NF-κB与肝细胞凋亡

NF-κB广泛存在于肝脏各种细胞中,通过调节众多基因的转录参与肝脏的生理、病理过程。近年来研究证明,NF-κB与肝细胞凋亡关系密切。本文就NF-κB及其在肝细胞凋亡中的作用作一综述。1NF-κB家族组成及其活化和调控NF-κB属NF-κB/Rel蛋白家族,包括Rel A(P56)、RelB、C-Rel(C亲     

NF-κB/P65,p-IκBα,IκKα在皮肤SCC和BCC中的表达和意义

目的:探讨NF-κB信号转导通路中真核细胞转录因子κ(BNF-κB/P65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)以及真核细胞转录因子抑制蛋白激酶(IκKα)在皮肤SCC和BCC中的表达和三者之间关系,为临床治疗提供新思路。方法:采用免疫组化SP法检测53例皮肤癌组织(其中SCC27例,BCC26例)和20例正常皮肤组织中NF-κB/P65,p-IκBα和IκKα蛋白的表达。结果:与正常皮肤组织相比,NF-κB/P65,p-IκBα和IκKα三者在SCC,BCC中均高表达(P<0.05);三者在SCC和BCC中的表达具有统计学意义(P<0.05);IκK蛋白的表达与SCC的分化程度无明显相关性(P>0.05)。在BCC和SCC中,IκKα的表达与p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0.536,P<0.05),NF-κB/P65和p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0.435,P<0.05)。结论:NF-κB信号传导通路可能在BCC和SCC的发生中起重要作用。     

NF-κB、Caspase-3在腺苷诱导人HepG2细胞凋亡中的作用

目的 研究NF-κB、Caspase-3在腺苷(ADO)体外诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用.方法 将不同浓度的ADO(0.1～5 mmol/L)作用于HepG2细胞,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖的时间效应和剂量效应.2.0 mmol/L ADO单用或联合NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC,100 μmol/L)作用HepG2细胞12 h、24 h,采用Hoechst 33342荧光染色法及流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡及细胞周期,Western blot技术检测NF-κB蛋白表达;荧光比色法测定Caspase-3酶活性.结果 ADO对HepG2细胞生长具有显著抑制作用,并呈一定的量效和时效关系.药物作用24 h、48 h的IC50分别为2.52 mmol/L和1.89 mmol/L.ADO单独处理HepG2细胞12 h和24 h或联合PDTC处理后,细胞凋亡率分别为8.30%、22.32%;20.18%、30.89%,均显著高于对照组(0.81%,P<0.001);ADO作用HepG2细胞后荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变,FCM分析药物处理组显示典型特征性的亚二倍体凋亡峰(sub-G1),细胞生长周期阻滞于G0/G1期;同时伴有Caspase-3活性显著升高(P<0.05).ADO处理后显著增加了NF-κB蛋白表达(P<0.05);PDTC有效抑制了NF-κB表达,同时增加了 Caspase-3活性及ADO的细胞毒作用(P<0.05).结论 ADO诱导了HepG2细胞凋亡并活化Caspase-3.抑制NF-κB活性可通过Caspase-3途径增强ADO的细胞毒作用.     

肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。　结果　 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。　结论　HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 ,为HCC免疫治疗提供了新的潜在靶位     

肝癌组织中Bcl-2和NF-κB的表达与AFP相关性的研究

目的：观察凋亡相关基因Bcl-2、核因子NF-κB在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达,并探讨二者与AFP之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测40例HCC组织（其中AFP阳性20例,AFP阴性20例）和10例良性肿瘤组织中Bcl-2、NF-κB的表达。结果：40例HCC患者Bcl-2阳性表达率为45.0%,NF-κB阳性表达率为57.5%;其中AFP阳性细胞Bcl-2表达率为55.0%,AFP阴性细胞为35.0%;AFP阳性细胞NF-κB表达率为75.0%,AFP阴性细胞为40.0%。HCC细胞NF-kB和Bcl-2的表达呈正相关（r=0.778,P〈0.01）。结论：Bcl-2、NF-κB的异常表达同HCC的抗凋亡和耐药性有一定关系,AFP阳性HCC细胞的Bcl-2、NF-κB阳性表达率更高。Bcl-2和NF-κB可以考虑作为预后的判断指标之一。     

NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肝细胞凋亡中的作用

目的:探讨腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在肝细胞凋亡信号转导中的作用,了解腹部火器伤肠管穿透后继发性肝损伤机制。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12和24h组,建立腹部火器伤肠管穿透模型,用免疫组化图像分析法测定各组肝内NF-κB活性,观察肝细胞凋亡和肝功能变化情况。结果:伤后各组肝内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后1h和8h出现2个高峰(P<0.05)。肝细胞凋亡指数和血清ALT水平于伤后显著增高(P<0.05),并与NF-κB活性变化基本一致。结论:腹部火器伤肠管穿透后肝内NF-κB活性增强,肝细胞凋亡增多,导致肝损伤。     

NF-кB与P-gp在肝细胞肝癌组织中的表达

目的探讨核转录因子（NF-κB）与P糖蛋白（P-gp）在肝细胞肝癌（HCC）及癌旁肝组织的表达及其相互关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测30例HCC中NF-κB、P-gp的表达情况，以30例相应癌旁肝组织作为对照组，所得结果用统计学卡方检验及列联表等相关分析进行比较。结果NF-κB蛋白在HCC、癌旁肝组织中阳性表达率分别为63．3％（19／30）、16．7％（5／30），HCC与癌旁肝组织中NF-κB蛋白表达差异有显著性（P〈0.05）；P-gp蛋白在HCC、癌旁肝组织中阳性表达率分别为83．3oA（25／30）、30％（9／30），HCC与癌旁肝组织表达差异有显著性（P〈0.05）。NF-κB蛋白的表达与P-gp蛋白的表达呈正相关（r=0.89，P〈0.05）。结论NF-κB和P-gp在HCC中的表达提示其可能参加了HCC和多药耐药的发生。NF-κB与P-gp在HCC表达中呈正相关，提示NF-κB与P-gp可能介导的多药耐药，共同参与了HCC多药耐药机制。     

Cyclin E在肝细胞癌中的表达及其意义

目的　探讨CyclinE在肝细胞癌中的表达及其意义。方法　应用同一组织连续切片免疫组化SABC法 ,检测CyclinE在 45例肝细胞癌 (HCC)及 3 0例癌旁肝组织中的表达及其与临床病理资料的关系。其中门静脉癌栓形成者 12例 ,有转移者 11例 ,肝内肿瘤播散或有卫星结节者 12例 ,肿瘤包膜侵袭者 19例 ,以上 4项中有任何 1项阳性或 1项以上阳性者归入侵袭转移组。结果　CyclinE在HCC组织中阳性表达率 3 5 .6% (16/ 45 ) ,癌旁肝组织无阳性表达。CyclinE表达与年龄、性别、乙肝表面抗原、血清甲胎蛋白、肿瘤大小、包膜形成、肝外转移及癌灶数目无关 (P >0 .0 5 ) ,与组织分化 ,癌栓形成有关 (P <0 .0 5 )。CyclinE在侵袭转移组较非侵袭转移组表达增高 (P <0 .0 5 )。.结论　CyclinE与肝细胞癌的发生 ,分化及侵袭转移有关 ,检测其表达有助于协助临床诊断治疗及判断预后。     

乳腺浸润性导管癌中survivin与NF-κB的表达及其临床意义

背景与目的：肿瘤的侵袭和转移是乳腺癌死亡的主要原因,对乳腺癌分子标记物的研究有助于诊断和预后判断,乳腺癌组织中凋亡基因survivin和核转录因子NF-κB蛋白的关系尚不清楚,本研究探讨乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB蛋白的表达及其与患者临床病理特征、分子亚型及预后的关系,以期拓展对乳腺癌发病机制的理解与认识,为乳腺癌防治提供新策略。 方法：选择2015年5月—2017年5月在郑州人民医院行手术治疗、术后经病理确诊且病历完整的80例乳腺浸润性导管癌患者作为研究对象,用免疫组化法检测患者癌组织与癌旁组织在survivin与NF-κB蛋白的表达,用统计学方法分析survivin、NF-κB蛋白与患者临床病理参数、分子亚型及预后的关系。 结果：survivin与NF-κB在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（53.75% vs. 11.25%;56.25% vs. 8.75%,均P<0.05）。survivin和NF-κB的表达均与组织学分化、淋巴结转移状况、TNM分期、分子分型有关,均表现为在低分化、淋巴结转移阳性、TNM分期晚、非luminal型乳腺癌组织中高表达（均P<0.05）;同时,两者共高表达率也在低分化、淋巴结转移阳性、TNM分期晚、非luminal型的乳腺癌组织明显升高（均P<0.05）。乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB表达呈正相关（r=0.546,P=0.000）。生存分析结果显示,survivin或NF-κB高表达患者的5年无病生存率均低于各自的低表达患者,而两者共高表达的患者5年无病生存率低于两者任何单一高表达或两者共低表达患者（均P<0.05）。Cox回归分析显示,NF-κB、survivin与NF-κB共表达、肿物直径、分化程度和淋巴结转移是乳腺浸润性导管癌患者预后的独立危险因素（均P<0.05）。 结论：乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB蛋白的表达与患者的恶性临床病理特征及不良预后密切相关,而且两者可能存在协同作用促进了乳腺癌的发生与发展。     

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨肝癌相关的新基因BC047440在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测36例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC047440 mRNA的表达，并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组，分析其与肿瘤病理变化的关系。〖KG(*8〗结果：36例HCC中BC047440基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2594±0.0928和0.0942±0.0443,差异有极显著性意义（P<0.01）;过高表达组与较高表达组相比较，前者肝癌直径较大，门静脉受侵较严重，差异有显著性（P<0.05）。结论：BC047440基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。     

稳定表达线粒体融合素基因2肝癌细胞株的建立及其意义

目的探讨将线粒体融合素基因2（mfn2）转染培养人肝癌细胞株HepG2，建立长期表达mfn2的肝癌细胞模型的可行性。方法基因重组构建mfn2真核表达质粒pEGFPnffn2，用脂质体将质粒转染培养人肝癌细胞株HepG2，经G418筛选阳性细胞克隆，逆转录-聚合酶链反应检测转染后30d细胞mfn2 mRNA的表达水平；Western—blot检测线粒体融合蛋白的表达。结果（1）成功构建表达真核质粒pEGFPmfn2；（2）成功将质粒pEGFPmfn2转染肝癌细胞株HepG2，并获得阳性细胞克隆；（3）经脂质体转染的人肝癌细胞株HepG2可较稳定表达mfn2。结论成功地建立稳定表达mfn2的肝癌细胞株，为进一步研究mfn2在肝癌发生发展中的作用奠定了基础。     

胆囊癌组织survivin,caspase-3和Cox-2表达与临床病理特点的关系

目的:探讨survivin，caspase-3及Cox-2蛋白表达与胆囊癌生物学行为及临床病理指标的关系。方法：检测49例胆囊癌、9例胆囊腺瘤、10例慢性胆囊炎组织中survivin，caspase-3及Cox-2的表达。结果：（1）survivin，caspase-3及Cox-2在胆囊癌组织中阳性表达率分别为65.3%（32/49），44.9%（22/49）和75.5%（37/49），显著高于胆囊良性病变组织(分别为P＜0.001，＜0.001及＝0.001)。（2）survivin表达与肿瘤浸润程度、分化程度、淋巴结转移及Nevin分期均无显著关系（均P＞0.05）;caspase-3表达与分化程度有关而与肿瘤浸润程度、淋巴结转移、Nevin分期无关;Cox-2阳性率在淋巴结转移组与非转移组、不同浸润深度以及Nevin分期间差异均有显著性，而与组织学分级无关。三者均与患者的年龄、性别无关。（3）survivin与caspase-3表达呈负相关(r＝－0.373，P＝0.008)，survivin与Cox-2表达呈正相关(r＝0.404，P＝0.004)，caspase-3与Cox-2表达无明显相关性(r＝－0.156，P＝0.284)。结论：胆囊癌组织caspase-3表达较低，而survivin及Cox-2表达较高;survivin和Cox-2的过表达以及caspase-3的失表达在胆囊癌的发生、发展中起重要作用。survivin和Cox-2蛋白可望作为靶点用于胆囊癌靶向治疗。     

EphA2与E cadherin在胰腺癌中的表达及其意义

目的 探讨EphA2和E-adherin在胰腺癌组织及细胞中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学SP方法，检测56例胰腺癌及23例癌旁非肿瘤胰腺组织中EphA2和E-cadherin的表达，并分析其与临床病理因素的关系。采用RT-PCR方法检测EphA2在胰腺癌细胞株BXPC-3，PC-3及PANC-1中的表达。结果 胰腺癌组织中EphA2阳性和E-cadherin阴件的表达率分别为66．07％和57．14％，均显著高于癌旁非肿瘤胰腺组织（P〈0．05）；EphA2表达与胰腺癌分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关，E-adherin表达与胰腺癌TNM分期和淋巴结有关。在胰腺癌组织中，EphA2与E-cadherin的表达呈负相关；EphA2在胰腺癌向侵袭力细胞株BXPC-3和PANC-1呈高表达，在低侵袭力细胞PC-3呈低表达。结论 EphA2与E-cadherin的表达和／或功能异常可能共同参与胰腺癌的发生发展与转移；联合检测两种蛋白对于胰腺癌转移潜能的判断具有一定的参考价值。     

5 LOXmRNA和VEGFmRNA在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的研究5脂氧合酶（5-LOX）在胰腺癌中的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）的关系.方法用RT-PCR检测5-LOXmRNA和VEGFmRNA在35例胰腺癌新鲜组织中的表达.结果5-LOX mRNA和VEGF mRNA在胰腺癌组织中的表达率分别为74.3%及60%,均与胰腺癌的临床分期有关;VEGF还与胰腺癌的分化程度有关.5-LOX mRNA和VEGF有协同作用（P＜0.05）,呈密切正相关（r=0.5 35,P＜0.01）.Ⅲ～Ⅳ期5-LOX mRNA表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05）.结论5-LOXmRNA和VEGFmRNA在胰腺癌中表达增高,与临床分期有关.5-LOXmRNA和VEGFmRNA表达呈正相关.     

大肠癌中VEGF-C分泌水平的检测及其意义

目的 检测大肠癌患者血清及不同的细胞系中血管内皮生长因子C（VEGF-C）和血管生长因子（VEGF）的分泌水平，评估其在诊断大肠癌淋巴结转移中的意义。方法 采用酶联免疫法检测66例大肠癌（观察组）和30例健康者（对照组）血清中及4株大肠癌细胞系培养液中VEGF-C和VEGF的分泌的水平。结果 观察组血清VEGF-C和VEGF均高于对照组（P〈0．01）；有淋巴结转移组的血清VEGF-C和VEGF均高于无淋巴结转移组（P〈0．01）；有淋巴管和／或血管浸润组上述两指标均高于无浸润组（P〈0．01）。血清VEGF-C水平在1438．0pg／mL以上者其灵敏度为81．0％。特异性为76．0％；血清VEGF水平在240．2pg／mL以上者其灵敏度为72．0％，特异性为74．0％。联合检测VEGF-C和VEGF对淋巴结转移阳性率的预测价值达84．6％，阴性预测价值达94．4％，精确度达93．7％。LoVo及LOVo-5FU培养液中VEGF-C分泌水平明显升高（P〈0．01）。结论 检测VEGF-C为判断大肠癌患者淋巴结是否转移可能提供新的诊断依据。VEGF-C可望成为治疗大肠癌淋巴道转移的新靶点。     

胃癌腹腔微转移检测及其临床意义

摘要：目的 探讨胃癌检测胃癌腹腔微转移的作用及临床意义。方法 选择 50例术前及术中检查均未发现腹膜转移的胃癌病例, 术中行道格拉斯窝处的腹膜活检并行HE常规染色和CK 20免疫组化染色检查，同时用RT PCR方法检测胃癌腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的表达。结果 全部患者道格拉斯窝活检腹膜HE染色均为阴性。CK 20免疫组化检查的阳性率为24.0％（12/50）；RT PCR检测腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的阳性率为36.0％（18/50）；CK 20免疫组化检查阳性的12例患者腹腔冲洗液中CK 20 mRNA检查均为阳性。CK 20 mRNA阳性率与胃癌浸润深度、组织学类型和淋巴结转移数目有关(P<0.05)。CK 20 mRNA阳性和阴性胃癌患者3年生存率分别为22.2％和62.5％(P<0.01)。结论 术前检查或术中探查未发现腹膜转移的胃癌患者,可行腹腔冲洗液RT PCR检查以发现有无腹腔微转移，该项检查可为胃癌正确分期、腹腔内辅助化疗及预后判断提供证据。     

亚甲蓝染色法检测甲状腺乳头状癌前哨淋巴结的临床研究

目的探讨甲状腺乳头状癌前哨淋巴结（SN）的检测方法及其对颈淋巴结转移的预测价值。方法术中使用亚甲蓝对24例甲状腺乳头状癌患者进行SN示踪，观察冷冻快速切片检查SN转移与常规病理淋巴结转移的符合率，及SN对颈淋巴结转移的预测价值。结果24例中成功检出21例SN，成功率为87．5％，SN平均每例3枚；1例假阴性，假阴性率为4．8％（1／21）；无假阳性。SN对颈淋巴结转移阳性预测值为83．3％。结论亚甲蓝染色法检测SN可较准确地预测甲状腺乳头状癌的颈淋巴结转移状况。     

p130Cas和paxillin在乳腺癌中表达的研究

目的 研究p130Cas蛋白和paxillin蛋白在乳腺癌组织中的表达,及其与乳腺癌临床特征、病理特征的关系,以评价乳腺癌的预后.方法 采用免疫组化SP法检测53例原发乳腺癌,10例乳腺纤维腺瘤,10例正常乳腺组织中p130Cas和paxillin蛋白的表达情况.结果 与正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤相比较,乳腺癌组织中p130Cas表达显著增高（P＜0.001）,而paxillin表达显著减少（P=0.003）.p130Cas的表达与患者的年龄、绝经状况、肿瘤细胞的ER和PR表达及组织学分级相关,而与肿瘤大小、淋巴结转移状况及病理学分期无关.paxillin的表达与患者的年龄、绝经状况、肿瘤细胞的ER和PR表达及肿瘤大小无关,而与病理学分期、组织学分级和淋巴结转移有关.结论 p130Cas和paxillin与乳腺癌细胞的恶性转化和侵袭转移有关;检测上述两种蛋白表达有助于评价乳腺癌患者的预后.     

skp2,C-myc在肝细胞肝癌中的表达及其意义

目的: 研究skp2和C-myc在肝细胞肝癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系。方法:用免疫组化PV9000二步法检测skp2和C-myc蛋白在48例肝细胞肝癌、20例肝硬化患者和16例正常肝组织中的表达。结果:肝细胞肝癌组织中skp2的阳性表达率（33.3%）显著高于肝硬化组织(均为阴性表达)(P=0.008)和正常肝组织(均为阴性表达)（P=0.020）。skp2在肝细胞肝癌中的表达与组织分化程度及转移有关（P<0.001及P=0.017）,但与肿瘤大小无关(P=0.058)，skp2在高分化肝细胞肝癌中无表达。肝细胞癌组织中C-myc 蛋白的的阳性表达率为58.3%，显著高于肝硬化组织的15%（P=0.001）和正常肝组织(阴性表达)（P<0.001）。C-myc 蛋白阳性表达与组织分化程度、转移及肿瘤大小有关，组间差异依次为P<0.001,=0.023及=0.007。肝细胞癌中skp2蛋白的表达与C-myc的表达呈正相关（r=0.508,P<0.001）。 结论:C-myc可能与肝细胞肝癌的发生发展有关。Skp2的表达提示预后不良。C-myc可能对skp2的表达起正性调节作用。