薄层扫描法测定川产九节龙中皂苷的含量

 目的：测定不同生长期的川产九节龙中2种新皂苷的含量,为确定合理采收期提供科学数据。方法：采用双波长薄层扫描法进行含量测定。结果：川产九节龙中2种新皂苷在5,6,7,8月份中的含量逐渐增高,以8月份含量最高。结论：此法具有简便,快速,精密度好,线性范围宽等特点。     

正交试验优选九节龙皂苷Ⅰ的提取工艺研究

目的筛选九节龙中九节龙皂苷Ⅰ的最佳提取工艺,并建立HPLC-ELSD法对九节龙皂苷Ⅰ的测定方法。方法采用L_3(3～4)正交试验,以九节龙皂苷Ⅰ提取率和干浸膏得率为检测指标。HPLC-ELSD色谱条件:Phe-nomenexC_(18)(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(75:25);体积流量:1.0mL/min;检测器漂移管温度:73.8℃;载气体积流量:2.0L/min。结果最佳提取工艺为75%乙醇,第1次8倍量提取4h,第2次6倍量提取3h。九节龙皂苷Ⅰ在0.88-4.42μg范围内线性关系良好(r=0.9999);样品平均回收率为100.37%,RSD为1.88%(n=6)。结论建立的正交试验优选九节龙的提取方法可行,采用的HPLC-ELSD法测定九节龙皂苷Ⅰ的方法可用于九节龙皂苷Ⅰ的质量控制。     

高效液相色谱分离纯化九节龙皂苷Ⅰ

目的采用制备色谱系统从九节龙皂苷粗品中分离纯化九节龙皂苷Ⅰ,建立其纯化工艺。方法九节龙皂苷粗品采用柱色谱分离,然后采用制备色谱系统,收集对应峰的回收液,即得九节龙皂苷Ⅰ,并对产品进行了TLC定性和质量分数定量分析。结果产品经HPLC检测,为九节龙皂苷Ⅰ,质量分数达99%以上。结论用制备色谱系统进行九节龙皂苷Ⅰ的分离和纯化,具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点。     

薄层扫描法测定川产九节龙中皂苷的含量

目的：测定不同生长期的川产九节龙中２种新皂苷的含量，为确定合理采收期提供科学数据。方法：采用双波长薄层扫描法进行含量测定。结果：川产九节龙中２种新皂苷在５，６，７，８月份中的含量逐渐增高，以８月份含量最高。结论：此法具有简便，快速，精密度好，线性范围宽等特点。     

九节龙皂苷I衍生物的合成及细胞毒活性研究

目的对九节龙皂苷Ⅰ进行结构修饰得到新的结构类似物,并对其抗肿瘤活性进行研究。方法通过对九节龙皂苷Ⅰ的30位醛基进行氧化、还原或氨基化合物的缩合得到一系列新的化合物,并采用MTT法对合成的衍生物进行9种人癌细胞毒活性研究,通过IC50来评价其抗肿瘤活性。结果得到的新化合物a、b、d和中间体c,分别为氢化九节龙皂苷Ⅰ、加氧九节龙皂苷Ⅰ、九节龙皂苷缩4-苄基-3-氨基硫脲和九节龙皂苷缩肼基二硫代甲酸甲酯;其中化合物a和中间体c对常见的9种人癌细胞IC50相比原皂苷均降低(P<0.05),说明其对肿瘤细胞的抑制能力较原皂苷增强。结论通过对九节龙皂苷I进行结构修饰,能够使其抗肿瘤活性增强。     

九节龙皂苷对荷瘤小鼠放化疗的增效作用

目的:观察九节龙皂苷(Ard ipusilloside,ADS)对荷瘤小鼠放化疗增效作用。方法:以ADS 12.5~100mg/kg灌胃给药,观察ADS对荷H22实体瘤小鼠5-Fu治疗和60Co-γ放疗的增效作用。结果:ADS对5-Fu化疗的增效率为21.2%~25.8%,对放疗的增效率为33.6%~41.6%。结论:ADS对5-Fu化疗,放疗均有增效作用。     

九节龙皂苷抗肿瘤作用研究进展

九节龙皂苷是金牛科紫金牛属植物川产九节龙Ardisia pusilla中分离出的1种三萜皂苷单体。皂苷大多具有抑瘤、抗菌等重要的生物活性,而其抗肿瘤作用具有重要的研究价值和诱人的开发前景。文章调研了有关九节龙皂苷的国内外文献报道,并分析了其相关抗肿瘤机制。研究表明,九节龙皂苷对肿瘤细胞有一定的抑制作用,对胶质瘤细胞较为突出。其诱导肿瘤细胞凋亡与促进Fas/Fas L表达及Caspase-3/Caspase-8活化,促进Bax表达,抑制Bcl-2表达,及BAD去磷酸化途径以及核内Ca2+浓度等有关;诱导肿瘤细胞自噬与促进Beclin-1及LC-3等表达有关;诱导肿瘤细胞侵袭与转移与下调MMP-2/MMP-9表达及E-钙黏素活性等有关。同时,体内药效学及药代动力学研究也证实了九节龙皂苷具有一定的抑制肿瘤作用。通过对九节龙皂苷体外抗肿瘤机制及体内抗肿瘤活性研究进展概述,以期为后期肿瘤治疗的临床前研究提供参考。     

高效液相色谱分离纯化九节龙皂苷I

目的 采用制备色谱系统从九节龙皂苷粗品中分离纯化九节龙皂苷I,建立其纯化工艺.方法 九节龙皂苷粗品采用柱色谱分离,然后采用制备色谱系统,收集对应峰的回收液,即得九节龙皂苷I,并对产品进行了TLC定性和质量分数定量分析.结果 产品经HPLC检测,为九节龙皂苷I,质量分数达99％以上.结论 用制备色谱系统进行九节龙皂苷I的分离和纯化,具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点.     

胃安康对小鼠免疫功能的影响

目的：研究中药复方胃安康（WAK）对小鼠免疫功能的影响，以探讨其抗肿瘤作用机理。方法：通过给小鼠灌胃WAK，观察其对免疫低下小鼠迟发性超敏反应，溶血素生成及对小鼠NK细胞，LAK细胞杀伤活性的影响。结果：WAK可明显增强免疫低下小鼠的DTH，提高血浆溶血素水平，增强NK及LAK细胞杀伤活性。结论：WAK可通过提高机体的免疫功能来发挥抗肿瘤作用。     

九节龙皂苷Ⅰ对胶质瘤U87细胞侵袭和迁移的影响

目的 观察九节龙皂苷Ⅰ(从九节龙全草中萃取)对胶质瘤U87细胞体外侵袭、迁移等生物学行为的影响及作用机制的探讨.方法 体外培养U87细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测胶质瘤U87细胞经不同浓度九节龙皂苷Ⅰ作用24、48、72 h后增殖率的变化;细胞划痕实验观察九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞移动能力的影响;Transwell侵袭转移模型评价九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱法分析九节龙皂苷Ⅰ对U87细胞分泌基质金属蛋白酶(MMP)活性的影响.结果 MTT法显示一定浓度的九节龙皂苷Ⅰ可抑制U87细胞生长,并随着浓度增加和作用时间延长而明显增加(P＜0.05);与对照组比较,经九节龙皂苷Ⅰ作用后U87细胞迁移和侵袭能力明显降低,MMP-2分泌减少.结论 九节龙皂苷Ⅰ可有效抑制脑胶质瘤U87细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与九节龙皂苷Ⅰ降低细胞MMP-2活性相关.     

九节龙皂苷Ⅰ对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用

目的:研究九节龙皂苷Ⅰ对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用.方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14 d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25 d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16 d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率.结果:九节龙皂苷Ⅰ 25 mg/kg～100 mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%～54.0%和45.4%～69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%～56.3%之间.结论:九节龙皂苷Ⅰ对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用.     

清解宁对小鼠免疫功能的影响

目的：研究清解宁对小鼠免疫功能的影响。方法：用绵羊红细胞(SRBC)免疫小鼠，分别用小鼠脚掌厚度测量法观察迟发性超敏反应(DTH)、溶血分光光度法观察体外抗体形成细胞数(PFC)、微量血凝法观察溶血素、MTT法观察脾T、B淋巴细胞的增殖功能，腹腔MΦ吞噬中性红比色法观察腹腔MΦ吞噬中性红的能力。结果：清解宁能明显抑制SRBC免疫小鼠的DTH、PFC、溶血素、脾T、B淋巴细胞的增殖以及腹腔MΦ吞噬中性红的能力。结论：清解宁对SRBC免疫小鼠的免疫功能具有明显的抑制作用。     

正交试验设计优选九节龙皂苷Ⅰ聚乳酸微球的制备工艺

目的 筛选溶剂蒸发法制备九节龙皂苷Ⅰ聚乳酸微球(ADS-Ⅰ-PLA-MS)最佳工艺.方法 采用HPLC-ELSD测定方法,以包封率和载药量为评价指标,W/O/W溶剂蒸发法制备微球;通过单因素和正交试验设计,考察内水相九节龙皂苷Ⅰ (ADS-Ⅰ)甲醇溶液的质量浓度、ADS-Ⅰ甲醇溶液与聚乳酸(PLA)二氯甲烷溶液体积比、PLA二氯甲烷溶液质量浓度和聚乙烯醇(PVA)体积等因素对ADS-Ⅰ-PLA-MS包封率及载药量的影响.结果 溶剂蒸发法制备ADS-Ⅰ-PLA-MS的最佳工艺条件为ADS-Ⅰ甲醇溶液质量浓度为8 mg/mL、ADS-Ⅰ甲醇溶液与PLA二氯甲烷溶液体积比为1∶13、PLA二氯甲烷溶液质量浓度为90 mg/mL、PVA体积为500 mL.结论 优选出的ADS-Ⅰ-PLA-MS制备工艺合理可行.     

九节龙皂苷衍生物对脑胶质瘤U373细胞株及裸鼠移植瘤的影响

目的探讨九节龙皂苷衍生物对脑胶质瘤U373细胞株及裸鼠移植瘤的影响。方法培养U373细胞系,采用MTT法检测不同剂量九节龙皂苷衍生物对脑胶质瘤U373细胞增殖的影响;流式细胞仪观察细胞凋亡情况;免疫细胞化学检测凋亡蛋白Caspase3、p-Caspase3的表达变化。建立裸鼠实体瘤动物模型,给予不同剂量九节龙皂苷衍生物,计算抑瘤率。结果九节龙皂苷衍生物可显著降低U373细胞的生存率;流式细胞仪检测结果显示,随着衍生物质量浓度的增大,U373细胞的凋亡率明显上升;免疫组化结果同样证明,衍生物可呈剂量依赖性的促进凋亡信号Caspase3和p-Caspase3的高表达。动物实验显示,九节龙皂苷衍生物12.5～50 mg/kg能显著抑制裸鼠荷U373实体瘤的生长,其抑瘤率45.9%～55.8%,免疫组化结果显示,经不同剂量衍生物处理后,Caspase3和p-Caspase3的表达高于模型组。结论九节龙皂苷衍生物对脑胶质瘤U373细胞株及裸鼠移植瘤均有抑制作用,可能通过调控Caspase3、p-Caspase3的表达,诱发U373细胞大量凋亡,发挥重要的抗肿瘤作用。     

九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用

目的:研究九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用。方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率。结果:九节龙皂苷I25mg/kg~100mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%~54.0%和45.4%~69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%~56.3%之间。结论:九节龙皂苷I对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用。     

墨旱莲乙酸乙酯总提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的：研究墨旱莲乙酸乙醇总提物(EAEEP)对机体免疫功能的调节作用。方法：采用腹腔注射氢化可的松或环磷酰胺所致免疫抑制小鼠模型,观察EAEEP对非特异免疫、体液免疫及细胞免疫功能的影响。结果：EAEEP能显著提高免疫抑制小鼠的免疫脏器指数、溶血素水平及外周血T淋巴细胞CD4亚群比例,并显著增强机体迟发性超敏反应。结论：EAEEP对小鼠的免疫功能有显著的调节作用。     

藏药然降多吉胶囊对小鼠免疫功能的影响

然降多吉胶囊对DNCB所致小鼠皮肤迟发性超敏反应引起的耳廓肿胀有显的对抗作用，可促进正常小鼠溶血素抗体生成，同时能提高正常小鼠单核巨噬细胞吞噬功能。     

蜂王浆对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的探讨蜂王浆对环磷酰胺(CTX)所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法建立小鼠免疫损伤模型,同时灌胃给予不同剂量蜂王浆连续7 d,以小鼠巨噬细胞吞噬功能、胸腺脾脏指数、迟发型超敏反应、血清溶血素水平为测定指标。结果蜂王浆3.06,6.12 g.kg-1剂量组能够明显增强小鼠巨噬细胞吞噬功能(P<0.05),同时,对小鼠胸腺脾脏指数具有一定的保护作用,并且能明显增加小鼠迟发型超敏反应,提高小鼠的血清溶血素含量。结论蜂王浆对CTX所致免疫低下小鼠免疫功能具有一定的增强作用。     

养精胶囊对环磷酰胺模型小鼠免疫功能的影响

目的观察养精胶囊对于KM小鼠非特异性与特异性免疫功能的影响。方法将青年KM小鼠随机分为空白对照组、模型组、左旋咪唑对照组、养精胶囊高、中、低剂量组共6组。灌胃7d,给药第3日开始,空白对照组每日皮下注射灭菌生理盐水0.1ml/10g,其余各组皮下注射环磷酰胺40 mg/㎏,连续5 d,5日后每组分别进行碳粒廓清实验、迟发型超敏反应实验(DTH)、鸡红细胞溶血素实验。结果养精胶囊能明显对抗环磷酰胺对小鼠吞噬功能的抑制作用,使低下的DTH升高,同时可以回升环磷酰胺所致的免疫低下小鼠的溶血素水平。结论养精胶囊可以从特异性和非特异性两方面增强小鼠的免疫功能。     

发酵灵芝菌丝体对小鼠免疫性肝损伤及免疫功能的影响

目的:研究灵芝菌丝体对小鼠免疫性肝损伤及免疫功能的影响。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤模型、环磷酰胺(Cy)所致小鼠迟发性超敏反应(DTH)增高或低下模型和刀豆素(ConA)或脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞增殖模型进行观察。结果:灵芝菌丝体(0.9g/kg,qd×10d,ig)可使免疫性肝损伤小鼠升高的血清ALT(P<0.01)、AST(P<0.05)和脾脏指数降低(P<0.05),并使小鼠肝脏损伤性变化减轻。灵芝菌丝体一方面(0.3,0.6,0.9g/kg,ig,qd×5d)可抑制亢进小鼠细胞免疫功能,使小鼠DTH减轻(P<0.05,P<0.01和P<0.01);另一方面(0.6,0.9g/kg,ig,qd×5d)也可提高低下小鼠细胞免疫功能,使小鼠DTH增强(P<0.05和P<0.01)。并且,灵芝菌丝体(0.3,0.6,0.9g/kg,ig,qd×10d)可抑制刀豆素ConA诱导的T淋巴细胞增殖(P<0.05,P<0.01和P<0.01)。结论:灵芝菌丝体具有细胞免疫调节功能,对免疫性肝损伤有明显的保护作用。