粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支（LAD）30min后松开,再灌注24h建立心肌缺血-再灌注损伤模型。将48只雄性SD大鼠随机分为：假手术组（Sham组）,缺血-再灌注损伤组（IRI组）,粉防己碱预处理组（Tet组）。再灌注结束后检测血清肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）和心肌梗死范围（IS/AAR,%）。应用原位末端标记法（TUNEL法）检测各组凋亡细胞,计算凋亡指数（AI）,应用免疫组化法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达,计算Bcl-2/Bax值,进行组间比较。结果与IRI组相比,Tet可明显降低CK-MB值（976.57±160.69）vs（1910.38±221.10）U/L,P〈0.01,减小心肌IS/AAR%,（23.28±4.38）%vs（43.76±6.30）%,P〈0.01。与IRI组比较,粉防己碱预处理可显著减少心肌细胞凋亡,AI显著降低（8.62±2.45%vs19.36±5.28%,P〈0.01）。粉防己碱预处理使Bcl-2表达增加,Bax表达下降,Bcl-2/Bax值显著升高（P〈0.01）。结论粉防己碱能明显抑制缺血-再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与促进Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达、升高Bcl-2/Bax比值有关。     

雌激素对大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨苯甲酸雌二醇对大鼠胸腺Bcl-2和Bax表达及细胞凋亡的影响及其机制.方法:雌性大鼠行卵巢切除术,给予苯甲酸雌二醇后,观察胸腺指数的变化,Hochest33342荧光染色及透射电镜标本观察胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,原位杂交技术检测Bcl-2、Bax m RNA的表达情况.结果:双侧卵巢切除组大鼠胸腺指数较假手术组增加,双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺指数较双侧卵巢切除组减小;假手术组和双侧卵巢切除组大鼠胸腺组织中以正常胸腺细胞为主,偶见凋亡细胞或凋亡小体,双侧卵巢切除+雌激素组可见较多凋亡细胞和凋亡小体;双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达较双侧卵巢切除组和假手术组增高明显降低,而Bax表达呈现相反趋势;Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达与Bcl-2、Bax的表达呈一致性.结论:雌激素可以降低大鼠胸腺指数,抑制胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达,从而诱导大鼠胸腺细胞凋亡,促进雌性大鼠胸腺退化.     

Bcl-2和Bax蛋白在Wistar大鼠胃粘膜的表达及其意义

Bcl-2是日前已知的抑制细胞凋亡的重要基因。Bax基因不但拮抗Bcl-2的抑制凋亡作用,而且有直接促进细胞凋亡的功能。Bax和Bcl-2是一对正负凋亡调节基因,研究其在大鼠胃粘膜的表达和分布,对研究胃粘膜的更新和发病机理有重要的意义。     

丙酸睾酮对大鼠胸腺细胞凋亡及胸腺中Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨丙酸睾酮在大鼠胸腺退化过程中的作用及其对大鼠胸腺中Bcl-2和Bax表达的影响。方法雄性大鼠去势后给予丙酸睾酮皮下注射,分别于注射后第1、4、7天取材,用半薄切片甲苯胺蓝染色检测胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,采用t检验进行统计学处理。结果丙酸睾酮处理组大鼠胸腺组织中可发现较多的凋亡细胞和凋亡小体;去势组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达量明显高于假手术组（P〈0.001）,丙酸睾酮处理后Bcl-2表达量明显减少（P〈0.001）;而Bax的表达正好相反,去势组大鼠胸腺组织中Bax表达量明显低于假手术组（P〈0.001）,给予丙酸睾酮后Bax表达量明显增加（P〈0.001）;结论丙酸睾酮可诱导大鼠胸腺细胞凋亡,并抑制大鼠胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达。     

瘦素对体外培养大鼠背根神经节神经元中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:研究瘦素对大鼠背根神经节(DRG)神经元中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:用不同浓度(1、 10和100nmol/L)的瘦素处理体外培养大鼠DRG神经元;采用免疫印迹技术,检测神经元中Bcl-2和Bax蛋白的表达变化.结果:10和100nmol/L的瘦素能促进DRG神经元中Bcl-2蛋白的表达;瘦素对Bax蛋白表达没有影响.结论:瘦素能促进DRG神经元中Bcl-2蛋白的表达,提示瘦素可通过提高Bcl-2蛋白表达来抑制Bax的促凋亡作用,从而改善DRG神经元的存活.这对进一步研究瘦素对DRG功能调节具有重要的意义.     

高血脂对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:通过检测大脑皮质内Bcl-2和Bax蛋白的表达,探讨高血脂加重脑缺血再灌注损伤的可能机制.方法:高脂饲料喂养建立高脂血症动物模型,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.神经行为学评分观察大鼠神经行为改变、TTC染色检测梗死灶体积、免疫印迹检测Bcl-2和Bax的表达.结果:与假手术组比较,单纯脑缺血再灌注组和高血脂合并脑缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加,并随再灌注时间的延长表达逐渐增加,再灌注24 h时达高峰,而后又降低.相同再灌注时间点,与单纯脑缺血再灌注组比较,高血脂合并脑缺血再灌注组Bcl-2减少但Bax增加.结论:高血脂可通过影响Bcl-2和Bax蛋白的表达,使Bcl-2/Bax值降低,加重脑缺血再灌注损伤.     

苦碟子对恶性黑色素瘤细胞抑制及凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达的影响

目的观察不同浓度中药苦碟子对恶性B16黑色素瘤细胞的抑制作用和凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达的变化,探讨中药苦碟子抑制B16黑色素瘤细胞生长的可能机制。方法通过细胞培养和MTT实验,检测苦碟子对B16黑色素瘤细胞的生长抑制情况,Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达,免疫荧光染色检测Bcl-2/Bax蛋白在不同浓度苦碟子处理的黑色素瘤细胞中的表达。透射电镜观察不同浓度梯度中药苦碟子诱导细胞凋亡,其细胞结构的特征性变化。结果随着苦碟子药物浓度的增加,黑色素瘤细胞活细胞数目逐渐减少,细胞存活率显著下降(<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平呈现下降趋势,而促凋亡蛋白Bax呈现上升趋势(<0.05),免疫荧光染色显示Bcl-2表达逐渐减少,Bax表达逐渐增加;电镜下凋亡小体数目不断增加,核固缩逐渐明显,细胞间隙增大,线粒体数目减少。结论中药苦碟子有浓度依赖性抑制黑色素瘤细胞生长,促进细胞凋亡,凋亡蛋白Bcl-2/Bax变化呈线性关系。     

大鼠额叶损伤后细胞凋亡及Bax与Bcl-2蛋白的表达变化

本研究目的为探讨大鼠额叶锐器损伤后细胞凋亡的变化规律及调控机制。通过电镜、TUNEL法及免疫组织化学染色方法检测细胞凋亡和Bax、Bcl2蛋白的表达变化,结果发现凋亡细胞在损伤后3h即可发现,24h达到高峰;伤后3hBax和Bcl2表达明显升高,Bax表达12h达到高峰,而Bcl2表达6h即达到高峰;伤后Bax/Bcl2比值上调,24h达到高峰,随后逐渐下降。结果表明大鼠额叶锐器伤后存在细胞凋亡,凋亡细胞数量的变化与伤后时程有关,Bax/Bcl2比值是决定细胞凋亡的重要因素。     

精索静脉曲张大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达和细胞凋亡的研究

目的：研究精索静脉曲张（VC）大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达与细胞凋亡及其机制。 方法： 选取35只成年健康雄性 Wistar大鼠，随机分为VC组（VG, n=20）和假手术组（SOG, n=15）。术后10周，取双侧睾丸，采用火焰原子吸收法测定线粒体钙、采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。 结果： VC组大鼠双侧睾丸生殖细胞线粒体钙的含量明显低于SOG组，生殖细胞凋亡显著增多，Bcl-2表达显著降低，Bax表达显著升高,但双侧睾丸生殖细胞凋亡率差异无显著。 结论： VC时，大鼠睾丸生殖细胞凋亡明显增加，提示VC时所致的男性不育可能是在某种凋亡诱发因素（高温、毒素返流、氧自由基等）作用下，线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达的变化直接对生殖细胞产生影响,导致男性不育。     

哮喘豚鼠嗜酸细胞Bcl-2和Bax mRNA表达及意义

目的:观察Bcl-2及Bax mRNA表达与嗜酸粒细胞（Eos）凋亡的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法:健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型,检测支气管灌洗液（BALF）中低密度EoS（HEos）及正常密度Eos（NEos）细胞凋亡,原位杂交及RT-PCR法检测Bcl-2及Bax mRNA表达。结果:哮喘组EoS显著高于正常组,以HEos为著（P<0.01）;Eos凋亡率明显低于正常组（P<0.01）。哮喘组不同密度Eos表达Bcl-2 mRNA明显增加,而Eos表达Bax mRNA明显减少。结论:哮喘时Eos存在凋亡抑制,这是哮喘时Eos增多的原因之一,哮喘豚鼠BALF Eos表达Bcl-2增加,表达Bax减少,表明Bcl-2及Bax可通过调节Eos凋亡参与哮喘发病。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax表达的作用研究

为了研究依达拉奉抗细胞凋亡的脑保护作用机制,本实验采用依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠进行治疗干预,观察大鼠脑组织Bcl-2和Bax的表达。将36只SD大鼠随机分为假手术组、再灌注组、依达拉奉治疗组,再灌注术后24h断头取脑,免疫组织化学和RT-PCR法观察脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果表明,大鼠脑缺血再灌注损伤后,Bcl-2和Bax含量显著增多;与再灌注组相比,依达拉奉治疗组Bcl-2的表达显著上调,Bax表达显著下调,Bcl-2/Bax比值显著升高。上述结果提示,依达拉奉的脑缺血保护作用可能与上调Bcl-2表达及下调Bax的表达有关。     

Apoptosis and the expression of Bax and Bcl-2 in hyperplasia and adenocarcinoma of the uterine endometrium

BACKGROUND: Apoptosis plays a crucial role in carcinogenesis in various tumours. This study was designed to investigate the occurrence of apoptosis and the expression of Bcl-2 and Bax proteins in endometrial tumours of corpus uteri. METHODS: Endometrial tissues were obtained from 20 patients with endometrioid adenocarcinoma, 16 patients with endometrial hyperplasia, and 4 patients with myoma uteri (which were used as controls). The occurrence of apoptosis was examined by using molecular biochemical techniques. The expression of Bcl-2 and Bax proteins was also investigated using immunohistochemical staining with appropriate antibodies. RESULTS: The labelling of DNA in situ indicated that apoptotic cells were sporadically seen in postmenopausal endometrium (5.2 +/- 2.1, n = 4) and endometrial hyperplasia without atypia (2.6 +/- 0.5, n = 9). In contrast, labelled cells were detected in atypical endometrial hyperplasia (15.9 +/- 2.2, n = 7), and their numbers increased intensely in adenocarcinoma (29.3 +/- 3.7, n = 20). Autoradiographic analysis revealed DNA laddering in many cases of carcinoma. Bcl-2 was highly immunopositive in hyperplasia without atypia (36.2 +/- 6.5%, n = 9), but was decreased in the atypical endometrial hyperplasia (16.3 +/- 4.8%, n = 7). Large fractions of the carcinoma (6.3 +/- 1.8%, n = 20) and normal endometrium (2.8 +/- 1.4%, n = 4) were immunonegative or slightly immunopositive to Bcl-2. In contrast, Bax immunoreactivity was more frequent and stronger in adenocarcinoma (43.6 +/- 4.1%, n = 20) than that in normal endometrium (17.6 +/- 6.7%, n = 4) and hyperplasia (7.2 +/- 2.2%, n = 16). CONCLUSIONS: These results suggest that cells in hyperplasia expressing Bcl-2 might have prolonged survival ability. Neoplastic cells in adenocarcinoma might show apoptosis in association with a decreased expression of Bcl-2 and an increased expression of Bax. Therefore, the frequency of apoptosis and the expression of Bcl-2 and Bax might be correlated with carcinogenesis in the uterine endometrium of humans.     

凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠下颌下腺内的表达

目的:观察糖尿病大鼠下颌下腺内凋亡相关蛋白Bcl-2和Pax表达变化.方法:SD雄性大鼠用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,H-E染色观察下颌下腺形态学变化,免疫组织化学SABC技术检测Bcl-2及Bax蛋白表达变化.结果:糖尿病组大鼠下颌下腺组织萎缩,间质纤维增生.与对照组比较,糖尿病组大鼠下颌下腺导管上皮细胞Bcl-2表达下降,Bax表达显著增加.结论:Bcl-2及Bax表达在糖尿病病理变化过程中出现了一定的变化规律.     

Bcl-2/Bax蛋白在生后大鼠卵巢不同发育时期的表达

目的 探讨Bcl-2/Bax与卵泡发育和凋亡的关系. 方法 用免疫组织化学技术和图像分析系统,对95只大鼠生后不同发育时期卵巢中凋亡相关因子Bcl-2/Bax的表达情况进行研究. 结果 0～360 d卵巢各级卵泡中的卵母细胞均呈Bcl-2/Bax阳性染色.正常卵细胞中Bcl-2反应强于Bax,退化卵细胞中Bax的反应强于Bcl-2.Bcl-2/Bax在卵泡细胞中的表达模式有所不同,21d前 Bcl-2为阳性,21～150d之间为Bcl-2阴性;180d以后正常卵泡为阴性,闭锁卵泡为阳性;Bax的表达,180d前全为阴性,180d后的表达同Bcl-2.膜细胞中Bcl-2/Bax的表达与卵泡细胞存在相似之处.Bcl-2/Bax在黄体中的表达只见于180d后. 结论 Bcl-2/Bax对卵细胞的生长、发育、存活和凋亡可能有重要的调节作用,其对卵泡细胞、膜细胞及黄体细胞的存活和凋亡的调节作用不明显.     

生育年龄妇女早期卵泡细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达

目的:研究生育年龄妇女早期卵泡的细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达。方法:12例卵巢组织标本来自进行妇科手术的生育年龄妇女(年龄23-38岁),并经过组织病理学检查证实无明显形态异常。利用末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法研究早期卵泡(包括始基卵泡、间期和初级卵泡)细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达。结果:早期卵泡内18.75%卵细胞表现TUNEL阳性,但是卵泡内未见TUNEL阳性颗粒细胞。BAX在早期卵泡的卵细胞内表达,阳性表达率76.07%;相反未见Bcl-2在卵细胞表达。另外,早期卵泡内颗粒细胞也没有表达Bcl-2和BAX。结论:生育年龄妇女早期卵泡的卵细胞发生凋亡,促凋亡蛋白BAX在卵细胞凋亡过程中发挥调节作用,由此提示BAX介导的卵细胞凋亡可能是生育年龄妇女早期卵泡闭锁的机制。     

大鼠脑冷冻伤模型建立及其bcl—2基因蛋白的表达

目的 建立大鼠脑冷冻伤模型并探讨脑组织细胞冷冻伤中Bcl-2的表达,提供抗损伤治疗的新思路。方法 运用液氮冷冻器作用于大鼠左侧顶部脑组织后2h、6h、12h,建立脑冷冻伤模型,同时观察冷冻伤侧脑组织病理形态学改变与Bcl-2表达的变化。结果 液氮作用后2h,脑组织已出现充血、水肿及神经元坏死的表现,并于12h明显累及海马回神经元。有价值的是,与坏死交界处的健在神经元呈现了Bcl-2的高表达。结论 说明了脑组织中神经元的损伤与Bcl-2基因蛋白的表达有关,提示通过抗细胞凋亡的途径对脑损伤治疗具有应用前景。     

Bcl-2 和Bax蛋白在慢性病毒性肝炎肝组织中的表达

目的研究细胞凋亡相关的Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白在慢性病毒性肝炎（ＣＨ）肝组织中表达的情况与该病发生发展的关系。方法对３５例不同病变程度的ＣＨ肝组织用免疫组化法检测Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达及定位。结果Ｂｃ１－２和Ｂａｘ分布基本一致，轻、中度ＣＨ主要见于碎屑样坏死（ＰＮ）区中的单个核细胞（ＭＮ），邻近ＰＮ区边缘的肝细胞浆中也有强阳性表达。ＨＥ染色观察，这些Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性肝细胞多呈重度水样变性或嗜酸性变。在重度ＣＨ肝组织中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性的ＭＮ主要分布于重度ＰＮ区和桥接坏死区，周围部分肝细胞Ｂａｘ阳性，而Ｂｃｌ－２为阴性。在慢性重型肝炎，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ除在亚大块肝细胞坏死区浸润的ＭＮ胞浆内表达外，残存肝细胞亦呈阳性表达。结论Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在肝组织中的表达可能不仅与ＣＨ的细胞凋亡有密切关系，而且与慢性重型肝炎的发生发展有关