c-fos原癌基因与心肌缺血再灌注

c-fos原癌基因属瞬息基因,是病毒癌基因v-fos的细胞同源物,其编码的产物位于核内并且有转录因子的特异结构,参与基因的表达调控。目前,c-fos基因与心肌缺血再灌注之间的关系越来越受到重视,局部或全心缺血再灌注可诱发心肌细胞c-fos基因的一过性表达,与蛋白合成抑制及Ca~(2+)等有密切关系,且c-fos基因还发挥第三信使的作用。     

缺血后处理对缺血再灌注大鼠肺组织超微结构的影响

Zhao等[1]提出了心肌缺血后处理(IPo)的概念,即在全面恢复再灌注前反复短暂多次给予再灌、停灌处理对随后长时间再灌注心肌有保护作用.     

咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响

目的 观察咪唑安定对氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区表达的影响，探讨咪唑安定预防或减轻氯胺酮所致精神症状及神经损害的机制。方法 雄性Wistar大鼠30只，随机分为生理盐水5ml组、咪唑安定15mg／kg组、氯胺酮100mg／kg组、咪唑安定15mg／kg加氯胺酮100mg／kg组、氯胺酮100mg／kg加咪唑安定15mg／kg组。咪唑安定与氯胺酮两药间隔15min给药，所用药物均由腹腔注射。各组动物于用药后2h开胸经心脏灌流脑固定，用免疫组织化学方法检测后扣带回皮质区c-fos蛋白的表达，用彩色病理图像分析系统测定c-fos阳性细胞的百分率和阳性细胞的密度。结果氯胺酮可明显诱导c-fos蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达；咪唑安定自身不能诱导c-fos的表达；咪唑安定预处理可显著抑制氯胺酮诱导的c-fos在这一区域的表达；先用氯胺酮后给予咪唑安定仅能部分抑制c-fos的表达。结论 咪唑安定预处理可抑制氯胺酮诱导的c-fos基因在大鼠后扣带回皮质区的表达，这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

脑缺血损伤与c-fos原癌基因表达

在脑缺血再灌早期,立即早期反应基因(IEG)的表达与脑缺血后神经元信息传递及其生存或死亡有密切关系。本文就(IEG)家庭中研究较深入的c-fos原癌基因在脑缺血后的表达和调控,以及其作用及作用机理进行综述。     

异丙酚对大鼠脑缺血/再灌注时脑组织c-fos基因表达的影响

目的 观察异丙酚在大鼠脑缺血/再灌注时对脑组织c-fos蛋白及c-fos mRNA表达的影响,从蛋白和分子水平探讨异丙酚脑保护作用的机制。方法 采用Pulsinelli-Brierley四血管闭塞的方法制作急性全脑缺血/再灌注损伤模型。40只大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注对照组和缺血/再灌注异丙酚处理组,后者根据异丙酚剂量又分为C1(50 mg·kg-1)、C2(100 mg·kg-1)和C3(150 mg·kg-1)三个亚组。全脑缺血10 min再灌注60 min时处死大鼠,分别采用免疫组织化学方法和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对缺血/再灌注后脑内c-fos蛋白及c-fos mRNA在海马组织的表达进行检测。结果 缺血/再灌注后皮层、海马、纹状体及边缘区等脑区均有大量的c-fos阳性蛋白表达,其中对照组呈强阳性表达,假手术组仅有少量c-fos阳性蛋白表达,异丙酚处理组则能明显抑制各脑区c-fos蛋白的表达,尤以海马CA1区最为显著;半定量RT-PCR结果显示,缺血,再灌注后海马组织c-fosmRNA表达较假手术组显著增高,而异丙酚处理组则可明显抑制缺血,再灌注后海马组织c-fos mRNA的异常表达。结论 异丙酚的脑保护作用可能与下调c-fos基因表达有关。     

兔心肌缺血-再灌注后c-fos,PCNA,Bax和Bcl-2的表达及临床意义

目的研究新西兰大白兔心肌细胞缺血-再灌注后原癌基因（c-fos）、增殖细胞核抗原（PCNA），Bax基因，Bcl-2基因的表达及其临床意义。方法用18只新西兰大白兔建立心肌缺血-再灌注模型，按不同再灌注方法随机分为3组，每组6只。Ⅰ组，缺血15min，不灌注；Ⅱ组，缺血15min，再灌注15min；Ⅲ组，缺血15min，再灌注30min。术后分别取缺血-再灌注区及对照区（非缺血-再灌注区）心肌组织进行c-fos，PCNA，Bax，Bcl-2的免疫组织化学检测。结果3组心肌细胞缺血-再灌注后c-fos、PCNA、Bax和Bcl-2均有阳性表达，缺血-再灌注区均高于对照区（P〈0．01或〈0．05）；组间比较：缺血-再灌注区c-fos、Bax和Bcl-2阳性率Ⅱ组、Ⅲ组均高于Ⅰ组，且Ⅲ组高于Ⅱ组（P〈0．01），PCNA阳性率Ⅲ组高于Ⅰ组（P〈0．01）。3组缺血-再灌注区Bax／Bcl-2比值均较对照区增高。结论心肌缺血和再灌注显著诱导c-fos的表达，其增加与心肌再灌注损伤有关；心肌缺血-再灌注后诱发细胞促凋亡／抗凋亡相关基因Bax／Bcl-2的激活，存在着与增殖基因共同表达的特点。     

纳洛酮对缺血再灌注心肌c-fos基因表达的影响

目的：研究纳洛酮对心肌缺血再灌注损伤的影响,从分子水平探讨心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法：３０只大白兔分为三组：（１）对照组;（２）心肌缺血３０分钟再灌３０分钟组;（３）静注纳洛酮１０分钟后缺血３０分钟再灌３０分钟组。提取心肌总ＰＮＡ与经同位素标记的ｃ－ｆｏｓ ｃＤＮＡ探针进行分子杂交并自显影,测定ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲ－ＮＡ水平。结果：纳洛酮能显著抑制心肌缺血再灌注时ｃ－ｆｏｓ基因的表达。结论：     

丙泊酚对脑缺血-再灌注后海马组织热休克蛋白70和c-fos基因表达的影响

目的观察丙泊酚对脑缺血一再灌注后海马组织热休克蛋白70(HSP70)与c-fos基因表达的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组、缺血一再灌注对照组和缺血一再灌注丙泊酚处理组,后者按丙泊酚用量又分为50、100和150mg／kg三个亚组。采用大鼠全脑缺血一再灌注损伤模型。全脑缺血10min再灌注60min时,断头取脑,采用免疫组织化学和半定量RT-PCR方法,对脑内HSP70与c-fos蛋白及其mRNA在海马组织的表达水平进行检测。结果缺血一再灌注后皮层、海马、纹状体及边缘区等脑区均有大量的HSP70和c-fos阳性蛋白表达,海马组织HSP70及c-fos基因mRNA的表达水平明显增高,其中以缺血一再灌注对照组表达最为显著;假手术组仅有少量阳性蛋白的表达,海马组织mRNA的表达水平极低;麻醉相关剂量的丙泊酚可显著抑制HSP70与c-fos蛋白在各脑区的表达,尤以海马CA1区最为显著,亦可明显下调HSP70和c-fos mRNA在海马组织的表达水平。结论缺血一再灌注损伤可明显诱导HSP70与c-fos基因的表达,丙泊酚的脑保护作用可能与其下调HSP70与c-fos基因的异常表达有关。     

p38MAPK信号通路及其在心肌缺血再灌注损伤中的作用

心肌缺血再灌注时氧自由基和细胞因子的大量释放激活p38MAPK，然后p38MAPK把信息传到核内，引起一些早期基因的表达，如c-fos、c-jun、NF-kB，但它们的激活是保护作用还是恶化作用尚无定论。p38MAPK是否参与缺血预处理(IPC)的保护作用也无一致意见。造成这些分歧的原因主要在于实验模型和动物种类差别。     

艾司洛尔对大鼠离体心脏缺血-再灌注时心肌C-fos基因表达的影响

心肌缺血．再灌注损伤机制的研究表明：兔、鼠和人类的心肌细胞在经过一定时间的缺血一再灌注后可出现明显的细胞凋亡，缺血时间越长c-fos表达越多，c-fos参与了心肌缺血．再灌注损伤。艾司洛尔是选择性8受体阻断剂，可降低心肌氧和能量的消耗，临床研究证明冠状动脉含艾司洛尔温血液灌注可避免心肌缺血，减少心肌水肿，产生心肌保     

p38 MAPK信号通路及其在心肌缺血再灌注损伤中的作用

心肌缺血再灌注时氧自由基和细胞因子的大量释放激活p38 MAPK,然后p38MAPK把信息传到核内,引起一些早期基因的表达,如c-fos、c-jun、NF-κB,但它们的激活是保护作用还是恶化作用尚无定论。p38 MAPK是否参与缺血预处理(IPC)的保护作用也无一致意见。造成这些分歧的原因主要在于实验模型和动物种类差别。     

氯胺酮对大鼠全心缺血/再灌注时心肌c-fos基因表达的影响

目的研究氯胺酮对大鼠全心缺血/再灌注时心肌c-fos基因表达的影响。方法Wistar大鼠40只,随机分为5组(各8只)正常对照组(C组);缺血/再灌注对照组(CR组)和高(KH)、中(KM组)、低(KL组)浓度氯胺酮灌注组(氯胺酮浓度分别为1×10-3、1×10-4和1×10-5mol/L)。提取心肌组织总RNA,经逆转录多聚酶链反应得到cDNA扩增产物,选择γ-actinmRNA作为内参照,用计算机成像分析系统分析曲线下峰面积,计算密度值。结果与C组相比,CR、KH、KM和KL组c-fosmRNA表达水平明显增高(P＜0.01和P＜0.05)。与CR组相比,KH、KM和KL组c-fosmRNA表达水平明显降低(P＜0.05和P＜0.01)。KM和KL组c-fosmRNA表达水平低于KH组(P＜0.05),但KM和KL组相比则无统计学差异(P＞0.05)。结论c-fos基因可能参与心肌缺血/再灌注损伤及保护的基因调节。氯胺酮能显著抑制心肌c-fos基因的表达,且中、低浓度氯胺酮较高浓度有效。     

c-fos原癌基因与痛觉调控

c-fos原癌基因在细胞内发挥第三信使的作用,参与痛觉调控过程。伤害性刺激可诱导c-fos基因在中枢神经系统表达,多数情况下被麻醉药抑制。c-fos基因对阿片肽等目的基因的调节可能是其发挥痛觉调控的重要方式。     

NO对单足致炎大鼠双侧脊髓背角FOS表达的影响

C-fos原癌基因是早期快反应基因大家族中的一员,当一定的刺激存在时,如细胞膜去极化、有神经递质或生长因子存在时,在许多不同类型的细胞中均可诱导c-fos的表达。其蛋白产物（FOS）可以通过免疫组化技术得以确认。刺激初级传入纤维可迅速诱导大鼠脊髓神经元内c-fos的表达。有证据表明c-fos可作为伤害性刺激后神经元兴奋性突触传     

大鼠心肌缺血预处理对细胞凋亡的影响

采用在体心肌缺血 再灌注模型 ,观察缺血预处理对心肌缺血 再灌注细胞凋亡的影响及与Ｆａｓ蛋白表达的关系。材料与方法动物模型与分组　左冠状动脉前降支结扎 开放心肌缺血 再灌注模型。将动物随机分成三组 ,Ⅰ组对照组 ,左冠状动脉前降支旷置 5 0ｍｉｎ ;Ⅱ组缺血 再灌注组 ,左冠状动脉前降支双活结结扎 ,30ｍｉｎ后松开结扎线 ,恢复再灌 2ｈ ;Ⅲ组缺血预处理组 ,按Ｍｕｒｒｙ[3 ] 法进行。观察指标及测定方法　免疫组化ＳＰ法测定Ｆａｓ的含量 ,用原位末端标记(ＴＵＮＥＬ )法检测凋亡细胞[4] ,用ＨＡＩＰＳ 2 0 0 0图像分析系统测定每…     

大鼠血红素加氧酶-1基因转染对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 观察重组腺相关病毒介导大鼠血红素加氧酶-1基因转染对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分成3组,对照组(C组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=12),腺相关病毒介导血红索加氧酶-1基因组(A-r组,n=12).基因转染3个月后,建立大鼠离体心脏Langendorff灌流模型,C组持续灌注100 min,其他各组均平衡15 rain,停灌40min与再灌注45 min,记录冠脉流量(CF),测定冠脉流出液肌酸激酶(CK)活性,测定再灌注后45 min时的心肌心肌组织超氧化物岐化酶(SOD)活性活性及丙二醛(MDA)含量,同时取每组大鼠心肌检测梗死面积、心肌细胞凋亡率以及心肌组织bax、bcl-2蛋白表达量.结果 离体心肌Langendorff灌注后,与I/R组比较,A-r组在复灌后冠脉流出液CK活性降低(P＜0.01),复灌后45min后心肌MDA含量降低(P＜0.01),SOD活性增高(P＜0.01),梗死面积较小(P＜0.01),心肌组织bax表达量、心肌细胞凋亡率均显著下降,心肌组织bel-2表达量明显增加(P＜0.01).结论 重组腺相关病毒血红素加氧酶1基因转染心肌后,可抑制离体缺血再灌注心肌细胞凋亡和增强心肌抗氧化能力,对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤有显著保护作用.     

维拉帕米在应力对体外骨髓间充质干细胞早期反应基因蛋白表达中作用的研究

[目的]研究维拉帕米(Verapamil)在周期性牵张应力对体外骨髓间充质干细胞(MSCs)早期反应基因蛋白表达中的作用,从而进一步推断出Ca2+ 通道在细胞响应力学的信号传导途径中的作用.[方法]分离并培养骨髓间充质干细胞,利用体外细胞牵张应力装置对第3～6代细胞加载力学信号,在应力干预细胞前加及不加钙离子拮抗剂(维拉帕米),受力结束后,流式细胞术检测细胞内钙离子荧光强度,用RT-PCR以及免疫组化的方法检测各组细胞内c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白表达的情况.[结果]加载力学信号后,细胞内钙离子浓度发生改变,c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白的表达明显增强(P<0.01),经维拉帕米预处理后,以上生物学效应受到抑制(P<0.01).[结论]在牵张应力作用下骨髓间充质干细胞Ca2+内流发生了变化,并且这种变化在骨髓间充质干细胞对周期性牵张应力的早期应答反应中起到了部分作用,可能依赖钙离子通道的活化来调控.     

钙离子及其阻滞剂对脊髓灰质c-fos基因表达的影响

目的探讨细胞外高钙离子及其阻滞剂对脊髓灰质c-fos基因表达的影响。方法用原位杂交方法分别观察离体培养脊髓组织在高钙离子环境下和加用阻滞剂AP5及尼卡地平30min～12h不同时间点c-fos基因的表达变化。结果高钙损伤后30min～6h脊髓组织灰质中c-fos表达明显较对照组强,4h达到高峰,8h即恢复至对照水平;钙离子阻滞剂组30min～8h均有增强,6h后达高峰。结论高钙离子能诱导离体脊髓组织灰质c-fos基因的表达,提示钙离子在脊髓继发性损伤的作用可能是通过介导c-fos等即早基因的表达实现的;钙离子阻滞剂AP5和尼卡地平未能完全阻断钙离子对c-fos表达的介导作用,仅表现为推迟表达高峰。     

醋柳黄酮对心肌缺血再灌注家兔bcl-2及bax作用的实验研究

目的:探讨醋柳黄酮对心肌缺血再灌注家兔心肌组织中Bcl-2及Bax蛋白及基因表达变化的作用,揭示醋柳黄酮治疗心肌缺血再灌注损伤作用机制。方法:采用结扎家兔冠状动脉前降支方法制备急性心肌缺血再灌注模型,west ern bl ot及r eal-t i me PCR方法检测Bcl-2及Bax蛋白及基因表达变化。结果:与假手术组比较,模型组心肌缺血再灌注家兔心肌组织中Bcl-2基因表达上调2.52倍,Bax基因表达上调5.02倍;经醋柳黄酮治疗后,与模型组比较,心肌缺血再灌注家兔心肌组织中bcl-2基因表达上调1.77倍,bax基因表达下调2.50倍。结论:醋柳黄酮可以通过促进抗凋亡基因Bcl-2基因及蛋白表达,并抑制促凋亡基因Bax基因及蛋白表达而对心肌缺血再灌注起保护作用。     

冠脉内皮细胞与心肌缺血再灌注损伤

缺血再灌注损伤在心肌缺血再灌中表现很明显。由于冠脉内皮细胞(CE)所处的特殊解剖位置及生理特点,缺血再灌注的哪对钙稳态、血凝稳定以及缺血再灌注稳态的维持都有重要作用。CE不仅是缺血再灌注损伤的靶器官,而且是活性氧产生的主要部位,同时又具有抗氧化作用。在体、离体心肌缺血再灌注损伤模型及缺氧处理分离培养的CE研究均表明,心肌缺血再灌注可引起CE损伤,甚至死亡。