MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区TNF-α的表达变化

目的观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的小鼠急性损伤帕金森病（PD）模型中纹状体（CPu）、黑质致密部（SNpc）、额叶皮层联合区（FrA）和腹侧被盖区（VTA）中TNF-α基因和蛋白的时程表达变化。方法用RT-PCR和Western blot方法对MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区TNF-α基因和蛋白的表达量进行检测。结果MPTP诱导的小鼠PD模型中SNpc和CPu脑区TNF-α基因在给药后6h和1d有显著性表达,TNF-α蛋白在给药后12h和1d有显著性表达,其中1d均是表达高峰;VTA和FrA脑区TNF-α基因和蛋白的表达不显著。结论表达增高的TNF-α可能对SNpc和VTA脑区DA能神经元及CPu和FrA脑区的DA能神经元末梢起了损伤作用,从而为深入研究PD的治疗过程提供一定的实验依据。     

MPTP诱导慢性帕金森病小鼠模型的实验研究

目的:观察慢性长期小剂量注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)对小鼠黑质多巴胺能神经元损伤及α-突触核蛋白(α-synuclein蛋白)表达的影响.方法:C57BL小鼠背部皮下注射MPTP 25 mg/kg体重,每周注射2次,连续注射5周,观察小鼠行为学改变,应用免疫组化染色检测酪氨酸羟化酶(Throsine hydroxylase,TH)和α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)的表达,原位末端标记法(TUNEL法)检测多巴胺能神经细胞凋亡.结果:与注射生理盐水组相比,注射MPTP组小鼠出现短暂一过性的震颤、后腿拉直、躬背、竖毛、运动减少等;黑质部酪氨酸羟化酶阳性细胞数目减少,α-突触核蛋白阳性细胞数目增加;生理盐水组未观察到细胞凋亡,MPTP组存在凋亡现象.结论:慢性长期注射MPTP可诱导小鼠行为学改变,黑质部多巴胺神经元细胞凋亡,以及α-突触核蛋白持续表达增多和聚集.     

帕金森病小鼠模型制作及一氧化氮相关神经损害

嗜黑质神经毒素1-甲基-4苯基-四氢吡啶（MPIP）能使人及某些动物产生类似帕金森病（PD）的生化、病理及行为改变，这为研究PD提供了良好的动物模型。对MPIP毒性作用的研究已成为阐明PD发病机制的重要方法。一氧化氮（NO）在中枢神经系统内具有多种生理功能，但其在一定条件下产生过多则可引起神经损伤。     

附子联合MPTP诱导肝阳上亢型PD小鼠亚急性模型与慢性模型的建立及比较

目的 附子联合1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(anendons combined 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导C57BL/6小鼠肝阳上亢PD亚急性模型和肝阳上亢PD慢性模型的建立,通过行为学、病理学及分子生物学方法对模型进行评估。方法 小鼠随机分为正常组、模型组、肝阳上亢PD亚急性组MPTP[25mg/(kg·d)]注射7天、肝阳上亢PD慢性组[25mg/(kg·d)],每3.5天注射1次,注射5周,在注射MPTP前,各模型组附子煎液灌胃4周。爬杆、转棒实验检测小鼠行为学变化;免疫组化检测小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(trosine hydroxylase,TH)的表达,免疫印迹检测各组小鼠蛋白含量变化,实时定量PCR检测TH mRNA表达变化。结果 与正常组比较,肝阳上亢PD慢性组小鼠行为变化明显,模型组及肝阳上亢PD亚急性组小鼠变化较低,在爬杆实验中,肝阳上亢PD慢性组小鼠爬杆时间明显长于模型组及肝阳上亢PD亚急性组(P<0.05),转棒实验中,肝阳上亢PD慢性组小鼠在棒时间明显短于模型组及肝阳上亢PD亚急性组(P<0.05)。中脑黑质区TH阳性细胞表达含量方面,与正常对照组比较,肝阳上亢PD慢性组TH表达量显著下降(P<0.05),模型组及肝阳上亢PD亚急性组表达量高于肝阳上亢PD慢性组;免疫印迹及实时定量PCR检测结果表明,肝阳上亢PD慢性组小鼠在蛋白及mRNA表达量均为最低(P<0.05)。结论 肝阳上亢PD慢性组小鼠与单纯MPTP模型组及肝阳上亢PD亚急性组比较,损伤程度更高,周期更长,更具有与人类PD相似的临床症状,提示该模型有望成为PD发病机制研究潜在的稳定模型。     

MPTP/MPP~+诱导的帕金森病实验模型的研究进展

建立一个稳定可靠的实验模型对研究帕金森病(PD)的发病和治疗是尤其必要的。自从发现1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)能在人类诱发PD以来,人们对其神经毒性作了大量研究。MPTP及其有效成分1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)对中脑黑质多巴胺能神经元有选择性的破坏作用,从而发挥其诱导PD的毒性作用。在过去的几十年里对MPTP/MPP+诱导的PD实验模型的研究取得了显著的进展,目前MPTP/MPP+诱导的PD实验模型已广泛地用于PD研究。     

不同剂量MPTP所致帕金森病小鼠模型焦虑行为的评价

目的：研究不同剂量1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）所致急性帕金森病（PD）小鼠模型的焦虑行为。方法：选取40只C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、小剂量组、中剂量组和大剂量组,每组10只。用高架十字迷宫和明暗箱检测小鼠的焦虑行为。结果：各模型组小鼠在暗箱停留的时间较对照组均有增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,但各模型组间的差异无统计学意义（P＞0.05）,各模型组间小鼠的穿箱次数差异亦无统计学意义（P＞0.05）;高架十字迷宫中各模型组小鼠进入开放臂次数（OE）、开放臂停留时间（OT）及开放臂停留时间百分比（OT%）与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,但各模型组间差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组比,小剂量组和中剂量组小鼠OT%显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：MPTP所致急性PD小鼠模型早期即会出现焦虑行为,但焦虑的严重程度与造模MPTP剂量无关。     

MPTP诱导影响亚急性与慢性帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元

目的:探索1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的亚急性与慢性帕金森病(PD)模型小鼠的黑质多巴胺能神经元改变.方法:采用MPTP诱导亚急性与慢性PD小鼠模型,分析小鼠酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数目和小鼠行为学悬挂评分.结果:慢性与亚急性PD模型小鼠TH阳性神经元计数分别降至正常水平的21.02％与17.94％;且TH阳性神经元计数下降均早于行为学改变.结论:小鼠慢性模型比亚急性模型更接近帕金森病的病理与病程.     

MPTP帕金森病动物模型研究进展

用神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的动物模型,无论在神经生化和病理组织学特征,还是在运动行为表现方面都酷似人帕金森病(PD),是目前研究PD的理想模型。对MPTP动物模型发病机制等方面的深入研究将有助于PD的防治。     

线粒体丝氨酸蛋白酶抑制MPTP诱导小鼠帕金森病的研究

目的 探讨线粒体丝氨酸蛋白酶(HtrA2/Omi)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠中脑多巴胺能神经元的影响.方法 12月龄C57BL雄性小鼠随机分为生理盐水组(5只)、MPTP组(5只)和MPTP+HtrA2/Omi组(6只),MPTP+HtrA2/Omi组小鼠尾...     

自由基在神经毒素MPTP致帕金森病中的作用机制

用1-甲基-4苯基-1，2，3，6四氢吡啶(MPTP)可在多种动物上模拟制备成帕金森病模型(PD)，这些动物PD模型的许多临床特征及主要的生化和病理标志与PD患者十分相似．分析并总结了MPTP的复杂代谢及其所引起的模型中自由基的产生及其对多巴胺能神经元的损伤机制．     

小鼠帕金森病模型中的大脑皮质细胞因子表达

目的:探讨甲基-苯基-四氢吡啶(MPTP)是否可诱导小鼠大脑皮质内细胞因子水平变化.方法:28只C57BL/6J雄性小鼠接受MPTP25mg/kgip注射连续5d,对照组(10只)注射生理盐水,在最后一次注射的第1日(10只),第3日(8只)和第14日(10只)杀鼠,然后用酶联免疫吸附的方法检测大脑皮质匀浆液上清内细胞因子IL-1β和IL-6的水平.结果:注射MPTP对大脑皮质IL-1β水平有影响(P<0.001),与对照组相比,IL-1β水平在注射后第3日降低(P<0.01);MPTP注射对大脑皮质IL-6水平没有影响.结论:MPTP诱导了大脑皮质促炎症细胞因子IL-1β的水平改变.     

帕金森病体外实验细胞模型的建立

目的： 探讨1-甲基-4-苯基-四氢吡啶离子（MPP⁺ ）对小鼠胚胎中脑原代培养多巴胺能神经元的毒性作用及其机制。在体外建立帕金森病（PD）实验研究的细胞模型。方法：采用小鼠胚胎（孕14 d）中脑进行原代细胞培养，实验分为对照组和不同浓度(0.1、１、10和15 μmol•L^-1)MPP⁺药物实验组，应用酪氨酸羟化酶（TH）免疫化学细胞染色方法 和Hoechst33342荧光染色对多巴胺能神经元的损伤及凋亡进行测定。结果：对照组中多巴胺能神经元的数量为(875±23)个/孔。在0.1、１、10和15 μmol•L^-1 MPP⁺实验组，多巴胺能神经元的数量分别为(612±25)、(586±32)、(459±16)和(435±19)个/孔，与对照组比较，MPP⁺实验组多巴胺能神经元数量均明显降低（P<0.05）,多巴胺能神经元突起的数目和长度明显减少。Hoechst33342 染色发现，对照组中凋亡细胞数占总细胞数的(5.45±0.29)%,10 μmol•L^-1 MPP⁺药物治疗组细胞凋亡率为(26.97±1.36)%，显著高于对照组水平（P<0.05）。结论：0.1、１、10 和15 μmol•L^-1 MPP⁺均引起多巴胺能神经元的数量显著减少，随着药物浓度的增加，多巴胺能神经元减少的程度越显著。MPP⁺引起的多巴胺能神经元的变性死亡可能通过凋亡途径所诱导。     

不同帕金森病模型小鼠空间参考记忆及脑内多巴胺水平的比较研究

目的 比较1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致的急性、亚急性和慢性帕金森病(PD)模型小鼠空间参考记忆和脑内多巴胺(DA)水平的差异.方法 用相同的MPTP使用总量不同的注射间隔分别制作急性、亚急性和慢性PD小鼠模型.Morris水迷宫检测小鼠空间参考记忆,高效液相(HPLC)检测纹状体、海马和前额叶皮层的DA含量,免疫组化染色检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量.结果 慢性PD小鼠的逃避潜伏期较对照组有明显延长(P＜0.05),而急性和亚急性PD小鼠则无明显变化.3组实验组纹状体DA含量[(1180.1±293.0)ng/ml,(1177.4±450.5)ng/ml,(1149.6±353.0)ng/ml]均较对照组[(225.6±79.7)ng/ml,(273.6±64.9)ng/ml,(327.1±126.2)ng/ml]有显著减少(P＜0.01),急性PD小鼠前额叶皮层DA含量[(65.3±23.9)ng/ml]较对照组[(41.2±18.8)ng/ml]有显著减少(P＜0.05),3组实验组海马DA含量无明显变化.3组实验组黑质TH阳性神经元数量均较对照组有显著减少(P＜0.05).结论 3种PD模型小鼠空间参考记忆差异可能不是由其脑内DA水平差异所致.     

异丙酚对MPTP损伤的小鼠黑质多巴胺神经元的保护作用

目的　观察异丙酚对 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3 ,6 四氢吡啶 (1 methyl 4 phenyl 1,2 ,3 ,6 tetrahydropyridineMPTP)损伤的小鼠纹状体多巴胺神经元的影响以及可能的作用机制。方法　给予Propofol 10 0mg/ (kg·d)后注射MPTP 2 0mg/ (kg·d) ,用药 6d。 12d后分离纹状体应用高效液相 -电化学方法检测纹状体多巴胺、二羟基苯乙酸及高香草酸的含量水平 ,应用12 5I- β-CIT放射性配基和免疫组化的方法检测多巴胺转运蛋白的活性和黑质神经元的损伤情况。结果　异丙酚可增加MPTP模型鼠多巴胺及其代谢产物的含量 ,异丙酚处理组DA ,DOPAC ,HVA的含量分别为 (8.2 417± 1.692 ) μg/ g、(1.3 81± 0 .486) μg/g和 (1.63 3 9± 0 .5 73 ) μg/ g ,与MPTP损伤组比较 ,明显增加。异丙酚亦可抑制黑质酪氨酸羟化酶 (TH)阳性神经元的减少。MPTP组注射MPTP 6d后 ,纹状体DAT为 (5 .3 13± 0 .64 2 )与正常组 (6.992± 0 .5 48) μg/ g比较显著下降 (P <0 .0 1) ,P +M组纹状体DAT为 (6.5 65± 0 .40 5 ) ,明显高于MPTP组 (P <0 .0 1) ,即减轻纹状体内多巴胺转运蛋白密度下降。结论　异丙酚对MPTP损伤的DA神经元具有一定的保护作用 ,其保护作用可能与抑制多巴胺转运蛋白活性有关     

年龄对MPTP作用于快速老化小鼠SAMP8环氧化酶2表达的影响

目的 探讨1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)对不同年龄快速老化小鼠(SAMP8)急性损伤后黑质纹状体系统多巴胺(DA)含量及环氧化酶2(COX-2)表达影响.方法 选用健康雌性SAMP8小鼠(3、6、10月龄各36只),随机分为对照组和用药组.用药组小鼠背部皮下注射MPTP(14 mg·kg-1),每2h注射1次,共注射4次,制成急性损伤模型;对照组小鼠给予等量生理盐水.分别于第1次给药后1、3、7d处死小鼠.采用行为学测试观察其运动功能,高效液相色谱法检测黑质DA含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测纹状体COX-2的表达,观察各时间点MPTP对不同月龄SAMP8小鼠的影响.结果 给予MPTP后1、3、7d,SAMP8小鼠在滚轴上停留时间缩短,DA水平下降,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);与3、6月龄小鼠比较,10月龄小鼠下降更明显;各用药组小鼠不同时间点COX-2表达均明显增高(P＜0.05);10月龄小鼠比3、6月龄升高更显著(P＜0.05).结论 衰老是影响帕金森病的重要因素,与环境毒素起到了协同作用;COX-2参与了MPTP所致帕金森病(PD)模型早期急性损伤后的病理反应过程,其反应程度与年龄有关,并随PD发展呈动态改变.     

MPTP对鼠肝脂质过氧化作用的影响

本文报道给C57小鼠腹腔注射不同剂量1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)后,发现组3(MPTP35 mg/kg,每天一次,共7天)鼠肝匀浆、线粒体和微粒体的膜丙二醛含量明显增加,与对照组相比分别增加70.5%,67%和51.4%(P<0.01),而组1(MPTP 35mg/kg,每4小时一次,共3次)和组2(MPTP35mg/kg,每天一次,共4天)鼠肝丙二醛含量与对照组相近。结果表明MPTP有明显地促进鼠肝脂质过氧化的作用,并与其剂量有关。     

AN EXPERIMENTAL RESEARCH ON MPTP-INDUCED PARKINSON''''S DISEASE IN RHESUS MONKEY

The rhesus monkeys receiving 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) produces typical parkinsonian syndrome close to the nature of human Parkinson's disease (PD), including the triad of akinesia, rigidity and tremor, the reduction of dopamine (DA) contents in the nigrostriatum, and severe degeneration of nerve cell in the substantia nigra (SN). Thus, the MPTP-treated monkey provides a useful animal model that can be used to study the etiology and pathogenetic mechanisms of PD and to explore new approaches for the treatment of PD.     

Genistein对MPTP致帕金森病去势模型小鼠多巴胺能神经元保护作用及其机制研究

目的研究大豆异黄酮活性成分genistein对1一甲基一4一苯基一1,2,3,6一四氢吡啶（1一methy-4-phenyl一1,2,3,6一tetrahydropyridine,MPtP）制备的去卵巢（OVX）帕金森病（Parkinson’sdisease,PD）档型小鼠多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法雌性C57BL6小鼠行双侧去卵巢手术（OVX）后,分为对照组、MPTP组、genistein预处理组和雌激素预处理组。