地塞米松对哮喘小鼠肺组织Muc5ac mRNA和蛋白表达的影响

目的 :研究糖皮质激素对小鼠支气管哮喘 (简称哮喘 )模型肺组织粘蛋白基因Muc5acmRNA和蛋白表达的影响 ,探讨其对哮喘时气道粘液过度分泌的作用。方法 :1 8只清洁级BALB/c小鼠被随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组 ,每组 6只。后 2组制作哮喘模型 ,地塞米松组用地塞米松治疗。采用RT PCR和免疫组化法分别检测肺组织中Muc5acmRNA和Muc5ac蛋白的表达。结果 :哮喘组肺组织Muc5acmRNA(0 .5 341± 0 .0 30 3)和蛋白 (0 .1 90 6± 0 .0 0 0 8)表达均较对照组 (分别为 0 .1 994± 0 .0 1 2 8和 0 .1 1 94± 0 .0 0 0 7)明显增加 (P均 <0 .0 1 ) ,地塞米松治疗后 2者均明显降低 (分别为 0 .2 72 9± 0 .0 345和 0 .1 4 5 6± 0 .0 0 0 3)。结论 :地塞米松可下调Muc5acmRNA和蛋白表达 ,可能在哮喘气道粘液过度分泌中起治疗作用     

罗格列酮对哮喘小鼠气道炎症和肺组织细胞因子信号抑制因子3和5mRNA表达的影响

目的:研究罗格列酮对哮喘小鼠气道炎症的影响.方法:24只BALB/c小鼠分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和罗格列酮组(C组),每组8只.B和C组通过卵清蛋白(OVA)致敏建立小鼠哮喘模型,C组建模同时吸入罗格列酮5×10<'-5>mol/L.HE染色观察肺组织病理学形态;ELISA方法检测小鼠肺泡灌洗液(BA...     

芪仙汤对支气管哮喘小鼠肺组织FIZZ1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察芪仙汤对哮喘小鼠肺组织中FIZZ1基因及蛋白表达水平的影响,探讨芪仙汤治疗哮喘的作用机制。方法:选用30只健康雌性BALB/c小鼠,采用随机数字表分为正常对照组(对照组)、支气管哮喘模型组(模型组)、芪仙汤治疗组(治疗组)。除对照组外均采用卵白蛋白(OVA)建立支气管哮喘小鼠模型。各组分别相应干预灌胃2周。从小鼠的一般情况、肺组织病理形态学(HE染色病理切片)指标评价支气管哮喘小鼠模型;采用RT-PCR检测肺组织FIZZ1基因mRNA表达水平,Western blot和免疫组化法检测肺组织FIZZ1蛋白表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织较正常组嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润明显,气道壁及支气管平滑肌增厚明显;治疗组哮喘病理改变明显改善。RT-PCR、Western blotting、免疫组化结果均显示模型组FIZZ1表达水平显著高于对照组,治疗组小鼠肺组织中FIZZ1表达水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:芪仙汤可能是通过下调小鼠肺组织FIZZ1表达起到治疗支气管哮喘的作用。     

哮喘大鼠肺组织白血病抑制因子的表达及地塞米松干预研究

目的探讨哮喘大鼠肺组织中白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达及其意义.方法制作卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,采用RT-PCR和Western-blot方法观察LIF在致敏大鼠肺组织中的表达.结果LIF蛋白表达量在哮喘组为(40832±12964),均较地塞米松组(16160±2108)和对照组(23110±8018)升高,差异有显著性(P＜0.01),地塞米松组与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).LIFmRNA的相对表达量哮喘组为(0.51±0.13),均较地塞米松组(0.18±0.05)和对照组(0.24±0.02)明显增高,差异有显.著性(P＜0.01),地塞米松组与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).结论LIF在致敏哮喘大鼠模型肺组织中表达显著增高,LIF作为神经免疫调节因子,可能参与了哮喘的发病机制.     

SOCS-3在大鼠慢性肝损伤中的表达研究

目的 通过研究细胞因子信号转导抑制因子-3（Suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3）在慢性肝损伤中的表达,为阐明其在慢性肝损伤中的作用提供实验基础。方法 采用CCL4法构建大鼠慢性肝损伤模型,通过实时荧光定量PCR、免疫组化检测大鼠肝脏组织SOCS-3的表达。结果 慢性肝损伤组SOCS-3 mRNA相对表达量及SOCS-3蛋白高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 在慢性肝损伤中,随着肝脏损伤加重,因炎症因子持续刺激,SOCS-3表达逐渐增加,提示SOCS-3在慢性肝损伤发生发展过程中起重要作用。     

巨噬细胞移动抑制因子及其与支气管哮喘关系的研究进展

支气管哮喘已成为一个全球性的卫生问题.目前全世界大约有3亿人患哮喘病,其中儿童患者有1.5亿,占全球人口的5%.2000年流行病学调查显示,我国儿童哮喘累积患病率为0.25%～4.63%(平均1.97%).相比于1990年调查累积患病率0.1l%～2.03%(平均1.00%)而言,10年内儿童哮喘患病率平均上升了64.8%.目前公认支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,主要特征是气道高反应[1] , 本质是气道的慢性变应性炎症[2] .多种细胞因子和介质形成支气管哮喘的复杂细胞因子网络.现有研究表明,在哮喘复杂的细胞因子网络中,巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)起着关键作用.     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋白5AC的表达变化及其相关性研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性。方法制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达。结果小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P<0.01),而MUC5AC表达显著升高(P<0.01),两者呈负相关(r=0.901,P<0.01)。结论哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌。     

STAT5、STAT6在哮喘肺组织的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子（STAT）5、STAT6在哮喘小鼠肺组织的表达。方法 16只小鼠随机分为A组（哮喘模型组,8只）和B组（正常对照组,8只）。其中A组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白（OVA）20μg和Al（OH）3 1 mg混悬液致敏,第21～30天每天予2%OVA生理盐水10 ml建立哮喘模型;B组以生理盐水代替OVA致敏和激发。31 d颈椎脱臼处死小鼠,取肺组织,经固定、石蜡包埋,制成组织切片,采用免疫组化方法检测肺组织STAT5、STAT6蛋白的表达水平。结果 A组STAT5、STAT6蛋白表达明显高于B组〔（23.25±3.28）×103 vs（2.33±0.78）×103,P〈0.01;（26.11±3.95）×103 vs（2.78±0.32）×103,P〈0.01〕。肺组织病理学改变：A组大鼠肺组织切片HE染色可见支气管和血管周围炎性细胞浸润,以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞为主,气道腔内可见黏液栓,气道上皮多处断裂,气道上皮细胞存在STAT6的表达,而且气道上皮细胞是哮喘主要的STAT6高表达细胞,胞浆呈棕黄色,且着色较深,气道内黏液腺体增生、杯状细胞肥大、上皮剥脱。B组无上述情况。结论 STAT5、STAT6在哮喘的发病机制中起重要作用。STAT5可能参与了哮喘发病的调控过程,具有促进嗜酸性粒细胞分化、增殖作用;气道炎性细胞浸润以及气道高反应性可能与STAT6基因高表达有关。     

CpGODN对尘螨哮喘小鼠Foxp3表达的影响

目的研究CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)对尘螨哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子及肺组织中Foxp3蛋白表达的影响。方法用雌性C57BL/6J小鼠建立尘螨哮喘小鼠模型,在抗原致敏阶段加入CpGODN进行干预,并设立GpCODN治疗对照组及布地奈德治疗对照组,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)的变化;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ的含量变化;用免疫印迹(Western-blot)法检测肺组织Foxp3蛋白的表达水平。结果与哮喘模型组及GpCODN治疗对照组比较,CpGODN治疗组的BALF中IL-4、IL-5的浓度降低,IFN-γ浓度升高,肺组织中Foxp3蛋白表达增高;相关性分析显示肺组织Foxp3表达与BALF中IFN-γ水平呈正相关,与BALF中IL-4、IL-5水平、EOS绝对值均呈负相关。结论 CpGODN能够改善尘螨哮喘小鼠气道炎症,调节Th1/Th2型细胞因子的平衡,可能是通过诱导Foxp3的表达来起到免疫调节的作用。     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋5AC的表达变化及其相关性研究

目的 探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性.方法 制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达.结果 小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P＜0.01),而MUC5AC表达显著升高(P＜0.01),两者呈负相关(r=0.901,P＜0.01).结论 哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌.     

支气管哮喘患者血清细胞因子、NLRP3 mRNA 及诱导痰黏蛋白水平的变化

目的 探讨支气管哮喘患者外周血中单个核细胞Nod 样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3） mRNA、血清白细胞介素-2（IL-2）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导痰黏蛋白水平的变化及 其意义。方法 选取2013 年1 月-2014 年12 月在该院确诊的80 例支气管哮喘患者作为哮喘组,同期收集 健康自愿者80 例作为对照组。检测两组患者外周血NLRP3 mRNA,以及血清IL-2、IL-6、TNF-α、诱 导痰黏蛋白MUC5AC 水平,并进行分析。结果 哮喘组患者NLRP3 mRNA,以及血清IL-6、TNF-α、 MUC5AC 水平高于对照组（P <0.05）;哮喘组患者IL-2 水平低于对照组（P <0.05）;急性发作期哮喘组患 者NLRP3 mRNA,以及血清IL-6、TNF-α、MUC5AC 水平高于慢性持续期哮喘患者（P <0.05）;急性发 作期哮喘组患者IL-2 水平低于慢性持续期哮喘患者（P <0.05）。哮喘组患者治疗后NLRP3 mRNA,以及血 清IL-6、TNF-α、MUC5AC 水平较治疗前降低（P <0.05）;哮喘组患者治疗后IL-2 水平高于治疗前（P <0.05）。 结论 哮喘患者NLRP3 mRNA 及血清IL-6、TNF-α、MUC5AC 水平升高,IL-2 水平降低,并且与患者 病情变化有关。     

Effects of Glucocorticoid on IL-13-induced Muc5ac Expression in Airways of Mice

Thereareatleast7MUCgenesthatnormallyexpresseintherespiratorytract,amongwhichMuc5acwasconsideredtobeamarkerofgobletcellmetaplasiainairways[1].Airwaymucusoverproductionandhypersecretion,aswellashyperviscosityisaclinicalfeatureofinflammatorydiseaseofairways,…     

SOCS2、SOCS5 在儿童过敏性紫癜中的表达及其意义

目的 探讨细胞因子信号传导抑制蛋白2（SOCS2）和SOCS5 在儿童过敏性紫癜（HSP）中的表达及其意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应检测HSP 患儿（36 例）和正常健康对照儿童（17 例）外周血单个核细胞中SOCS2 和SOCS5 mRNA 表达水平。结果 HSP 患儿SOCS2 和SOCS5 mRNA 表达水平高于对照儿童（P <0.05）。混合型HSP 患儿SOCS2 和SOCS5 mRNA 表达水平较单纯型患儿升高（P <0.05）。HSP 患儿SOCS2 和SOCS5 mRNA 表达水平无性别差异（P >0.05）。结论 SOCS2、SOCS5 可能参与儿童HSP 的发病。     

Kinetic study of eosinophil apoptosis and its relationship to Th2 cytokines in asthmatic murine model

Ｉｔｉｓｗｅｌｌｋｎｏｗｎｔｈａｔａｉｒｗａｙｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｂｒｏｎｃｈｉａｌａｓｔｈｍａ Ｂｏｔｈｉｎａｔｏｐｉｃａｎｄｎｏｎ ａｔｏｐｉｃａｓｔｈｍａ ,ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓａｒｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅｔｈｅｃｒｉｔｉｃａｌｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｒｙｃｅｌｌｓｗｈｉｃｈｒｅｌｅａｓｅｍａｊｏｒｂａｓｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ ,ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｄｅｒｉｖｅｄｎ…     

腺病毒介导的SOCS3对银屑病小鼠模型治疗的实验研究

目的研究腺病毒介导的SOCS3对银屑病小鼠模型的治疗作用。方法获得重组腺病毒Ad—SOCS3,用WesternBlot分析Ad—SOCS3在TC-1细胞中的表达。用流式细胞仪检测对TC-1的细胞凋亡。腹腔注射Ad-SOCS3小鼠银屑病模型,观察小鼠阴道上皮有丝分裂,用ELISA检测血清中IL-6和TNF-α浓度。结果SOCS3在TC-1能有效表达。与Ad—SOCS3的感染复数相关。Ad-SOCS3能显著抑制TNF-α介导的细胞凋亡（P〈0．01）。Ad—SOCS3能抑制雌激素期小鼠阴道上皮有丝分裂（P〈0．01）,较Ad—EGFP,Ad-SOCS3降低血清中IL-6和TNF-α浓度（P〈0．01）。结论Ad-SOCS3能抑制炎性因子诱导的细胞凋亡和炎症,其对银屑病具有潜在的治疗价值。     

胆木提取物对哮喘小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞及细胞因子的影响

目的 探讨通过预先应用胆木提取物的干预,了解其对哮喘小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞及细胞因子的影响以及剂量相关性。方法 将实验动物随机分为6组（正常对照组,哮喘模型组,胆木提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组,地塞米松组）,每组10只,实验组通过卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,随后每日一次雾化吸入OVA激发复制小鼠支气管哮喘模型,除正常对照组外,每次哮喘激发前30 min腹腔注射给药（低剂量组1.0 mg/kg,中剂量组2.0 mg/kg,高剂量组4.0 mg/kg,地塞米松组2 mg/kg）。在连续雾化激发28 d后断颈处死小鼠,留取BALF,用ELISA方法对IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ浓度进行检测;瑞氏染色计数白细胞(white blood cell,WBC)、嗜酸性粒细胞（eosinophile granulocyte,EOS）、中性粒细胞（neutrophile granulocyte,NEU)。结果 与哮喘模型组对比,经胆木提取物干预处理,哮喘小鼠BALF中WBC、EOS、NEU均降低,其数值与胆木提取物的干预剂量呈负相关;而细胞因子IL-2、IL-10、IFN-γ的浓度则比哮喘模型组升高,其升高幅度与干预剂量呈正相关,细胞因子IL-4、IL-5浓度比哮喘模型组降低,降低幅度与干预剂量呈负相关。结论 胆木提取物可能通过影响细胞因子（IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ）的分泌及炎性细胞在气道中的浸润,对支气管哮喘小鼠的气道炎症进行调控。     

瘦素对大鼠脂肪细胞SOCS-3表达的影响

目的:探讨瘦素对脂肪细胞SOCS-3表达的影响及机制.方法:分离并培养大鼠成熟脂肪细胞,采用50 nmol·L-1重组瘦素对脂肪细胞分别处理0.5、2、6 h,免疫共沉淀结合Western blotting法检测SOCS-3、p-STAT1、p-STAT3蛋白表达.结果:瘦素未处理的脂肪细胞中有少量SOCS-3表达,在...     

Expression of Interleukin-17 in Lung and Peripheral Blood of Asthmatic Rats and the Influence of Dexamethasone

The expression of interleukin-17(IL-17) in lung and peripheral blood of asthmatic rats and the influence of dexamethasone,and the role of IL-17 in the pathogenesis of asthma were investigated.Thirty Sprague-Dawley(SD) adult rats were randomly divided into three groups(n=10 in each group):normal group,asthmatic group,and dexamethasone-interfered group.Rat asthmatic model was established by intraperitoneal(i.p.) injection of 10% ovalbumin(OVA) and challenge with 1% OVA via inhalation.Rats in dexamethasone-interfered group were pretreated with dexamethasone(2 mg/kg,i.p.) 30 min before each challenge.The expression of IL-17 protein in serum and bronchoalveolar lavage fluid(BALF) was detected by ELISA.The expression of IL-17 mRNA in peripheral blood mononuclear cells(PBMC) and BALF cells was semi-quantitatively detected by RT-PCR.The expression of IL-17 protein in serum and BALF of asthmatic rats was significantly elevated as compared with normal rats and dexamethsone-interfered rats(P<0.01),and there was significant difference between normal rats and dexamethsone-interfered rats(P<0.05).The expression of IL-17 mRNA in PBMC and BALF cells of asthmatic rats was markedly increased as compared with normal rats and dexamethsone-interfered rats(P<0.01),and significant difference was found between normal rats and dexamethsone-interfered rats(P<0.05).It was concluded that the expression of IL-17 was increased significantly in asthmatic rats and could be inhibited partly by dexamethasone,suggesting that IL-17 might play an important role in the pathogenesis of asthma as an inflammation regulation factor.