日本血吸虫病患者尿液中循环抗原和抗体联合检测的诊断价值

[目的 ]探讨尿液中血吸虫循环抗原和抗体检测对日本血吸虫病的诊断价值。 [方法 ]用单克隆抗体夹心 ELISA法检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原 ,间接ELISA检测尿液中特异性抗体。 [结果 ]10例急性血吸虫病和 6 1例慢性血吸虫病患者尿液中循环抗原的阳性率分别为 6 0 %和 40 % ,特异性抗体的阳性率分别为 80 %和 6 1 7%。两者联合检测的总阳性率分别为 10 0 %和 71 7%。 10 0例健康对照者尿液中仅 3%出现假阳性。 [结论 ]检测尿液中日本血吸虫循环抗原和特异性抗体简便、实用 ,为一种非损伤性的血吸虫病诊断方法。     

日本血吸虫成虫表膜抗原的诊断效果及疗效考核价值

[目的 ]探讨日本血吸虫成虫表膜抗原 (Sj MAg)检测日本血吸虫病患者的特异性和敏感性及考核疗效价值。 [方法 ]采用 Sj MAg- EL ISA检测治疗前、后不同时期血吸虫病患者血清中特异性 Ig G、 Ig G4及健康人、并殖吸虫、华支睾吸虫及囊尾蚴病患者血清中的交叉抗体。 [结果 ]Sj MAg的敏感性和特异性与可溶性虫卵抗原(Sj SEA)比较 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;用 Sj MAg- EL ISA检测治疗后 12个月患者血清中 Ig G的阴转率为80 .0 % ,显著高于 SEA- EL ISA的 43.3% ,而检测 Ig G4的阴转率为 93.3% ,显著高于 Sj SEA- EL ISA的 6 0 % ,检测治疗后 2 4个月患者血清中 Ig G和 Ig G4的阴转率分别达 92 .9%和 97.6 %。 [结论 ]Sj MAg- EL ISA检测日本血吸虫病具有与 Sj SEA- EL ISA相同的诊断价值和较高的考核疗效价值。     

金标抗rSjc26GST多克隆抗体斑点免疫金渗滤法检测血吸虫循环抗原的研究

目的　探索一种简捷的检测血吸虫循环抗原的方法。方法　应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽 - S-转移酶 (r Sjc2 6 GST)的多克隆抗体标记胶体金 ,建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法 (S- DIGFA) ,并以 S- EL ISA作对比。结果　用 S- DIGFA和 S- EL ISA平行检测 95例慢性血吸虫病患者 ,阳性检出率分别为 81.0 5 %和 82 .11% ;正常人血清 180份 ,两者的假阳性率分别为 6 .6 7%和 7.78%。结论　经统计分析证明 S- DIGFA的敏感性和特异性与 S-EL ISA相近 ,且方法更简便快速 ,适合于基层应用。并表明 r Sjc2 6 GST抗原具有诊断血吸虫病的应用价值。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原38kDa分子的纯化及诊断价值的初步评估

[目的 ]探讨日本血吸虫虫卵可溶性抗原 (SEA) 38k Da分子诊断血吸虫病的应用价值。 [方法 ]用 SDS-PAGE配合电渗洗脱技术分离纯化了诊断靶抗原 SEA38k Da,并经 SDS- PAGE和 Western blot鉴定 ;将 SEA38k Da分子和 SEA用于 EL ISA法检测日本血吸虫病患者血清 ,急性期 31例、慢性期 31例 ,正常人 6 0例 ,华支睾吸虫病患者血清 30例 ,并殖吸虫病患者血清 30例。 [结果 ]SEA38k Da分子抗原和 SEA所测得的阳性率分别为90 .3%、90 .3%、1.7%、0、0和 90 .3%、83.9%、3.3%、0、0。将 SEA 38k Da分子和 SEA在 EL ISA中的 P/N比值进行比较 ,经 t检验 ,发现在检测急性血吸虫病患者 ,慢性血吸虫病患者和正常人血清时 ,两者间的 P/N比值在 3组间差异均有显著性意义 (P值均 <0 .0 0 1) ;SEA 38k Da分子在检测患者血清时的 P/N比值显著高于 SEA,而检测正常人血清时的 P/N比值显著低于 SEA。 [结论 ]纯化 SEA38k Da具有较好的敏感性和特异性 ,具有诊断潜能     

微波ELISA法对日本血吸虫病流行区不同人群的检测结果

作者前已报道用微波 EL ISA法诊断日本血吸虫病具有快速 EL ISA类同的敏感性和特异性 ,而且具有更为快速的优点 ,全过程仅需 5 min即可显色观察结果 ,可提高血吸虫病检测的工作效率 [1 ]。本文进一步将此法应用于现场 ,结果报告如下。1　材料与方法1.1　试剂盒　微波 EL ISA与快速 EL ISA所用试剂盒 ,均为中国疾病预防控制中心寄生虫病所提供的快速 EL ISA试剂盒。1.2　试验血清分组　 11999年收集江西波阳县有血吸虫疫水接触史患者血清 2 0 3例 ,其中含历史粪孵阳性患者血清 13例 ,历史 IHA阳性 2例 ,晚期血吸虫病患者血清 11…     

两种ELISA方法检测日本血吸虫病循环抗原的比较

[目的 ]比较两种ELISA方法检测血吸虫病患者血清中的循环抗原的效果。 [方法 ]以单克隆抗体为基础的斑点 ELISA和夹心 ELISA。 [结果和结论 ]斑点 ELISA与夹心 ELISA的阳性检出率分别为 48 0 %～ 98 8%和 12 0 %～ 93 8%。两法的特异性依次为 95 4%～ 10 0 %及 90 %。     

Em18重组抗原特异性抗体的制备及对循环抗原检测的初探

目的 用Em18重组抗原ReEm18制备特异性抗体,建立双抗体夹心ELISA,检测患者血清中的循环抗原.方法 ReEm18经亲和纯化,免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,分别制备单克隆抗体(单抗)和多克隆抗体(多抗).用获得的单抗和多抗建立双抗体夹心ELISA,检测患者血清中Em18循环抗原.结果 免疫兔血清抗ReEm18抗体效价达1∶204 800以上.经ReEm18和多房棘球蚴病(AE)患者血清及健康人血清阻断ELISA试验双重筛选融合细胞,共获得14株抑制率＞50%的特异性阳性细胞克隆.将特异性单抗和多抗自由组合进行双抗体夹心ELISA,结果以9号单抗与多抗的配对检测抗原为最优,检测ReEm18的灵敏度达3 ng/m1.用建立的双夹心ELISA方法检测血清,11份AE血清中6份为阳性.结论 获得针对ReEm18的特异性单抗和多抗,建立了敏感的双抗体夹心ELISA方法,血清学初步检测结果表明AE血清中存在可检测的Em18循环抗原.     

夹心dot-ELISA检测钉螺体内血吸虫抗原的研究

目的 :探讨夹心 dot- ELISA检测钉螺血吸虫抗原的可行性及可靠性。方法 :利用组合单抗 ,通过夹心 dot- EL ISA检测未感染和不同感染期的钉螺血吸虫抗原 ,并与镜检比较。结果 :集体感染组 1- 3wk,夹心 dot- ELISA检测的阳性率、符合率随着时间的推移逐渐呈上升趋势 ;感染4 - 9wk,除第 6wk外 ,阳性率、敏感性及符合率均为 10 0 % ,同镜检结果基本一致 ;未感染组结果全部阴性 ,与镜检结果一致 ;12只镜检显示为其它吸虫感染的钉螺 ,夹心 dot- ELISA阴性。结论 :夹心 dot- EL ISA可用于检测钉螺血吸虫抗原。     

ELISA检测妇科肿瘤患者伴发弓形虫感染的调查

[目的 ]了解妇科宫颈癌患者伴发弓形虫感染的情况。[方法 ]采用 EL ISA法检测弓形虫 Ig G、Ig M抗体和循环抗原。 [结果 ]宫颈癌、妇科良性肿瘤、其它疾患妇女 3组人群的弓形虫感染率分别为 :44 .0 % (2 2 / 5 0 )、2 5 .4% (15 / 5 9)和 2 0 .3% (2 8/ 138)。 3组人群 Ig G阳性率分别为 2 0 .0 0 %、11.86 %和 10 .87% ,Ig M阳性率分别为2 0 .0 0 %、13.5 6 %和 8.70 % ,循环抗原阳性率分别为 14.0 0 %、5 .0 9%和 1.45 %。 [结论 ]宫颈癌患者弓形虫感染率明显高于其它两组人群 ,以循环抗原和 Ig M阳性尤为明显     

夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原的研究(英文)

目的建立以多抗为捕获抗体和单抗为检测抗体的夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原。方法利用杂交瘤技术制备抗旋毛虫单抗;旋毛虫抗原免疫家兔,分离纯化兔血清,制备兔抗旋毛虫多抗。多抗作为捕获抗体包被酶标板,单抗为检测抗体,选择适宜多抗和单抗浓度,建立夹心ELISA方法,再利用亲和素和生物素的高结合力连接起标记了生物素的抗体和DNA片段,将抗原抗体特异反应的免疫技术同无限扩增DNA片段的基因检测技术结合,利用PCR反应对DNA片段的扩增能力,提高检测灵敏度。结果制备了兔抗旋毛虫多抗,间接ELISA法筛选出与多种寄生虫抗原无交叉反应的单抗F4C6,夹心ELISA检测旋毛虫抗原最低浓度为0.05μg/ml,免疫PCR方法检测最低浓度为0.1ng/ml。结论首次建立夹心免疫-PCR检测旋毛虫抗原的方法,检测旋毛虫抗原的灵敏度高于传统ELISA方法104倍。     

双抗体夹心ELISA检测循环抗原在血吸虫病控制流行地区应用的研究

对血吸虫病已控制流行地区1099名10岁以上的人群,应用抗血吸虫成虫抗原多克隆抗体(PcAb)为捕捉抗体,抗血吸虫虫卵抗原单克隆抗体(McAb)MG_2-HRP为覆盖抗体的双抗体夹心ELISA,检测血吸虫循环抗原(CAg),并以ELISA检测抗体(CAb)作平行对照.结果CAg和CAb的阳性检出率分别为4.55%和4.64%,两者的差异无显著意义(P>0.05).在50例CAg阳性者中,无血吸虫病治疗史者31例,而51例CAb阳性者中,无血吸虫病治疗史者仅6例.CAg和CAb联合检测能提高检出率.     

单克隆抗体双抗体夹心ELISA检测日本血吸虫病人循环抗原

本文用抗日本血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体Ｓｊ１１６和Ｓｊ１０ｃ作双夹心ＥＬＩＳＡ检测粪检阳性的血吸虫病人血清中的循环抗原，阳性率达９３．４％。正常人假阳性率为６．７％。与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫及囊虫病的交叉反应分另伪３．２％、０、１３．３％和１３．３％。     

Detection of a circulating antigen in human schistosomiasis japonica using a monoclonal antibody

A double antibody enzyme-linked immunosorbent assay (sandwich ELISA) was used for the detection of a circulating antigen from human schistosomiasis japonica infections. This assay involves the use of polyclonal rabbit Schistosoma japonicum soluble egg antigen (SEA) antiserum to bind circulating antigen and a monoclonal antibody (MabH4) to identify and quantify this antigen. Sera from 108 S. japonicum-infected patients (acute and chronic) were tested. Sera from 93 of 95 patients with chronic infection were positive for this antigen; sera from 12 of 13 patients with acute infections were also positive. Antigen was not detectable in control human sera. Sera from 35 chronic schistosomiasis patients were collected 6-12 months after praziquantel treatment. Circulating antigen was not detectable in the sera of 33 of these patients and was dramatically reduced in 2. This ELISA system may prove valuable in differentiating past and current infections.     

日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究

探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探讨针，检测日本血吸虫病患者和健康人血清；晚期血吸虫病患者脾血和外周血；感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。     

双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用

目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法（S－DIGFA）在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗26kDaGST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的S－DIGFA的基础上，应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共1388份，并以双抗体夹心ELISA（S－ELISA）作对照。结果 用S－DIGFA和S－ELISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清300份，阳性检出率分别为15．7％和17．3％；两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清1088份，阳性检出率分别为3．9％和3．7％。结论 S－DIGFA检测循环抗原可在现场扩大和作血清流行病学调查。     

Diagnosis of human schistosomiasis by detection of circulating cathodic antigen with a monoclonal antibody.

Monoclonal antibody (MAb) 5H11 reacted with repeating epitopes on Schistosoma mansoni circulating cathodic antigen (CCA) and detected CCA in sera of Egyptian S. mansoni-infected patients. MAb 5H11 was both capture and biotinylated detection antibody in a sandwich ELISA of trichloroacetic acid-pretreated serum samples. Sera of patients with 7-500 eggs/g of stool were positive by MAb 5H11-CCA sandwich ELISA. Stool egg counts and CCA serum levels correlated (r = .52), and CCA levels decreased by 4 weeks after praziquantel treatment in patients with pretreatment egg counts of greater than or equal to 50/g of stool (P less than .05). Sera of Schistosoma haematobium-infected patients, uninfected individuals, and most patients with other helminths were negative in this assay. The MAb 5H11-CCA sandwich ELISA appears sensitive and specific for immunodetection of active schistosomiasis mansoni and useful for monitoring its chemotherapy.     

应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病

目的：探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法：在原已建立的ELISA法的基础上，应用3个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应，数分钟用肉眼观察结果。结果：本法检测SEA的敏感度为16ng／ml，在69例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中，阳性率为60．8％，特异性为95．2％；同时用dot－ELISA检测137例慢性日本血吸虫病患者，阳性率为54．7％、特异性为94．6％；夹心ELISA检测118例 慢性日本血吸虫病患者，阳性率为61．9％、特异性为95．7％。结论：经数理统计G检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ELISA 相近, 且操作更简便且快速。     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅱ

制备血吸虫病单克隆抗体诊断试剂盒,将其用于Dot—ELISA,分别检测江苏、安徽流行区急性血吸虫病患者及四川、江西、安徽流行区慢性血吸虫病患者血清中循环抗原。结果不同流行区Dot—ELISA反应的平均“+”值、阳性率和抗原滴度的几何均数不同,循环抗原水平可以反映流行区的疫情。另将Dot—ELISA、ELISA检测四川慢性血吸虫病人治前及治后半年、1年的血清循环抗原及抗体,结果循环抗原在病人治疗后很快下降,治后1年77.8％(35/45)病人的循环抗原转为阴性。循环抗体在病人治疗后也逐渐下降,但速度甚为缓慢。治疗后1年,仅21.7％(10/46)病人转为阴性。上述结果表明,循环抗原能更直接、更真实地反映防治效果。     

卵黄抗体IgY检测血吸虫病人循环抗原的初步研究

目的 探讨抗可溶性虫卵抗原（SEA）卵黄抗体（IgY）检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（S-ELISA）检测急、慢性血吸虫病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验法（SEA-ELISA）作比较。结果S-ELISA测得SEA浓度（y）与吸光度（A450）值（x）呈明显的正相关（y=459．22x-108．14,r=0．9481）。急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100．00％（9／9）,慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84．44％（38／45）,健康人的特异性为96．00％（48／50）。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论S-ELISA具有较好的敏感性和特异性,可用于血吸虫病免疫诊断。