早孕妇女血浆中胎儿游离DNA的检测

目的:建立一种检测早孕妇女血浆中胎儿游离DNA的新方法。方法:从50例妊娠7、8、9周的孕妇外周血血浆中提取胎儿游离DNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测其中的Y性别决定区(SRY)基因。结果:38例早孕孕男胎妇女中32例血浆中出现SRY基因,灵敏度84.21%;12例早孕孕女胎的妇女血浆中均未出现SRY基因,特异度100%。结论:用实时荧光定量PCR技术可用来检测早孕妇女血浆中的胎儿游离DNA,这对无创性早期产前基因诊断方法的建立具有重大意义。     

早孕期孕妇外周血的胎儿游离DNA检测分析

目的:分析早孕期孕妇外周血的胎儿游离DNA状况,并对其诊断价值分析。方法:选取2016年3月~2017年3月某院进行产前筛查的100例高危孕妇进行研究,其中9~13周孕龄的50例孕妇定为早孕组,15~20周孕龄的50例孕妇定为中孕组,对两组孕妇的外周血中游离胎儿的DNA进行检测。结果:在早孕组50例孕妇外周血游离胎儿DNA检测结果显示,共检出1例染色体数目异常,结果为21-三体综合征,与羊水染色体核型检测分析结果完全相同;中孕组50例游离胎儿DNA检测结果显示,1例孕妇染色体数目表现异常,1例染色体结构异常,均与羊水染色体核型检测分析结果相同。对孕妇外周血中的SRY基因(雄性的性别决定基因)浓度进行测量,结果显示中孕组浓度(149.25±59.17)copies/mL远高于早孕组的(26.42±35.31)copies/mL,数据差异存在统计学意义(P0.05)。结论:孕妇外周血胎儿游离DNA对于早孕期染色体非整倍体具有准确的、高精度的检测率,能够作为产前筛查起到检测胎儿疾病的方法,值得临床推广使用。     

应用孕妇血浆DNA检测胎儿性别的研究

目的探讨应用孕妇血浆中游离DNA进行无创性产前性别诊断的可行性。方法用柱分离法提取26例孕妇血浆中DNA,用巢式PCR技术检测其胎儿性别决定基因（SRY）基因。结果26位孕妇中14例孕男胎的孕妇有12例显示阳性条带,12例孕女胎的孕妇2例有阳性条带,总的准确率为84．6％。结论采用孕妇血浆胎儿DNA和巢式PCR技术可以快速简便地进行无创性产前性别诊断,对性连锁遗传病的预防具有重要意义。     

人类SRY基因在产前诊断及外周血造血干细胞移植后患者植活证据鉴定中的应用

目的 :建立一种对性连锁遗传胎儿产前诊断及外周造血干细胞移植后患者植活证据鉴定的方法。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR)扩增男性特异的 SRY基因 ,其片段大小为 2 5 4bp。结果 :对不同标本的扩增表明 ,2 0例男性标本均出现该特异扩增片段 ,而女性无此片段。结论 :聚合酶链式反应 (PCR)特异扩增片段 SRY基因片段 ,可用于 X连锁遗传胎儿产前诊断及外周血造血干细胞移植后患者植活证据鉴定     

不同孕次孕妇外周血胎儿遗传信息检测

目的从不同孕次孕妇外周血中分离出胎儿DNA并加以鉴定,探讨孕妇不同孕次对外周血中胎儿遗传物质检测的结果影响。方法不同孕次孕妇共30例,于孕36-40周时按以往有无孕产史分成两组,以往有早孕史的孕妇12例为研究组;初次妊娠孕妇18例为对照组,抽取孕妇外周血并分离出胎儿DNA,用套式PCR检测其中的SRY基因并与新生儿出生性别作结果对照。结果应用套式PCR能够从母体外周血中检测到胎儿SRY基因,且两组特异性、敏感性比较无显著性差异。结论以往有早孕史的孕妇外周血SRY基因的检测结果与初次妊娠孕妇比较无显著性差异。     

性分化异常患者SRY基因检测及病因分析

目的探讨SRY基因在性别分化和发育中的作用。方法应用染色体核型分析和聚合酶链式反应(PCR)对人类性别决定区域(SRY)基因进行特异性扩增。结果在18例患者中有5例为46,XY,SRY( )睾丸女性化综合征患者;4例为46,XX女性性反转患者,其中3例为SRY( ),1例SRY(-);2例为46,XX,SRY( )两性畸形患者;2例为47,XXY克氏征;其他5例患者SRY基因与染色体性别一致,但都伴有不同程度的性发育异常。结论SRY基因的缺失或易位是导致性分化异常的最主要原因,同时性别决定和分化还有其他相关基因参与。     

孕妇外周血中胎儿γ血红蛋白基因的检测

目的　探索检测孕妇外周血中胎儿γ血红蛋白基因表达的方法。方法　提取孕妇全血mRNA ,经体外逆转录后 ,用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,应用ε/γ特异引物引导扩增胎儿ε/γ血红蛋白基因 ,以NdeⅡ酶切后 ,经琼脂糖凝胶电泳 ,在凝胶成像系统下观察。结果　成功自孕妇外周血中扩增出胎儿ε/γ血红蛋白基因 ,ε/γ基因被NdeⅡ酶切成三个γ基因片断 ,大小分别为 191、5 7和 2 6bp。结论　孕妇全血中微量的胎儿mRNA已基本满足体外逆转录及扩增的要求 ,胎儿γ血红蛋白基因的检测可为无创伤性产前诊断的发展奠定基础。     

从胎儿循环的角度分析培养孕妇外周血中胎儿有核红细胞用于无创性产前诊断的可行性

目的从胎儿循环的角度分析培养孕妇外周血中胎儿有核红细胞(FNRBC)用于无创性产前诊断是否可行。方法取22例孕7～9周人工流产者胚胎绒毛组织(胎儿循环组)和外周血30ml(外周血组),经MACS-GPA+富集后进行体外培养,胎儿特异的ε血红蛋白抗体标记,比较胎儿循环组和外周血组ε血红蛋白抗体阳性细胞克隆的比例。瑞氏-吉姆萨染色分析胎儿循环中和外周血中具有增殖能力的FNRBC比例。结果外周血组ε-血红蛋白抗体阳性细胞克隆比例为0,胎儿循环组为98.4%。胎儿循环中具有增殖能力的原、早幼红细胞占6.9%,中晚幼红细胞占93.1%;外周血中原、早幼红细胞为0,中晚幼红细胞占100%。结论在目前的条件下培养孕妇外周血中FNRBC很难。主要原因可能在于进入母体内可增殖的胎儿有核红细胞比例太低。     

超声联合无创产前基因检测早期筛查胎儿染色体异常的诊断价值

目的 探究胎儿染色体异常早期筛查中超声联合无创产前基因检测的应用价值。方法 选取624例需行羊水细胞染色体核型检测的高危孕妇为研究对象,所有孕妇均行产前超声、无创产前基因检测及羊水细胞染色体核型检测。将羊水细胞染色体核型检测结果视为金标准,分析无创产前基因检测、单独超声检测与联合应用诊断胎儿染色体异常的准确率。结果 超声联合无创产前基因检测诊断准确率为96.43%(54/56),明显高于超声检测的34.62%(54/156)、无创产前基因检测的83.87%(52/62),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 胎儿染色体异常早期筛查中采用超声联合无创产前基因检测的诊断价值显著,可提高筛查准确性。     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞用于产前诊断的临床分析

目的:评价孕妇外周血中胎儿有核红细胞(nucleatedredbloodcell,NRBC)用于产前诊断的可行性。方法:取236例28～42周孕妇外周血各6ml,密度梯度离心分离胎儿NRBC,制片、瑞氏染色、细胞计数;至终止妊娠时,取胎盘组织行病理切片,再行NRBC计数。分析母血中胎儿NRBC数量与妊娠异常的关系。结果:正常对照65例,外周血中NRBC计数为(10.5±3.9)个/6ml,胎盘绒毛间质血管中NRBC计数为(1.1±0.5)个/50HP。58例慢性胎儿窘迫(chronicfetaldistress,CFD),外周血和胎盘NRBC分别为(19.6±7.6)个/6ml、(2.8±0.8)个/50HP。44例胎儿生长受限(fetalgrowthrestriction,FGR),外周血NRBC为(21.3±8.1)个/6ml,胎盘NRBC为(5.8±2.3)个/50HP。69例妊高征,外周血NRBC为(22.36±7.6)个/6ml,胎盘NRBC为(4.2±2.7)个/50HP。所有妊娠异常孕妇的NRBC计数均显著高于正常妊娠组(P<0.01)。结论:妊娠发生异常导致宫内缺氧时,孕妇外周血NRBC计数可明显升高,在产前诊断中具有重要参考价值。     

彩超诊断胎儿发育异常的临床分析

目的:探讨彩超诊断胎儿发育异常的临床效果和价值。方法:选取2015年6月~2016年6月间于某院进行产前检查的600例孕妇为研究对象,对其均应用四维彩超诊断胎儿发育情况,总结彩超诊断准确率。结果:经胎儿引产和产后随访观察,600例孕妇中共发现畸形33例45处,四维彩超诊断检测出33例畸形43处,诊断符合率为95.56%,两者差异无统计学意义(P0.05);45处畸形分别为面部畸形7例,心脏畸形8例,中枢神经系统畸形9例,泌尿生殖系统畸形9例,消化道畸形5例,四肢畸形7例。其中,四维彩超漏诊为单侧肾积水1例,肾积水伴输尿管扩张1例,漏诊率为4.44%(2/43),结论:应用四维彩超对孕妇进行产前检查,可以有效鉴别胎儿的发育异常情况,这对提高人口素质有着积极的意义,值得临床推广。     

一种提高孕妇外周血中游离胎儿DNA产量的新方法

目的探讨提高孕妇外周血中游离胎儿DNA产量的新方法。方法用QIAamp DNA Blood Mini Kit和QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取56名孕妇外周血血浆DNA。应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析样本中游离胎儿DNA的含量。结果与QIAamp DNA Blood Mini Kit相比,经QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取试剂盒提取的总DNA平均浓度是前者的1.5倍。29名早期妊娠孕妇外周血游离胎儿DNA平均浓度为812拷贝/mL,27例晚期妊娠为4 876拷贝/mL。29名男性胎儿SRY基因平均浓度是前者1.2倍,妊娠早期平均浓度为28.6拷贝/mL,晚期平均浓度为264拷贝/mL。结论经改良后,采用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取试剂盒可以获得更高浓度的胎儿游离DNA,可以应用于孕早期和孕中期的无创性产前基因诊断。     

高龄孕妇胎儿出生缺陷情况分析

目的 分析高龄孕妇出生缺陷情况.方法 选择单胎孕妇50 684例,其中高龄组(35~51岁)孕妇2 436例,对照组(18~34岁)孕妇48 248例进行常规经腹超声产前诊断,观察早孕期流产情况、胎儿颈项透明层厚度(NT)、胎儿颈后皮肤及软组织厚度(NF)情况、孕中晚期胎儿畸形情况,以及胎儿染色体核型分析,分析高龄孕妇NT、NF增厚情况、胎儿畸形率、畸形好发系统等.结果 早孕期流产情况:高龄孕妇自然流产238例(9.77%),适龄孕妇自然流产1 910例(3.96%).NT、NF异常者1 822例,其中高龄孕妇胎儿异常98例(4.02%).高龄孕妇中合并多系统畸形36例(36.73%),大于45岁者染色体核型异常者占22.6%.结论 对高龄孕妇应做系统超声筛查及有针对性的血清学及介入性检查,以保证获得良好的妊娠结局.     

彩超大脑中动脉血流峰值速度检测对胎儿宫内贫血的诊断分析

目的探讨彩超大脑中动脉血流峰值速度检测对胎儿宫内贫血诊断的价值。方法利用彩超对胎儿MCA-PSV值进行检测分析。结果通过对实验数据的记录和分析可知,两组孕妇的MCA-PSV值与脐血Hb浓度存在一定的差异。其中,观察组孕妇的MCA-PSV平均值为(1.27±0.26)(MOM),对照组孕妇的MCA-PSV平均值为(1.01±0.15)(MOM)。观察组在采用彩超MCA-PSV检测后,从检测效果来看本组55例孕妇中有51(92.73%)例孕妇的胎儿宫内贫血症状被成功检测;有4(7.27%)例孕妇的胎儿宫内贫血症状未被成功检测;差异具有统计学意义(χ2=3.156,P<0.05)。其中,有12例孕妇为重度胎儿宫内贫血,检测率为100.00%(12/12);有31例孕妇为中度胎儿宫内贫血,检测率为96.77%(30/31);有12例孕妇为轻度胎儿宫内贫血,检测率为75.00%(9/12);差异具有统计学意义(χ2=2.317,P<0.05)。结论彩超MCA-PSV检测对胎儿宫内贫血的诊断准确率高,且安全无创伤,因此,应当进行临床推广。     

用荧光定量PCR检测46,XY女性的SRY基因

目的:探讨用荧光定量聚合酶(FQ-PCR)检测46,XY女性SRY基因的可靠性和临床意义。方法:应用FQ-PCR方法对10例46,XY女性患者进行了SRY基因检测,并将检测结果与剖腹探查及病理组织学结果比较。结果:10例患者中,有8例SRY基因阳性,定量结果为(2～5)×108拷贝/mL,与正常男性SRY基因的拷贝数相近,8例体内均无卵巢组织,6例有发育不良的睾丸组织,2例卵巢部位为曲细精管组织;2例SRY基因阴性,体内有未发育的卵巢组织和幼稚子宫,无睾丸组织。结论:用FQ-PCR法检测SRY基因是可靠的,该方法可为患者的临床诊断、治疗提供进一步的依据。     

探讨四维彩超在胎儿畸形诊断中的临床应用价值

目的探讨四维彩超在胎儿畸形诊断中的临床应用价值。方法我院在2015年1月至12月进行本次调查,以1000例在我院进行常规孕检的孕妇为例。分别对该1000例孕妇进行二维彩超及四维彩超进行诊断,分析两种诊断方法在胎儿畸形诊断中的应用价值。结果1000例孕妇中,最终产后诊断(或流产)确诊为畸形胎儿18例。其中经二维超声诊断确诊77.8%(14/18);四维彩超诊断确诊94.5%(17/18),以四维彩超诊断准确率较高,组间比较P<0.05。本次主要畸形特征包括脊椎裂、肾积水、无脑畸形及唇腭裂。结论四维彩超在胎儿畸形诊断中具有重要的临床价值,可作为胎儿畸形筛查的主要手段。     

孕晚期彩色多普勒超声PI、RI、S/D对胎儿宫内窘迫的评估价值

目的：探讨孕晚期彩色多普勒超声流搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期和舒张期流速比(S/D)对胎儿宫内窘迫的评估价值。方法：选取2020-03～2021-03焦作市妇幼保健院妇产科门诊及住院136例利用彩色多普勒超声进行产前检查的孕妇作为本次研究对象,其中健康组孕妇为86例,宫内窘迫组孕妇为50例,彩色多普勒超声检查时,观察并监测记录胎儿脐动脉管和大脑中动脉中的PI、RI、S/D,评价两个指标与胎儿宫内窘迫的关系。结果：宫内窘迫组胎儿脐动脉中PI、RI、S/D值明显比健康孕妇组胎儿低,差异有统计学意义(P<0.05);宫内窘迫组胎大脑中动脉中PI、RI、S/D值明显比健康孕妇组胎儿增高,差异有统计学意义(P<0.05);经ROC曲线分析得出,PI、RI、S/D曲线下面积分别为0.743、0.797、0.755,灵敏度为62.0%、68.0%、72.0%,敏感度为95.3%、86.0%、81.4%,ROC曲线下面积可较好的预测胎儿宫内窘迫诊断价值。结论：彩色多普勒超声对孕晚期胎儿宫内窘迫具有较高诊断价值,可检测胎儿脐动脉和大脑中动脉的PI、RI、S/D值,根据数值的变化...     

探讨皖北地区孕妇人群中p.Arg435His-IgG3同种异型的阳性率

目的:探索皖北地区孕妇人群中IgG3同种异型p.Arg435His(p.Arg435His-IgG3)的阳性率,为后续进一步研究p.Arg435His-IgG3与胎儿和新生儿溶血病的发生发展奠定理论基础。方法:提取177例孕妇血液样本DNA,设计特定引物,采用PCR技术对IgG3重链恒定区CH2和CH3的基因片段进行扩增,再通过Sanger测序法对扩增产物进行基因测序。将测序结果与参考序列AJ390235(IMGT基因库登录号)进行比对,以384位氨基酸密码子突变作为实验内参,查找435位氨基酸密码子是否发生突变并计算出p.Arg435His-IgG3的阳性率。结果:177例孕妇血样中有3例无效样本,在其余174例有效样本中检测到一例为IgG3同种异型p.Arg435His(g.1053927G>A),阳性率为0.57%;通过比对384位氨基酸密码子测序结果提示,在174例样本中有纯合子AGC 30例、AAT 61例,杂合子AG/AC/T 83例。结论:皖北地区孕妇人群中存在p.Arg435His-IgG3同种异型,其阳性率与继往研究相比偏低。     

产前胎儿神经系统畸形彩超诊断的价值分析

目的探讨产前胎儿神经系统畸形彩超诊断价值。方法选取2013年3月~2015年12月我院产前检查诊治疑似为胎儿神经系统畸形孕妇110作为研究对象,所有孕妇孕期分别采用普通B超和彩色超声进行检查,以引产或分娩后诊断为"金标准",比较两种超声检查灵敏度、特异性及诊断阳性率、误诊率、漏诊率。结果 110例孕妇经引产或分娩后证实为胎儿神经系统畸形85例,发生率为77.27%。普通B超在产前胎儿神经系统畸形中诊断灵敏度为75.29%,特异性为64.00%。彩色超声在产前胎儿神经系统畸形中诊断灵敏度为91.76%,特异性为92.00%。彩色超声在产前胎儿神经系统畸形中诊断阳性率高于普通B超,误诊率和漏诊率均低于普通B超(70.91%vs.58.18%,1.82%vs.8.18%,6.36%vs.19.09%,P<0.05)。结论彩色超声在产前胎儿神经系统畸形中诊断具有较高灵敏度、特异性,可降低误诊、漏诊发生率,提高阳性诊断率,可作为产前筛查胎儿神经系统畸形首选辅助检查方法。     

SRY基因、SOX-9基因检测在性反转中的应用研究

目的探讨在性反转综合征患者中SRY基因和SOX-9基因是否存在和突变对性腺发育的影响。方法分析了5例性反转患者,其中46,XX男性性反转4例,1例46,XY女性性反转的染色体核型,并对SRY基因存在与否用原位杂交(FISH)进行了检测。结果 3例46,XX男性性反转SRY基因阳性,1例46,XY.t(10;13)(p10;q22)女性性反转SRY基因阴性,1例46,XX男性性反转患者SRY基因阴性。5例均检测到SOX-9基因,并对这1例SRY基因阴性而SOX-9基因阳性的患者进行了基因测序,未发现SOX-9基因存在基因的突变。结论 SRY基因在性别分化中的重要基因,SOX-9基因的重复拷贝对性别的分化也十分重要。