山东地区输血传播病毒（TTV）检测和部分基因克隆及序列测定

目的 了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测26例山东地区非甲－庚型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中TTVDNA,并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序,分析其基因变异的情况。结果 26例非甲－庚型肝炎中11例TTV－DAN阳性（42．3％）。对其中两株（TTVSD4、TTVSD5）部分基因克隆测序,并与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性（25．0％）,对其中一株（TTVSD6）部分基因克隆与测序,与日本株（ABOO8394）相比较,其核苷酸序列同源性为99％;TTV山东株三株间核苷酸同源性均为99％。结论 本项研究证实山东地区非甲－庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染,TTV感染可能具有嗜肝性,而且可能与肝功能损害有关,是引起非甲－庚型肝炎重要病原。     

山东泰安地区人群中TTV感染调查及TTV山东株基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎TTV感染及基因变异的状况。方法 应用RT－PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲－庚型肝炎患者血清中TTVDNA，并对阳性血清扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆法测充，分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血清中TTVDNA阳性检出率为19.5%(8/41)，而16例非甲－庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3%(5/16)。TTV山东第一析序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本 株和中国第一株相比较分别为94%和91％；山东TTV的两株序列间同源性均为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲－庚型肝炎患者中存在较高TTV感染，输血可能为会传播TTV感染途径之一，是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

上海地区部分人群输血传播病毒(TTV)感染的研究

目的 调查上海地区输血传播病毒(TTV)在不同人群中的感染情况,探索TTV的高危人群和传播途径.方法 应用半巢式PCR方法检测TTVDNA,并抽取部分阳性标本的PCR产物(249bp)测定核苷酸序列.结果 检测有关人群8组计473例,其中非甲～非庚型肝炎病人60例,甲～庚型肝炎病人102例,血液透析病人55例,血液病儿童38例,健康人群68例,以及性病病人、静脉吸毒人群、肝癌病人各50例.TTVDNA总阳性率28.33%(134/473).阳性率波动在17.64%～50%.8组人群中静脉吸毒人群阳性率高达50%(25/50),性病组阳性率36%(18/50),该2组人群TTV感染率与健康人群(17.64%)相比均有显着性差异(χ²=14.01P<0.001,χ²=5.12P<0.05).其余各组群阳性率差异比较无统计学意义.将肠道传播途径的组群(甲、戊肝)与血液传播途径的组群(静脉吸毒者、血液病疾患、血液病人及乙、丙肝病人)比较分析,其阳性率分别为25.49%、32.17%.二者无显着性差异(χ²=0.46,P>0.05).20份阳性标本扩增产物测序结果,核苷酸序列与日本株(N22)同源性在85%以上的有15例,在<85%的有5例.结论 研究证实上海地区存在较广泛的TTV感染,其中静脉毒瘾者与性病患者为高危人群,传播途径除经血感染外,可能存在性接触传播及其他非血源性传播途径.TTV在人群中存在携带状态,可能是致病性不强的病毒.上海地区存在TTV毒株的变异.     

TTV感染及复制与原发性肝癌关系的病例——对照研究

应用病例一对照研究方法对ＴＴＶ感染及复制与原发性肝癌关系进行研究。选择原发性肝癌病人８８例,同时选择非肝病,非肿瘤病人以及献血员７５人作为对照。ＴＴＶＤＮＡ的检查采用套式－ＰＣＲ方法。     

萍乡地区一种新型肝炎病毒（TTV）检测及核苷酸序列分析

为了解萍乡地区肝炎病毒在人群中感染分布状况,分析肝病病毒株基因特点,采用ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶ－ＤＮＡ,针对ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性标本进行了序列测定。分析其基因变化情况,结果显示在９０例就诊血清标本中,ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性率为３３．３％,ＡＬＴ增高３９例病人中,ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性率为４３．６％,ＡＬＴ正常４６例中,ＴＴＶ－ＤＮＡ的阳性率为１９．６％,２８例献血员中,ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性率为２５％。     

深圳地区HBsAg阳性人群TTV核酸序列分析

目的 分析HBsAg阳性和阴性人群输血传播肝炎病毒（TTV）感染率的差异及TTV病毒核酸序列。方法应用套式PCR扩增TTV病毒核酸序列，将扩增的TTV核酸片段进行核酸测序，构建进化树分析TTV核酸序列的同源性。结果 HBsAg阳性和阴性人群TTV感染率比较，差异无统计学意义，深圳TTV病毒株与日本TTV病毒株的核酸序列同源性较大。结论人群中TTV病毒株携带率与HBsAg的携带率无相关性。     

常州地区不同人群TTV感染情况的调查

目的 调查常州地区正常人群、献血员及不同肝炎患者TTV（transfusion transmittcd virus)感染情况。方法 运用巢式聚合酶链反应（巢式PCR）对常州地区152例健康体检人员,121例正常献血员,301例不同肝炎患者进行TTV DNA的检测。结果 常州地区不同人群TTV DNA阳性分别为：正常人群10．53％、献血员11．57％、甲型肝炎12％、乙型肝炎27．16％丙型肝炎0、戊型肝炎0、庚型肝炎0、非甲－庚型肝炎34．72％。正常人群、献血员中阳性率与乙型肝炎、非甲－庚型肝炎中的阳性率相比差异有显著性（P＜0．05）。且正常人群、献血员中TTV DNA阳性者内氨酸转氨酶（ALT）均正常。结论 常州地区正常人群与献血员中TTV携带者较常见;部分非甲－庚型肝炎可能与TTV相关。     

健康献血员中TTV感染情况的检测

目的检测邢台和北京2城市健康献血员血清中TT病毒(TTV)感染情况,并结合北京市慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人TTV感染情况进行比较,以阐明TTV在健康人群中的感染情况及其存在的意义.方法用改良非编码区(UTR)PCR和N22 PCR法,分别检测健康献血员、慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎病人血清中TTV DNA.结果 UTR PCR检测表明,健康献血员TTV DNA检出率为98.3%,而60例慢性乙型肝炎和80例慢性丙型肝炎患者血清中TTV DNA检出率均为100%;N22 PCR在上述人群中TTV DNA检出率分别为32.6%,35.0%和42.5%.结论 TT病毒在人群中有很高的感染率,但N22 PCR检测的结果与UTR PCR相比明显偏低,二者间有显著性差异.在健康人群和慢性肝炎病人中,采用相同PCR方法的TTV DNA检出率无显著性差异.     

513例各型病毒性肝炎血清中TTV抗体检测分析

截至１９９５年底,已发现与肝炎有关的病毒有甲、乙、丙、丁、戊、庚６种,但临床上仍有５%～１０%的肝炎患者上述病原学标记为阴性［１］。１９９７年底,日本学者ＮｉｃｈｉｚａＷａ等应用代表性差异分析法（ＲＤＡ）发现了一种新的肝炎相关病毒,即输血传播病毒（ＴＴＶ）［２］。为了解ＴＴＶ在本地区肝炎病人中的感染情况,我们在１９９９年６月采用ＥＬＩＳＡ间接法对５１３例本院住院病人的血清进行抗ＴＴＶ抗体的检测,结果报告如下。１材料与方法１．１病例选择本院住院病人５１３例,其中急性肝炎２１１例,慢性肝炎１６２例,慢性重型肝…     

萍乡地区O139群霍乱弧菌TcpA基因序列分析

目的　探讨O13 9群霍乱JX株的TcpA基因序列 ,分析该株基因的特点。方法　采用PCR扩增技术 ,检测含O13 9群霍乱标本 ,对TcpA基因阳性者进行核苷酸序列测定 ,分析基因变异情况。结果　发现阳性标本中 ,对其中 1株进行了TcpA基因序列测定 ,该序列与TcpAET(O13 9株 )同源性为 10 0 % ,与EVC序列同源性为 96%。结论　本株与O1群 (EVC)遗传关系最近 ,对萍乡地区霍乱防治具有重要意义。     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。     

TTV在HBV携带者和乙型肝炎患者中感染情况分析

目的　输血传播病毒 (TTV)在中国郑州地区乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎患者中的感染情况。方法　采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应 (nested -PCR)方法 ,对不同人群的血清标本进行检测。结果TTVDNA在 4 4例乙型肝炎病毒携带者中检出 10例 (2 2 .7% ) ,在 5 6例乙型肝炎患者中检出 13例 (2 3.2 % ) ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　TTV感染与ALT的升高无必然联系 ,TTV可能存在条件致病性     

我国不同人群输血传播病毒感染调查

目的　了解不同人群输血传播病毒 (TTV)的感染状况。方法　采用套式PCR法检测血清标本中TTVDNA ,并对其中 1株TTV的部分基因序列进行了测定。结果　不同人群TTVDNA阳性率分别为 :正常体检人群 10 .3% ,献血员 43.7% ,吸毒者 15 .6% ,血液透析病人5 4.4% ,妓女 65 .0 % ,慢性丙型肝炎病人 2 5 .0 % ,非甲～庚型肝炎 0 / 11。结论　TTV在各类人群中均有较高的感染率     

聚合酶链反应标记输血传播病毒(TTV)地高辛素探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针，并与巢式ＰＣＲ法（ｎＰＣＲ）比较。结果该探针具有ＴＴＶ特异性，其灵敏度为１０ｐｇＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲～庚型肝炎病人的血清标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为１８５％（２０／１０８）；检测２２份病人的粪便标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为２７３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率为９６９％（１２６／１３０）。结论：用ＰＣＲ法直接制备地高辛素标记ＤＮＡ探针简便、快速、灵敏度高，特异性好。应用该法从６名病人的粪便中检出ＴＴＶＤＮＡ，提示ＴＴＶ有可能通过粪口途径传播。     

健康人群TTV第1、4、5基因群感染检测分析

目的　对九江市健康婴儿及志愿献血员血清中TT病毒(TTVirus,TTV)第1、4、5基因群感染情况进行检测,以期阐明3种不同TTV基因群在该地区人群中的感染情况。方法　分别用UTRPCR以及N2 2PCR、G4PCR、G5PCR等3种群特异性PCR ,检测九江市86例健康婴儿和12 9例健康献血员血清中总TTVDNA以及3种不同基因群TTVDNA。结果　婴儿和献血员血清中TTV总检出率分别为5 3. 5 % (46 / 86 )和98. 5 % (12 7/ 12 9) ,其中第1基因群TTVDNA检出率分别为16 . 3% (14 / 86 )和35 .7% (46 / 12 9) ,第4基因群TTVDNA检出率分别为4 0 . 7%(35 / 86 )和82. 9% (10 7/ 12 9) ,第5基因群TTVDNA检出率分别为2 4. 4 % (2 1/ 86 )和4 6 .5 % (6 0 / 12 9)。结论　TTV在该地区健康婴儿和成人中有很高的感染率,但不同的基因群感染率各不相同,其中TTV第4基因群可能是该地区人群中TTV感染的优势株。此外,6个月以内的婴儿大多数尚未感染TTV ,受感染的7～12个月龄婴儿中以感染1种TTV基因群为主,但婴儿中不同基因群的混合感染随着年龄的增加而逐渐增多,但同时感染3种基因群者明显少于当地成人水平(P <0 .0 0 1)。而当地健康成人则以混合感染3种不同基因群者多见。     

肝炎病人中不同基因型TTV的检出及序列分析

目的：了解TTV在肝炎病人中的感染率及基因型别。方法：采用半式套式PCR方法,对72例不同型别的肝炎病人血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果：在72例不同肝炎病人中,共检出39例TTV DNA阳性血清, 总检出率为54．16％。其中在非甲庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％,而在明确诊断为甲－庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为50％,两组相比差异显（x^2＝4．0278,P＜0．05）。测序的6分离株相互间的核酸同源性为60．4％－93．2％,氨基酸的同源性为54．1％－97．3％。这6个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60．4％－99．1％,氨基酸的同源性为55．4％－98．6％。经系统发育分析表明这6株TTV可分属于G1、G2两个基因型的4个亚型。结论：非甲－庚型肝炎病人的TTV感染率明显高于明确病原的甲－庚型肝炎的病原之一。检出的TTV至少可分属于G1、G2两个基因型中的4个亚型。     

长沙株洲两市590名吸毒者TTV感染现况调查

目的研究吸毒者TTV感染现况及其影响因素。方法采用现况调查的方法，随机抽取湖南省某男性戒毒所和某女性戒毒所中的吸毒者共590人，用问卷方式调查吸毒者有关资料，并用ELISA法测定其血清中TTV—IgG，用SPSS10．0进行数据统计分析。结果吸毒者TTV感染率为24．7％（146／590），高于一般人群TTV感染率（0．63％～16．4％）；女性吸毒者TTV感染率34．3％（104／303）显著高于男性吸毒者14．6％（42／287），两者之间差异有显著性（P〈0．05）；静脉注射组和非静脉注射吸毒组TTV感染率分别为26．9％和21．0％，两组间差异有显著性（P〈0．05）；扎耳孔也是吸毒者感染TTV的影响因素，扎耳孔者和未扎耳孔者TTV感染率分别为33．7％和16．1％，差异有显著性（P〈0．05）。结论吸毒者是TTV感染的高危人群，吸毒者TTV感染率高于一般人群；女性吸毒者TTV感染率显著高于男性吸毒者，静脉注射吸毒者TTV感染率显著高于非静脉注射吸毒者，吸毒者作为TTV感染的高危人群，对其进行监测及有效的管理和控制，对于降低TTV感染并防止其对家庭和社会人群的传播具有重要的临床及流行病学意义。     

同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立

目的 建立同时检测SEN病毒D和H（SENV－D和H）巢式聚合酶链反应法（nPCR)。方法 第一轮PCR外引物为SENV－D和H开放读码框架（ORF）1区的共同序列，第二轮PCR内引物分别为SENV－D和H ORF1区型特异性引物。应用双脱氧链末端终止法对SENV－D和H的PCR产物进行克隆测序。结果 应用同时检测SENV－D和H的nPCR法最终检出SENV-D和H的表稀释度为10^3。序列分析表明，用本法检出的SENV－D（DTd株）和SENV－H（DTh株）与GenBank收录的SENV－D和H株核苷酸序列同源性均为92％。检测173例慢性乙型肝炎（轻、中度）患者，SENV－D和H的总感染率为58.4%。结论 本法可用于SENV－D和H感染的临床诊断和流行病学调查。     

熔点曲线法研究TTV肝炎患者中TTV准种与其临床分型的关系

目的研究TTV肝炎患者中TTV准种及其与患者不同临床分型的关系。方法采用巢式荧光实时多聚酶链式反应(PCR)扩增TTVDNA,收集TTV DNA阳性的慢性肝炎病例52例,其中轻度、中度、重度分别为15例、17例、20例;慢性重型肝炎患者18例;献血员15例。采用熔点曲线方法进行TTV准种检测。结果TTV肝炎患者中度、重度和重型组中熔点曲线波峰数量显著多于献血员和慢性TTV肝炎轻度组(P<0.05),重度和重型组熔点曲线波峰数量显著多于中度组患者(P<0.05)。但重度组患者TTVDNA熔点曲线波峰数量与重型组相比较无显著差异(P>0.05)。结论TTV存在病毒准种,TTV准种感染的复杂性可能是TTV肝炎患者病情严重程度有关,准种越复杂病情越严重。