沙土鼠短时氧惊厥海马各区神经元c-fos蛋白表达的变化

目的 观察短时氧惊厥沙土鼠脑海马各区神经元c-fos蛋白的表达.探讨氧惊厥时神经元激活部位.方法 18只健康雄性沙土鼠经观察和检疫1周后进行实验.按体质量采用随机数字法分为3组(正常对照组、短时氧惊厥组、压力对照组),每组3只.沙土鼠暴露在0.5 MPa压力的高压氧下,引起短时氧惊厥(首次惊厥5 min后,减压出舱)后应用LSAB染色法观察海马各区神经元c-fos蛋白的表达情况.结果 沙土鼠在发生短时氧惊厥后,用免疫组化染色的脑切片上发现海马各区神经元c-fos蛋白阳性表达,依次为CA1、CA2、CA4、CA3区.结论 海马是氧惊厥时神经元激活的部位之一,海马CA1区作用最强.     

短时氧惊厥沙土鼠海马神经元形态学的改变

高压氧 (hyperbaric oxygen,HBO)对机体的作用比较复杂 ,当吸入 HBO超过一定的压力 -时程 ,对机体将产生明显的毒性作用 ,表现突出的器官是大脑、眼和肺脏。氧惊厥(hyperbaric oxygen- induced convulsion,HBOC)是急性中枢神经系统氧中毒的临床表现 ,其发生机制之一 ,目前多主张与 HBO作用下产生的活性氧过多 ,与氧自由基造成的损伤有关 [1 ]。研究证实氧自由基在一定浓度下可引起细胞凋亡(apoptosis) ,细胞凋亡是与坏死不同的死亡方式 ,是主动的生理性死亡 ,目前研究发现许多疾病与细胞凋亡有关 ,并认为细胞凋亡在疾病的发生发展中起…     

PYK2在海人酸癫痫大鼠海马神经元及小胶质细胞中的表达变化

目的 观察海人酸癫痫大鼠海马内神经元和小胶质细胞中PYK2的表达并探讨其意义。方法 建立海人酸大鼠癫痫模型，大鼠癫痫发作后8、24、72h后处死大鼠，采用免疫组化方法观察大鼠海马内小胶质细胞的活化状况，以及海马神经元和活化后小胶质细胞中PYK2的表达变化。结果 与正常大鼠相比，癫痫大鼠中PYK2的表达在癫痫发作8h后急剧下降，并随时间推移继续下降。癫痫发作24h后，海马中出现大量呈阿米巴形状、强烈表达活化型PYK2的活化型小胶质细胞；癫痫后72h，海马中出现大量有活化型PYK2强表达的“杆”状活化型小胶质细胞。结论 癫痫可致海马神经元及小胶质细胞PYK2表达变化；小胶质细胞中活化型PYK2的表达可能与小胶质细胞活化有关。     

Bcl-2基因在一氧化碳暴露大鼠脑中的表达

目的 观察一氧化碳(CO)暴露后大鼠脑中Bcl-2基因的分布。方法 用Wistar大鼠制成CO暴露动物模型，随机分组，分别在染毒后第3天、第2天和当天处死，取脑制成切片，用地高辛Bcl-2探针原位杂交，观察Bcl-2的信号分布。结果 Bcl-2 mRNA的表达在海马、大脑皮层和胼胝体比较明显，其中海马的表达信号最强，大脑皮层次之，胼胝体最弱。其他部位呈散在的弱信号。相应区域在各个时间点无明显的差异。对照组未见表达。结论 CO暴露后，Bcl-2在海马、大脑皮层和胼胝体的表达较为明显；Bcl-2在上述部位的表达可能部分的解释CO中毒迟发性神经损伤的发生。     

高压氧对幼鼠与成年鼠海马神经元超微结构影响的观察

目的 探讨高压氧（HBO）对正常幼鼠与成年鼠海马神经元超微结构的影响。方法 将健康SD幼鼠与成年大鼠暴露于0．25MPa(2．5ATA）HBO或高压空气（HBA）环境中1－3个疗程,各疗程结束当日取海马组织观察形态变化。结果 HBO处置引起海马组织内神经元核膜不平滑甚至模糊,部分线粒体肿胀、嵴模糊,部分粗面内质网（RER）扩张、脱颗粒。幼鼠1个疗程后可见轻微上述变化,处置次数增多,上述变化越明显;成年鼠2个疗程后出现神经元超微结构改变,但不及幼鼠显著。停止HBO处置后20d多数改变已恢复。HBA组明显改变。结论 长程HBO暴露可致大鼠海马组织内神经元超微结构损伤,相同方案HBO处置,幼鼠的结构改变早于成年鼠,且程度重、恢复时间相对要长;这种结构改变主要与HBO有关,非HBA所致,而且是可逆的。     

脑损伤后大鼠神经功能及海马神经元的变化

目的：观察并探讨Feeney法创伤性脑损伤中大鼠神经功能及海马神经元的变化，以选择一种合理的大鼠脑损伤模型致伤方案，方法：用20g重棒分别从10，30，40g重棒从25cm的高度打击SD大鼠一侧脑皮层致伤，观察伤后大鼠神经功能及海马神经元的变化。结果：200g.cm所致的损伤伤后无明显的神经功能障碍和海马结构的改变。600g.cm可造成一定程度的神经功能障碍及伤侧海马神经元变性坏死；1000g.cm可引起伤后严重的神经功能缺损，伤侧海马结构被完全毁损，结论：Feeney法创伤性脑损伤模型中600g.cm打击方案是较为合理且又能致创伤性脑损伤后大鼠神经功能及海马神经元改变的脑损伤方案。     

高压氧致大鼠氧惊厥时海马神经元突触体内钙离子浓度的改变

本研究采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ技术和Ｄ－ｍｙｏ－ＩＰ３［３Ｈ］试剂盒测定了高压氧致氧惊厥时大鼠海马神经元突触体内游离Ｃａ（２＋）浓度和肌醇磷脂代谢改变，并观察了苏林碱对氧惊厥的预防作用。结果发现氧惊厥时突触体内游离Ｃａ（２＋）和三磷酸肌醇（ＩＰ３）浓度均显著升高，分别为对照组的２倍和６倍。预先给大鼠腹腔注射苏林碱后，氧惊厥的潜伏期明显延长，成活率增加，突触体内Ｃａ（２＋）和ＩＰ３堆积也显著减轻，分别降至氧惊厥组的６３．２％和２７．１％。这些资料表明，神经元内游离Ｃａ（２＋）和ＩＰ３堆积是造成氧惊厥的重要原因，苏林碱能有效地防止其堆积而显示出良好的预防作用。     

Bcl-2基因在儿童髓母细胞瘤中表达的研究

目的：从凋亡之异常角度探讨儿童髓母细胞发生、发展及预后的生物学机制。方法：以84例获随访的儿童髓母细胞瘤组织（按术后生存期3、5、10年分为A、B、C三组）为研究对象，用原位杂交及免疫组化染色法分别检测Bcl-2mRNA和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，并用3^1末端标记法做原位细胞凋亡检测。结果：72例（85．7％）表达Bcl-2mRNA，其阳性率为A＞B＞C；PCNA阳性肿瘤组织细胞密度与肿瘤细胞Bcl-2mRNA表达水平增加，呈正相关，而凋亡肿瘤细胞密度与肿瘤细胞Bcl-2mRNA表达水平呈负相关。结论：儿童髓母细胞瘤中Bcl-2基因高表达可抑制其凋亡，细胞增殖与凋亡失衡可能是儿童髓母细胞瘤发生发展的重要环节。     

大鼠海马的神经元构筑

运用Nissl法和Colgi法研究了正常成年SD大鼠海马的神经元构筑。发现大鼠海马内有大锥体细胞、大梭形细胞、小锥体细胞、小梭形细胞和异位颗粒细胞等5种神经元。神经元的类型及分布方式在海马各区之间差别明显。海马内神经元的胞体主要聚集在锥体层。海马各区神经元胞体分布的厚度及密度分别为CA_1区:281.5μm±65.5μm、258.1/mm±84.3/mm;CA_2区:46.6μm±11.5μm、251.0/mm±64.7/mm;CA_3区:61.7μm±16.6μm、201.6/mm±40.5/mm;CA_4区:90.6μm±20.6/μm、196.0/mm±37.3/mm。     

大鼠海马的神经元构筑

应用Nissl法和Golgi法研究了正常成年SD大鼠的海马神经元构筑。发现：大鼠海马内有大锥体细胞、大梭形细胞、小锥体细胞、小梭形细胞及异位颗粒细胞等5种类型的神经元。神经元的类型及分布在海马各区之间差异较明显。海马神经元的胞体主要聚集于锥体层。各区神经元脑体分布的厚度及密度分别为CA1：（281．5±65.5）μm,（258．1±89．3）个／mm;CA2：（46．6±11．5）μm,（251．0±647）个／mm;CA3：（61．7±16．6）μm,（201．6±40．5）个／mm;CA4：（90．6±28．6）μm,（196.0±37．3）个／mm。     

NaHCO3对氧惊厥潜伏期的影响

目的观察NaHCO3对氧惊厥潜伏期的影响，以探讨内源性CO2与氧惊厥的关系。方法在复制小鼠氧惊厥模型的基础上，行为学方法测定不同压力下氧惊厥潜伏期。小鼠24只，随机分为6组：3、4、5ATA下，分别设生理盐水组、5％NaHCO3组，每组4只。另取小鼠15只，随机分为3组：常压对照组、生理盐水组和5％NaHCO3组，每组5只。后2组在4ATA医用纯氧下暴露18min后，测定脑组织氧化产物丙二醛（maleic dialdehyde，MDA）含量。结果（1）与生理盐水组相比，5ATA下，5％NaHCO3组的氧惊厥潜伏期明显延长（P〈0．01）；4ATA下，5％NaHCO3组的氧惊厥潜伏期也延长（P〈0．01）；3ATA下，由于120min后小鼠仍未发生惊厥，所以不能作出判定。（2）4ATA高压氧暴露18min后，5％NaHCO3组与生理盐水组的脑组织MDA含量明显低于常压对照组；5％NaHCO3组的脑组织MDA含量明显低于生理盐水组（P〈0．05）。结论5％NaHCO3可以延长氧惊厥潜伏期，减轻脑组织氧化损伤程度。     

高压氧对沙土鼠脑缺血再灌注海马神经细胞NMDA受体的作用研究

显,但显著高于假手术组(P<0.01).结论 脑缺血后,海马区神经细胞NMDA受体的Bmax显著增加,氯胺酮、氯胺酮+高压氧治疗可使Bmax降低.可能通过此途径减少细胞外Ca2+内流,恢复细胞内游离Ca2+浓度,从而起到高压氧治疗脑缺血的作用.     

高压氧对大鼠持续性局灶脑缺血后脑中Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨高压氧（HBO）治疗对大鼠局灶性脑缺血的作用及其机制。方法 应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型。70只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组,缺血对照组,缺血 HBO组,缺血 高压空气组,每大组再各分5小组（n=4）,分别对应6,24,48,72h及7d时间点断头取脑。观察各组大鼠梗塞灶体积及Bcl-2蛋白合成,并进行组间比较。结果 早期应用HBO能减少梗塞灶体积,提高半暗带内Bcl-2蛋白的合成。结论 早期应用HBO可能对治疗急性脑缺血有效。     

创伤性脑损伤后细胞凋亡及Bcl-2基因治疗

目的 研究创伤性脑损伤（TBI）后的细胞凋亡情况，并探讨Bcl-2基因治疗对凋亡的作用。方法 60只SD大鼠随机分成TBI组（15只）、假处理组（15只）、基因治疗组（15只）和空载体对照组（15只）。除了假处理组外，所有大鼠均用Feeney自由落体致伤装置制成TBI模型。通过RT—PCR法克隆Bcl-2基因cDNA，并利用重组真核表达载体转染受损的脑细胞。用免疫荧光法检测Bcl-2基因的表达。原位末端标记法和电镜检测细胞凋亡情况。结果 与假处理组相比，TBI组的伤灶周围可以发现更多凋亡细胞，并且两者之间的凋亡指数差异有统计学意义（P〈0．01）。通过脂质转染，Bcl-2基因成功在体内表达。基因治疗组的Bcl-2（＋）细胞的标记指数为（8．3±0．7）％，而在空载体对照组中仅为（0．9±0．2）％（P〈0．01）。结论 细胞凋亡存在于损伤的脑组织中，而Bcl-2基因治疗能抑制这种凋亡的发生，后者为TBI后早期干预促进脑细胞存活提供了一种可行的方法。     

高压氧对沙鼠脑缺血海马神经细胞Ca2+-ATP酶活力的影响

目的探讨高压氧（HBO）作用后对脑缺血海马神经细胞Ca^2＋-ATP酶活力的影响。方法用蒙古种沙土鼠，采用双侧颈总动脉结扎制作前脑缺血模型，动物随机分为正常对照组、缺血再灌注组（夹闭双侧颈总动脉30min制作全脑缺血模型，随后放开动脉夹使再灌流80min）、0．1MPa纯氧组、0．25MPa高压氧组、0．25MPa常氧高氮组共5个组。采用定磷法测定海马神经细胞Ca^2＋-ATP酶活力。结果急性脑缺血再灌注后，Ca^2＋-ATP酶活力显著下降（P〈0．01），经0．1MPa纯氧和0．25MPa高压氧作用后，Ca^2＋-ATP酶活力均明显恢复，与急性脑缺血再灌注组相比，差异有统计学意义（P〈0．01），而且以0．25MPa高压氧组作用更为显著，0．25MPa常氧高氮组Ca^2＋．ATP酶活力无明显改变，结论高压氧可通过恢复Ca^2＋-ATP酶活力以恢复细胞内游离Ca^2＋浓度。     

Bcl-2在膀胱肿瘤中的表达及临床意义

目的 :探讨bcl- 2蛋白在人膀胱癌中表达的临床意义。方法 :取 5 7例经病理证实的膀胱肿瘤标本 ,应用免疫组化技术检测石蜡包埋在组织切片中bcl- 2的表达。结果 :正常膀胱粘膜组织bcl- 2蛋白呈阴性。膀胱移行细胞癌Ⅰ级 15例 ,阳性率13 .3 % ;Ⅱ级 16例 ,阳性率 6 .2 % ;Ⅲ级 18例 ,阳性率 5 0 .0 %。膀胱横纹肌肉瘤阳性 1例 ,葡萄状肉瘤阳性 1例 ,内胚窦瘤阳性1例。结论 :凋亡抑制基因bcl- 2蛋白在人膀胱不同细胞类型的肿瘤中有表达 ,在移行细胞中的表达与临床病理分级有一定的相关关系     

丁酸钠对肝癌Hep G_2细胞株Bcl-2表达的影响

目的：研究丁酸钠（NaB）引起HepG2细胞凋亡的作用及其分子机制。方法：用不同浓度丁酸钠处理HepG2细胞后，用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测Bcl-2mRNA的表达丰度；Hochest3342核染色后观察HepG2细胞核凋亡形态的变化；原位切口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果：丁酸钠在mRNA水平明显抑制Bcl-2基因的转录；荧光显微镜下可见丁酸钠处理后细胞核出现高度凝聚、边缘化，并可见凋亡小体出现；TUNEL法证明出现细胞凋亡。结论：丁酸钠通过下调Bcl-2的转录和表达，诱导肝癌HepG2细胞的凋亡。     

高压氧对沙土鼠脑缺血再灌注海马神经细胞NMDA受体的作用研究

显,但显著高于假手术组(P<0.01).结论 脑缺血后,海马区神经细胞NMDA受体的Bmax显著增加,氯胺酮、氯胺酮+高压氧治疗可使Bmax降低.可能通过此途径减少细胞外Ca2+内流,恢复细胞内游离Ca2+浓度,从而起到高压氧治疗脑缺血的作用.