一种新的抗肿瘤物质:7-恶二环(2,2,1)-5-庾烯-2,3-二羟酐

在随机选择和测定其抗肿瘤活性的多种化合物中,一凡们发现7-恶二环(2,2,1)-5-庾烯-2,3-二羟酐[7-oxabicycIo(2,2,1)-5-heptene-2,3-dicarboxylic anhydride,OHD)对实验性的艾氏腹水癌细胞(EAC)具有很强的抗肿瘤活性.1970年,Riley 和Rerkam 报道随     

血红素氧合酶-1对人肝癌SMMC-7721细胞5-FU化疗敏感性的影响

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对人肝癌SMMC-7721细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响及其可能的机制.方法:应用不同浓度锌原卟啉(ZnPP)、氯化血红素(Hemin)单独或联合5-FU作用于人肝癌SMMC-7721细胞不同时间,MTT法观察药物对细胞生长抑制作用;蛋白质印迹法分析细胞HO-1蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Caspase-3活性检测试荆盒分析其凋亡机制.结果:ZnPP和5-FU均可明显抑制SMMC-7721细胞生长,呈剂量依赖性.5-FU联用ZnPP(20 μmol/L)显著增加细胞生长抑制率和凋亡率,P=0.000;而联用Hemin(10/μmol/L)显著降低细胞生长抑制率和凋亡率,P=0.000.SMMC-7721细胞中可见HO-1表达,应用Hemin和5-FU均能使其表达增强,联用ZnPP可逆转此现象.应用5-FU细胞内Caspase-3活性明显增高,约0.553±0.024,P=0.000;联用znPP后可进一步提高细胞内Caspase-3活性,达1.190±0.091,P=0.000.而联用Hemin后细胞内Caspase-3活性水平显著降低,约0.321±0.024,P=0.000.结论:阻断HO-1的表达可增强人肝癌SMMC-7721细胞对5-FU化疗敏感性,而诱导HO-1表达则降低人肝癌SMMC-7721细胞时5-FU化疗敏感性,这一作用机制可能与影响细胞Caspase-3活性有关.     

转染IkBα基因抑制NF-KB活性对A549细胞侵袭行为的影响

背景与目的:近年来的研究显示核因子-KB(nuclear factor-kB, NF-kB)的活化能够调节肿瘤细胞的侵袭和转移.本研究探讨抑制NF-kB的活性对A549细胞侵袭能力的影响及其可能的机制.方法:构建表达NF-kB抑制物a同分异构体(inhibitor of NF-kB, α isoform, IkBα)的真核表达重组质粒pcDNA3.1( )/IkBα.体外培养A549细胞,分为未转染组(不转染质粒)、转染pcDNA3.1( )组、转染pcDNA3.1( )/IkBα组,分别转染相应的质粒.应用RT-PCR、Western blot检测各组细胞IkBα的表达情况,应用凝胶电泳迁移率改变实验(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)检测各组细胞NF-kB的活性,应用Transwell侵袭小室检测各组细胞的侵袭能力,应用RT-PCR方法检测各组细胞MMP-2、MMP-9的mRNA水平,应用明胶酶谱法检测各组细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的活性.结果:酶切鉴定结果显示pcDNA3.1( )/IkBα质粒构建成功.RT-PCR和Western blot检测结果表明构建的pcDNA3.1( )/IkBα质粒能够在A549细胞中表达IkBα.转染pcDNA3.1( )/IkBα组A549细胞NF-kB活性、侵袭细胞数目、MMP-2活性及MMP-9活性均低于未转染组和转染pcDNA3.1( )组(P值均<0.05),而转染pcDNA3.1( )组与未转染组之间的差异均无统计学意义(P值均>0.05).结论:转染IkBα基因能够抑制A549细胞中NF-KB的活性.NF-kB的活性下降能够抑制A549细胞的侵袭能力,其机制可能与MMP-2、MMP-9表达下调有关.     

人体肿瘤共同抗原对肿瘤诊断的研究

本研究应用活性玫瑰花形成试验(A-Rosette)来鉴定肿瘤抗原的存在,并探讨其对人体肿瘤诊断的价值。 一、材料与方法 (一)肿瘤共同抗原的抽提:1.标本 胃癌三个,贲门癌两个,肺癌一个,结肠癌一个。2.制备肿瘤共同抗原的方法 外科手术切下的人体肿瘤组织,立即放入-30℃以下的低温冰箱中保藏。抽提时用     

CPT-11临床应用进展

CPT-11（盐酸伊立替康）是一种半合成的可溶性喜树碱类衍生物,主要作用于细胞周期的S期,通过抑制拓扑异构酶I,干扰DNA复制和细胞分裂。在体内经羧酸酯酶的催化作用,代谢成活性产物7-乙基-10-羟基喜树碱（SN-38）,其抗癌活性为前者的100—1000倍。目前临床上应用广泛,现对其应用进展作一综述。     

COMT活性与子宫内膜癌发生和发展相关

目的:探讨儿茶酚氧位甲基转移酶( catechol-O-methyltransferase,COMT)的活性与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法:建立体外反应体系,以3,4-二羟基苯甲酸(3,4-dihydroxybenzoic acid,DBA)为底物,采用反相高效液相色谱法检测终反应产物4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid,4-OH-3-MBA)的浓度,以此反映COMT的活性.应用此方法检测子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织(对照组)及待检者外周血中COMT活性,并比较子宫内膜癌组和对照组患者中COMT的活性差异.结果:可溶性COMT( soluble-COMT,S-COMT)是子宫内膜组织中COMT的主要活性形式,子宫内膜组织中S-COMT活性明显高于外周血中S-COMT的活性(P=0.000)；子宫内膜癌组织中S-COMT的活性明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.001).低分化的子宫内膜癌组织中S-COMT的活性明显低于高、中分化的子宫内膜癌组织,差异有统计学意义(P=0.042).结论:人子宫内膜组织中COMT的活性改变可能与子宫内膜癌的发生、发展有关.     

LCRG1基因5''端调控区域的克隆及活性测定

背景与目的:LCRG1基因的调控机制至今不清楚, 本研究拟克隆LCRG1基因的转录起始区上游序列, 寻找与其表达有关的调控序列.方法:利用生物信息学技术预测LCRG1基因5′端调控区域的启动子活性区域,采用PCR方法从人基因组DNA中扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776 kb(-1 191 bp～ 585 bp)片段,并将其构建到荧光素酶报告基因pGL3 basic载体中.与内参照质粒PhRL-SV40共转染COS7细胞,通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性.结果:成功扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776 kb(-1 191 bp～ 585 bp)片段,测序正确; pGL3-1776启动子活性大约为阳性对照组pGL3-control的0.16倍,为阴性组pGL3 basic 的35倍.结论:成功克隆LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191 bp～ 585 bp),该片段具有启动子活性.     

IL-2和IL-12基因联合治疗小鼠头颈鳞癌的实验研究

目的观察白细胞介素-2(IL-2)基因与白细胞介素-12(IL-12)基因联合治疗小鼠头颈鳞癌的疗效. 方法建立小鼠头颈鳞癌动物模型,在荷瘤部位将脂质体包裹的IL-2基因和IL-12基因直接注入肿瘤中,观察肿瘤大小变化,并检测此两种基因在肿瘤细胞中的蛋白表达情况、小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)和细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性. 结果 IL-2基因和IL-12基因联合治疗组,肿瘤生长明显受抑制,疗效显著优于单独治疗组和对照组(P<0.01).在注射有IL-2、IL-12基因的肿瘤组织中,其相对应的IL-2、IL- 12蛋白水平明显升高,小鼠脾细胞NK活性和CTL杀伤活性增强. 结论 IL-2、IL-12基因治疗可抑制小鼠头颈鳞癌生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答.二者联合应用,可产生协同效应并加强其抗肿瘤效果.     

放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达和功能的影响

[目的]研究放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的表达和功能的影响.[方法]随机抽取8例恶性肿瘤患者并取其治疗前后的红细胞,应用Cl-荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)检测其治疗前后红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,并通过Westernblot检定治疗前后带3蛋白表达量的变化.[结果]8例恶性肿瘤患者放疗后红细胞膜带3蛋白的离子转运活性均明显减弱,其中6例患者红细胞膜带3蛋白表达减少.[结论]带3蛋白的表达和功能与肿瘤细胞的增殖和凋亡相关.     

survivin在他莫昔芬抑制肝癌HepG2细胞增殖和诱导凋亡中的作用

已有文献报道,他莫昔芬通过雌激素受体(ER)-α独立的信号通路发挥作用[1],其发挥抗增殖作用可能与钙离子内流增加、活性氧产生和(或)抑制蛋白激酶C活性有关[2-4].最近的研究表明,他莫昔芬对肿瘤细胞的生长抑制活性与细胞凋亡有关.     

鼠白细胞介素-12质粒联合小剂量环磷酰胺对荷瘤小鼠NK及巨噬细胞功能的影响

目的探讨联合应用鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒(pCmIL-12)和小剂量环磷酰胺(CTX)治疗小鼠黑色素瘤的效果以及对NK和巨噬细胞功能的影响.方法荷瘤小鼠经肌注pCmIL-12和皮下注射CTX后,观察肿瘤大小,测定小鼠NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及NO释放量.结果肿瘤重量、NK和巨噬细胞杀伤活性及NO释放量的结果提示pCmIL-12与CTX合用具有交互(协同)作用.结论联合应用pCmIL-12质粒和小剂量环磷酰胺有较明显的抑瘤作用,并可增强荷瘤小鼠NK及巨噬细胞的功能.     

高三尖杉酯碱诱导鼻咽癌细胞的CNE—2Z凋亡过程中Caspase—6、—8的活性变化

目的了解高三尖杉酯碱(HHT)诱导CNE-2Z细胞凋亡过程中Caspase-6、-8的活性变化.方法用不同浓度(0.125、0.25、0.5、1μg/ml)的HHT分别处理CNE-2Z细胞1、2、4、8、12、24h,用比色法检测其Caspase-6、-8的活性(A405mm表示).结果1μg/ml HHT处理CNE-2Z细胞1h即可见Caspase-8活性明显高于两个对照组(未处理组和抑制剂+药物处理组,P＜0.01),2h达高峰.而Caspase-6的活性在4h开始升高,12h达高峰,24h仍明显高于对照组(P＜0.01).不同浓度的HHT处理CNE-2Z细胞,Caspase-6在12h、Caspase-8在2h时均可见它们的活性明显高于两个对照组(P＜0.01),且随HHT浓度的增加而活性增强.结论Caspase-6、-8参与了HHT诱导的CNE-2Z细胞凋亡,且其活性升高有时间和浓度依赖性.     

茶多酚干预信号转导通路的研究进展

芬多酚可干预以激活蛋白质-1(AP-1)和核转录因子-κB(NF-κB)为主的信号转导通路.茶多酚通过JNK通路抑制促癌物诱导的AP-1活性;通过降低抑制蛋白IκB磷酸化来调节NF-κB的活性.荼多酚选择性地阻断肿瘤细胞信号转导通路,从而破坏肿瘤控制性生长调节机制,为其抗癌机制研究开拓新的思路.     

过继免疫疗法(AIT)与羟基喜树碱(HCPT)序贯应用治疗膀胱癌的实验研究

目的了解过继免疫疗法(AIT)与羟基喜树碱(HCPT)序贯应用对膀胱肿瘤的作用.方法体外实验测定TIL及TIL与HCPT联合应用对不同靶细胞的杀伤活性,体内实验了解不同治疗方法对小鼠膀胱肿瘤的治疗效果.结果TIL对同种异体膀胱肿瘤细胞有强大的杀伤活性,对正常组织细胞无毒性,TIL与HCPT联合应用对肿瘤细胞的杀伤毒性低于单独应用时的杀伤活性.体内实验说明同时应用TIL及HCPT无明显疗效,而合理联合应用即序贯疗法有强大的抗癌作用.结论通过本实验说明过继免疫疗法与HCPT序贯应用才能起到抗癌作用,其可能机理是序贯疗法充分发挥HCPT化疗作用又不影响TIL的杀伤活性,并且有促进TIL聚积于肿瘤周围的效果.     

树突状细胞对肿瘤浸润性淋巴细胞杀伤自体肝癌细胞活性影响的研究

目的　探讨树突状细胞 (DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞 (TIL )体外对自体肝癌细胞杀伤活性。方法　从肝癌患者外周血获取 DC,应用粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)、白细胞介素 - 4 (IL - 4 )和肿瘤抗原激活 DC,然后用 DC激活 TIL ,观察 TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性。结果　 DC激活的 TIL对自体肝癌细胞具有很高的杀伤活性 ,杀伤率为 (89.39± 3.0 5 ) % ,明显高于未经 DC激活的 TIL、DC激活的 T淋巴细胞和未经 DC激活的 T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率。其杀伤率分别为 (5 5 .2 3± 1.5 3) %、(5 4 .89± 1.4 8) %和 (3.6 5± 0 .2 6 ) %。结论　肝癌患者外周血 DC能诱导 TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫     

脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞NF-κB活性的抑制作用

目的　探讨脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞NF κB活性的抑制作用。方法　用脂肪酸合酶抑制剂(FASI) 浅蓝菌素处理大肠癌LoVo细胞株 ,用凝胶电泳迁移率法 (EMSA)检测NF κB活性。结果　实验分别用不同浓度浅蓝菌素 (10 -9～ 10 -5M )处理LoVo细胞 12h后 ,可抑制NF κB活化 ,其抑制程度呈剂量依赖性递减 ,与对照组相比较浅蓝菌素 (10 -9～ 10 -5M )处理LoVo细胞 12h后NF κB条带扫描像素积分比分别为 0 .787,0 .45 1,0 .379,0 .338,0 .32 2。结论　浅蓝菌素处理人大肠癌LoVo细胞后 ,NF κB活化程度随浅蓝菌素的剂量递增而递减。提示浅蓝菌素对LoVo细胞NF κB活性的具有抑制作用。     

蛋白激酶C-α与KBV200细胞多药耐药相关性的初步研究

目的　探讨蛋白激酶C -α(PKC)与KBV 2 0 0肿瘤细胞多药耐药 (MDR )的关系及其机制。方法　应用3 2 P掺入法检测 2株细胞的PKC活性 ;用Westernblot法检测PKC -α在耐药株KBV 2 0 0及敏感株KB的表达及亚细胞分布 ;流式细胞仪检测PKC -α的荧光强度。结果　KBV 2 0 0细胞的PKC活性较KB细胞明显升高 ,且膜组分PKC活性所占总活性的百分率升高 ;PKC-α亚型的表达选择性升高 ;流式细胞仪检测发现KBV 2 0 0细胞的PKC -α的荧光强度 ( 5 .3 4± 0 .5 6)显著高于KB细胞PKC -α的荧光强度 ( 2 .0 7± 0 .2 1) ,P <0 .0 1。结论　PKC -α与KBV 2 0 0细胞株的MDR表型关系密切 ,PKC -α可能在KBV 2 0 0细胞的MDR表型中起重要作用。     

人肺癌中甲状腺转录因子-1DNA结合活性的意义

背景与目的 甲状腺转录因子-1(TTF-1)是一种细胞核蛋自,在调控肺泡上皮基因表达与活性物质分泌中具有潜在的重要作用.本研究观察在肺癌组织中TTF-1的DNA结合活性,探讨其与肺癌病理类型、分化程度的关系.方法 采用电泳迁移率(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)同位素放射自显影,光密度分析的方法分别检测有随访资料的96例肺癌组织中TTF-1的DNA结合活性.结果 TTF-1 DNA结合活性在腺癌组织其光密度值为172±23.2,高于其它病理类型,其中小细胞癌光密度值为141±16.3,鳞癌光密度值为122±13.6(P＜0.05);在高分化程度肺癌组织中TTF-1 DNA结合活性较高(P＜0.05).TTF-1 DNA结合活性水平与肺癌患者生存情况呈负相关.结论 TTF-1 DNA结合活性在肺癌组织较高;在不同病理类型、分化程度的肺癌组织中,TTF-1的DNA结合活性明显不同,可能在其中起重要作用,可作为肺癌患者转移及生存情况的潜在预测因子.     

核因子-κB活化与结肠直肠癌临床病理关系研究

目的探讨核因子-κB(NF-κB)活化与结肠直肠癌临床病理的关系.方法应用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)检测50例结肠直肠癌、30例结肠直肠腺瘤和20例正常大肠组织NF-κB的结合活性,并结合临床病理学资料评估其相互关系.结果结肠直肠癌和结肠直肠腺瘤分别与正常结肠直肠组织比较,NF-κB结合活性明显增高,差异有显著性(P<0.05);结肠直肠癌和结肠直肠腺瘤比较,NF-κB结合活性差异无显著性(P>0.05).NF-κB的活化与结肠直肠癌患者的性别、病变部位、组织类型、淋巴结转移和Dukes分期均无显著相关(P>0.05).结论结论NF-κB活化与结肠直肠癌的发生有关,可作为结肠直肠癌早期指标之一.     

CIK细胞的特点及临床应用

细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)是一种新型的免疫活性细胞,CIK增殖能力强,细胞毒作用强,具有一定的免疫特性.在基础研究及临床应用中对CIK的探讨不断深入,以期得到更有效的免疫治疗方法,为临床提供依据.现综述CIK细胞的特点及其临床应用.