卵泡液白血病抑制因子浓度对IVF-ET妊娠结局的影响

 【目的】检测卵泡液内白血病抑制因子（LIF）浓度，探讨LIF和体外受精和胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的关系。【方法】接受IVF-ET治疗周期的患者在取卵时留取第1管清亮无血染卵泡液，用酶联免疫吸附法（ELSIA）测定卵泡液内LIF浓度。并对LIF和年龄、性激素、移植胚胎质量以及妊娠率等因素进行分析。【结果】共收集了164个IVF-ET周期（164个病人）的卵泡液。66例妊娠，妊娠率40．2％。卵泡液LIF浓度在妊娠组和未妊娠组间元显著性差别。但在找到卵子的卵泡液内LIF水平显著低于未找到卵子的卵泡液组（P=0．034）。正常妊娠妇女的卵泡液内LIF水平显著高于异常妊娠（流产和宫外孕）妇女（P=0．006）。年龄在妊娠组和未妊娠组间有显著性差异（P=0．038）。【结论】卵泡液内LIF浓度并不影响IVF-ET妊娠结局。正常妊娠妇女卵泡液LIF浓度显著高于发生早期流产和宫外孕的妇女。年龄会显著影响IVF-ET妊娠率。     

卵泡液白血病抑制因子浓度对IVF-ET妊娠结局的影响

【目的】检测卵泡液内白血病抑制因子（LIF）浓度，探讨LIF和体外受精和胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的关系。【方法】接受IVF-ET治疗周期的患者在取卵时留取第1管清亮无血染卵泡液，用酶联免疫吸附法（ELSIA）测定卵泡液内LIF浓度。并对LIF和年龄、性激素、移植胚胎质量以及妊娠率等因素进行分析。【结果】共收集了164个IVF-ET周期（164个病人）的卵泡液。66例妊娠，妊娠率40．2％。卵泡液LIF浓度在妊娠组和未妊娠组间元显著性差别。但在找到卵子的卵泡液内LIF水平显著低于未找到卵子的卵泡液组（P=0．034）。正常妊娠妇女的卵泡液内LIF水平显著高于异常妊娠（流产和宫外孕）妇女（P=0．006）。年龄在妊娠组和未妊娠组间有显著性差异（P=0．038）。【结论】卵泡液内LIF浓度并不影响IVF-ET妊娠结局。正常妊娠妇女卵泡液LIF浓度显著高于发生早期流产和宫外孕的妇女。年龄会显著影响IVF-ET妊娠率。     

卵泡液中颗粒细胞 FSHR 的表达与体外受精-胚胎移植的相关研究

目的：检测超促排卵治疗过程中卵泡液内颗粒细胞卵泡刺激素受体（ FSHR ）的表达水平,探讨FSHR表达与体外受精-胚胎移植（ IVF-ET）中卵子质量和临床妊娠率的关系。方法随机选择在本中心行第一周期IVF-ET的患者35例。采卵日收集卵泡液中的颗粒细胞,检测FSHR的表达。结果卵子的卵裂率随颗粒细胞FSHR表达强度的增加而升高（r＝0．681,P＜0．05）;卵子的受精率随颗粒细胞中FSHR表达的增加而升高（r＝0．647,P＜0．05）;与临床妊娠组相比,非妊娠组患者卵泡液中颗粒细胞FSHR表达水平显著降低,差异有统计学意义（P＜0．05）,年龄、不孕年限、获卵率、卵子成熟度、优胚率差异无统计学意义。结论在IVF-ET中,卵泡液中颗粒细胞FSHR的表达水平将会影响卵子的质量,进而影响临床妊娠率。     

GM-CSF及性激素水平对卵泡和早期胚胎发育的影响

目的 探讨超促排卵周期取卵日（OPU）卵泡液中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）及性激素水平对卵泡发育、卵子受精、卵裂及胚胎质量的影响.方法 用控制性超促排卵进行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗60例因输卵管因素不孕病人,在取卵时留取第一管清亮卵泡液,分别用酶联免疫吸附试验法（ELISA）和酶免疫分析法（EIA）测定60例卵泡液中GM-CSF浓度和促黄体生成素（LH）、孕酮（P）和雌二醇（E2）的含量,卵泡液按相应卵母细胞的成熟度、受精情况、卵裂和胚胎质量分组分析.结果 成熟卵泡组卵泡液中GM-CSF、LH和P水平均高于未成熟组（t=2.35～5.05,P〈0.05）,受精组卵泡液中GM-CSF、LH、P水平均高于未受精组（t=2.36～4.01,P〈0.05）;卵裂组与未卵裂组、高质量胚胎组与低质量胚胎组卵泡液中GM-CSF、P和LH水平无显著性差异（t=0.97～1.64,P〉0.05）;妊娠组GM-CSF和LH浓度高于未妊娠组（t=25.83、2.36,P〈0.05）,而孕酮含量无显著性差异（t=1,68,P〉0.05）;雌二醇浓度在各组间无明显差异（t=0.03～0.70,P〉0.05）.卵泡液GM-CSF与E2水平呈正相关（r=0.321,P〈0.01）,与P和LH水平无相关性（r=0.145、0.147,P〉0.05）.结论 OPU卵泡液中GM-CSF和LH浓度与相应卵泡的卵母细胞成熟及其后的受精有关,而与卵裂及胚胎质量无关, 卵泡液中适量黄体生成素和P促进卵母细胞的成熟.卵泡液中GM-CSF与E2有相关性,提示E2对卵泡液中的GM-CSF水平有调节作用.     

体外受精非优质胚胎冻融的临床价值

目的探讨体外受精非优质胚胎冻融的临床价值。方法对接受冻融胚胎移植的653个周期患者的临床资料进行回顾性分析。结果冻存胚胎根据质量分为优质组、混合组、非优质组。3组两两比较解冻后胚胎存活率、卵裂球完整率，非优质组明显低于混合组（P〈0．05），后者也低于优质组（P〈0．05），但各组的胚胎利用率、流产率无明显差别（P〉0．05）。优质组的临床妊娠率与混合组差别无统计学意义（P〉0．05），但皆高于非优质组（P〈0．05）。结论冻存体外受精非优质胚胎可提高胚胎利用率和累积临床妊娠率，具有重要的临床价值。     

卵泡发育速度对胚胎发育及体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨促排卵过程中卵泡发育速度与卵母细胞质量间的相关性。方法154名患者共159个体外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期,按卵泡发育速度（v,mm／d）的分布分为A组（v〈1）、B组（1≤v≤1．59）、C组（v〉1．59）,比较各组卵母细胞成熟度指标。结果A、B、C3组卵细胞成熟率分别为89．56％、92．45％和94．76％,优质胚胎率分别为40．85％、36．37％和37．11％,妊娠率分别为42．1％、43．1％和35．3％,卵母细胞成熟率C组高于A、B组。优质胚胎率A组高于B、C两组,但组间差异均无显著性（P〉0．05）,而妊娠率A、B两组明显高于C组,且B、C两组间差异有显著性（P〈0．05）。结论促排卵过程中卵泡的生长速度应控制在一个最佳的范围内,因其与卵子质量和后期优质胚胎率及妊娠结局密切相关,且卵泡发育速度又可作为衡量卵泡发育潜能的一项重要指标。     

卵泡液和血清EG-VEGF、VEGF和TGF-β1水平与IVF妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值

目的 探讨卵泡液和血清中内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF）、血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平与体外受精（IVF）妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值。方法 选择60例因输卵管和（或）男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者作为研究对象。ELISA法检测取卵当日卵泡液中和取卵后第2天血清中EG-VEGF、VEGF和TGF-β1的水平,分析其与卵巢反应和IVF妊娠结局的关系。结果 卵泡液EG-VEGF、血清EG-VEGF、卵泡液VEGF浓度均与控制性超排卵周期中人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日血清雌二醇（E₂）浓度呈显著负相关（r=－0.622, P<0.01; r=－0.511, P<0.01; r=－0.427, P<0.01）,卵泡液EG-VEGF与卵泡液VEGF浓度呈显著正相关（r=0.354, P<0.01）。60例不孕症患者中,妊娠31例,未妊娠29例。与非妊娠组比较,妊娠组hCG注射日血清E₂浓度较低（P<0.05）,而血清EG-VEGF浓度较高（P<0.01）;而两组间卵泡液和血清VEGF、TGF-β1的浓度比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 卵泡液和血清EG-VEGF及卵泡液VEGF水平均与卵巢反应呈显著负相关。黄体早期血清EG-VEGF水平与IVF妊娠结局相关,可能具有预测IVF妊娠结局的潜在价值。     

短时受精在体外受精-胚胎移植治疗周期中的应用价值

目的比较体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗中精卵孵育不同时间对胚胎质量的影响。方法按精卵共孵育时间不同将280个周期采集到的卵子3342枚随机分为短时受精组（A组,精卵共同孵育4-6h后随机选取1／2数量卵子脱颗粒细胞）、长受精组（B组,所剩1／2数量卵子,精卵孵育过夜）。分别比较两组的受精率、多精受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎种植率。结果两组的受精率、多精受精率和卵裂率比较差异无统计学意义（P〉0．05）;A组的优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎种植率显著高于B组（P〈0．05）。结论缩短精卵孵育时间不影响受精率及卵裂率,相反能提高胚胎质量,从而提高临床妊娠率。     

IVF－ET患者 IGFBP－3和 IGF－1水平与卵泡发育、卵巢内分泌、胚胎质量及妊娠之间的关系

目的：研究行体外受精－胚胎移植（IVF－ET）的患者血清、卵泡液中胰岛素样生长因子－1（IGF－1）、胰岛素样生长因子结合蛋白－3（IGFBP－3）水平与卵泡发育、卵巢内分泌、激素反应类型、胚胎质量、妊娠之间的关系。方法用酶联免疫吸附法检测96例患者卵泡早期、卵泡中期和取卵日血清中IGF－1、IGFBP－3水平及取卵日卵泡液中IGF－1、IGFBP－3水平,并用放射免疫法检测上述标本中的雌二醇和孕酮水平。结果在超促排卵周期中,血清中的IGF－1水平随着卵泡的逐渐发育成熟而逐渐升高,但血清IGFBP－3水平则随着卵泡发育进程而逐渐降低,各组间差异有统计学意义（ P＜0.05）。取卵日血清中IGF－1、IGFBP－3水平显著高于中卵泡液上述细胞因子的水平（P＜0.05,P＜0.001）;取卵日血清和卵泡液IGF－1、IGFBP－3水平与各自的雌二醇水平呈正相关,与孕酮水平无相关性。随着获卵数的增加,卵泡液中IGF－1水平显著升高（ P＜0.05）;而卵泡液IGFBP－3水平则随着获卵数的增加显著降低（ P＜0.05）。高质量胚胎比≥0.5者的卵泡液IGF－1浓度较＜0.5者显著升高（P＜0.05）,而高质量胚胎比≥0.5者的IGFBP－3浓度较高质量胚胎比＜0.5者显著降低（P＜0.01）。妊娠者卵泡液IGF－1水平显著高于未妊娠者（P＜0.01）,而妊娠者IGFBP－3水平显著低于未妊娠者（P＜0.05）。结论在超促排卵周期中,IGF－1和IGFBP－3参与调节卵泡发育并影响胚胎质量。 IGF－1和IGFBP－3的浓度可以作为IVF结局的预测指标。     

体外受精妇女排卵时卵泡液中白血病抑制因子的变化及其意义

目的检测体外受精妇女排卵时卵泡液中白血病抑制因子(IIF)的水平,探讨其与卵泡发育及排卵的关系.方法应用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测45例体外受精妇女排卵时卵泡液和外周血中LIF的水平.结果①排卵时卵泡液中的LIF浓度(22.77±14.11)ng/L高于外周血中的浓度(3.20±1.25)ng/L(P<0.001).②成熟卵细胞的卵泡液中LIF的浓度(31.3±15.90)ng/L高于成熟前卵细胞的卵泡液中的浓度(11     

体外受精周期中血清和卵泡液活性氧及总抗氧化能力的研究

目的探讨体外受精(IVF)周期中血清和卵泡液活性氧(ROS)及总抗氧化能力(TAC)的变化特征。方法选择进行IVF助孕的患者共245个周期,分别收集卵泡刺激前基础状态血清和取卵日血清及排卵期卵泡液,检测ROS和TAC,并分析其与相关临床特征之间的相关性。结果基础状态血清ROS值平均为(59.8±54.6)cps,取卵日血清ROS值平均为(77.5±62.3)cps,差异具有统计学意义(P<0.05);但TAC差异无统计学意义(P>0.05)。卵泡液ROS与取卵日血清ROS、卵泡液TAC与基础状态血清TAC及取卵日TAC均呈正相关(P<0.05)。卵泡液ROS和TAC水平与患者年龄、雌二醇(E2)峰值、获卵数、峰值E2/获卵数及受精率等均无相关性,仅ROS与患者体质量指数(BMI)呈正相关(r=0.29,P=0.04)。BMI<19 kg/m2组与BMI为23～25 kg/m2组及BMI>25 kg/m2组的患者相比,卵泡液ROS显著降低(P<0.05)。结论排卵期血清ROS较早卵泡期升高,卵泡液ROS与BMI呈正相关。     

脱氢表雄酮对卵巢储备功能减退患者IVF结局及卵泡液GDF-9、BMP-15的影响

目的 探讨脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA)对卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve, DOR)患者的卵巢功能、卵泡液中生长分化因子-9(growth differentiation factor-9, GDF-9)、骨形态发生蛋白-15(bone morphogenetic protein-15, BMP-15)浓度及体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer, IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法 采用历史性队列研究,共纳入163例行IVF/ICSI-ET助孕的DOR患者,根据预处理方案分为DHEA组和对照组。比较两组患者基础内分泌水平、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)、窦卵泡数(antral follicle counts, AFC)、促性腺激素(gonadotropin, Gn)总量、Gn使用天数、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日激素浓度和子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵数、受精率、优胚率、胚胎种植率及临床妊娠率。比较两组患者卵泡液GDF-9、BMP-15浓度,并将其与卵巢储备功能指标进行相关性分析。结果 DHEA预处理前两组基础内分泌、AMH、AFC差异均无统计学意义(P>0.05),预处理后,DHEA组基础卵泡刺激素(basal follicle stimulating hormone, bFSH)降低、AFC增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Gn总量、Gn天数、hCG日激素浓度、hCG日子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵数、受精率、优胚率、胚胎种植率、临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。DHEA组卵泡液中BMP-15浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),GDF-9差异无统计学意义(P>0.05)。双侧Pearson相关系数分析显示卵泡液BMP-15表达与基础雌二醇(estradiol,E₂)呈正相关。结论 DHEA可通过增加AFC和下调FSH改善DOR患者的卵巢储备功能并提高卵泡液BMP-15的浓度。     

布舍瑞林(Buserelin)在体外受精中应用及对排卵前卵泡液类固醇的影响

从外周血及卵泡液中的激素水平评估两种不同超排卵方案在体外受精与胚胎移植中的作用。采用枸橼酸氯(?)酚胺(枸檬酸克罗米芬,clomiPhen citrate,CC)、人更年期促性腺激素(HMG)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)进行联合(CHh)超排卵13例,采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)的制剂布舍瑞林(buserelin)结合HMG/hCG(BHh)者11例。过早LH峰发生率CHh组为3/13,BHh组为0/11。BHh组妊娠4例,CHh组1例。卵泡液中黄体酮(P)及雌二醇(E_2)浓度,P/E_2 比值BHh组均低于CHh组。P/E_2比值在一定范围内对卵子受精有利。     

辅助生殖技术中发生枯萎卵的影响因素

目的 探究辅助生殖技术(ART)妊娠妇女中枯萎卵的发生率和影响因素.方法 回顾性分析2012年1月~2015年12月在南方医科大学南方医院生殖中心行体外受精-胚胎移植临床妊娠共2378例,包括早期胚胎停育和同期单胎活产,其中胚胎停育根据有无胎芽分为胎芽组和枯萎卵组.比较枯萎卵组、胎芽组和活产组3组间基本信息,如女方年龄、男方年龄、体质量指数(BMI)、基础窦卵泡数(AFC)、基础卵泡刺激素(bFSH)、bFSH/bLH比值、不孕年限、促性腺激素(Gn)用量及Gn天数、人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日雌二醇值、移植日内膜厚度、获卵数、移植优胚率、移植后10~14 d血清β-hCG值、不孕类型和流产次数,以及不同移植周期、胚胎类型、不孕因素、受精方式间枯萎卵发生率的比较.结果 枯萎卵组的双方年龄、BMI、不孕年限、不孕类型、流产次数和活产组有显著性差异;β-hCG在枯萎卵组<胎芽组<活产组(P=0.000);囊胚移植较卵裂期胚胎显著增加枯萎卵的发生率(11.6%vs 5.6%,P=0.000);3组间其他参数无统计学差异(P>0.05);经多因素Logistic回归分析,女方年龄、β-hCG和囊胚移植是枯萎卵发生的危险因素.结论 女方高龄、血清β-hCG下降和囊胚移植增加枯萎卵发生的风险,枯萎卵的发生可能和早期胚胎发育的基因印记错误有关.     

卵泡液中VEGF水平对卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)周期中血管内皮生长因子(VEGF)水平与卵母细胞成熟及早期胚胎质量的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测78例接受IVF和ICSI助孕治疗的患者采卵日卵泡液中VEGF的水平,实验室观察同一卵泡腔内对应的卵母细胞的成熟度及其受精后胚胎发育情况,并结合临床上患者的年龄、促排卵方案等情况,分析两者之间的关联。结果:①卵泡液中VEGF的水平与卵母细胞成熟度研究表明:中间型及成熟型卵母细胞与未成熟型比较,差异有显著性(P<0.05),而其它型之间差异没有显著性差异(P>0.05)。②卵泡液中VEGF的水平与早期胚胎发育研究表明:优质胚胎(Ⅰ、Ⅱ级)与非优质胚胎(Ⅲ、Ⅳ级)差异有显著性(P<0.05)。③卵母细胞成熟度处于中间型和成熟型组,年龄>35岁接受治疗的患者卵泡液中VEGF水平相比于年龄低于35岁的患者,差异有显著性(P<0.05)。结论:①卵泡液中VEGF浓度在一定范围内对卵母细胞成熟有促进作用,可作为评估卵母细胞质量、胚胎质量的有效指标之一。②在IVF和ICSI周期中,卵泡液中VEGF的水平可以作为筛选优质卵母细胞质量的参考指标,并可以作为指导及预测妊娠结局的有效指标之一,但是要注意患者年龄的因素。     

Follicular development, oocyte maturity and fertilization in vitro.

Forty-four infertile women in 44 cycles were stimulated by CC/hMG/hCG (39 cycles) and by CC/hCG (5 cycles) for the purpose of in vitro fertilization (IVF, 37 cases with 35 transfers) and gamete intrafallopian transfer (GIFT, 7 cases). Intraoperative ovum pick-up was performed 32-36 hours after hCG injection. Blood E2 and P levels were determined. Blood E2 was found to be proportional to the number of mature and intermediate oocytes obtained, and correlated with the number of follicles (greater than 10 mm) and the total follicular fluid volume. Altogether 213 follicles aspirated were analyzed. There was a highly significant linear correlation (r = 0.72, P less than 0.01) between the follicular diameter (X cm) on the operation day and the aspirated follicular fluid volume (FFV, Y). The equation of the line was Y = 3.8 X-4.4. The higher concentrations of follicular E2, P, FSH, LH and lower T concentration were crucial to the maturing process of oocytes. It was found that mature oocytes could be retrieved from 26.5% of the small follicles, so it is worthwhile to aspirate the small ones. The fertilization rate was much higher with the mature oocytes than the immature ones. But the morphologically mature oocytes might function differently, i.e. the mature oocytes retrieved from the small follicles or from follicles with unbalanced hormonal microenvironment usually give a low fertilization rate.

     

非肥胖多囊卵巢综合征不孕患者瘦素mRNA和蛋白表达的对照研究

目的探讨非肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者黄素化颗粒细胞瘦素mRNA的表达和血清、卵泡液瘦素水平。方法对超促排卵条件下16例非肥胖PCOS不孕患者和24名正常对照进行研究。采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)半定量测定卵巢黄素化颗粒细胞瘦素mRNA的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清和卵泡液中瘦素蛋白水平的表达。结果(1)两组对象的卵巢黄素化颗粒细胞上均有瘦素mRNA的表达,但表达量差异无统计学意义(P>005)。(2)两组对象血清瘦素、卵泡液瘦素水平比较,差异均无统计学意义(均P>005)。(3)PCOS组患者血清瘦素与卵泡液瘦素水平比较,差异无统计学意义(P>005);对照组血清瘦素与卵泡液瘦素水平比较,差异也无统计学意义(P>005)。(4)两组对象中卵泡液瘦素水平均与血清瘦素水平显著正相关(PCOS组rs=0838,P=0000;对照组rs=0837,P=0000),血清瘦素水平均与体重指数显著正相关(PCOS组rs=0665,P=0005;对照组rs=0712,P=0000);(5)两组对象中卵巢黄素化颗粒细胞瘦素mRNA表达与卵泡液瘦素水平均无相关性(均P>005)。结论非肥胖PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞有瘦素mRNA的表达,其表达量无异常;非肥胖PCOS患者血清、卵泡液瘦素水平与正常妇女类似,血清瘦素主要来源于脂肪组织,卵泡液瘦素水平主要取决于循环瘦素水平。     

颗粒细胞氧化应激及凋亡对IVF-ET结局的影响

目的：研究颗粒细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平及凋亡对IVF-ET结局的影响。方法：选取51名首次行IVF-ET的输卵管性因素不孕患者。用GnRH-a长方案超促排卵治疗,密度梯度离心法分离卵泡液中颗粒细胞,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,化学发光法测定SOD水平,流式细胞仪法测定凋亡率。结果：妊娠组与未妊娠组相比有较低的MDA水平和凋亡率,较高的优胚率,差异有统计学意义（P<0.05）。MDA与受精率呈中度负相关（r=-0.425,P=0.002）,与获卵数、成熟卵子数、卵裂率、优胚率无明显相关关系;SOD与之均无相关关系;凋亡率与获卵数(r=-286,P=0.042)、成熟卵子数(r=-0.330,P=0.020)、优胚率(r=-0.311,P=0.026)呈低度负相关。MDA与SOD呈中度负相关(r=-0.471,P<0.001);与凋亡率呈中度正相关(r=0.475,P<0.001)。结论：氧化应激可能导致卵巢颗粒细胞凋亡,进而影响卵子的发育潜能及IVF-ET的结局。