家蝇三龄幼虫血细胞形态的观察

目的通过姬氏染色法以便观察家蝇三龄幼虫的各种血细胞形态。方法取家蝇三龄幼虫血淋巴制作血涂片,姬氏染液染色,油镜观察。结果染色效果良好,家蝇三龄幼虫的各种血细胞结构清晰。可分为原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞、类绛血胞5种。其中浆血胞可分为大核浆血胞和小核浆血胞两种。结论家蝇三龄幼虫血细胞分为5种。     

感染大肠杆菌后家蝇幼虫血淋巴细胞的观察

目的 探讨家蝇三龄幼虫被大肠杆菌感染后的细胞免疫反应.方法 观察家蝇三龄幼虫感染大肠杆菌后4、8、16及24 h血淋巴细胞总数(THC)及各类血细胞数量(DHC)的变化.观察大肠杆菌感染后家蝇幼虫血细胞形态的变化.结果 ①与对照组比较,感染4、8、16、24 h组THC均有显著增加(P<0.01);感染后各时间组的浆血胞和粒血胞数均显著升高(P<0.01);感染后16、24 h组的珠血胞数显著升高(P<0.01);各时间组的原血胞和类绛血胞数量无明显变化(P>0.05).②感染后4、8、16 h组的浆血胞和粒血胞的比例明显增加(P<0.01),感染后各时间组的珠血胞的比例均明显减少(P<0.01),各时间组原血胞和类绛血胞的比例均无明显变化(P>0.05).③感染大肠杆菌后,浆血胞发生空泡、细胞变形等变化.结论 家蝇幼虫感染大肠杆菌后在体内诱发的细胞免疫反应表现为血淋巴细胞数量、分类及形态出现变化,其中浆血胞和粒血胞两类细胞是免疫反应的主要参与者,珠血胞也可能参与细胞免疫反应.     

滞育家蝇幼虫糖的变化

目的观察家蝇幼虫滞育前后血淋巴中总糖、海藻糖、糖原的变化,探讨家蝇幼虫滞育发生的生化机制。方法低温诱导家蝇幼虫滞育,用蒽酮比色法测定滞育10d、15d、20d组及非滞育组血淋巴总糖、海藻糖、糖原的含量。结果滞育组与非滞育组比较,(1)家蝇幼虫血淋巴总糖含量滞育10d组显著升高,15d组、20d组则降低。(2)血淋巴海藻糖含量滞育10d组、20d组明显升高,15d组差异无显著性。(3)血淋巴糖原含量滞育10d组、15d组降低,20d组则升高。结论家蝇滞育幼虫的糖醇积累型属于海藻糖积累型。     

家蝇幼虫血淋巴抗白念珠菌作用的初步研究

目的 :用微量液体培养生长抑制法检测家蝇幼虫血淋巴的抗白念珠菌活性。方法 :用大肠杆菌接种家蝇 3期幼虫 ,收集接种后不同时间血淋巴 ,设立空白对照、药物对照和蛋白酶K对照组 ,检测血淋巴和血淋巴 80℃ 5min去粗蛋白后提取多肽对 3株白念珠菌的抗菌活性。结果 :大肠杆菌诱导 2 4h后血淋巴出现抗白念珠菌活性 ,能被水解蛋白酶灭活 ,去粗蛋白后仍有活性 ,对氟康唑敏感株及耐药株白念珠菌均有抑制作用。结论 :大肠杆菌可诱导家蝇幼虫血淋巴产生抗白念珠菌多肽。家蝇幼虫血淋巴抗白念珠菌作用的初步研究@吴建伟$贵阳医学院寄生虫学教研室!贵…     

猪粪饲养家蝇幼虫的营养成分研究

目的 :分析猪粪饲养家蝇 (Muscadomestica)幼虫的营养成分。方法 :引种野生家蝇 ,用猪粪饲养幼虫 ,收获 3期老熟幼虫 ,测定粗蛋白、粗脂肪、氨基酸和脂肪酸构成及微量元素含量 ,用粮食与农业组织 世界卫生组织 (FAO WHO)提出的参考蛋白模式评价 ,并与麦麸饲养的幼虫及鱼粉比较。结果 :每公斤猪粪平均可产(0 13± 0 0 4)～ (0 2 0± 0 12 )kg鲜蛆 ,鲜蛆烘干比为 1∶0 31± 0 12 ,粗蛋白 42 36 %～ 5 2 33 % ,必须氨基酸含量占总氨基酸的 45 10 % (E % ) ,必须氨基酸与非必需氨基酸总量的比值 (E/N)为 0 82 ,E % /T为 3 0 1,脂肪酸含量为 13 73 %～ 16 83 % ,油酸、亚油酸及亚麻酸等必需脂肪酸分别为 36 99% ,7 6 1%和 0 35 % ,Fe 2 91 5mg/kg ,Cu 87 5 5mg/kg ,Zn 2 46 8mg/kg ,Mn 2 49 45mg/kg ,比麦麸饲养幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉。结论 :猪粪饲养的家蝇幼虫比麦麸饲养的幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉     

家蝇幼虫营养价值及抗病毒活性的初步研究

目的：为在贵阳地区建立畜禽粪便养殖家蝇生产蝇蛆动物蛋白提供实验室数据，并观察用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡的效果及经济效益，确定家蝇组织匀浆液的抗病毒活性。方法：（1）在相同的实验室饲养环境下，观察人工饲料、猪粪饲养的家蝇幼虫体内脂肪酸及微量元素含量的区别；（2）用蝇蛆粉或鲜蝇代替鱼粉饲养蛋鸡，观察对蛋质的影响；（3）用鸡胚法检测蝇蛆组织匀浆液的抗病毒活性。结果：用猪粪饲养的蝇蛆体内所含的微量元素（Ca、Fe、Cu、Zn、Se)高于用人工饲料饲养的蝇蛆（P＜0．05）；用蝇蛆粉或鲜蝇代替鱼粉饲养蛋鸡，蛋内的脂肪酸及微量元素含量无明显改变（P＞0．05）；蝇蛆组织匀浆液中有抗病毒活性物质存在，性质尚待进一步确定。结论：用猪粪饲养家蝇不仅可以生产出优质的蝇蛆蛋白，还可以节约开支，净化环境及生产大量的优质生物肥；用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡不会影响鸡蛋的质量，蝇蛆生产周期短、经济、简单易行；蝇蛆组织匀浆液中存在抗病毒的活性物质，为抗病毒药物的寻找开辟了新的路径。     

两种提取家蝇幼虫血淋巴方法的比较

目的:对剪头法和瞬时破壁法提取的家蝇幼虫血淋巴粗提液进行蛋白浓度和SDS-PAGE分析比较.方法:分别采用剪头法和瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴粗提液,同时设立未诱导组和热诱导组,测定各组的蛋白浓度进行比较分析,并对各组血淋巴粗提液进行SDS-PAGE的分析比较.结果:剪头法热诱导组的血淋巴粗提液蛋白浓度高于未诱导组,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白浓度高于剪头法;经SDS-PAGE分析,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白条带明显多于剪头法.结论:瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴简便易行,所提取的血淋巴蛋白成分多于剪头法.     

温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响

目的探讨温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响。方法将家蝇卵置于不同温度和光周期下饲养,观察幼虫发育至蛹的时间。结果随着温度的降低,幼虫滞育期延长;随着温度的升高,滞育幼虫发育为蛹的时间缩短,15℃为最佳滞育温度。光周期对幼虫滞育的影响不大。结论温度对家蝇幼虫滞育的维持和终止有重要作用。高温可解除家蝇幼虫的滞育。光周期对家蝇幼虫滞育的影响不大。     

家蝇幼虫抗菌肽Defensins基因的克隆与序列分析

目的：克隆家蝇幼虫的抗菌肽defensins基因并对其进行序列分析。方法：提取家蝇幼虫总RNA，根据家蝇成虫defensins基因cDNA序列设计一对引物，RT-PCR扩增目的基因片段，T-A克隆后测序，应用相关生物信息学软件对该序列进行分析。结果：RT—PCR扩增出一条约310bp的目的片段，序列分析表明，其与家蝇成虫防御素基因同源性高达97％，核酸序列变异主要发生在信号肽区域。结论：成功克隆及分析了家蝇幼虫防御素基因全长编码区cDNA序列，为其下一步的重组表达和生物活性研究奠定了基础。     

家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响

目的：观察家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响。方法：从培养家蝇幼虫的猪粪中提取幼虫分泌物，制成虫卵培养液，观察培养液中猪蛔虫卵发育情况。同时，设立未培养家蝇幼虫的猪粪为阴性对照组。结果：实验组蛔虫卵的发育率较对照组低，两者比较差异有显著性（P＜0．05）。结论：家蝇幼虫的分泌物中可能含有阻碍蛔虫卵发育的物质。     

房山区家蝇抗药性检测结果

目的为了解掌握房山区家蝇对常见杀虫剂的抗药性,为科学合理使用杀虫剂提供依据。方法玻瓶药膜法。结果2007年房山区家蝇对0.05%残杀威、0.05%高效氯氰菊酯的LD50为3.39、0.09,抗性系数为1784.21,186.54。结论家蝇对0.05%残杀威的抗性高于0.05%高效氯氰菊酯。应根据抗药性检测结果,科学合理使用杀虫剂,提倡综合防制。     

天津市北辰家蝇抗药性调查

目的了解天津北辰区家蝇抗药性情况,指导合理使用杀虫剂。方法用点滴法测定家蝇半数致死量(LD50)。结果北辰区家蝇对5种常用杀虫剂的LD50依次为敌敌畏0.0 530μg/只、高效氯氰菊酯0.0 310μg/只、溴氰菊酯0.0217μg/只、残杀威0.1 902μg/只、氯菊酯0.0 262μg/只。与敏感试虫相比,R/S值敌敌畏为10.0倍、高效氯氰菊酯为50.82倍、溴氰菊酯为22.85倍、残杀威为3.30倍、氯菊酯为2.34倍。结论北辰区野外家蝇对5种常见杀虫剂均产生不同程度的抗药性,以高效氯氰菊酯和溴氰菊酯最为著。建议加强抗药性监测,科学合理用药,采取综合防治措施,减缓抗药性的发展。     

北京市海淀区家蝇对5种杀虫剂的抗性测定和分析

目的了解北京市海淀区现场品系家蝇对5种常用杀虫剂的抗性水平,为合理选择用药提供依据。方法采用点滴法测定抗性水平。结果现场品系家蝇对溴氰菊酯、氯氰菊酯、毒死蜱、乙酰甲胺磷和残杀威的抗性系数分别为40.10,46.48,10.36,15.33和5.43。结论北京市海淀区现场品系家蝇对5种杀虫剂均产生了明显的抗性,但抗性的程度不同,从高到低依次为:氯氰菊酯、溴氰菊酯、乙酰甲胺磷、毒死蜱和残杀威。     

家蝇幼虫Defensin成熟蛋白序列的克隆及在原核中的表达

目的 克隆家蝇幼虫defensin成熟蛋白编码序列并在大肠杆菌中表达，为进一步的研究该基因的功能奠定基础。方法 以家蝇幼虫cDNA文库为模板扩增出defensin基因的成熟蛋白全长编码序列，构建重组原核表达载体pGEX／MDEF，转化的克隆(质粒)通过筛选并测序鉴定。重组的pGEX／MDEF在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，SDS-PAGE鉴定其表达情况和分子质量并用抗鼠GST单抗作western blot杂交进一步鉴定融合蛋白的表达。结果 以家蝇幼虫cDNA文库扩增出一条长约为140bp的cDNA片段，经测序证实其为defensin基因成熟蛋白的编码序列，它编码含40个氨基酸的蛋白质，预测其分子质量单位为4kD。被成功克隆入pGEX-4T-1载体的家蝇幼虫defensin基因的cDNA，在重组大肠杆菌BL21(DE3)中诱导可大量生成相对分子质量30KD融合蛋白。结论 成功构建了家蝇幼虫defensin基因原核表达载体，且其成熟蛋白的编码序列在大肠杆菌高效表达。为下一步表达蛋白纯化，以及研究其生物活性提供了材料。     

三种家蝇酚氧化酶基因表达差异研究

目的进行不同品系家蝇酚氧化酶基因表达量差异的分析研究。方法根据酚氧化酶基因序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在家蝇抗性品系、敏感品系、现场采集品系家蝇体内酚氧化酶的表达水平差异。结果酚氧化酶基因在抗性品系蝇体内的表达量是敏感品系的13.38倍,现场品系是敏感品系的6.24倍。结论家蝇酚氧化酶基因可作为新的抗性检测及治理基因靶标。     

家蝇幼虫组织匀浆液抗病毒活性的研究

目的 探索家蝇组织匀浆液的抗病毒作用。方法 用鸡胚法检测经针刺或冷冻免疫诱导及同期对照家蝇幼虫组织匀浆液的抗病毒活性。结果 家蝇幼虫组织匀浆液中有抗病毒活性物质存在,针刺或冷冻组抗病毒物质的活性高于同期对照组。结论 家蝇幼虫组织匀浆液中抗病毒活性物质的性质尚待进一步确定。研究结果为抗病毒药物的寻找开辟了新的路径。     

大肠杆菌诱导家蝇抗菌物质的研究

目的　对家蝇体内的抗菌物质进行研究。方法　用大肠杆菌诱导家蝇三龄幼虫 ,采用抑菌圈法 ,对家蝇体内抗菌物质的诱导效果及其活性进行研究。以SDS PAGE法分离家蝇的抗菌蛋白。结果　诱导产生的家蝇抗菌物质其活力高峰出现于第 48h。诱导后第 48h血淋巴稀释 10 0倍 ,对大肠杆菌的致死率仍达 12 % ;其抗菌物质对动、植物病原菌有广谱的抗菌活性 ,同时 ,未经诱导的家蝇幼虫也具有抗菌活性。SDS PAGE电泳分析表明 ,外源诱导能增强原有抗菌物质的表达量 ,并能激活新的蛋白产生。结论　为进一步纯化和生化分析家蝇体内的抗菌蛋白提供了新的依据。