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）过表达质粒（pcDNA3.1-PTEN）或共转染anti-miR-132-3p和PTEN干扰质粒（si-PTEN）,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法检测PTEN、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达,生物信息学预测结合双萤光素酶报告实验分析miR-132-3p与PTEN的靶向关系。结果 与ARPE-19细胞相比,SP6.5、M23细胞中miR-132-3p表达量（0.26±0.02比0.94±0.09、0.81±0.08）明显升高（P<...     

茯苓皮水提物对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的改善作用

目的:研究茯苓皮水提物(PWE)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的改善作用。方法:将84只大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、模型对照组、阳性对照组(复方鳖甲软肝片,0.75 g/kg)和PWE低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g/kg,以生药计),每组12只。除空白对照组与溶剂对照组(ip植物油)外,其余各组大鼠均ip CCl_4-植物油溶液复制肝纤维化模型。造模成功后,各给药组大鼠ig相应药物,其余3组大鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续4周。给药结束后,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、羟脯氨酸(Hyp)和肝组织中还原性谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,苏木精-伊红染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理变化。结果:与空白对照组比较,溶剂对照组大鼠各指标均无明显变化(P>0.05);模型对照组大鼠血清中AST、ALT、LN、HA、Hyp含量和肝组织中MDA含量显著升高(P<0.05),肝组织中GSH、SOD含量显著降低(P<0.05),且肝组织发生明显纤维化病变。与模型对照组比较,PWE中、高剂量组大鼠血清中AST、ALT、LN、HA、Hyp含量和肝组织中MDA含量显著降低(P<0.05),肝组织中GSH、SOD含量显著升高(P<0.05),肝组织纤维化程度明显减轻。结论:PWE对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化具有良好的改善作用,其机制可能与抑制机体脂质过氧化有关。     

下调微小 RNA-425-5p靶向第 10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白调控宫颈癌细胞侵袭和迁移的分子机制

目的研究下调微小 RNA(miR)-425-5p靶向第 10号染色体同源缺失性磷酸酶 -张力蛋白( PTEN)调控宫颈癌 Caski细胞侵袭和迁移的分子机制。方法本研究起止时间为 2018年 12月至 2019年 11月。以宫颈癌 Caski细胞为探讨对象,转染 miR-425-5p抑制剂( inhibitor),PTEN siRNA和 miR-425-5p inhibitor共转染到宫颈癌 Caski细胞; MTT法测定细胞增殖, Transwell小室测定细胞侵袭和迁移;在线靶基因预测软件发现 PTEN与 miR-425-5p可能互为靶向关系,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系;蛋白质印迹法( Western blotting)测定上皮钙黏素( E-cadherin)、神经钙黏素( N-cadherin)蛋白表达。结果转染 miR-425-5p inhibitor后的宫颈癌 Caski细胞 miR-425-5p表达量降低［( 0.96±0.15)比( 0.32±0.04)］,增殖［( 0.47±0.05)比( 0.23±0.04)］、侵袭［( 95.32±7.86)比( 63.17±5.22)］及迁移［( 140.88±13.94)比( 89.64±9.57)］能力降低, E-cadherin表达上调［( 0.29±0.05)比( 0.65±     

第十染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的研究子宫颈癌手术标本中第十染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法,检测80例宫颈癌手术标本中PTEN蛋白的表达。结果PTEN蛋白在宫颈癌中的表达低于在正常黏膜中的表达(P<0.05);PTEN蛋白的表达与宫颈癌组织细胞分化程度以及宫颈癌的临床病理分期呈负相关(P<0.05)。结论子宫颈癌组织中,PTEN蛋白表达缺失的肿瘤组织恶性程度更高。     

麦冬皂苷D调控磷酸酶及张力蛋白同源物诱导激酶1/帕金蛋白通路对脓毒症心肌损伤的保护作用

目的 探讨麦冬皂苷D(OPD)对脓毒症大鼠心肌损伤及磷酸酶及张力蛋白同源物诱导激酶1/帕金蛋白(PINK1/parkin)通路的影响。方法 用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症大鼠模型,并将造模成功的大鼠随机分为模型组、实验组、对照组和联合组,每组8只。在模型制备成功后12 h,实验组给予腹腔注射40 mg·kg^-1 OPD,对照组给予腹腔注射20 mg·kg^-1 3-MA,联合组给予腹腔注射40 mg·kg^-1 OPD和20 mg·kg^-1 3-MA;假手术组和模型组均给予腹腔注射等量0.9%NaCl。5组大鼠每12 h重复给药1次,连续给药6 d。用酶联免疫吸附试验法检测血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平,用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织中PINK1和parkin蛋白的表达水平。结果 实验组、对照组、联合组、模型组和假手术组的血清cTnⅠ水平分别为(0.98±0.20)、(3.44±0.69)、(1.64±0.38)、(2.39±0.45)和(0.37±0.07)mg·L^-1,PINK1蛋...     

重组人肝星状细胞激活相关蛋白抗大鼠肝纤维化的作用

为了观察重组人肝星状细胞激活相关蛋白(rhSTAP)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝功能及病理形态学的影响.建立大鼠CCl4肝纤维化模型,从早期干预组自造模开始起注射给药,持续12周,治疗组自造模6周后开始给药,维持6周,造模周期结束后测定大鼠血清中谷丙氨转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)的含量及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量并对肝组织进行病理组织学检查.结果显示重组人源肝星状细胞激活相关蛋白能显著降低大鼠血清中ALT、AST、HA及肝组织中羟脯氨酸含量的升高,明显改善大鼠肝组织病理变化.因此重组人源肝星状细胞激活相关蛋白能有效干预CCl4诱导的大鼠肝纤维化,值得深入研究.     

第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白和存活蛋白在结直肠癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨结直肠癌组织中第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)和存活蛋白(survivin)的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学染色的方法,检测50例结直肠癌组织和30份癌旁正常组织中PTEN和survivin和表达情况,并分析两者与不同临床病理特征之间的关系。结果 PTEN在结直肠癌组织中的表达(46%)明显低于癌旁正常组织(90%),而survivin在癌组织中的表达(76%)高于癌旁正常组织(27%)。随着肿瘤细胞分化程度的降低,PTEN阳性表达率降低,而survivin阳性表达率增高;TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者PTEN阳性表达率高于Ⅲ~Ⅳ期,而survivin阳性表达率Ⅰ~Ⅱ期的患者低于Ⅲ~Ⅳ期。结论PTEN和survivin在结直肠癌组织中的表达与结直肠癌的分化程度、TNM分期相关。PTEN表达低下、survivin表达增高的结直肠癌患者预后差。     

血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂--氯沙坦抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂--氯沙坦对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的作用.方法SD大鼠按1 ml·kg-1体重皮下注射50?l4植物油溶液,用分光光度法测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,并采用放免方法测定血清PCⅢ和HA含量.给药12周后取肝组织进行HE染色.结果氯沙坦剂量组(2.5,5,10 mg·kg-1,ig)、卡托普利组(100mg·kg-1,ig)明显降低肝纤维化大鼠血清转氨酶(ALT、AST)、PCⅢ、HA水平和肝组织中Hyp含量.组织病理学检查显示氯沙坦有减轻肝纤维化作用.结论氯沙坦对大鼠肝纤维化有抑制作用.     

葛根素对四氯化碳所诱导肝纤维化大鼠的干预作用及对TLR-4、NF-κB、AP-1的影响

目的：研究葛根素对四氯化碳所诱导肝纤维化大鼠的干预作用及其对TLR-4、NF-κB、AP-1的影响。方法：将56只SD大鼠腹腔注射四氯化碳花生油溶液（1：1）1 mL·kg^-1,每周2次,连续注射8周,建立肝纤维化大鼠模型。将经病理学检查确认成肝纤维化模型的大鼠随机分为5组：模型组、阳性药水飞蓟素40 mg·kg^-1组、葛根素20,40,80 mg·kg^-1组,每组10只。每日灌胃给药一次,连续给药60 d。同时另设置正常组大鼠10只。Masson染色法观察各组肝组织病理学变化和纤维化程度。末次给药12 h后,检测大鼠血清谷草转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、白介素-6（IL-6）的水平;Elisa法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1（IL-1）的含量;蛋白免疫印迹法检测肝组织中TLR-4、NF-κB、AP-1的蛋白表达。结果：与模型相比,葛根素可降低肝纤维化大鼠血清AST、ALT、IL-6的水平以及TNF-α、IL-6的含量（P<0.05）,并明显下调TLR-4、NF-κB、AP-1的蛋白表达水平（P<0.05）。结论：葛根素具有一定的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与调节肝组织中TLR-4、NF-κB、AP-1的蛋白水平有关。     

肝病二号合剂对肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究肝病二号合剂能否诱导肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡,且能使bcl-2、bcl-2a、bax蛋白表达增加。方法雄性SD大鼠50只,体质量200g±25g,50只大鼠均用40%(V/V)四氯化碳溶液按0.15mL/100g皮下注射,每周2次,连续用药8周后,随机处死其中5只证实肝纤维化模型形成,将剩余45只随机分成空白组(A组)20只,模型组5只(C组)、治疗组(B组)20只,B组20只予肝病二号合剂4mL/(100g d)灌服8周,A组20只,用等量的生理盐水灌服8周治疗结束,C组为模型组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测肝细胞凋亡,采用免疫组化法检测bcl-2 bcl-2a和bax蛋白。结果 B组与A、C组比较,肝星状细胞数量B组的细胞数量明显减少,肝星状细胞凋亡的数量明显增加,细胞凋亡指数增加明显。B组bcl-2 bcl-2a和bax蛋白明显增加。结论肝病二号合剂可以诱导肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡,且能使bcl-2、bcl-2a、bax蛋白表达增加。     

氧化苦参碱联合前列腺素E1对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究

目的探讨氧化苦参碱联合前列腺素E1对实验性大鼠肝纤维化的防治作用。方法采用预防和治疗两种方法在大鼠肝纤维化模型上观察氧化苦参碱、前列腺素E1单独及联合应用后对实验性肝纤维化大鼠透明质酸（HA）、Ⅲ型胶原（PC—Ⅲ）、Ⅳ型胶原（PC—Ⅳ）、层粘蛋白（LN）的水平和肝功能的影响。结果氧化苦参碱单独和联合前列腺素E1应用后，大鼠的ALT、ALP和A／G均与模型组差异有统计学意义（P〈0．05或〈0．01），且联合用药组与单独应用组的ALT、ALP和A／G均差异有统计学意义（P〈0．05或〈0．01）；联合用药后的HA、PCⅢ、CⅣ、LN比单独用氧化苦参碱、前列腺素E1的作用显著，表明氧化苦参碱联合前列腺素E1对实验性大鼠肝纤维化的肝功能有一定的预防作用。氧化苦参碱单独和联合应用治疗实验性大鼠肝纤维化，大鼠的ALT、ALP、HA、PCⅢ与模型组有显著性降低作用（P〈0.05或〈0．01），而A／G则表现为显著升高效应（P〈0．05或〈0．01）；联合用药组与单独应用时相比较，ALP、A／G、HA、PCIII均有显著性改变（P〈0．05或〈0．01），表明氧化苦参碱联合前列腺素E1对实验性大鼠肝纤维化的肝功能有显著的治疗作用。结论氧化苦参碱和PGE1联合用药可显著增强对实验性大鼠肝纤维化的防治效果。     

清肝益脾胶囊对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用及对肠道菌群的影响

目的:研究清肝益脾胶囊(Qinggan Yipi Capsules,简称QgYp)对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis, HF)的保护作用，并初步探讨其通过调节肠道菌群改善HF的机制。方法:36只SD大鼠随机分成正常组、模型组、QgYp低剂量组、QgYp中剂量组、QgYp高剂量组和秋水仙碱组，腹腔注射四氯化碳油溶液构建HF大鼠模型，第4周后给予药物干预直至第8周；采用HE、Masson染色，光镜下观察病理变化；采用全自动生化分析仪检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)含量；采用ELISA检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)含量。另取24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、QgYp中剂量组，同上方法建模与给药，于8周后收集盲肠内容物，采用16S rRNA测序技术检测肠道菌群。结果:与模型组相比，QgYp各组大鼠肝脏系数显著降低(P<0.05),肝组织纤维病变和胶原纤维沉积显著改善(P<0.05);QgYp中剂量组、QgYp高剂量组ALT、AST、HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C含量显著降低(P<...     

基于高迁移率族蛋白B1对老鼠生物碱A抗肝纤维化作用机制的研究

目的基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)探讨老鼠簕生物碱A(HBOA)抗大鼠肝纤维化的作用机制。方法采用四氯化碳(CCl_4)橄榄油溶液灌胃12周,建立大鼠肝纤维化模型。第8周确定建模成功后,将其随机分为模型对照组、秋水仙碱组、HBOA高剂量组、HBOA低剂量组,从第9周起,相应药物干预4周后,取肝组织切片行HE染色及Masson染色;测定血清中ALT、AST、T-BIL、HMGB1、IL-1β、TNF-α的含量;免疫组化法检测肝组织中HMGB1蛋白的表达;实时荧光定量PCR法测定肝组织中HMGB1 mRNA表达量。结果与模型对照组相比,HBOA高、低剂量均明显减轻CCl_4所致肝组织病变程度,降低血清中ALT、AST、T-BIL、HMGB1、IL-1β、TNF-α含量,减少肝组织中HMGB1蛋白及mRNA表达,且血清HMGB1水平与IL-1β、TNF-α、ALT、AST、T-BIL呈正相关。结论 HBOA对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化有一定的改善,其作用机制可能与降低致炎因子HMGB1有关。