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结肠癌细胞通过Fas/FasL诱导淋巴细胞发生凋亡 总被引:7,自引:0,他引:7
背景与目的:研究发现,肿瘤组织中Fas配体阳性表达区肿瘤浸润淋巴细胞的凋亡率比FasL阴性区高,推测肿瘤细胞可通过增加表达FasL来杀伤肿瘤浸润淋巴细胞。本研究拟在体外验证结肠癌细胞SW480是否可以诱导淋巴细胞发生凋亡。方法:结肠癌细胞系SW480(效应细胞)与对Fas介导凋亡敏感的Jurkat细胞(靶细胞)共培养,分为3种效靶比20∶1,10∶1,5∶1。生长曲线法、流式细胞术、荧光显微镜观察分别检测Jurkat细胞的凋亡情况。结果:流式细胞仪检测结果显示,SW480接种浓度为0(对照)、0.5×105/ml、1×105/ml、2×105/ml时,Jurkat细胞凋亡率为(1.8±0.21)%、(5.49±0.17)%、(11.18±0.14)%、(18.22±0.11)%。荧光显微镜观察结果表明,SW480接种浓度为0(对照)、0.5×105/ml、1×105/ml、2×105/ml时,Jurkat细胞凋亡率为(1.58±0.12)%、(5.22±0.13)%、(9.74±0.21)%、(19.33±0.18)%。3种效靶比条件下,SW480细胞均能诱导Jurkat细胞发生凋亡。随着SW480接种浓度的升高及共培养作用时间的延长,Jurkat细胞凋亡率逐渐增加。每个实验组与对照组相比,P值均小于0.01。结论:结肠癌细胞SW480可以通过Fas系统诱导淋巴细胞发生凋亡,这为结肠癌的免疫逃逸、反击机制提供了又一证据。 相似文献
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肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞凋亡的双重阻断研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的通过阻断Fas/FasL介导的T细胞凋亡,建立快速制备大量激活的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的方法。方法选择FasL表达阳性的肝癌标本,分离肝癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL),然后在体外将两者混合,并在CD28单抗共刺激下,激活制备特异性CTL。应用可溶性Fas受体阻断肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发激活T细胞凋亡,与对照组比较用流式细胞仪和DNA ladder Test同时检测阻断凋亡作用,通过3H掺入法和51Cr释放法了解T细胞增殖力及杀伤活性。结果流式细胞术仪检测未阻断组较阻断组和未阻断对照组凋亡率明显升高,未阻断组凋亡率达47.82%±0.13%,对照组静息性T淋巴细胞组为3.76%±0.25%,阻断组为8.22%±0.26%(P<0.01),DNA ladder显示未阻断组T淋巴细胞出现明显梯状条带,阻断组为阴性。51Cr释放法表明阻断后T淋巴细胞杀伤活性增加,较未阻断组及未阻断对照组差异有显著性(P<0.01)。3H掺入法检测证实可溶性Fas受体阻断激活T细胞凋亡后,细胞增殖明显升高,较未阻断组差异有显著性(P<0.01)。结论体外实验可获得大量激活T细胞,并可杀伤肿瘤细胞。 相似文献
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调节性T细胞(Treg)的浸润是肿瘤免疫微环境抑制的重要机制之一.Treg在多种肿瘤患者的外周血和肿瘤组织呈现高表达,其高表达很可能通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞的肿瘤杀伤效应或引起效应性T淋巴细胞对肿瘤抗原的耐受,而不产生急性或记忆性效应性T淋巴细胞反应,最终逃避免疫攻击,营造了机体免疫抑制微环境,介导肿瘤的免疫逃逸.Abstract: Regulatory T cell (Treg) infiltration is an important mechanism for inhibition of tumor immune microenvironment. Treg is highly expressed in peripheral blood and tumor tissue of various cancer patients. A high expression of Treg may inhibit the antitumor effect of CD4 + CD8 + T lymphocytes or induce immunological resistance to tumor antigens among cytotoxic T lymphocytes(CTL) without producing acute or memory CTL responses, resulting in tumor escape from immuneattack and immune suppressionin in the tumor microenvironment. 相似文献
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目的 测定特异性细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )对胃癌细胞的体外杀伤活性及观察形态学改变。方法 用分离胃腺癌患者的癌细胞经丝裂霉素 C处理后 ,作为抗原与抗CD3单克隆抗体、重组白细胞介素 - 2刺激患者自体外周血单个核细胞 ,体外诱导 CTL,用 MTT比色法测定 CTL 对自体癌细胞、人胃癌细胞株 (BGC- 82 3和 MGC- 80 3)的体外杀伤活性。将 CTL与 BGC- 82 3共同温育 ,通过透射和扫描电镜观察杀伤靶细胞的形态改变。结果 CTL对自体胃癌细胞有特异性杀伤作用 ,可使靶细胞凋亡或溶解坏死。结论 体外混合细胞培养诱导出的 CTL,对靶细胞有明显的杀伤作用 相似文献
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DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。 相似文献
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鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:探讨鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。方法: 用免疫组化及TUNEL方法检测45例鳞癌与基底细胞癌的Fas/FasL表达及其与细胞凋亡的关系。结果: 鳞癌Fas/FasL表达高于基底细胞癌;Fas/FasL阳性细胞凋亡率高于阴性细胞。 结论: Fas/FasL系统与细胞凋亡密切相关,并在肿瘤侵袭中可能起重要作用。 相似文献
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目的 探讨凋亡相关基因Fas/FasL表达与非小细胞肺癌细胞凋亡和临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术对45例肺癌和38例癌旁组织中的Fas和Fasl表达及凋亡细胞水平进行检测。结果 与癌旁组织比较,肺癌中FasL表达增加,Fas表达降低,凋亡细胞减少;FasL表达与组织类型有关;肺癌细胞凋亡水平在淋巴结转移和晚期癌组织中明显受抑;Fas表达阳性的凋亡细胞指数明显高于Fas表达阴性组。结论 细胞凋亡调控异常在肺癌发病中可能起重要作用。 相似文献
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MMC诱导EJ细胞凋亡和Fas/FasL、Caspase-3基因表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的;研究丝裂霉素(MMC)在体外诱导膀胱癌细胞EJ凋亡和凋亡相关基因Fas/FasL,Caspas-3表达的关系。方法:以低剂量MMC(0.100mg/ml)诱导EJ细胞凋亡;以TUNEL法和FCM研究EJ细胞凋亡,细胞周期分布及Caspase-3抗体对抗MMC诱导凋亡;以免疫组化检测Fas/FasL,Caspas-3蛋白表达。结果:低剂量MMC处理的EJ细胞出现明显的凋亡形态特征,凋亡峰和细胞生长阻滞均发生于G0/G1期,Fas/FasL,Caspas-3蛋白呈上调表达,Caspase-3抗体能特异性阻断MMC诱导EJ细胞凋亡。结论;低剂量MMC能够诱导EJ细胞凋亡和增加Fas/FasL,Caspas-3基因表达,且与启动Caspase凋亡信号传导有关。 相似文献
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术前化疗后结直肠癌组织中Fas/FasL和survivin的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨化疗后结直肠癌组织Fas/FasL和survivin的表达情况及两者之间的相关性。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)和免疫组化方法,测定化疗后和未化疗两组各16例结直肠癌患者肿瘤的原位凋亡(AI)、原位增殖(KI)及survivin表达,运用流式细胞仪测定肿瘤细胞的细胞周期、Fas/FasL表达,用双抗体ELISA法检测患者血清可溶性Fas/FasL(sFas/sFasL)表达。结果化疗组结直肠癌患者肿瘤细胞的AI及Fas/FasL均较对照组高,KI、G2/M期细胞、sFas及survivin较对照组低,差别有统计学意义(P<0.05)。结论化疗通过诱导结直肠癌细胞凋亡及阻止细胞进入G2/M期从而抑制癌细胞的生长。Fas/FasL系统与结直肠癌细胞凋亡、增殖调控有关。survivin阳性表达下降程度可作为化疗有效的标志之一。 相似文献
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柔红霉素对HL-60细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 :通过测定柔红霉素 (DNR)对急性早幼粒细胞白血病细胞株HL 60凋亡及Fas/FasL基因表达的变化 ,探讨Fas/FasL系统在细胞凋亡中的作用。方法 :应用荧光显微镜、结合DNA电泳及流式细胞仪分析技术 ,观察柔红霉素对HL 60细胞凋亡的影响及细胞凋亡过程中Fas/FasL基因的表达。结果 :柔红霉素浓度为 0 .1、1 μg/ml时 ,作用 6小时出现典型凋亡细胞 ,荧光显微镜观察HL 60细胞可见凋亡小体、染色质浓缩和胞体出芽改变 ,流式细胞仪分析可见凋亡峰 ,2 4小时达高峰 (45 .2 %± 1 0 .3 % )。 1 0 μg/ml柔红霉素作用 6小时 ,未见凋亡峰。柔红霉素可诱导Fas/FasL基因表达。结论 :柔红霉素诱导细胞凋亡是其治疗白血病的主要机制之一 ,Fas/FasL系统参与柔红霉素诱导的HL 60细胞的凋亡过程 相似文献
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目的:在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上,从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2.5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用,光学及荧光显微镜下观察细胞形态学变化,Annexin Ⅴ/PI 流式细胞术检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应法检测Fas/FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平,比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性。结果千金子甾醇可明显抑制HL-60细胞的增殖,增殖抑制率分别为(34.9±3.7)%、(54.6±5.2)%、(61.3±4.3)%,细胞呈典型凋亡形态学改变,细胞早期凋亡率分别为(23.4±3.1)%、(35.7±4.3)%、(53.2±3.9)%。Fas、FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平明显上调(P<0.01),caspase-8和caspase-3活性显著增高(P<0.01)。结论千金子甾醇可以诱导HL-60细胞发生剂量依赖性细胞凋亡,其机制与上调Fas/FasL凋亡信号通路有关。 相似文献
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Fas/FasL与肿瘤局部及全身性免疫抑制 总被引:4,自引:0,他引:4
Fas(CD95)及其配体(FasL)属TNF和NGF受体家族,Fas在多种质细胞表面均有表达。Fas与FasL结合可引起多种细胞产生凋亡。近年来研究发现FasL在多种种瘤细胞的表面和细胞质中表达,同时已证实肿瘤周围激活的淋巴细胞表面有Fas的表达,而这些淋巴细胞的凋亡异常增加,因此推测表达FsaL的肿瘤细胞能诱发淋巴细胞的异常凋亡或抑制其功能,肿瘤细胞表面表达的FasL可能在局部免疫抑制中起着重 相似文献
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Fas/FasL在肺癌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨Fas/FasL在肺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测60例肺癌组织、癌旁组织及20例正常肺组织的Fas/FasL的表达。结果Fas/FasL在肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas/FasL在癌旁组织及正常肺组织中Fas/FasL表达率。Fas/FasL在非小细胞肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas/FasL在小细胞肺癌中阳性表达率。Fas的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移无明显相关,FasL的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移明显相关。结论Fas/FasL在肺癌的发生和发展中起重要作用。 相似文献
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目的探讨Fas、FasL及p53在视网膜母细胞瘤中的表达及意义.方法用S-P方法检测45例视网膜母细胞瘤及12例正常视网膜组织中Fas、FasL及p53蛋白的表达.结果Fas在视网膜母细胞瘤组织及正常视网膜组织中均呈低表达,差异无显著性(P>0.05);FasL在视网膜母细胞瘤及正常视网膜组织中均呈高表达,差异无显著性(P>0.05);p53在视网膜母细胞瘤中的表达较强,而在正常视网膜组织中的表达极弱,差异有极显著性(P<0.002).结论FasL在视网膜母细胞瘤及正常视网膜中均呈现高表达,与肿瘤细胞的免疫逃逸机制有关;突变型p53在视网膜母细胞瘤中的表达明显高于正常视网膜组织,可能抑制肿瘤凋亡的发生,促进肿瘤的生长. 相似文献
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目的 :探讨Fas/FasL在大肠癌患者外周血淋巴细胞及肿瘤浸润淋巴细胞的表达变化的意义。方法 :用流式细胞仪对 3 6例大肠癌患者外周血淋巴细胞与肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocyte ,TIL)的Fas及FasL进行定量分析。结果 :大肠癌患者外周血淋巴细胞上Fas/FasL表达明显高于正常对照 ,TIL上Fas/FasL表达高于外周血淋巴细胞上表达。结论 :Fas/FasL在大肠癌患者外周血淋巴细胞与TIL的不同分布说明 ,Fas/FasL不仅在肿瘤浸润区域而且在全身参与了免疫系统与肿瘤的相互斗争。 相似文献