磷脂酰胆碱拮抗自由基致小鼠微核作用的研究

应用小鼠外周血正染红细胞（ＮＣＥ）微核实验，评价臭氧产生的自由基对细胞遗传毒理效应及其磷脂酰胆碱对其遗传损伤的保护作用。实验结果显示：臭氧可使小鼠ＮＣＥ微核率明显增高（Ｐ＜０．０１），而磷脂酰胆碱对自由基诱导微核作用有明显的抑制。提示磷脂酰胆碱具有拮抗自由基造成的ＤＮＡ氧化损伤作用。     

磷脂对自由基损伤的心肌线粒体的保护和修复作用

报道磷脂类（卵磷脂及心磷脂）对氧自由基损伤的心肌线粒体的保护及修复作用。应用黄嘌呤氧化酶／次黄嘌吟自由基诱生系统作为自由基损伤体系。预先在心肌线粒体系中加入磷脂可以降低自由基引起的心肌线粒体的膨胀，过氧化脂质的堆积，保护细胞色素氧化酶的活力。这可能因为自由基对心肌线粒体的损伤导致了线粒体膜上卵磷脂及心磷脂的破坏。在体系中外加卵磷脂及心磷脂可作为氧化损伤的直接目标，保护了细胞器的正常结构和功能。同时     

肝细胞与肝癌细胞中磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2表达及活性的比较

目的 比较研究原代培养的大鼠肝细胞与大鼠肝癌细胞内磷脂酰乙醇胺Ｎ－甲基转移酶２（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅＮ－ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒｓａｅ２．ＰＥＭＴ２）表达水平和活性,了解ＰＥＭＴ２与细胞生长、增殖的关系。方法 利用免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹方法观察ＰＥＭＴ２蛋白的表达,以「＾３Ｈ－Ｃ 同位素掺入法测定了ＰＥＭＴ２的活性,流式细胞仪分析了两种细胞的细胞周期中ＤＮＡ的     

磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2过表达抑制磷脂酶Cγ1磷酸化及转位

目的探讨转染磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2(PEMT2)基因抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞增殖的机制。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法,观察转染PEMT2基因对大鼠肝癌CBRH 7919细胞磷脂酶C γ 1(PLC γ 1)磷酸化及在细胞内转位的影响;同时观察转染PEMT2基因对肝细胞生长因子受体(c- Met)自身磷酸化活化的影响。结果转染PEMT2后,质膜结合的PLC γ下降,为对照组的45％。膜结合的磷酸化PLC γ 1约为对照组细胞的27％,同时c-Met磷酸化程度显著下降,约为对照组细胞的32％。结论转染PEMT2基因可抑制细胞PLC γ 1磷酸化及由胞浆向质膜转位,抑制c-Met自身磷酸化活化,从而下调CBRH-7919细胞c-Met／PLC γ 1信号转导途经。     

线粒体功能损伤对心肌细胞的影响

心脏是高耗能器官,为了提供足够的三磷酸腺苷,心肌细胞中有大量线粒体。线粒体功能障碍会影响心肌的能量供给和多种细胞活动。该文介绍氧化应激、线粒体动力学失衡、线粒体自噬失调、线粒体膜通透性转换孔异常和线粒体金属离子通道异常对心肌细胞功能的影响。     

油酰乙醇胺对糖尿病大鼠脑内炎性因子及神经相关因子表达的影响

目的探讨油酰乙醇胺(OEA)对糖尿病小鼠脑内炎性和神经营养因子的影响。方法采用高脂高糖加STZ链脲佐菌素(STZ)诱导T2DM小鼠模型,OEA[15、30、60 mg/(kg·d)]连续腹腔注射给药6周,通过Real time-PCR及Western blot检测海马内白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、突触成长相关蛋白-43(GAP-43)、突触素(SYN)、BDNF和NT-3的mRNA和蛋白表达水平。结果糖尿病模型小鼠海马内炎症因子IL-6、IL-1β和TNFα的表达水平下降,并显著上调海马内GAP-43、SYN、BDNF和NT3 mRNA表达水平。结论OEA具有降低糖尿病后海马内炎症,增加海马内突触相关因子和神经营养因子的作用,从而发挥神经保护作用。     

牛磺酸对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响

目的：观察牛磺酸对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响。方法：采用培养的第2代心肌细胞，随机分面4组：（1）正常对照组：仅用DMEM培养；（2）羟自由基组：OH－终浓度为0．1mmol.L^-1；（3）牛左酸组：牛磺酸终浓度为30mmol.L^-1；（4）牛磺酸＋羟自由基组：牛磺酸30mmol.L^-1 OH-0.1mmol.L。观察心肌细胞存活率和形态学，流式细胞仪双标法检测细胞凋亡率。结果：（1）羟自由基组心肌细胞存活率降低，和对照组比较有显性差异（P＜0．05），牛磺酸＋羟自由基组细胞存活率较羟自由基组高（P＜0．05），（2）Annexin V /PI-细胞即凋亡细胞在羟自由基组有较高的发生率，明显高于其他各组（P＜0．05）；牛磺酸＋羟自由基组的细胞凋亡率显低于羟自由基组（P＜0．05），（3）羟自由基组凋亡心肌细胞呈特征性超微结构。结论：牛磺酸能减轻外源性羟自由基诱导的心肌细胞凋亡。     

卡托普利对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响

目的观察卡托普利对由外源性羟自由基诱导的心肌细胞凋亡有无影响。方法①利用第４代心肌细胞,随机分１５组,在终浓度为１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－１ｍｏｌ／Ｌ的羟自由基无血清条件培养下分别共孵育８ｈ、１６ｈ、２４ｈ,确定１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ及２４ｈ为诱导心肌细胞凋亡的最佳浓度及时间。②在上述条件下分别观察３种不同浓度卡托普利（１０＾－７     

卡维地洛对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响

目的 :观察卡维地洛 (Carvedilol)对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响。方法 :采用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 :1.正常对照组 :仅用DMEM培养 ;2 .羟自由基组 :FeSO410 0 μmol·L- 1 +H2 O2 10 0 μmol·L- 1 ;3.卡维地洛组 :卡维地洛终浓度为 1μmol·L- 1 ;4 .卡维地洛 +羟自由基组 :卡维地洛 1μmol·L- 1 +FeSO4 10 0 μmol·L- 1 +H2 O2 10 0 μmol·L- 1 。观察心肌细胞存活率和形态学 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 :1.羟自由基组心肌细胞存活率降低 ,和对照组比较有显著性差异(P <0 0 5 ) ;卡维地洛 +羟自由基组细胞存活率较羟自由基组高 (P <0 0 5 )。 2 .羟自由基组凋亡率较高 ,明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ;卡维地洛 +羟自由基组的细胞凋亡率显著低于羟自由基组 (P <0 0 5 )。3.羟自由基组凋亡心肌细胞呈特征性超微结构及AnnexinV+ PI- 荧光染色。结论 :卡维地洛能减轻外源性羟自由基诱导的心肌细胞凋亡。     

自由基与慢性阻塞性肺疾病患者淋巴细胞线粒体膜磷脂改变的研究

为了探讨自由基对慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）的细胞病理损伤部位，我们以外周血淋巴细胞为模型，观察ＣＯＰＤ患者淋巴细胞线粒体膜磷脂超微结构定位改变与血清中过氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）变化的关系，为今后预防和治疗ＣＯＰＤ提供理论根据。对象１...     

多烯磷脂酰胆碱对脂肪肝患者的疗效观察

目的观察多烯磷脂酰胆碱（易善复）治疗脂肪肝患者的疗效。方法将102例脂肪肝患者随机分为治疗组54例,对照组48例,治疗组在常规保肝治疗基础上,给予易善复注射液465mg/天静点,1个月后改为易善复2粒（465mg）3次/天口服;对照组给予常规保肝治疗即口服水飞蓟宾（水林佳）、肝泰乐、复合维生素B片,疗程共6个月。观察两组患者治疗前后的肝功能、血脂、血糖及肝组织学变化等指标。结果治疗组ALT、AST下降幅度优于对照组,差异有统计学意义;治疗组中甘油三酯（TG）下降幅度优于与对照组,差异有统计学意义;肝组织学恢复两组比较有统计学意义;空腹血糖、空腹胰岛素水平在治疗组中有下降趋势,但两组比较无统计学差异。结论易善复能较早改善脂肪肝患者的肝功能及组织学,且能降低甘油三酯水平。     

冬虫夏草及人工虫草菌丝体对超氧阴离子自由基和羟自由基清除作用的实验研究

目的　研究冬虫夏草及三种人工虫草菌丝体对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用。方法　采用邻苯三酚自氧化体系产生超氧阴离子自由基 ,研究冬虫夏草及三种人工虫草菌丝体对超氧阴离子自由基的清除作用 ;利用 Fenton反应产生羟自由基 ,研究冬虫夏草及三种人工虫草菌丝体对羟自由基的清除作用 ,同时比较四种样品对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力。结果　冬虫夏草、蝙蝠蛾拟青霉、虫草头孢菌和蝙蝠蛾被孢霉对超氧阴离子自由基和羟自由基均有清除作用 (P<0 .0 5) ;四种虫草样品对超氧阴离子自由基的清除能力弱于超氧阴离子自由基特异性清除剂抗坏血酸 (P<0 .0 5) ;对羟自由基的清除能力弱于羟自由基特异性清除剂 D-甘露醇 (P<0 .0 5)。结论　冬虫夏草及三种人工虫草菌丝体对超氧阴离子自由基和羟自由基均有清除作用 ;虫草素和 D-甘露醇是虫草中对自由基具有清除作用的有效组分之一 ,虫草素主要发挥对超氧阴离子自由基的清除作用 ,而对羟自由基的清除作用是虫草素和 D-甘露醇共同作用的结果。     

磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2过表达对大鼠肝癌细胞不同亚型蛋白激酶C表达及转位的影响

目的 探讨转染磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2-（PEMT2）基因抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞增殖的机制。方法 采用免疫细胞化学和蛋白质印迹法观察Pemt2过表达对肝癌细咆不矧亚型蛋白激酶C-（PKC）表达及在细胞内转位的影响，同时采用高效薄板层忻技术对细胞内二脂酰甘油（DAG）的水平进行检测。结果 转染PEMT2使细胞cPKC-α表达降低，cPKC-β2表达增加，并由胞浆向质膜转位。同时细胞内DAG水平下降。转染PEMT2对其它PKC亚型的表达及细胞内转位无显著影响。结论 转染PEMT2对不同亚型PKC表达及细胞内转位的影响可能与其抑制细胞增殖、诱导凋亡的机制有关。     

实验性甲状腺功能低下大鼠脑、红细胞膜神经磷脂与磷脂酰胆碱分子比变化的研究

应用薄层色谱扫描法，动态观察了实验性甲低大鼠脑，红细胞膜神经磷脂（ＳＭ）／磷脂酰胆碱（ＰＣ）分子比变化，结果表明持续用甲基硫脲嘧啶（ＭＴＵ）和脑发育临界期后停ＭＴＵ组，ＳＭ／ＰＣ分子比明显升高（Ｐ＜０．０５）。提示脑发育临界期内甲状腺激素缺乏，可导致生物膜的明显老化，膜磷脂分布破坏造成一系列结构和功能的改变，进而使中枢神经系统发育异常和功能障碍。     

红花黄色素对羟自由基损伤抗凝血酶Ⅲ的保护作用

邻二氮菲-Fe(2+)氧化法及硫代巴比妥酸比色法实验结果表明，红花黄色素清除羟自由基及抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化作用的IC50。分别为7.5g／L、5.7×10-2g／L，两作用均呈明显的量效关系。SDS－PAGE电泳结果表明，红花黄色素可抑制羟自由基诱发的兔抗凝血酶Ⅲ解聚。     

黄芪对老年小鼠脑线粒体Mn-SOD、MDA及脑细胞凋亡影响的实验研究

目的 研究黄芪对老年小鼠脑抗氧化系统的影响。方法 用TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率，并检测脑线粒体锰超氧化物歧化奠(Mn-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。以黄芪水煎剂灌胃老年小鼠30d，观察黄芪对老年小鼠上述指标的影响。结果 老年小鼠Mn-SOD活性降低,MDA含量升高,具有典型的凋亡特征，与老年组比较黄芪组脑线粒体Mn-SOD活性升高，MDA含量降低，凋亡细胞数减少．结论 黄芪通过抗氧化作用抑制老年小鼠脑神经细胞凋亡。     

肉桂水提液对全脑缺血再灌注损伤大鼠羟自由基和谷胱甘肽过氧化物酶的影响

目的 探讨肉桂水提液对全腩缺血再灌注损伤大鼠羟自由基(·OH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响.方法 采用4-血管阻断(4-VO)方法建立全脑缺血再灌注动物模型,利用分光光度法测定大鼠脑、肝、肾、心等组织中·OH抑制能力和GSH-PX活性的变化.结果 与模型组相比,各剂量给药组大鼠各组织中·OH的抑制能力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性明显提高(P<0.01或P<0.05).结论 肉桂水提液可预防性降低自由基代谢造成的机体损伤,提高GSH-Px的活性,对脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

增龄对大鼠心肌线粒体DNA氧化损伤的影响

目的　探讨增龄对大鼠心肌线粒体 DNA(mt DNA)缺失、线粒体呼吸链酶复合体及 ATP合成的影响。方法　 Wistar雄性大鼠分为 3组 :幼年组 (1月龄 )、青年组 (6月龄 )各 1 2只和老年组 (2 4月龄 ) 1 0只。心肌线粒体 DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及腺苷三磷酸 (ATP)合成分别用聚合酶链反应 (PCR)、酶动力学和生物发光技术进行测定。结果　 3组大鼠均有不同程度 mt DNA缺失。老年组 mt DNA缺失 (2 .0 9± 1 .62 )较幼年组 mt DNA缺失 (0 .77± 1 .1 6)明显增高 (P<0 .0 5) ;较青年组 mt DNA缺失 (1 .54± 1 .1 7)也有升高的趋势 (P>0 .0 5)。老年组心线粒体呼吸链复合酶 活力 (2 347.2 1± 62 3.33)均较青年组 (3 859.1 2± 70 3.53)、幼年组 (4776.90± 548.63)明显降低 (P<0 .0 1 )。老年组心线粒体 ATP合成量 (1 96.95± 33.2 6)较青年组 (337.53± 62 .1 8)明显降低 (P<0 .0 1 )。心线粒体呼吸链复合酶 活力 3组间无明显性差异 (P>0 .0 5)。结论　大鼠线粒体 DNA氧化损伤与衰老有一定的相关性。     

车前子多糖对大鼠肝线粒体自由基防御功能的影响

目的探讨车前子多糖(PSP)对大鼠肝线粒体自由基防御功能的影响。方法差速离心法提取雄性SD大鼠肝线粒体,采用硫酸亚铁-维生素C(Fe2+-Vit C)激发剂,建立大鼠肝线粒体脂质过氧化(LPO)模型,比色法测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和抗氧化物酶(T-AOC)活性,观察PSP对各生化指标的影响。结果 PSP浓度在25、50和100 mg/L范围时,MDA含量分别为3.94±0.15,3.65±0.18和2.88±0.20,均显著低于模型组6.47±0.48(P<0.01),表明PSP对肝线粒体脂质过氧化有抑制作用,而对抗氧化物酶类活性均有激活作用,与模型组比较,均明显升高(P<0.01)。结论 PSP对大鼠肝线粒体自由基的防御功能可产生一定的影响,对治未病起到一定的防治作用。