激活素A和卵泡抑素对MG-63细胞株OCN、BMP-2蛋白表达的影响

目的 探讨激活素A (activin A)和卵泡抑素(follistatin,FS)对骨肉瘤细胞株(MG-63)骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态形成蛋白-2(BMP-2)蛋白质表达的影响以及骨形成作用.方法 采用细胞培养结合Western blot检测,观察不同浓度激活素A以及加用卵泡抑素后对MG-63细胞OCN、BMP-2蛋白质表达的影响,并采用PNPP底物比色法检测MG-63细胞的碱性磷酸酶含量.结果 激活素A明显上调MG-63细胞OCN、BMP-2蛋白质表达(P＜0.05),随着激活素A剂量增加以及作用时间延长,OCN、BMP-2蛋白质表达量逐渐加大,并促进碱性磷酸酶的生成,但加用卵泡抑素后该作用得到抑制.结论 激活素A上调OCN、BMP-2蛋白质表达及促进骨形成,而卵泡抑素抑制该效应.     

激活素A及卵泡抑素基因在糖尿病大鼠肾脏表达的实验研究

目的:探讨激活素A(ACT-A)及卵泡抑素(FS)基因在糖尿病大鼠肾脏的表达及可能机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分成对照组(NC)和糖尿病组(DM),腹腔注射STZ诱导糖尿病模型。各组分别在术后4、8、12和16周处死6只大鼠。观察各组肾重/体重(KW/BW)、24h尿白蛋白排泄率(AER)及肌酐清除率(Ccr)的变化。real time-PCR检测各组肾组织ACT-A及FS基因的表达。结果:与NC组相比,DM组大鼠从第8周末开始KW/BW、AER及Ccr均显著上升(P<0.01),16周末时达峰值。DM组大鼠从第4周末开始ACT-A mRNA表达逐渐增加,第12周末时达峰值(P<0.01)。FS mRNA在NC组各时间点大鼠肾组织大量表达,而在DM组其表达量呈逐渐下降趋势,第16周时只能检测到基础量表达。结论:ACT-A及FS表达失衡在DN的进行性发展中发挥了重要作用。     

缺氧缺血性脑损伤与激活素A表达变化的相关性研究

目的：探讨激活素A(ACT-A)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的表达规律及其意义。方法：结扎新生7日龄Wistar大鼠左侧颈总动脉后,置于氧气浓度为8％的密闭氮氧仓中缺氧2h,建立HIBD模型。应用HE染色及SP免疫组化方法,检测新生大鼠HIBD后不同时间点ACT-A的表达。 结果：缺氧缺血(HI)1h, 首先在左侧扣带皮质区出现ACT A的表达,分别与右侧及对照组比较均有显著性差异［(2.50±1.51)个/mm² vs (1.13±0.64)个/mm²,(2.50±1.51)个/mm² vs (1.00±0.76)个/mm²,　P<0.05］;ACT-A表达峰值出现在HI 10h,左侧额顶皮质、扣带皮质、纹状体、齿状回可见大量阳性细胞,与右侧比较差异有显著性［(19.75±2.19)个/mm² vs (1.25±0.71)个/mm²,　P<0.01］,且与对照组同侧比较亦有显著性差异［(19.75±2.19)个/mm² vs (1.00±0.76)个/mm²,　P<0.01］。至HI 72?h左侧额顶皮质区仍可见阳性细胞,与右侧及对照组比较均有显著性差异［(12.75±3.62)个/mm² vs (1.38±0.74)个/mm²,(12.75±3.62)个/mm² vs (1.00±0.76)个/mm², P<0.05］。 结论：缺氧缺血可明显激活ACT-A的表达增加,提示激活素在新生大鼠HIBD的病理过程中可能发挥重要作用。     

激活素-卵泡抑素系统与肾脏

激活素(activin,ACT)和卵泡抑素(follistatin,FS)最早发现于性腺,是一类分泌性糖蛋白激素,80年代中期从人、猪和大鼠等哺乳动物的卵泡液中成功分离,参与调节垂体卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)分泌.ACT能促进FSH分泌,FS则抑制FSH分泌.最近几年研究发现,ACT、FS不仅存在于卵巢中,在胸腺、垂体、肺、肝、胰、肾、皮肤等器官中也广泛分布,除了能调节FSH的分泌外,还广泛参与动物胚胎的形态发生、组织分化、组织损伤后修复,组织纤维化及炎症反应等一系列过程[1,2],具有重要的生物学意义.本文就国外关于ACT和FS与肾脏胚胎发生、肾脏缺血再灌注损伤修复以及肾组织纤维化的关系的研究进展作一文献综述.     

抑制素、激活素和卵泡抑素与男性生殖的关系

生殖进程的调控涉及大脑、内分泌器官、性腺及其他生殖组织之间的通信系统,近来越来越多的研究集中在旁分泌和自分泌对这些细胞系统的调节作用.现讨论了抑制素、激活素和卵泡抑素的结构和生理学,探讨其作为内分泌激素对男性生殖的作用及其如何在垂体、性腺及相关组织发挥自分泌/旁分泌功能.     

激活素A和卵泡抑素对冻融人胎儿卵巢雌二醇分泌的影响

目的：研究组织培养条件下冻融人胎儿卵巢雌二醇（E2）的分泌及激活素A（Act A）和卵泡抑素（FS）对E2分泌的影响。方法：冻融人胎儿卵巢组织体外培养，分别加入基础培养液（对照组，即MEM组）、基础培养液＋100ng／ml Act A（Act A组）、基础培养液＋100ng／ml FS（FS组）和基础培养液＋100ng／ml Act A＋100ng／ml FS（A＋F组），每组4块组织，培养8d。收集培养2d、4d、6d、8d各组培养液，测定比较其E2值。结果：培养4d、6d、8d卵巢组织分泌的E2值均高于2d的E2值（均P〈0．05），随培养时间延长，E2分泌量先增加后减少，在培养后6d可达较高分泌水平；Act A组E2分泌量明显高于对照组、FS组和A＋F组（均P〈0．01）。结论：冻融人胎儿卵巢在组织培养条件下能分泌E2，Act A能促进体外培养胎儿卵巢E2的分泌，其作用可能受到FS的调节。     

新生大鼠缺氧缺血后不同部位脑组织中Par-4基因的表达

目的：观察Par-4基因在新生大鼠脑缺氧缺血后，不同脑组织中的表达。方法：制备新生大鼠缺氧缺血性脑病的动物模型。利用RT-PCR检测脑缺氧缺血后不同时间点海马组织、大脑额叶皮质及小脑中Par-4的mRNA表达的改变，利用Western blot检测在缺氧缺血24h后，海马组织大脑额叶皮质和小脑中Pat-4蛋白表达量的改变。结果：①海马组织和大脑额叶皮质中的Pat4 mRNA在脑缺氧缺血后2h已明显升高，至6h已达高峰。而小脑未见表达；②在新生大鼠脑缺氧缺血24h后，海马组织及大脑额叶皮质中Pat-4蛋白表达量显著升高，并且海马组织中Par-4蛋白表达量高于大脑额叶皮质中Par-4蛋白表达量。而小脑未见其蛋白表达。结论：缺氧缺血对新生大鼠不同脑组织中Par-4基因表达影响不同，Pat-4可能参予了缺氧缺血对新生大鼠海马组织和大脑额叶皮质的致病过程。     

激活素A及卵泡抑素对大鼠肾间质成纤维细胞分泌羟脯氨酸及Ⅳ型胶原的影响

目的 研究激活素A(activin A,ACT-A)及卵泡抑素(follistatin,FS)在肾间质纤维化中的作用. 方法 SD大鼠肾间质成纤维细胞体外培养后分为A组、F组、A+F组,分别向培养液中加入ACT-A、FS、ACT-A+FS,用ELISA法检测培养液上清中羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含最.结果在本研究浓度范围内,ACT-A浓度越高,培养液中HYP及Ⅳ-C浓度也越高;单纯加入FS对大鼠肾间质成纤维细胞分泌HYP及Ⅳ-C没有显影响(P>0.05),但以剂苗依赖方式抑制ACT-A促大鼠肾间质成纤维细胞分泌HYP及Ⅳ-C的作用(P<0.01). 结论 ACT-A可能在肾间质损害的发生、发展中起重要作用,补充外源性的FS有可能为治疗肾间质纤维化提供新的思路.     

INH-FS-ACT系统对女性睾酮水平的影响

目的探讨女性体内雄激素水平的影响因素.方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术(Sandwich ELISA),检测27名无内分泌疾病的女性月经周期第三天血清中睾酮(T)、抑制素(INHB)、卵泡抑素(FS)、激活素(ACTA)水平,并分析T与年龄、体重指数(BMI)、INHB、FS、ACTA、ACTA/FS及其他性激素:雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)的相关性.结果 T随年龄增长而降低(r=0.577,P＜0.05),与INHB正相关(r=0.663,P＜0.05),与FS负相关(r=-0.572,P＜0.05),与ACTA无相关性(r=0.293,P＞0.05),但与ACTA/FS比值正相关(r=0.629,P＜0.05).T与BMI及其他性激素均无相关性.结论 INH-FS-ACT系统影响女性睾酮的分泌.     

磷酸酶PTEN在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡中的作用

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 （hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)时,大脑皮层第10号染色体上磷酸酶及张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）蛋白、磷酸化（p）-PTEN蛋白、促凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达变化,探讨抑制PTEN活性对新生大鼠缺氧缺血（HI）神经元凋亡的保护作用机制。 方法 将128只10日龄SD大鼠随机分为4组:缺氧缺血组、假手术组、PTEN脂质磷酸酶抑制剂双过氧化钒 (bisperoxovanadium, bpv)干预组和生理盐水溶剂组。缺氧缺血组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气 （92% N2、8% O2）中缺氧2.5 h;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理。bpv干预组和溶剂对照组予腹腔内注射bpv和生理盐水,30 min后做缺氧缺血处理。各组分别于建模后0.5 h及24 h处死动物取大脑皮层,应用Western blot检测PTEN、p-PTEN及Bim的蛋白含量。实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）定量检测Bim mRNA表达水平,应用TUNEL染色法检测凋亡细胞。 结果 缺氧缺血组于HI后0.5 h 及24 h,PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达降低。HI后0.5 h,Bim mRNA及蛋白表达增加,与假手术组比较差异有统计学意义 (P<0.05),HI后24 h,Bim mRNA及蛋白恢复至基线水平。bpv干预组PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达增加,Bim mRNA及蛋白表达降低,与生理盐水组和缺氧缺血组相比,差异有统计学意义 (P<0.05)。bpv干预组于HI后24 h,TUNEL染色阳性细胞数较生理盐水组和缺氧缺血组减少,凋亡指数降低,差异有统计学意义 (P<0.05)。结论 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时,PTEN发生去磷酸化,活性增高,抑制PTEN活性可下调前凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达,减少神经细胞凋亡。     

新生大鼠缺氧缺血脑组织水肿及水通道蛋白-4的表达变化

目的 探讨新生SD大鼠缺氧缺血不同时间点脑组织水肿及水通道蛋白-4 (AQP-4) 表达的功能意义。 方法 健康3 d龄SD大鼠60只, 分为对照组 (12只) 和缺氧缺血脑损伤模型 (HIBD)组 （48只)。HIBD 组行右侧颈总动脉结扎后,分为吸入80 mL/L O2+920 mL/L N2 4 h、8 h、16 h、24 h 四个亚组,每组12只大鼠。对照组仅行假手术, 不予右颈总动脉结扎和缺氧缺血。HIBD各亚组分别于持续缺氧缺血4 h、8 h、16 h、24 h后处死动物,对照组于手术后12 h处死。取脑组织分别进行HE染色观察脑组织病理改变、脑含水量测定、实时荧光定量PCR检测大脑海马AQP-4 mRNA表达。 结果 HE染色示:随着缺氧缺血时间延长,右脑神经细胞与胶质细胞肿胀进行性加重,24 h组神经细胞溶解损伤明显,胶质细胞稀疏变性。HIBD 组右侧大脑持续缺氧缺血8 h、16 h和24 h脑组织含水量均较对照组增加, 差异有统计学意义 (P<0.05);实时荧光定量PCR显示右脑海马AQP-4 mRNA表达较对照组减少 (P<0. 05)。 结论 新生大鼠缺氧缺血后脑组织水肿,海马AQP-4表达下调,提示AQP-4与脑组织水肿有关。     

肥胖大鼠模型脑组织中GIRK4的表达研究

目的 研究饮食诱导肥胖大鼠G-蛋白偶联（门控）内向整流钾离子通道（GIRK4）基因在脑组织中的表达,探讨GIRK4与肥胖的相关性.方法 30只SD大鼠,雌雄各半,对照组（n=10）予以普通饲料饲喂作为,实验组（n=20）以高脂肪高热量饮食饲喂8周,建立肥胖大鼠模型,肥胖大鼠体重超过正常饮食饲喂大鼠20％以上为成功模型,处死大鼠,提取两组大鼠的脑组织,提取脑组织中的总蛋白,应用Western blot法检测GIRK4蛋白表达,Quantity One软件处理实验结果.结果 （1）15只大鼠进入肥胖组（体重大于正常对照组20％）.（2）肥胖组血清总胆固醇及甘油三酯水平高于对照组（P＜0.05）,高脂高糖饮饲喂建立大鼠模型,肥胖大鼠脑中表达GIRK4蛋白较正常饲喂大鼠低,两组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 GIRK4在肥胖大鼠脑组织中表达水平降低,且在肥胖大鼠中表达,可能与饮食诱导肥胖的发生相关.     

Cx43在缺氧缺血新生大鼠脑组织中的表达及意义

目的目的研究Cx43在新生大鼠HIBD的表达,探讨其在HIBD的作用及意义。方法7d龄健康SD大鼠128只,随机分为对照组和缺氧缺血组,每组64只。两组大鼠根据处死时相点每组再随机分为6h、24h、48h、72h四个小组,每组16只。每组大鼠取8只,采用HE染色、DNA原位末端标记法、免疫组化染色方法观察各组新生大鼠脑组织病理变化、细胞凋亡及Cx43表达、分布情况;每组另外8只应用Western-blot定量分析Cx43蛋白在皮层及海马的表达。结果对照组各时相点皮层、海马未见DNA原位末端标记法阳性细胞;缺氧缺血组24h组开始细胞凋亡细胞逐渐增多,缺氧缺血组24h、48h、72h组的凋亡阳性细胞分别为15.12±2.68、30.24±3.65、68.72±5.60,各组差异有显著性意义,P<0.01;对照组均有Cx43表达,6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为(8.38±0.16)%、(8.38±0.19)%、(8.39±0.03)%、(8.35±0.15)%,各时相点组Cx43阳性表达差异无显著意义,P>0.05;缺氧缺血后6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为(18.64±0.30)%、(29.65±0.26)%、(35.34±0.21)%、(42.05±0.31)%,随着缺氧缺血后时间的推移,Cx43阳性表达逐渐增加,各组对比,差异有显著意义,P<0.01;缺氧缺血组与对照组对比,缺氧缺血组各时相点Cx43阳性表达均高于对照组,P<0.01;Western-blot结果:各组电泳均可显示在43～46KD范围的条带,Cx43/GAPDH电泳条带密度比值对照组6h、24h、48h、72h分别为1.00±0.01、0.99±0.02、1.01±0.01、1.01±0.01;缺氧缺血组6h、24h、48h、72hCx43/GAPDH电泳条带比值分别为1.11±0.04、1.25±0.02、1.37±0.01、1.50±0.01;缺氧缺血组与对照组对比,同一时相点Cx43蛋白的表达均较对照组高,P<0.01;缺氧缺血6h组Cx43表达已开始增加,随着缺氧缺血后时间的推移逐渐增加,至72h组最明显,缺氧缺血各组间比较,差异有显著意义,P<0.01;对照组各时相点比较,Cx43蛋白的表达差异无显著意义,P>0.05。结论缺氧缺血后Cx43的表达逐渐增加,其变化规律与神经细胞凋亡严重程度及光镜观察到的脑损伤进展的时间框架相吻合,且发生时间早于细胞凋亡,提示Cx43表达的增加参与了新生大鼠HIBD的病理形成过程,推测其通过缝隙连接增强传播和放大细胞损伤,在HIBD早期发挥“姐妹杀伤效应”,导致和加重脑损害。     

Cx43在缺氧缺血新生大鼠脑组织中的表达及意义

目的 目的研究Cx43在新生大鼠HIBD的表达,探讨其在HIBD的作用及意义。方法 7d龄健康SD大鼠128只,随机分为对照组和缺氧缺血组,每组64只。两组大鼠根据处死时相点每组再随机分为6h、24h、48h、72h四个小组,每组16只。每组大鼠取8只,采用HE染色、DNA原位末端标记法、免疫组化染色方法观察各组新生大鼠脑组织病理变化、细胞凋亡及Cx43表达、分布情况;每组另外8只应用Western-blot定量分析Cx43蛋白在皮层及海马的表达。结果 对照组各时相点皮层、海马未见DNA原位末端标记法阳性细胞;缺氧缺血组24h组开始细胞凋亡细胞逐渐增多,缺氧缺血组24h、48h、72h组的凋亡阳性细胞分别为15.12±2.68、30.24±3.65、68.72±5.60,各组差异有显著性意义,P〈0.01;对照组均有Cx43表达,6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为（8.38±0.16）%、（8.38±0.19）%、（8.39±0.03）%、（8.35±0.15）%,各时相点组Cx43阳性表达差异无显著意义,P〉0.05;缺氧缺血后6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为（18.64±0.30）%、（29.65±0.26）%、（35.34±0.21）%、（42.05±0.31）%,随着缺氧缺血后时间的推移,Cx43阳性表达逐渐增加,各组对比,差异有显著意义,P〈0.01;缺氧缺血组与对照组对比,缺氧缺血组各时相点Cx43阳性表达均高于对照组,P〈0.01;Western-blot结果：各组电泳均可显示在43～46KD范围的条带,Cx43/GAPDH电泳条带密度比值对照组6h、24h、48h、72h分别为1.00±0.01、0.99±0.02、1.01±0.01、1.01±0.01;缺氧缺血组6h、24h、48h、72hCx43/GAPDH电泳条带比值分别为1.11±0.04、1.25±0.02、1.37±0.01、1.50±0.01;缺氧缺血组与对照组对比,同一时相点Cx43蛋白的表达均较对照组高,P〈0.01;缺氧缺血6h组Cx43表达已开始增加,随着缺氧缺血后时间的推移逐渐增加,至72h组最明显,缺氧缺血各组间比较,差异有显著意义,P〈0.01;对照组各时相点比较,Cx43蛋白的表达差异无显著意义,P〉0.05。结论 缺氧缺血后Cx43的表达逐渐增加,其变化规律与神经细胞凋亡严重程度及光镜观察到的脑损伤进展的时间框架相吻合,且发生时间早于细胞凋亡,提示Cx43表达的增加参与了新生大鼠HIBD的病理形成过程,推测其通过缝隙连接增强传播和放大细胞损伤,在HIBD早期发挥“姐妹杀伤效应”,导致和加重脑损害。     

活化素A在未足月胎膜早破合并羊膜腔感染中的表达及临床意义

目的：探讨活化素A在未足月胎膜早破合并羊膜腔感染中的表达水平及其临床意义。方法将我院妇产科2014年4月至2015年3月收治的30例未足月胎膜早破合并羊膜腔感染(IAI)患者作为观察组,另选同期30例未足月胎膜早破患者为对照组,在征得两组患者知情同意下对其活化素A表达水平进行测定及比较,以分析活化素A在未足月胎膜早破合并羊膜腔感染诊断中的应用价值。结果观察组患者的血清活化素A表达水平和羊水中活化素A表达水平分别为(245.35±12.85) pg/mL、(396.21±5.33) pg/mL,均明显高于对照组的(132.44±11.46) pg/mL、(277.65±5.21) pg/mL,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);观察组中轻度未足月胎膜早破合并羊膜腔感染者血清、羊水中活化素A表达水平分别为(120.85±11.84) pg/mL、(360.72±5.50) pg/mL,均低于中、重度未足月胎膜早破合并羊膜腔感染者的(370.44±12.92) pg/mL、(500.24±5.75) pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论活化素A表达水平与未足月胎膜早破合并羊膜腔感染息息相关,膜腔感染程度越高,则其表达水平越高,可作为临床判定是否发生羊膜腔感染以及感染程度的重要参照指标。