线粒体凋亡途径在TA2小鼠自发性乳腺癌中的作用

比较TA2小鼠正常乳腺、乳腺癌前病变和乳腺癌组织中细胞增殖和凋亡的情况,通过检测线粒体凋亡途径中Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9在乳腺组织中的表达,初步确定线粒体凋亡途径在TA2小鼠自发乳腺癌中可能发挥的作用。方法:收集正常TA2成年雌鼠的乳腺组织（NC组）和TA2自发性乳腺癌癌前病变组织（SBC-b组）和乳腺癌组织（SBC-t组）,采用免疫组化方法检测各组乳腺上皮细胞中PCNA、Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达并计算增殖指数（PI）;采用TUNEL方法检测细胞凋亡并计算凋亡指数（AI）;采用Real-time PCR和Western blot方法检测组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达及mRNA相对表达水平。结果:免疫组化染色,Real-time PCR以及Western blot结果一致显示,SBC-b组Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9表达均明显高于NC（P<0.01或P<0.05）;SBC-t组中除Bcl-2高于NC外,其余蛋白表达均明显低于NC（P<0.01）,但bcl-2,bax和Caspase-3 mRNA表达均显著高于NC（P<0.01）,Caspase-9 mRNA略高于NC,但无统计学意义（P>0.05）。结论:线粒体途径可能参与了TA2鼠自发性乳腺癌的发生,其通过刺激部分乳腺上皮细胞凋亡,破坏了TA2小鼠乳腺上皮细胞增殖和凋亡的平衡,以致乳腺癌发生。      

MiR-374a通过PTEN/AKT信号通路调节乳腺癌细胞的增殖和凋亡

摘 要：［目的］ 探讨miR-374a在乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用，并进一步探讨其机制。［方法］ 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测人乳腺癌细胞MCF-7及正常人乳腺细胞Hs 578Bst的miR-374a及PTEN mRNA转录水平，Western blot法测定MCF-7、Hs 578Bst组细胞及对照、 miR-374a抑制剂组细胞的PTEN、p-AKT蛋白表达变化，用CCK-8法及Tunel法分别观察对照组和miR-374a抑制剂组细胞的增殖和凋亡，并用Western blot法检测两组细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达。［结果］ 与人正常乳腺Hs 578Bst细胞相比，乳腺癌MCF-7细胞的miR-374a表达水平显著性增高（P<0.001），PTEN mRNA及蛋白的表达水平显著性降低（P<0.001），而p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.001）。miR-374a抑制剂可抑制乳腺癌细胞的增殖（P<0.001），并促进其凋亡的发生（P<0.001），降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平（P<0.001）的同时活化凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9（P<0.001）。miR-374a 通过靶点PTEN影响AKT通路，miR-374a组细胞PTEN mRNA表达水平显著性降低（P<0.001），而miR-374a抑制剂处理后，PTEN蛋白水平显著性升高（P<0.001），p-AKT表达降低（P<0.001）。［结论］ miR-374a在乳腺癌细胞高表达，并通过调节PTEN/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖，促进凋亡的发生。miR-374a/PTEN/AKT信号通路有望成为乳腺癌的新治疗靶点。     

Survivin与乳腺癌雌激素受体信号通路相关基因的相关性

目的:探讨乳腺癌中Survivin与雌激素受体（estrogen receptor,ER）信号通路相关基因的相关性。方法:采用Real-time PCR技术检测10例乳腺癌组织中Survivin的含量,选择含量最高的3例作为高表达组,含量最低的3例作为低表达组;采用人乳腺癌雌激素受体信号通路PCR芯片检测两组标本中相关基因表达的差异。结果:两组标本中Survivin的含量差异有统计学意义（P<0.05）。雌激素受体信号通路相关基因PCR芯片检测结果表明,Survivin低表达组的ER含量较高表达组降低,但差异无统计学意义（P>0.05）;Survivin低表达组的CDKN1B、NME1、ERBB2、TOP2A含量较高表达组显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:在乳腺癌中,Survivin与CDKN1B、NME1、ERBB2、TOP2A的表达在mRNA水平上呈正相关,与ER的表达存在着正相关的趋势,表明Survivin与雌激素受体信号通路之间存在着一定的相关性。Survivin在乳腺癌的内分泌治疗中可能具有潜在的重要意义。     

乳腺癌组织中BCRP的表达与新辅助化疗疗效的关系

目的 探讨原发性乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein,BCRP）的表达与新辅助化疗疗效的相关性。方法 采用免疫组织化学MaxVisionTM一步法检测84例原发性乳腺癌组织中BCRP的表达,结合新辅助化疗后临床疗效及术后病理组织学Miller&Payne（MP）分级,分析BCRP的表达与新辅助化疗疗效及相关病理指标的相互关系。结果 （1）原发性乳腺癌组织中BCRP的阳性表达率为71.43%。（2）BCRP的表达水平与新辅助化疗临床疗效有关,新辅助化疗后获得cCR组患者BCRP表达水平明显低于SD+PD组和cPR组,三组间BCRP表达水平的差异有统计学意义（χ2=9.779,P=0.008）。（3）BCRP的表达水平与新辅助化疗后组织学反应有关,组织学显著反应组（病理反应4~5级）BCRP的表达水平明显低于组织学非显著反应组（病理反应1~3级）,差异有统计学意义（χ2=8.649,P=0.003）。（4）BCRP的表达水平与新辅助化疗后残余阳性腋窝淋巴结的个数正相关（r =0.518,P=0.000）。结论 BCRP在原发性乳腺癌组织中有一定程度的表达,BCRP的表达水平可以预测新辅助化疗的临床疗效及组织学反应,BCRP的表达水平与新辅助化疗后残余阳性腋窝淋巴结的个数正相关,BCRP可以作为判断患者化疗效果及预后指标之一。     

生存素乳腺癌耐药蛋白和人表皮生长因子受体2基因的表达与乳腺癌新辅助化疗疗效的关系

目的 探讨生存素(Survivin)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)以及人表皮生长因子受体2(HER-2)基因表达对乳腺癌TE方案新辅助化疗疗效的预测价值.方法 对56例乳腺癌患者行TE方案新辅助化疗,应用RT-PCR法检测TE方案化疗前后Survivin、BCRP和HER-2 mRNA的表达差异,并结合化疗疗效进行相关性分析.结果 56例乳腺癌患者经TE方案新辅助化疗后的总有效率为71.4％.全组完全缓解5例,病理完全缓解4例,部分缓解35例,稳定13例,进展3例.Survivin mRNA的阳性表达率由化疗前的60.7％降至化疗后的35.7％ (P =0.008);BCRP mRNA的阳性表达率由化疗前的37.5％降至化疗后的19.6％(P=0.036);HER-2 mRNA的阳性表达率由化疗前的41.1％降至化疗后的21.4％ (P =0.025).Survivin或BCRP单独阴性表达的患者化疗的有效率均较阳性表达者高(均P＜0.05).HER-2 mRNA的单独表达状况与化疗疗效无关(P =0.144).Survivin、BCRP和HER-2 mRNA均为阴性表达的患者化疗疗效高于其他各组(P =0.003).在乳腺癌组织中,Survivin、BCRP和HER-2 mRNA的表达之间不存在相关关系(P＞0.05).结论 联合检测Survivin、BCRP和HER-2的表达可作为预测乳腺癌TE方案新辅助化疗敏感性的分子生物学指标.     

胃癌组织中LMO1与Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白表达的关系及意义

摘 要：［目的］ 检测LMO1、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达,并对这些蛋白之间的关系和临床意义进行分析。 ［方法］ 对96例胃癌手术患者的肿瘤组织标本及50例癌旁组织标本进行免疫组化染色（SP法）,检测LMO1、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白的表达情况。同时收集患者的病理学情况,对与各指标的关系进行分析。 ［结果］ 胃癌组织中LMO1、Bcl-2、Survivin表达均比癌旁组织增强（均P<0.05）,Caspase-3蛋白在胃癌组织中表达低于癌旁组织（P<0.05）,Bax在两种组织中表达无明显差异（P>0.05）。胃癌组织中细胞凋亡率明显低于癌旁组织（P<0.01）。胃癌组织中LOM1蛋白强表达者细胞凋亡率明显低于弱表达者（P<0.01）。Spearman相关分析发现,胃癌组织中LMO1与Bcl-2表达存在正相关（r=0.3058,P=0.002）,LMO1与Caspase-3表达存在负相关（r=-0.2886,P=0.004）;Bcl-2与Survivin表达存在正相关关系（r=0.2986,P=0.0315）,Bcl-2与Bax表达呈负相关（r=-0.4062,P<0.001）,Survivin与Caspase-3也呈负相关（r=-0.3142,P=0.002）。［结论］ 胃癌组织中LMO1蛋白可能通过调节Bcl-2、Caspase-3的表达和活性而参与肿瘤凋亡。     

乳腺

乳腺肿瘤中Bcl-2、p53和PCNA蛋白的表达及临床意义；乳腺癌患者血中hMAM的表达及临床意义；局部血含量和血氧含量的检测在乳腺疾病诊断中的应用；Caspase-7、Caspase-3、Survivin与乳腺癌新辅助化疗的关系;hASIP基因在乳腺癌中的表达及其意义贻婷;     

干扰ANXA3基因表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘 要：［目的］ 探究干扰膜联蛋白A3（ANXA3）基因表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响以及可能作用机制。［方法］ 以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,RNA干扰技术沉默ANXA3基因表达,荧光定量RT-PCR和Western Blot检测转染后细胞中ANXA3 mRNA及蛋白表达;四甲基偶氮唑（MTT）法检测细胞的增殖能力变化,膜联蛋白 V-FITC（Annexin V-FITC）/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）蛋白的水平。［结果］ 空白对照组、阴性对照组和ANXA3干扰组细胞中ANXA3 mRNA的表达量分别为0.078±0.006、0.072±0.007和0.008±0.001;ANXA3蛋白表达量分别为0.792±0.085、0.764±0.078和0.353±0.039;细胞的凋亡率分别为（3.425±0.643）%、（3.537±0.740）%、（23.455±3.686）%;Bcl-2蛋白水平分别为1.256±0.247、1.239±0.265、0.624±0.065;Bax蛋白水平分别为0.856±0.086、0.842±0.079、1.526±0.344;Cleaved Caspase-3蛋白水平分别为0.522±0.057、0.535±0.062、1.230±0.367。与空白对照组相比,ANXA3干扰组细胞中ANXA3 mRNA和蛋白水平显著性降低（P<0.05）,细胞的增殖能力显著性降低（P<0.05）,其凋亡率显著性增加（P<0.05）;细胞中Bcl-2蛋白水平显著性下调（P<0.05）,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著性上调（P<0.05）。［结论］ 干扰ANXA3表达抑制乳腺癌细胞增殖,诱导其凋亡,其作用与Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平变化引起的细胞凋亡通路的变化有关。     

基因Survivin、Caspase-9在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生的关系

目的:观察凋亡相关基因Survivin和Caspase-9在胃癌组织中的表达以及它们与胃癌发生的关系.方法:采用RT-PCR方法检测Survivin和Caspase-9在30例胃癌组织、10例正常胃组织标本中的表达.结果:30例胃癌组织中20例Survivin mRNA表达阳性,10例正常胃组织无Survivin mRNA表达;30例胃癌组织和10例正常胃组织均有Caspase-9 mRNA表达,20例Survivin mRNA表达阳性的胃癌组织Caspase-9 mRNA表达水平与10例SurvivinmRNA表达阴性的胃癌组织Caspase-9 mRNA表达水平无明显差别,30例胃癌组织Caspase-9 mRNA表达水平明显低于10例正常胃组织.结论:Survivin在胃癌组织中的表达明显升高,Caspase-9表达明显降低.Survivin表达升高及Caspase-9表达降低是胃癌发生的重要因素之一.     

Survivin和Caspase-9基因在新疆维族、汉族HER-2阳性乳腺癌组织中的表达及意义

目的:检测Survivin和Caspase-9基因在新疆维族、汉族HER-2阳性乳腺癌组织中的表达,了解两基因在两民族女性乳腺癌患者之间的差异,初步探明两基因可能存在的作用。方法:选取初次确诊为乳腺癌的女性患者,经术前或者术后免疫组化检查为HER-2阳性者共48例,以各民族良性乳腺病患者标本为对照。采用免疫组化和real-time RT-PCR分别检测Survivin和Caspase-9基因的表达,并分析各指标在各组之间表达的差异。结果:real-time RT-PCR结果显示:Survivin基因在维吾尔族组表达高于汉族组,两组均高于各自民族的对照组,均P<0.05。两民族对照组之间差异无统计学意义,P>0.05。Caspase-9基因在维吾尔族组表达略低于汉族组,但差异没有统计学意义,P>0.05。维吾尔族组和汉族组均低于各自民族对照组,均P<0.05。两民族对照组之间差异没有统计学意义,P>0.05。免疫组化结果显示:Survivin基因维吾尔族组表达略高于汉族组,但差异没有统计学意义,P>0.05。维吾尔族组和汉族组均高于各自民族对照组,均P<0.05。两民族对照组之间差异没有统计学意义,P>0.05。Caspase-9基因在维吾尔族组表达略低于汉族组,但差异没有统计学意义,P>0.05。维吾尔族组和汉族组均高于各自民族对照组,均P<0.05。两民族对照组之间差异没有统计学意义,P>0.05。结论:Survivin基因和Caspase-9基因在新疆维汉民族妇女HER-2阳性过表达乳腺癌患者之间表达不同,Survivin基因表达增强,Caspase-9基因表达减弱可能更易导致维吾尔族女性HER-2阳性乳腺癌的发生。     

Bcl-2,Bax在乳腺癌中表达的临床意义

目的　探讨Bcl 2 ,Bax在乳腺癌中表达的临床意义。方法　免疫组化链霉菌素 生物素 (S P)法对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的乳腺癌 82例 (其中有腋窝淋巴结转移的 61例 ) ,15例乳腺良性肿瘤和 15例正常乳腺组织作对照 ,检测Bcl 2 ,Bax的表达情况。结果　Bcl 2在癌组织中的表达 ( 5 6 10 % )与正常乳腺组织 ( 3 3 3 3 % )和良性肿瘤 ( 4 0 0 0 % )中的表达无统计学差异 ,在不同种类、不同分级的浸润性导管癌中无明显差异 (P >0 0 5 ) ,在有转移 ( 4 7 5 4% )和无转移组 ( 80 95 % )中有明显差异 (P <0 0 1)。Bax在癌组织中的 ( 60 98% )表达与正常乳腺组织 ( 73 3 3 % )和良性肿瘤中 ( 60 0 0 % )的表达无统计学差异 ,在不同种类癌中无明显差异 (P>0 0 5 ) ,在不同分级的浸润性导管癌中有显著差异 (P <0 0 5 ) ,在有转移 ( 67 2 1% )和无转移组 ( 4 2 86% )中有显著差异 (P <0 0 5 )。两者在乳腺癌中的表达有相关 (P <0 0 5 )。结论　检测乳腺癌Bcl 2 ,Bax基因的表达情况 ,有助于预测乳腺癌患者的淋巴结转移情况及预后     

BP1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨BP1与乳腺癌临床病理因素的关系及与Bcl-2表达的相关性。方法运用Western blot及免疫组织化学方法检测45例乳腺癌组织和相应癌旁组织中BP1以及乳腺癌组织中Bcl-2、ER、PR、C-erbB-2的蛋白表达。结果乳腺癌组织中BP1蛋白阳性表达水平及阳性细胞数均高于相应癌旁组织,差异均有统计学意义(P均<0.05)。乳腺癌组织中BP1蛋白表达水平与Bcl-2蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.678,P<0.05);乳腺癌组织中BP1蛋白阳性细胞数与Bcl-2阳性细胞数呈正相关关系(r=0.653,P<0.05)。BP1高表达与ER、PR及C-erbB-2有关(P均<0.05)。结论 BP1蛋白可能具有促进乳腺癌发生、发展的作用,这可能与其上调Bcl-2表达进而抑制乳腺癌细胞凋亡有关。     

BCRP和Ki-67与乳腺癌新辅助化疗疗效的关系

目的:探讨乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和Ki-67的表达与新辅助化疗疗效之间的关系.方法:回顾性分析我科2012 年10月至2014年8 月收治的Ⅱ-Ⅲ期乳腺癌新辅助化疗患者65例,采用免疫组化方法检测BCRP和Ki-67的表达,分析BCRP、Ki-67的表达水平与新辅助化疗疗效的关系.结果:原发性乳腺癌组织中BCRP的阳性表达率为67.7%.BCRP的表达水平与新辅助化疗后病理组织学反应有关,组织学显著反应组(病理反应4~5级)BCRP的表达水平明显低于非显著反应组(病理反应1~3级),差异有统计学意义(x2=12.77,P=0.001).化疗前Ki-67高表达组临床缓解率明显高于低表达组(x2=17.72,P<0.00). 结论: 联合检测乳腺癌组织中BCRP和Ki-67 的表达水平对新辅助化疗疗效有一定的预测价值.     

乳腺癌干细胞多药耐药基因的表达及意义

Objective:To approach the expressions of MDR1 and BCRP in breast cancer stem cells and differentiated cells.Methods:The breast cancer stem calls were separated from human breast cancer primary tissues and MCF-7 by flow cytometry.Then we measured the expressions of MDR1 and BCRP with different subset cells by Realtime-PCR.Results:Contrasted with breast cancer differentiated cells,the expressions of MDR1 and BCRP in breast cancer stem calls were higher (P＜0.01),and the proportion of stem cells rose after chemotherapy (P＜0.01).Conclusion:Contrasted with breast cancer differentiated cells,breast cancer stem cells have stronger ability of clrug-resistanca with higher level of multi-drug resistance genes,and it is one of key points for chemotherapy failure of breast cancer.     

Twist调控对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响及其机制探讨

目的:探究Twist调控对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响及其机制。方法:从我院2016年3月至2017年3月间确诊的卵巢癌患者中选择75例作为研究组,其中早期14例,中期42例,晚期19例;另随机选择同期来我院体检的健康人75例作为对照组。收集两组患者的卵巢组织,用免疫组化的方法检测Twist、N-cadherin与E-cadherin和MMP-9蛋白的表达情况,用RT-PCR法检测Twist、N-cadherin与E-cadherin、细胞凋亡相关基因（Bcl-2、Bax）mRNA表达水平。结果:研究组患者卵巢组织中的Twist、MMP-9蛋白阳性表达率显著高于对照组患者（P<0.05）;研究组患者卵巢组织中N-cadherin蛋白阳性表达率显著高于对照组患者（P<0.05）,而对照组患者E-cadherin蛋白阳性表达率显著高于研究组患者（P<0.05）;研究组患者卵巢组织中Twist、N-cadherin mRNA表达水平显著高于对照组患者（P<0.05）,对照组患者E-cadherin mRNA表达水平显著高于研究组患者（P<0.05）;研究组患者卵巢组织中Bcl-2 mRNA表达水平显著高于对照组患者（P<0.05）,对照组患者Bax mRNA表达水平显著高于研究组患者（P<0.05）。 结论:Twist在卵巢癌的侵袭与转移中发挥了重要的作用,其参与了上皮间质转化的过程。     

血浆纤维蛋白原水平与乳腺癌新辅助化疗疗效及预后的相关性

目的:评估血浆纤维蛋白原水平与乳腺癌新辅助化疗患者临床效果和预后的关系。方法:使用Clauss凝固法定量检测188例乳腺癌患者新辅助化疗前外周血中纤维蛋白原水平,根据纤维蛋白原水平将患者分为降低组、正常组或升高组。分析纤维蛋白原水平与病理完全缓解（pCR）的相关性,并进行预后分析。结果:月经状态与血浆纤维蛋白原水平相关（P<0.05）。纤维蛋白原水平是pCR的独立预测因素（P=0.002,95%CI:1.699~9.347）。Kaplan-Meier分析显示血浆纤维蛋白原水平升高组的无病生存期（DFS）和总生存期（OS）缩短（P<0.05）。单因素和多因素生存分析均显示分子分型、肿瘤大小、淋巴结状态、纤维蛋白原水平及pCR是DFS和OS的独立预后因素（P<0.05）。结论:血浆纤维蛋白原水平降低提示预后较好,血浆纤维蛋白原水平可能成为预测局部晚期乳腺癌患者新辅助化疗pCR和预后的生物学标志物。