T细胞主动凋亡的研究进展

激活的Ｔ细胞、Ｂ细胞以及未成熟的淋巴细胞对细胞程度化死亡敏感。在此过程中，Ｆａｓ：Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）之间的相互作用尤为重要。Ｔ细胞可以通过Ｆａｓ－依赖途径杀伤自己本身，即在免凤反应的调节中，Ｔ细胞表现为主动凋亡。     

反义Fas阻断激活T细胞凋亡的研究

目的：探索阻断激活Ｔ细胞凋亡的途径，增加激活的Ｔ细胞数量，提高肿瘤免疫治疗的疗效。方法：应用ＣＤ３诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞的凋亡作为激活的Ｔ细胞凋亡模型，应用逆转录病毒载体将反义Ｆａｓ转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，观察反义Ｆａｓ对ＣＤ３及抗Ｆａｓ单克隆抗体（单抗）对Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡的影响。结果：构建一个反义Ｆａｓ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ－反义Ｆａｓ，并转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，发现Ｊｕｒｋａｔ细胞Ｆａｓ蛋白表达量下降，并部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。结论：应用反义技术阻断Ｆａｓ基因表达，可部分阻断ＣＤ３及抗Ｆａｓ单抗诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡。     

激活诱导的T细胞死亡研究进展

Ｔ细胞激活诱导的细胞死亡（ＡＩＣＤ）是Ｔ细胞被激活后再次受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激而发生的细胞凋亡，这一机制对于调节机体免疫反应具有重要意义。研究表明，Ｔ细胞受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激后通过一系列信号传导引发多种细胞因子的转录和合成，Ｔ细胞被激活。活化的Ｔ细胞表达Ｆａｓ／ＦａｓＬ增加，通过自身ＦａｓＬ的可溶性ＦａｓＬ对Ｆａｓ的作用启动凋亡信号传导，使激活的Ｔ细胞发生凋亡。但特殊的是，Ｔｈ２细胞激活后却仍具     

几种子同方式诱导Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19的表达

为探讨一个新的细胞凋亡相关基因－ＴＦＡＲ１９所参与的凋亡途径,我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡过程中ＴＦＡＲ１９表达的变化。采用去除血清,ＶＰ－１６作用及Ｆａｓ单抗活化受体等方法诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡后,以ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ水平ＴＦＡＲ１９的表达,用流式细胞术及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白水平ＴＦＡＲ１９的表达。实验结果显示,Ｊｕｒｋａｔ细胞在去除血清１２小时,     

caspase 3在细胞因子调节急性白血病细胞凋亡中的变化

目的 研究ｃａｓｐａｓｅ３在粒细胞集落刺激因子（Ｃ－ＣＳＦ）和粒巨洚细胞集落因子（ＧＭ－ＣＳＦ）调节白血病细胞系ＮＢ４细胞凋亡过程中的变化及其意义。方法 利用细胞这、流式细胞仪分析及ＤＮＡ片段化比率测定,检测Ｇ－ＣＳＦ及ＤＭ－ＣＳＦ对ＮＢ４细胞凋亡的影响,应用荧光分光光度法检测ｃａｓｐａｓｅ３活性变化,并利用ＡＥ－ＤＥＶＤ－ＣＲＯ进行ｃａｓｐａｓｅ３抑制试验。结果 Ｇ－ＣＳＦ能诱导ＮＢ４细胞凋亡,     

Fas抗原—配体系统与肝脏疾病研究进展

Ｆａｓ抗原和Ｆａｓ配本是细胞表面的两种跨膜蛋白。当一个细胞的Ｆａｓ与另一细胞的ＦａｓＬ相结合时,可以导致表达Ｆａｓ的细胞凋亡;Ｔ淋巴细胞表达ＦａｓＬ可以使表达Ｆａｓ的肝细胞凋亡,Ｆａｓ诱导的肝细胞凋亡在某些肝脏疾病的发生发展中起重要作用。     

维甲酸诱导HL-60细胞Fas蛋白表达

目的：探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和９顺式维甲酸（９ｃｉｓＲＡ）对ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及维甲酸对抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡敏感性的影响。方法：用流式细胞仪检测ＨＬ６０细胞膜Ｆａｓ蛋白表达水平；分别采用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪检测抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结果：ＨＬ６０细胞Ｆａｓ弱表达。经１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ或９ｃｉｓＲＡ分别预处理４天后，ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性均显著提高。９ｃｉｓＲＡ提高ＨＬ６０细胞对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性的能力强于ＡＴＲＡ。结论：维甲酸可上调ＨＬ６０细胞表达Ｆａｓ，这可能与维甲酸诱导ＨＬ６０细胞分化相关。进一步深入探讨其分子机制，将为肿瘤治疗，特别是自体骨髓移植中骨髓净化提供新方法     

致痫大鼠脑组织中Fas表达及神经生长因子的干预性作用

目的：观察癫痫发作后大鼠脑组织中Ｆａｓ的表达及细胞凋亡的情况及神经生长因子（ＮＧＦ）的干预性作用。方法：采用ＬｉＣＬ－Ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎ致痫的Ｗｉｓｔｅｒ大鼠模型,通过ＴＵＮＥＬ和免疫组化方法对各组Ｆａｓ的表达、细胞凋亡情况进行观察。结果：癫痫后１ｈＦａｓ表达开始增加,１２ｈ达高峰,持续１周,Ｆａｓ的高表达与细胞凋亡的分布一致。ＮＧＦ组Ｆａｓ表达和细胞凋亡情况均致痫组有显的减少（Ｐ〈０．０１）,结论：癫痫发作可引起Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加,ＮＧＦ有抑制Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加的作用。     

Fas抗原电子

Ｆａｓ抗原，又称ＡＰＯ－１ＡＫ和ＣＤ９５，是一种３１９个氨基酸组成的Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子和神经生长因子受体超家庭成员。Ｆａｓ抗原表达于各种细胞，如活化的Ｔ，Ｂ细胞，ＮＫ细胞，胸腺细胞，恶性的Ｔ、Ｂ细胞，成纤维细胞等。     

细胞凋亡因子Fas配体

Ｆａｓ和Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）是已认识到一对诱导细胞凋亡的膜蛋白分子，它们之间的构成一条独特的细胞凋亡通路。本文对ＦａｓＬ的分子生物学特性和生理功能及其在疾病发生中的作用作一综述。     

bcl-2基因转染阻断Fas介导的Jurkat细胞凋亡

目的：通过ｂｃｌ２阻断Ｆａｓ介导的细胞凋亡了解ｂｃｌ２基因在淋巴瘤癌变过程中逃避机体免疫监控的作用机制。方法：应用基因重组技术重组ｐＬＸＳＮｂｃｌ２，采用电穿孔法将其与空载体分别转染包装细胞系ＰＡ３１７，将阳性克隆病毒上清感染人Ｔ淋巴瘤细胞株Ｊｕｒｋａｔ，用Ｇ４１８筛选，其阳性克隆进行免疫组化检测，应用抗Ｆａｓ抗体诱导细胞凋亡来模拟细胞毒Ｔ细胞的杀伤机制，观察ｂｃｌ２在淋巴瘤逃避免疫机制中的作用。结果：转染人ｂｃｌ２基因的Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２）细胞较对照Ｊｕｒｋａｔ及转染空载体Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｎｅｏ）细胞，ｂｃｌ２表达量明显增加，而Ｆａｓ基因表达量无明显变化。其Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２能明显耐受抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结论：人ｂｃｌ２基因在淋巴瘤中过量表达，能部分阻断抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡，ｂｃｌ２基因过量表达可能是淋巴瘤癌变过程中逃脱机体免疫监控的机制之一。     

Fas基因在rhG-CSF诱导白血病细胞凋亡过程中的作用

目的探讨了Ｆａｓ基因是否参与重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧＣＳＦ）对白血病细胞的诱导凋亡过程。方法利用脂质体（ＤＯＴＡＰ）介导的基因转染技术将Ｆａｓ基因转入ＨＬ６０细胞中,并经原位杂交、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及流式细胞术（ＦＣＭ）证实已成功建立了Ｆａｓ高表达的ＨＬ６０细胞株,用ＦＣＭ对Ｆａｓ基因在ｒｈＧＣＳＦ诱导白血病细胞凋亡过程中的作用进行了探讨。结果相同浓度的ｒｈＧＣＳＦ作用相同时间后转染的ＨＬ６０细胞凋亡率较未转染的ＨＬ６０细胞凋亡率明显增加,且随ｒｈＧＣＳＦ作用时间延长,Ｆａｓ在ＨＬ６０细胞中的表达逐渐增加。结论Ｆａｓ基因是凋亡诱导基因,ｒｈＧＣＳＦ诱导白血病细胞凋亡依赖Ｆａｓ径路传递凋亡信号。     

钙离子在VP—16诱导HL—76细胞凋亡的作用

为了研究Ｃａ＾２＋在ＶＰ－１６（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡中的作用,采用流式细胞术,激光共聚焦显微镜和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法进行观察,结果显示,ＶＰ－１６可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡,并可引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度的增加,细胞外钙离子螯合剂ＥＧＴＡ不抑制其诱导的细胞凋亡,而细胞内钙离子螯合剂ＢＡＰＴＡ－ＡＭ可抑制此过程,并且可抑制细胞色素Ｃ的释放,实验结果提示,Ｃａ＾２＋在细胞凋亡和细胞色素Ｃ的释放过程中起重要的作用。     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。     

化疗药物诱导白血病细胞凋亡对Fas/FasL途径依赖性的研究

化疗药物除通过同各自的靶点直接作用外 ,也可以通过诱导细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。文献报道化疗药物诱导白血病细胞凋亡与Ｆａｓ/ＦａｓＬ途径有关[1 3 ] ,我们对此进行了研究 ,并探讨化疗药物与ＦａｓＬ联用的疗效及其机制 ,期望为白血病的治疗提供新的线索。材料和方法1　主要试剂　柔红霉素 (ＤＮＲ)、阿糖胞苷 (Ａｒａ Ｃ)、碘化丙锭(ＰＩ)购自Ｓｉｇｍａ公司 ;原位末端标记 (ＴＵＮＥＬ)试剂盒购自博士德公司 ;可溶性Ｆａｓ配体 (ｓＦａｓＬ) ,小鼠抗人Ｆａｓ单抗 (ＩｇＧ1) ,白血病细胞系ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2、Ｕ937由华中科技大学同济…     

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL系统表达改变？…

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生,发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义,方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法,原位杂交,半定量转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（〈２４小时）大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加,肺     

三氧化二砷诱导细胞凋亡的调节

目的探讨细胞内巯基、维甲酸、Ｃａｓｐａｓｅ酶与三氧化二砷诱导细胞凋亡之间的关系。方法采用ＮＢ４、ＨＬ６０细胞为体外模型,观察不同巯基化合物、维甲酸及Ｃａｓｐａｓｅ酶抑制物对三氧化二砷诱导细胞凋亡的影响。结果①乙酰半胱氨酸能阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡,二巯基硫氨（ＢＳＯ）则增强三氧化二砷诱导的细胞凋亡,单巯基甘油,二巯基丙醇对三氧化二砷诱导的细胞凋亡无影响;②Ｃａｓｐａｓｅ抑制剂ＺＶＡＤ．ｆｍｋ可阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡,而ＹＶＡＤ．ｆｍｋ不能阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡;③在ＮＢ４细胞,维甲酸与三氧化二砷有拮抗作用,但在ＨＬ６０细胞中可产生协同作用。结论①三氧化二砷通过与细胞内游离巯基结合,进而改变细胞内信号传导,选择性激活Ｃａｓｐａｓｅ酶,导致细胞凋亡;②维甲酸对三氧化二砷诱导细胞凋亡的调节作用呈细胞特异性。     

干扰素及Fas抗体对肝癌细胞的细胞毒性研究

应用基因重组人干扰素γ和抗Ｆａｓ抗体体外处理人肝癌细胞系ＨｅＰＧ－２，采用ＭＴＴ法检测各处理组和对照组细胞的凋亡。结果表明：ＩＦＮ－γ诱导ＨｅＰＧ－２２４ｈ后，再加入Ｆａｓ抗体，发现对ＨｅＰＧ－２细胞的细胞毒作用显著高于ＩＦＮ－γ和Ｆａｓ抗体单独作用，提示ＩＦＮ－γ能促进抗Ｆａｓ抗体对肝癌细胞的细胞毒性，为ＩＦＮ－γ协同Ｆａｓ抗体治疗肿瘤提供了一定的实验依据。     

Fas,FasL与淋巴细胞凋亡

本文概述了Ｆａｓ及其配基ＦａｓＬ的结构,分布及其诱导淋巴细胞凋亡的机理,并就Ｆａｓ、ＦａｓＬ诱导淋巴细胞凋亡的免疫学意义及其移植耐受,肿瘤发生,病毒感染的关系作了综述。     

Fas系统与疾病

Ｆａｓ和ＦａｓＬ分别属于ＴＮＦＲ／ＮＧＦＲ和ＴＮＦ超家族。Ｆａｓ表达于多种细胞表面，其中以活化淋巴细胞、淋巴系恶性肿瘤细胞表达最为丰富。ＦａｓＬ主要表达于活化Ｔ细胞。ＦａｓＬ与Ｆａｓ结合可介导Ｆａｓ细胞凋亡，也可协同刺激Ｔ细胞增殖，Ｆａｓ系统在机体维持自身稳定中起重要作用。该系统的缺损或功能紊乱将导致疾病。