槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ—２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５～４０μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ２＋］；的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５～１２４．４μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ２＋］１升高的机制。     

丙咪嗪抗血小板聚集作用与细胞外Ca_(2+)浓度的关系

目的：观察丙咪嗪抗血小板聚集作用与细胞外Ｃａ２＋浓度的关系。方法：以比浊度法进行血小板聚集实验。结果：丙咪嗪００１～１ｍｍｏｌ／Ｌ浓度明显对抗凝血酶及二磷酸腺苷诱导的人血小板聚集，且其抗血小板聚集作用随着细胞外Ｃａ２＋增加（加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ）与降低（加入乙二醇二乙醚二氨四乙酸１ｍｍｏｌ／Ｌ）而呈现减弱和增强现象，与维拉帕米作用相似。结论：丙咪嗪的抗血小板聚集作用可能与抗钙作用有关。     

NIDDM患者血小板Ca_(2+)转运及其与聚集功能的关系

３２例ＮＩＤＤＭ患者，分血小板聚集功能亢进组（ｎ＝１７）和无亢进组（ｎ＝１５），探讨Ｃａ２＋转运影响血小板胞浆游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）变化与最大聚集（ＭＡＲ）的关系。结果：亢进组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（１３４．４±２６．４对１０１．５±１３．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。［Ｃａ２＋］ｉ与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３２１９，Ｐ＜０．０５）以凝血酶刺激，有胞外Ｃａ２＋内流及胞内Ｃａ２＋释放时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（９１８．９±２０７．６对７９１．２±１１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），并与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３３７１，Ｐ＜０．０１）；以ＴＭＢ８阻滞胞内Ｃａ２＋释放，组间差异仍然显著（Ｐ＜０．０５）；当缺乏胞外Ｃａ２＋内流时，则组间不呈显著差异（Ｐ＞０．０５）。以钙载体Ａ２３１８７刺激，在有或无胞外Ｃａ２＋时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）然而，无亢进组上述各指标与对照组间均未呈显著差异。提示ＮＩＤＤＭ患者血小板聚集功能亢进与［Ｃａ２＋］ｉ变化有关，可能涉及胞浆内Ｃａ２＋稳态异常，凝血酶刺激胞外Ｃａ２＋内流及Ａ２３１８７作用胞内Ｃａ２＋释放增强等环节     

槲皮素对血小板聚集和胞浆游离钙的影响

研究槲皮素对凝血酶诱导的血小板聚集和胞浆游离钙浓度的影响及钙对槲皮素的血小板聚集制剂效应的作用。本实验荧光钙离子指示剂观察槲皮素对血小权胞浆游离钙的影响。表明，槲皮素明显抑制凝血酶诱因小板聚集和游离钙的升高。ＩＣ５０和９５％可信区间分别为１４６．２（９２．４－２３１．３）和７８．５（４９．５－１２４．４）μｍｏｌ．Ｌ＾－１，槲皮素对凝血酶诱导的钙释放无影响，抑制钙内流是槲皮素抑制血波板聚集和「Ｃdi     

Fura－2荷载血小板胞内游离钙浓度的连续测定

以Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２荷载血小板，连续测定血小板胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度动态变化。在生理胞外Ｃａ２＋浓度时。正常成人血小板［Ｃａ２＋］ｉ静息水平为１０８．３±３．６ｎｍｏｌ／Ｌ（－ｘ±ｓ－ｘｎ＝１５，下同），以凝血酶０．２Ｕ／ｍｌ作诱导，［Ｃａ２＋］ｉ迅速升至峰值７７０．３±２７．３ｎｍｏｌ／Ｌ，其下降幅度在４ｍｉｎ时为４０．９％±１．８％；以ＴＭＢ８４００μｍｏｌ／Ｌ阻滞胞内Ｃａ２＋释放，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（４４３．７±２７．７ｎｍｏｌ／Ｌ）明显下降（Ｐ＜０．００１），而４ｍｉｎ的下降幅度（４７．７％±３．８％）则无明显差异（Ｐ＞０．０５）。在胞外Ｃａ２＋＜１０－８ｍｏｌ／Ｌ时，［Ｃａ２＋］ｉ静息水平７０．２±７．５ｎｍｏｌ／Ｌ，作同样的诱导，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（３２１．２±１７．８ｎｍｏｌ／Ｌ）及下降幅度（９９．２％±３．６％）均有显著变化（ｐ＜０．００１）。结果表明，本文所建立的方法能连续测定血小板［Ｃａ２＋］ｉ的动态变化。     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升高的抑制作用

应用４５Ｃａ２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０、１００μｍｏｌ·Ｌ－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ２＋内流还是胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％；但对Ａ２３１８７引起的胞内［Ｃａ２＋］ｉ升高无显著抑制作用。结果表明：海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流和［Ｃａ２＋］ｉ的升高。     

API0134对凝血酶作用下血小板环核苷酸和胞浆游离钙离子浓度的影响

为观察穿心莲有效成分（ＡＰＩ０１３４）对凝血酶作用下血小板活化的抑制作用,将家兔２４只随机分为ＡＰＩ０１３４（Ａ）组（ｎ＝９）,噻氯匹定（Ｔ）组（ｎ＝８）和对照组（ｎ＝７）,治疗１周,然后检测凝血酶作用下血小板内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和胞浆游离钙离子浓度,以及血小板超微结构。结果表明ｃＡＭＰ水平在Ａ、Ｔ两组显著高于Ｃ组（Ｐ＜０．０５）,而胞浆游离钙离子浓度明显低于Ｃ组（Ｐ＜０．０１）,超微结构表明Ａ组和Ｔ组血小板脱颗粒现象较Ｃ组明显减轻。在Ａ和Ｔ组之间各项参数均无统计学差异。结论：ＡＰＩ可抑制凝血酶诱导的血小板活化反应     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

花椒油素对A23187和钙调节血小板及细胞内游离钙作用的研究

目的 研究花椒油素对ＣａＣｌ２和钙离子载体Ａ２３１８７调节血小板及其中Ｃａ＾２＋浓度的作用。方法 比浊法测定血小板聚集,用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定细胞内游离钙的水平。结果 花椒油素显著地抑制ＣａＣｌ２和Ａ２３１８７诱导的血小板聚集,前者的抑制率为９．０％～６７．１％,后者的抑制率为１８．１％～７２．５％。明显降低Ａ２３１８７诱导的血小板胞质游离Ｃａ＾２＋浓度,降低率为１２．８％～６３．４％。结论 花椒油素抑制聚集作用与降低细胞内游离Ｃａ＾２＋水平之间呈线性正相关（Ｐ〈０．０１）。     

普鲁卡因胺抑制凝血酶诱导的人单个血小板游离Ca~(2+)升高

用570型粘附式细胞仪动态观察普鲁卡因胺（Procainamide，Pro）对凝血酶激活的人单个血小板细胞内游离Ca2+的影响。静息状态时对照组和给药组荧光值均较低。当加入0．1u／ml凝血酶时，荧光强度迅速上升，两组达峰值时间均为20s，但给药组最大升高幅度比对照组低21％（P＜0．05）。随后荧光强度迅速下降，两组下降率均为-1u／s，对照组和给药组下降幅度分别为57％和76％（P＜0．05）。上文结果提示，普鲁卡因胺降低凝血酶诱导的血小板游离Ca2+升高，对Ca2+的再摄取没有影响。     

凝血酶对牛主动脉内皮细胞表达组织因子活性的影响

目的 :探讨凝血酶对内皮细胞表达组织因子 (TF)活性的作用及其机制。方法 :实验材料为第 4～ 8代新生牛主动脉内皮细胞 ,采用一期凝固法检测细胞冻融液中的TF活性。结果及讨论 :凝血酶可促进血管内皮细胞表达TF活性 ;凝血酶对内皮细胞的这种刺激作用可能具有Ca2 + /CaM依赖性 ,且可能与细胞内cAMP浓度有关。     

EFFECT OF 764－3 ON AGGREGATION AND CALCIUM MOVEMENTS IN AEQUORIN－LOADED HUMAN PLATELETS

ＥＦＦＥＣＴＯＦ７６４－３ＯＮＡＧＧＲＥＧＡＴＩＯＮＡＮＤＣＡＬＣＩＵＭＭＯＶＥＭＥＮＴＳＩＮＡＥＱＵＯＲＩＮ－ＬＯＡＤＥＤＨＵＭＡＮＰＬＡＴＥＬＥＴＳＷｕＨｕａｉｚｈｕ武怀珠；ＬｉＪｉａｚｅｎｇ李家增；ＰｅｎｇＬｉｎ彭林；ＴｅｎｇＢｉｎ滕彬ａｎｄＺ...     

钙离子选择性微电极直接测试人牙菌斑Ca2+的初步探讨

目的：评价钙离子选择性微电极（Ｃａ＾２＋检测、分析的可行性及其意义。方法：采用自制的中性载体Ｃａ＾２＋－ＩＳＭＥ直接测试牙菌斑中的Ｃａ＾２＋,并对Ｃａ＾２＋－ＩＳＭＥ进行了一步的改进。结果：聚氯乙烯毛细管与玻璃毛细管制备的电检具有类似的性能,但在牙菌斑Ｃａ＾２＋的测试中电位显示不稳定,波动幅度大,重复性差。结论：Ｃａ＾２＋－ＩＳＭＥ用于原位牙菌斑Ｃａ＾２＋的测试尚有许多问题有待解决。     

PKC介导凝血酶诱导人肺成纤维细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达

摘要：目的研究蛋白激酶C（PKC）在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作
用。方法分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶（10 nmol/L）刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中
MCP-1的蛋白表达;提取细胞裂解液中总RNA并逆转录合成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA表达水平。结
果广谱型PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I 和RO-31-8220 可抑制凝血酶诱导的HLF-1 MCP-1 蛋白释放及mRNA表达,而
Ca2+依赖性PKC抑制剂Gö 6976则没有抑制效果。结论非Ca2+依赖性PKC介导凝血酶诱导HLF-1释放MCP-1。
     

脑出血后脑组织水、离子变化及水蛭素的作用

目的　探讨自发性脑出血脑水肿的发生机制及水蛭素的作用。方法　利用大鼠自体新鲜无肝素未凝动脉血定量脑出血模型 ,观察不同时间大鼠脑出血周围脑组织含水量、离子含量的变化 ,并以大鼠脑出血后脑内注射凝血酶特异抑制剂水蛭素的实验 ,研究水蛭素对水肿程度及离子含量变化的影响。结果　大鼠脑出血后早期脑组织含水量、离子随时间推移而升高、变化 ,而水蛭素可减轻其水肿程度及离子变化 (P <0 .0 5 )。结论　凝血酶与实验性脑出血脑水肿的产生发展关系密切 ,早期应用水蛭素可减轻脑出血脑水肿。     

Ilexonin A may be a slow calcium channel blocker

Ilexonin A is an effective compound isolated from Ilex pubescens Hook. et Arn. It has been used in the clinic to treat cardiovascular diseases such as cerebral embolism and myocardial infarction. Experimental studies have shown that it inhibited thrombosis, platelet adhesion, and platelet aggregation and 5-HT release induced by collagen, ADP or A23187 in vitro and in vivo. The inhibitory effect of platelet aggregation induced by A23187 was reduced by adding CaCl2 (1mM) to the medium. It suggests that the effects of llexonin A on platelet function are possibly related to calcium. The present experiments were designed to investigate the effects of Ilexonin A on thrombin-induced Ca2+ fluxes of platelets, in which quin-2 was used to measure the cytoplasmic Ca2+ concentration. The results indicated that the free calcium concentrations of resting platelets and the platelets activated by thrombin were 78.65 +/- 7.74 nM and 871.10 +/- 123.63 nM respectively. After adding EGTA (lmM) to the medium, the calcium concentrations reduced to 34.75 +/- 7.77 nM and 50. 86 +/- 7.44 nM. Ilexonin A and verapamil markedly inhibited the thrombin induced Ca2+ influx. The IC50 was 76.8 microM and 67.5 microM respectively. But both had no effect on thrombin-induced Ca2+ release from dense tubular system. It suggests that Ilexonin A acts most likely as a calcium slow channel blocker.     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402 细胞 Ca2+浓度的影响

目的研究甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响.方法采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化.结果在AFP作用4 min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10 min时降到正常水平.结论AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Be17402细胞内信息传递.     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402细胞Ca~(2+)浓度的影响

目的:研究甲胎蛋白(alpha-fetoproteinAFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响。方法:采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化。结果:在AFP作用4min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10min时降到正常水平。结论:AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Bel7402细胞内信息传递。