层粘连蛋白对人胃癌细胞内游离钙及钙调蛋白和核DNA含…

本文研究外源性层粘连蛋白与人胃癌细胞膜上其受体介导细胞内Ｃａ＾２＋浓度及钙调蛋白（ＣａＭ）和ＤＮＡ发生的变化。结果表明，层粘连蛋白可引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度升高和钙调蛋白含量显著升高。同时伴有核ＤＮＡ含量增加。提示外源性层粘连蛋白与质膜上的层粘连蛋白受体结合后可能通过细胞内Ｃａ＾２＋影响核内ＣａＭ，进而促进ＤＮＡ的合成。该信息通路在层粘连蛋白促进肿瘤细胞粘着，铺展，增殖等生物学效应中可能起重要调节     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP3及钙调蛋白影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１,４,５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍,持续８０～１６０ｓ;以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞,Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２,ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用,而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加,激活ＣａＭ从而调节细胞功能。     

17β—雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙,IP3及？…

目的 观察１７β－雌二醇（Ｅ２０）对成骨细胞内游离钙（「Ｃａ＾２＋」ｉ）１,４,５,－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映「Ｃａ＾２＋」ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。     

aFGF对肺腺癌AGZY—83A细胞株TPK,PKC活性及Ca^2＋浓度的影响

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性（ＴＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性；用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：随着ａＦＧＦ浓度增加，ＴＰＫ及ＰＫＣ活性随之升高。当ａＦＧＦ浓度为１．１２μｇ／ｍｌ时ａＦＧＦ处理组的ＴＰＫ是对照组的４倍；膜ＰＫＣ活性也是对照组的４倍，胞浆ＰＫＣ活性是对照组的１．７５倍。［Ｃａ２＋］ｉ是对照组的３倍。结论：该细胞株中ａＦＧＦ受体具有ＴＰＫ活性。ＴＰＫ激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化，而使ＰＫＣ活性及［Ｃａ２＋］ｉ升高，即ＰＫＣ和Ｃａ２＋是ＴＰＫ的下游信号分子，进一步促进ｃ－ｆｏｓ、ｊｕｎ基因表达增加，导致细胞增殖     

肺心病患者细胞内游离钙-钙调蛋白活性的研究

目的：通过测定肺心病患者血小板内游离钙离子浓度和钙调蛋白活性,探讨和ＣａＭ活性变化在肺心病,缺氧性肺动脉高压形成机制中的作用。方法：用荧光指标剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ标记示踪法和磷酸二酯酶法测定１９例肺心病急性发作期患者和２０例健康者血小板（Ｃａ＾２＋）＾ｉ,ＣａＭ活性。     

呼吸中枢M受体亚型与细胞内钙

目的探讨呼吸中枢Ｍ受体亚型与细胞内钙的关系。方法采用Ｆｕｒａ－２双波长荧光法测定Ｍ１和Ｍ２受体激动剂和拮抗剂对胎鼠桥脑和延脑神经细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。结果在静息状态下，其［Ｃａ２＋］ｉ为７２±６ｎｍｏｌ／Ｌ，加入２００μｍｏｌ／ＬＡｃｈ，［Ｃａ２＋］ｉ升高３８％，匹鲁卡品（Ｐｉｌ）０．４～２００μｍｏｌ／Ｌ无明显的升高细胞内钙的作用，而Ｍ２受体激动剂６β－乙酰氧基去甲托烷（６β－ＡＮ）１～１０μｍｏｌ／Ｌ。对神经细胞内的游离钙均无明显影响。Ｍ１－Ｒ拮抗剂哌仑西平（Ｐｉ）６０μｍｏｌ／Ｌ能拮抗Ａｃｈ升高细胞内钙的作用，Ｍ２－Ｒ拮抗剂ＡＦ－ＤＸ１１６２０μｍｏｌ／Ｌ不能拮抗。结论Ｍ１－Ｒ兴奋与细胞内钙升高有关。     

用Fluo3—AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^2＋浓度及药物对 …

用Ｆｌｕｏ ３－ＡＭ为荧光控针,测定２型糖尿病患者淋巴细胞内Ｃａ＾２＋浓度,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Ｂａｙ Ｋ８６４４、胰岛素等药物对胞内Ｃａ＾２＋的作用机制。实验表明患者胞浆内Ｃａ＾２＋浓度与正常人相比显著升高;药物对胞内Ｃａ＾２＋的刺激表明,病人地外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内Ｃａ＾２＋浓度升高,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道,也能促进钙从钙池中释放。上述研     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca~（2＋）－Mg~（2＋））－ATP酶的影响

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－Ａｒｐ酶的影响，采用改良的Ｈａｎａｈａｎ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ２＋浓度呈正相关。说明（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性下降时，红细胞变形能力降低，可能与患者红细胞膜蛋白的过度糖化及细胞内Ｃａ２＋浓度的增高有关。     

大鼠脑挫伤后脑不同部位细胞和线粒体内的钙含量变化

用原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）及比色法分别测定了脑挫伤后８ｈ大鼠各脑区细胞内钙（Ｃａｉ）、组织总磷（Ｐｔ）、线粒体钙（Ｃａｍｔ）、线粒体（Ｐｍｔ）的含量变化，结果表明原发损伤可使多数脑区的细胞受体影响并发生Ｃａ＾２＋内流，局部伤情影响着Ｃａ＾２＋内流程度；内流Ｃａ＾２＋多是以结合形式沉积于胞浆等部位以维持胞内Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）稳定，蛋白质是可能的主要结合剂；但严重的Ｃａ＾２＋内流将     

前列腺素E_2对大鼠肺泡巨噬细胞内皮素生成的调控

采用放射免疫分析法观察大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的内皮素（ＥＴ）生成。结果显示：①未受刺激的ＡＭ存在ＥＴ的基础分泌；②脂多糖（ＬＰＳ）、佛波醇酯（ＰＭＡ）和Ｃａ２＋导入剂Ａ２３１８７均可显著促进ＡＭ的ＥＴ生成；③钙调蛋白（ＣａＭ）抑制剂Ｗ７可阻断ＰＭＡ的促ＥＴ生成效应；④外源性前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）可抑制ＬＰＳ和ＰＭＡ的促ＥＴ生成效应，消炎痛可增强ＬＰＳ的作用。结果表明，ＡＭ具有产生ＥＴ的功能，调控ＡＭ生成ＥＴ的细胞内信号转导途径存在依赖ＰＫＣ和Ｃａ２＋－ＣａＭ二条途径，ＡＭ产生的内源性ＰＧｓ对ＥＴ的生成具有负性调节作用     

神经降压素的肝细胞保护作用与Ca~（2＋）的关系

观察了神经降压素（ＮＴ）的肝细胞保护作用与Ｃａ２＋的关系。结果显示，醋氨酚使肝细胞Ｃａ２＋内流和肝脏钙含量增加，但对于线粒体Ｃａ２＋摄取及其钙含量无明显影响，表明细胞可能出现胞质Ｃａ２＋超载。若在醋氨酚之前给予ＮＴ则使肝细胞Ｃａ２＋内流明显减少，肝脏Ｃａ２＋含量有降低趋势，但线粒体钙含量显著增加。这些结果提示，ＮＴ通过减少Ｃａ２＋内流，增强线粒体贮存Ｃａ２＋的能力，部分缓解醋氨酚所致胞质Ｃａ２＋超载从而减轻细胞损伤。     

Mechanism of allyl chloride-induced cytoskeletal injury to nerve cells

ＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｌｙｌｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｄｕｃｅｄｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔａｌｉｎｊｕｒｙｔｏｎｅｒｖｅｃｅｌｓＸｉｅＫｅｑｉｎ谢克勤,ＳｕｎＫｅｒｅｎ孙克任,ＧａｏＳｈｕｊｕｎ高树君,ＺｈａｎｇＬｅｉ张磊ａｎｄＺｈａｎｇＭｉｎ张Ｉｎｓｔｉ...     

继发性右室肥厚患者钙调蛋白基因表达的研究

探讨继发性右室肥厚(RVH)患者心肌细胞内Ca     

Mechanical Strain Regulates Osteoblast Proliferation Through Ca2+-CaMK-CREB Signal Pathway

Objective To investigate the effects of mechanical strain on Ca2+-calmodulin dependent kinase (CaMK)-cAMP response element binding protein (CREB) signal pathway and proliferation of osteoblasts. Methods Using a four-point bending device, MC3T3-E1 cells were exposed to mechanical tensile strains of 2500μs and 5000μs at 0.5 Hz respectively. The intracellular free Ca2+ ([Ca2+]i) concentration and calmodulin activity were assayed by fluorospectrophotometry, CaMK IIβ, CREB, and phosphorylated (activated) CREB (p-CREB) were assessed by Western blot, and cells proliferation was assayed with MTT. Pretreatment with verapamil was carried out to block Ca2+ channel, and inhibitor U73122 was used to inhibit phospholipase C (PLC). Results Mechanical strains of 2500μs and 5000μs for 1 to 10 minutes both increased [Ca2+]i level of the cells.The2500μs strain, a periodicity of 1 h/d for 3 days, activated calmodulin, elevated protein levels of CaMK IIβ and p-CREB, and promoted cells proliferation, which were attenuated by pretreatment of verapamil or U73122. The effects of5000μs strain on calmodulin, CaMK IIβ, p-CREB and proliferation were contrary to 2500μs strain. Conclusion Themechanical strain regulates osteoblasts proliferation through Ca2+-CaMK-CREB signal pathway viaCa2+ channel and PLC/IP3 transduction cascades.     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402 细胞 Ca2+浓度的影响

目的研究甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响.方法采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化.结果在AFP作用4 min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10 min时降到正常水平.结论AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Be17402细胞内信息传递.     

甲胎蛋白对人肝癌Bel7402细胞Ca~(2+)浓度的影响

目的:研究甲胎蛋白(alpha-fetoproteinAFP)对人肝癌细胞信息传递物质Ca2+浓度的影响。方法:采用由脐带血血清中提纯的AFP作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,通过共聚焦显微镜扫描,观察不同时间细胞内Ca2+浓度的变化。结果:在AFP作用4min时能显著提高Bel7402细胞内Ca2+浓度,与对照组比较升高204.1%,随后缓慢下降,到作用10min时降到正常水平。结论:AFP能通过改变细胞Ca2+浓度从而调节人肝癌Bel7402细胞内信息传递。     

Effect of Calmodulin and Voltage-dependent Ca~(2+) Channel on the Proliferation of Heptoma Cells Induced by Epidermal Growth Factor

Epidermal growth factor(EGF) has been impli-cated as a hepatotrophic factor during liver regenera-tion.EGF plays a role in the proliferation of hep-atoma cells.In general,EGF induces tumor cells di-vision and proliferation through a series of signaltransduction by binding with EGF receptor(EGFR)and activate its thyrosine protein kinase and therebyinducing phosphoration of itself and its protein sub-strate[1] .This postreceptorsingnal transduction isas-sociated with phosphoylinositolpathw…     

线粒体DNA缺失对人淋巴瘤Namalwa 细胞生长和侵袭能力的影响

目的探讨线粒体DNA（mtDNA）缺失对人淋巴瘤Namalwa 细胞生长和迁移能力的影响。方法采用溴化乙锭处理
Namalwa细胞获得mtDNA缺失的ρ0-Namalwa细胞;营养缺陷法、PCR扩增线粒体DNA片段、Western bloting检测COXII蛋白
表达等方法鉴定ρ0-Namalwa细胞;MTT方法及细胞周期测定细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;流式细胞
术检测活性氧（ROS）及细胞内钙离子水平。结果ρ0-Namalwa细胞在选择性培养基中正常生长,而在非选择性培养基中逐渐
死亡;ρ0-Namalwa细胞未扩增出mtDNA片段以及未表达COXII蛋白;与Namalwa细胞相比,ρ0-Namalwa的细胞增殖率、迁移及
侵袭能力、ROS水平及细胞内Ca2+浓度明显降低,细胞阻滞于G0/G1期。结论ρ0-Namalwa细胞与亲本Namalwa细胞相比,生长
及迁移能力减弱,可能与细胞内ROS产生减少及细胞内Ca2+浓度降低有关。
     

1－烯丙基氯－3诱导神经细胞内游离钙和游离钠离子改变

用鸡胚脑神经细胞对１－烯丙基氯－３引起的细胞内游离Ｃａ~（２＋）、游离Ｎａ~＋的变化进行了研究。结果显示，在１－烯丙基氯－３的作用下，神经细胞内游离Ｃａ~（２＋）、游离Ｎａ~＋浓度随毒物浓度的增加而明显增高，呈显著的剂量－效应关系。细胞内游离Ｎａ~＋的改变在低剂量组无Ｃａ~（２＋）变化明显，细胞外高钾能使细胞内游离钙增加，但对细胞内游离Ｎａ~＋作用不明显。提示１－烯丙基氯－３引起的中毒性周围神经病可能与神经细胞内Ｎａ~＋、Ｃａ~（２＋）增加有关。