先天性胫骨假关节患者染色体核型的初步分析

目的 先天性胫骨假关节(congenital paseudarthrosis of tibia,CVF)病因尚不清楚，通过细胞培养及染色体核型研究的方法了解先天性胫骨假关节患染色体核型的情况，探讨其与神经纤维瘤病(neurofibromatosis，NF)之间的相关性。方法 患来自西京医院骨科1982—1999年手术治疗的28例CPT患中有随访记录的患10例。所有患均经病理学及临床检查确诊。男7例，女3例；左侧5例，右侧4例，双侧1例；年龄4—17岁，平均11．5岁。7例患躯干上有奶油咖啡斑。取患的外周抗凝血1—2ml，无菌条件下加入含有植物凝血素(phytahematoagglutinin PHA)及体积分数为100ml／L小牛血清的1640培养液中，37℃恒温箱内培养70—72h。于终止培养前4h加入秋水仙素(10μg／ml)继续培养直至收获，制片，行染色体核型分析。结果 10例CPT患的淋巴细胞培养均获得可分析标本。所有患染色体核型均正常，未见染色体核型缺失及多倍体，均为46XY或46XX型。结论 NF不是CPT的病因，他们在基因定位方面可能存在某种联系。     

先天性胫骨假关节中肌纤维母细胞的表达研究

目的深入了解先天性胫骨假关节(CPT)的病理变化、细胞类型及其病变来源。方法(1)取5例先天胫骨假关节(CPT)标本中不同部位的组织20例,经固定、切片染色后置于透射电镜下进行观察。(2)同时采用免疫组化及免疫荧光方法对24例CPT病人的25个病变骨膜标本中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMactin)、波纹蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)进行检测。以正常骨膜(10例),创伤性假关节(TP)骨膜(20例)和纤维瘤病组织(10例)作为对照。结果(1)断端间组织及病变骨膜组织性质完全一样,均为致密纤维结缔组织,细胞成分多,主要纤维母细胞、肌纤维母细胞及少量未分化细胞。移行部位骨膜组织结构与病变处骨膜组织结构相似。(2)所有标本均为波纹蛋白染色阳性,结蛋白染色阴性,20例先天性胫骨假关节骨膜和8例纤维瘤病病变组织中α-平滑肌肌动蛋白染色阳性,两者无显著性相差(P>0.05),正常骨膜及创伤性假关节(TP)骨膜中α-平滑肌肌动蛋白染色阴性,与先天性胫骨假关节骨膜和纤维瘤病病变组织有显著性相差(P<0.01)。结论(1)先天胫骨假关节(CPT)是非神经起源的、而是起源于骨膜的一种细胞增生活跃的纤维增生性变;(2)肌纤维母细胞是先天胫骨假关节发病中关键的病理因素之一。     

手术治疗先天性胫骨假关节的护理

先天性胫骨假关节(congenital pseudarthrosis of the tibia,CPT)是小儿矫形外科罕见且治疗困难的一种疾病。其发生率为1/14万~1/19万,男女比例相当,左侧受累稍多于右侧,双侧同时受累者十分罕见。病因不明,约有50%的患儿同时患神经纤维瘤病(NF),其他患儿尚存在遗传及机械因素[1]。我科于2004年1月—2006年4月期间收治过8例先天性胫骨假关节的患儿,现将护理体会报道如下。1临床资料2004年1月—2006年4月在我科接受治疗的先天性胫骨假关节患儿8例,男3例,女5例。年龄2.5~4岁。右小腿6例,左小腿2例。2例行带血管蒂腓骨移植,6例行病段切除植骨…     

先天性胫骨假关节中肌纤维母细胞的表达研究

目的：深入了解先天性胫骨假关节（CPT)的病理变化、细胞类型及其病变来源。方法：（１）取5例先天性胫骨假关节（CPT）标本中不同部位的组织20例， 经固定、切片染色后置于透射电镜下进行观察。（2）同时采用免疫组化及免疫荧光方法对24例CPT病人的25个病变骨膜标本中α－平滑肌肌动蛋白（α-SM actin)、波纹蛋白（vimentin)、结蛋白（desmin)进行检测。以正常骨膜（10例），创伤性假关节（TP）骨膜（20例）和纤维瘤病组织（10例）作为对照。结果：（1）断端间组织及病变骨膜组织性质完全一样，均为致密纤维结缔组织，细胞成分多，主要纤维母细胞、肌纤维母细胞及少量未分化细胞。移行部位骨膜组织结构与病变处骨膜组织结构相似。（2）所有标本均为波纹蛋白染色阳性，结蛋白染色阴性，20例先天性胫骨假关节骨膜和8例纤维瘤病病变组织中α-平滑肌肌动蛋白染色阳性，两者无显著性相差（P＞0．05），正常骨膜及创伤性假关节（TP）骨膜中α－平滑肌肌动蛋白染色阴性，与先天性胫骨假关节骨膜和纤维瘤病病变组织有显著性相差（P＜0．01）。结论：（1）先天性胫骨假关节（CPT)是非神经起源的、而是起源于骨膜的一种细胞增生活跃的纤维增生性变；（2）肌纤维母细胞是先天性胫骨假关节发病中关键的病理因素之一。     

先天性胫骨假关节5例分析

先天性胫骨假关节(CPT)是临床上罕见的疾病，据统计，其发生率占新生儿的1／25万，多发生于一侧。CPT是骨科领域中一种认识较少易误诊且治疗极为困难、预后差的疾病，对我院1999年以来收治CPT5例分析如下。     

127例先天性胫骨假关节患儿父母心理精神状况调查

正先天性胫骨假关节(congenital pseudarthrosis of the tibia,CPT)是发育异常导致的胫骨畸形,表现为胫骨成角畸形、髓腔狭窄或囊肿等,最终形成不愈合的假关节,是儿童骨科最具挑战、最难治愈的疾病之一[1-5],也是一种罕见病[6-7],其发病率为1/250 000～1/140 000[7]。该病症病程长、治疗难、需反复多次手术、费用高,患者需随访至骨骼完全成熟。因此,长期、多次手术及复杂的     

先天性胫骨假关节相关病理变化研究

目的明确先天性胫骨假关节(CPT)病变骨膜中I、III型胶原的含量及排列.方法采用天狼猩红染色辅以计算机图像分析技术对24例CPT病人的25个病变骨膜标本中I、III型胶原的含量进行检测.结果CPT骨膜中I、III型胶原含量与正常骨膜及创伤性假关节中I、III型胶原含量相差显著(P<0.01),而与纤维瘤病相比I、III型胶原表达相差不显著(P>0.05).结论CPT的发病机制可能与骨膜上I、III型胶原的比率发生变化导致的异常纤维增生有关.     

先天性胫骨假关节骨膜组织中基质金属蛋白酶对骨生成的影响

目的:基质金属蛋白酶在骨胚胎发育、改建及病理过程中所起的关键作用已引起人们的重视.明确基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在先天性胫骨假关节病变处骨膜组织中的含量,探讨其与发病机制的关系.方法:标本来自1990-01/2004-12年吉林大学第一临床医院骨关节二科收治的先天性胫骨假关节患者19例,年龄4～13岁,取材部位为假关节病变处骨膜组织;以10例正常骨膜做阴性对照,年龄10～15岁;15例胫骨闭合骨折断端周围骨膜做阳性对照.所取标本均经家属及本人同意.采用免疫组织化学方法观察上述标本骨膜组织内基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达.结果:①基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9主要在血管内皮细胞胞浆中表达.②基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在假关节病变骨膜内表达的阳性程度与创伤后骨折断端骨膜无明显差异(P＞0.05),但都明显高于正常骨膜(P＜0.05,P＜0.01);二者在骨膜内的表达水平具有明显相关性(P＜0.01).结论:先天性胫骨假关节骨膜组织中基质内基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9在病理条件下表达增强影响骨生成,是形成假关节的重要原因.     

15例Turner综合征患者临床特征和染色体核型分析

目的收集并分析Turner综合征(turner syndrome,TS)患者的临床资料,加强对TS患者临床特征及染色体异常的认识。方法收集15例TS患者的病史,以及实验室、影像学检查结果。结果 15例TS患者中发现染色体核型4种,9例患者核型为45,X0,1例为46,XX/45,X0,4例为46,X,i(Xq),1例为46,X,inv(Xq)。初诊年龄≤18岁的患者10例,其中8例身高在同龄女童身高第3百分位数以下,2例在第10百分位数以下。15例患者均存在不同程度的乳房及外阴发育异常,阴毛、腋毛均缺如。12例患者子宫发育异常;10例卵巢发育异常。12例患者雌二醇降低,卵泡刺激素、黄体生成素相对偏高。8例患者合并桥本甲状腺炎,其中2例合并亚临床甲状腺功能亢进,1例合并Graves’甲亢,3例合并亚临床甲状腺功能减退,1例合并甲状腺功能减退。5例肝功能异常;1例合并2型糖尿病。合并先天性心脏病-房间隔缺损1例;合并马蹄肾1例。结论 TS患者染色体核型众多,临床体征各不相同,但均有生长发育迟缓及性腺发育不良的特征。     

腓骨瓣移植＋外固定支架治疗先天性胫骨假关节

目的介绍用自体腓骨瓣移植＋外固定支架治疗先天性胫骨假关节的临床经验和疗效。方法对23例先天性胫骨假关节患耆采用自体腓骨瓣移植加用外固定支架治疗先天性胫骨假关节。结果其中20例假关节经1次手术愈合,愈合时间4～7个月,平均愈合时间5．1个月;3例经2次手术,假关节14个月愈合。结论所转移的自体腓骨瓣具有丰富的血供,能有效防止骨吸收,有提高骨愈合及延长肢体的效果,是目前治疗先天性胫骨假关节较为理想的方法。     

MLPA技术联合染色体核型分析检测儿童发育异常的临床研究

目的探讨多重链接依赖性探针扩增(MLPA)技术联合染色体核型分析在检测儿童发育异常中的临床应用价值。方法收集87例生长发育异常的儿童,抽取外周血进行传统G显带核型分析,并运用MLPA技术进行染色体微缺失等检测,分析发育异常儿童的染色体情况。结果 87例患儿中检出异常核型22例,异常率为25.3%,包括46,XY,小Y染色体核型10例、45,X核型2例、45,X/46,XY核型1例、46,XY/45,XX核型1例、47,XXY核型1例等。在65例正常核型中MLPA仍检测出8例存在微缺失或微重复。结论 MLPA技术联合染色体核型分析为临床诊断儿童发育异常提供了一条有效、准确的检测流程,有利于提高染色体异常的检出率和准确率。     

Effect of digoxin on DNA synthesis and cell viability in human breast tumour tissue in organ culture

10 biopsy specimens of primary breast tumours from 10 patients were classified histopathologically into 8 ductal carcinomas and 2 lobular carcinomas. Portions of tumour of approximately 1 mm3 were cultured in Medium 199 buffered with 20 mM Hepes for 48 h with or without addition of digoxin at concentrations from 1-2 ng/ml to 10-20 micrograms/ml of culture medium. Measurement of DNA synthesis by [3H]-thymidine incorporation, DNA analysis and histological examination showed that 5 biopsy specimens demonstrated epithelial cell survival in culture. These cultures were significantly (p less than 0.001) affected by digoxin at concentrations above 10-20 ng/ml, with suppression of [3H]-thymidine incorporation and reduced epithelial cell viability. Parallel studies on 5 biopsy specimens of DMBA-induced rat mammary carcinomas showed no effects of digoxin up to 10 micrograms/ml of culture medium. These studies indicate the possibility of this class of drug being of use in growth suppression of breast tumours.     

CpG-寡核苷酸免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病遗传学研究中的应用

目的:探索CpG-寡核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotide,CpG-ODN)免疫刺激法在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞染色体培养中的价值,对比国内外相关研究的差异,进一步提高CLL核型培养成功率及异常核型检出率。方法:收集82例CLL患者的骨髓标本,分别应用植物血凝素(PHA)、CpG-寡核苷酸联合白介素-2(CpG-ODN DSP30+IL-2)刺激培养72 h后收获细胞,制备染色体,进行常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)分析。同时应用D13S25、Rb1、ATM、p53和CSP12探针进行间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization,iFISH)检测。比较2种细胞刺激剂进行染色体培养及iFISH检测结果的差异性。结果:PHA与CpG-ODN DSP30+IL-22种免疫刺激法核型培养成功率(可分析分裂相t≥20个)分别为90.2%(74例)和68.3%(56例),异常核型检出率分别为13.5%(10例)和46.4%(26例)。PHA组核型培养成功率显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.01),而CpG-ODN DSP30+IL-2组异常核型检出率显著高于PHA组(P=0.003)。iFISH异常核型检出率(74.4%,61例)显著高于CpG-ODN DSP30+IL-2组(P=0.000)。iFISH检测能验证CC分析检出的异常。结论:应用CpG-ODN DSP30+IL-2免疫刺激法培养CLL细胞,可提高异常核型检出率,特别是能检出提示预后差的各种易位。     

30例含Y染色体表型女性患者的月经异常

目的：探讨表型女性伴月经异常、细胞遗传学检查存在Ｙ染色体的患者染色体组型与临床表现的关系。方法：对月经异常患者抽血行染色体组检查,采用Ｇ显带分析或常规染色分析。结果：发现３０例患者含Ｙ染色体组其组型分别为２５％４６,ＸＹ〈３例４６,ＸＸ／４６,ＸＹ及３例４５,Ｘ／４６,ＸＹ。４６,ＸＹ组型中１６例表现为睾丸女性化综合征,７例单纯性ＸＹ性腺发育不全,１例卵巢早衰,１例混合性性腺发育不全,４６,ＸＸ／     

306例骨髓增生异常综合征染色体核型的研究

本研究目的是探讨染色体异常克隆在骨髓增生异常综合征 (MDS)诊断及预后评估中的重要地位。运用染色体常规G显带技术及FISH技术对 30 6例MDS患者的染色体核型进行分析 ,并对其中 93例进行临床追踪观察。结果表明 :30 6例MDS中有 14 4例检出异常克隆 ,总的核型异常率为 4 7.1% ,发生频率较高的染色体畸变依次为 : 8,易位型 ,复杂及高度复杂异常核型 ,- 7/ 7q - ,2 0q - / - 2 0 ,三体 1或部分三体 1, 9/ 9q ,-Y , 11/ 11q - ,- 9/ 9q - ,dup(1q) , 2 1。难治性贫血伴原始细胞增多 (RAEB)与转化性难治性贫血伴原始细胞增多(RAEBT)的核型异常率明显高于难治性贫血 (RA)及难治性贫血伴缺粒幼细胞 (RAS) (P <0 .0 5 )。有诱变剂接触史者染色体畸变率高于无诱变剂接触史者。随访 93例中核型异常者生存时间明显短于核型正常者 (P <0 .0 0 5 ) ,向急性白血病转化的机率明显高于核型正常者 (P <0 .0 5 ) ,其中复杂或高度复杂核型 ,- 7/ 7q - , 11/ 11q -者预后差。结论 :MDS是一组高度异质性的克隆性疾病 ,染色体核型分析对MDS的正确诊断、病情监测、治疗方案选择及预后评估有重要价值。     

造血干细胞移植后白血病细胞遗传学和融合基因表达临床意义

目的 探讨造血干细胞移植后白血病细胞遗传学改变和基因表达的情况。方法 用骨髓细胞短期培养法和直接法G显带分析染色体；双色荧光原位杂交检测bcr／abl融合基因。结果 2例供者为女性的男性急性髓细胞性白血病患者allo-PBSCT后，染色体检测持续46，XX。最长生存已50个月。4例慢性髓细胞性白血病经allo-PBSCT。后，Ph染色体阳性和bcr／abl融合基因阳性1例，供者淋巴细胞输注加干扰素治疗，已生存70个月。Ph染色体阴性bcr／abl融合基因阳性2例，最长生存已27个月。Ph染色体阴性bcr／abl融合基因阴性1例，已生存14个月。2例急性髓细胞性白血病自体造血干细胞移植后检测出非特征性染色体畸变，复发后再化疗达完全缓解，最长生存期达81个月。结论 造血干细胞移植后白血病细胞遗传学检测可观察近期疗效，并指导后续治疗方法的选择。     

Haemodynamic and neurohumoral effects of cold pressor test in severe heart failure

Summary. The effect of a cold pressor test (CPT) on haemodynamics in relation to general and regional sympathetic activity and arginin vasopressin (AVP), was studied in eleven patients with severe congestive heart failure (CHF). Compared to an age-matched control group (C), resting arterial plasma noradrenaline (NA) (419 ±77 vs. 182 ±15 pg ml^-1), and adrenaline (A) (142 ±28 vs 54 ±10 pg ml^-1) were higher (P<0.05) in CHF. AVP showed no significant difference (14±4 vs. 9±4 pg ml^-1). During CPT systolic and diastolic blood pressure and systemic vascular resistance increased (P<0.01), as did NA (δ 114±39 pg ml^-1, P<0.01), A (δ 33 ± 10 pg ml, P<0.01) and heart rate (δ 10 beats min^-1, P<0.01). The myocardial v-a difference of NA decreased (P<0.05), but was unchanged across the renal vascular bed during CPT. The a-v difference of NA in the hepatic vascular bed, and fractional extraction of A in the coronary sinus, renal and hepatic vascular beds remained unchanged during CPT. AVP did not change significantly and no change in cardiac index or left ventricular filling pressure was observed during CPT. These data suggest that despite an increased activation of the sympathetic nervous system at rest, a further increase in blood pressure and catecholamines took place during CPT. Thus, the effect of a CPT which activates the central sympathetic system seems not to be altered in patients with severe CHF.     

基于微阵列芯片的比较基因组杂交技术在原发性闭经患者中的应用

目的 采用array-CGH技术对原发性闭经患者进行检测,探讨原发性闭经的分子生物学机制.方法 选取原发性闭经患者10例,另外选择10名具有规则月经周期的同龄女性自愿者作为健康对照者.分别采用常规细胞核型分析技术及array-CGH技术对10例原发性闭经患者和健康对照者进行分析.细胞核型分析技术采用常规G显带染色体核型分析技术,array-CGH技术采用美国Affymetrix公司Cytogenetic 2.7M微阵列芯片技术.结果 10例原发性闭经病例经常规G显带染色体核型分析未发现异常,所有病例和健康对照标本均为正常女性染色体核型:46,XX.Array-CGH 分析结果显示,有5例原发性闭经患者的X染色体短臂末端发生了约110000 bp的细小缺失,定位到染色体上的位置为:46,X,del(X)(p22.33).所有健康对照者经array-CGH分析均未见异常的DNA拷贝数改变.结论 Array-CGH技术在DNA水平上提高了染色体病的诊断水平,对于常规方法不能明确诊断的原发性闭经患者,有必要应用array-CGH技术进行更高分辨率的遗传学分析.     

染色体核型异常患者全基因组芯片扫描结果分析

目的利用全基因组芯片扫描技术对染色体核型检测结果异常的患者样本进行重复检测分析,验证并确认患者染色体的具体核型。方法利用基因分型芯片技术对9例临床表型皆为智力落后合并多发畸形,且核型结果异常的样本进行检测分析,比较两种技术之间结果相符程度,通过芯片平台结果来验证染色体核型技术的准确性,同时分析其临床适用性。结果染色体核型结果和全基因组芯片分析技术的结果完全符合的为2例Turner综合征患者,均为嵌合型;3例染色体核型结果阳性患者,全基因组芯片分析结果为阴性,其中2例为随体增加,1例为染色体内倒位;4例涉及染色体片段大小不同的缺失和复制的患者,核型结果和全基因组芯片结果差异较大,并且核型检测结果与患者实际核型相差较大。结论染色体核型技术在用于以往认定的适应症如智力落后、多发畸形的检测中,检测的准确性相对全基因组芯片技术较低,在明确定位染色体缺失和复制大小及位置的能力上有明显的不足,但对于检测染色体平衡性结构性变化的作用不能被芯片所取代。     

31例12p染色体畸变血液病患者细胞遗传学和临床分析

为研究12p染色体异常的细胞遗传学和临床特点，收集临床病例并将患者骨髓细胞进行24小时短期培养后，按常规方法制备染色体标本，用G显带技术进行核型分析。结果表明：31例中12p平衡易位16例，12p缺失10例，add(12p)6例，inv(12)1例。按复杂核型分类法，16例12p易位中简单畸变6例，复杂畸变6例，高度复杂畸变4例。10例12p缺失以高度复杂畸变为主，计有7例，简单畸变仅1例。31例中急性白血病21例，骨髓增生异常综合征3例，慢性粒细胞白血病4例，慢粒急淋变、非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润、多发性骨髓瘤各1例。有完整随访资料的患者14例，其中8例急性白血病患者仅进行常规化疗，3例获得完全缓解，该8例患者中位生存时间5．5月。结论12p染色体畸变累及多种血液系统恶性疾病，核型多为复杂畸变，病人缓解率低、生存时间短。