miR-342-3p对乳腺癌化疗敏感性的影响

目的:研究miR-342-3p对乳腺癌化疗敏感性的影响?方法:检测乳腺癌细胞株MCF-7?SKBr3和MDA-MB-231中miR-342-3p的表达?应用脂质体转染方法,转染hsa-miR-342-3p模拟物到低表达miR-342-3p的乳腺癌细胞株(mimic转染组),同时设立阴性对照(mim-NC转染组);转染miR-342-3p抑制物到高表达miR-342-3p的乳腺癌细胞株(inhibitor转染组),同时设立阴性对照(inhi-NC转染组)?mimic转染组?mim-NC转染组?inhibitor转染组和inhi-NC转染组细胞,分别加入浓度为2 ?滋mol/L的紫杉醇?顺铂及4 ?滋mol/L的阿霉素的进行培养,应用CCK8法检测药物作用48 h后细胞增殖率的变化?结果:以SKBr3为参照,miR-243-3p在MCF-7细胞中的相对表达倍数是126.000,在MDA-MB-231细胞中的相对表达倍数是0.017?mimic转染组细胞与紫杉醇?顺铂孵育48 h后,肿瘤细胞增殖率低于mim-NC转染组,差异有统计学意义(P < 0.05),但与阿霉素孵育后细胞增殖率与mim-NC转染组差异无统计学意义(P > 0.05);inhibitor转染组细胞与紫杉醇?顺铂和阿霉素孵育48 h后,肿瘤细胞的增殖率高于inhi-NC转染组,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-342-3p能调控乳腺癌细胞株MDA-MB-231?MCF-7对紫杉醇和顺铂的化疗敏感性,但提高miR-342-3p表达不能增加MDA-MB-231细胞对阿霉素的化疗敏感性,降低miR-342-3p的表达却可以减弱MCF-7细胞对阿霉素的化疗敏感性?     

miR-342-3p在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:研究miR-342-3p在乳腺癌中的表达及与临床病理联系?方法:收集2008年1月~2012年8月乳腺癌手术患者组织标本共85例,使用实时荧光定量PCR检测miR-342-3p在乳腺癌组织中的表达情况,应用免疫组化的方法检测乳腺癌组织中雌激素受体(ER)?孕激素受体(PR)?Her-2及P53的表达?结果:miRNA-342-3p在Lumina型乳腺癌组织中高表达,在Her-2高表达型乳腺癌次之,在三阴性乳腺癌组织中表达最低,差异有统计学意义(P < 0.05);miRNA-342-3p的表达与不同ER?Her-2及P53的表达相关,差异有统计学意义(P < 0.05),在不同PR状态?不同年龄组?有无淋巴结转移及与肿瘤大小?组织分级和病理分期间,差异无统计学意义(P > 0.05),癌与癌旁组织间无显著性差异(P > 0.05)?结论:miR-342-3p在不同乳腺癌分子亚型中表达存在差异,可能成为乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌治疗的新靶点?     

miR-342-3p对三阴性乳腺癌化疗敏感性的影响

目的:研究miR-342-3p对三阴性乳腺癌化疗敏感性的影响.方法:收集江苏省肿瘤医院乳腺外科2011年1月至2013年8月行术前化疗的三阴性乳腺癌病人32例,其中完全缓解(CR)5例,部分缓解(PR)27例,检测肿瘤组织中miR-342-3p的表达情况;应用脂质体转染方法,三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231转染has-miR-342-3p模拟物(mimic)和miR-342-3p抑制物(inhibitor),设立阴性对照(mim-NC)组和(inhi-NC)组.mimic组,mim-NC组,inhibitor组和inhi-NC组细胞株,分别加入浓度为2μmol/L的紫杉醇,顺铂及4μmol/L的阿霉素进行培养;应用CCK8法和流式细胞仪检测48 h后肿瘤细胞增殖率和凋亡的变化.结果:miRNA-342-3p在术前化疗后达到CR的三阴性乳腺癌组织中的表达明显高于PR的三阴性乳腺癌组织(P＜0.05).Mimic组细胞株与紫杉醇,顺铂作用48 h后肿瘤细胞增殖率低于mim-NC组,凋亡率高于mim-NC组,差异有统计学意义(w0.05).Inhibitor组细胞株与紫杉醇,顺铂作用48 h后,肿瘤细胞增殖率高于inhiNC组,凋亡率低于inhi-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).但与阿霉素作用后细胞增殖率和凋亡率在mimic组与mimNC组,inhibitor组与inhi-NC组,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:miR-342-3p高表达的三阴性乳腺癌对化疗药物反应更敏感,miR-342-3p能调控乳腺癌细胞株MDA-MB-231对紫杉醇和顺铂的化疗敏感性,但miR-342-3p不影响MDAMB-231细胞株对阿霉素的化疗敏感性.     

赫赛汀治疗HER-2过度表达晚期乳腺癌的疗效观察

目的 观察赫赛汀（Herceptin）治疗人类表皮生长因子受体2（HER-2）过度表达晚期乳腺癌的临床疗效。方法 将30例HER-2过度表达的晚期乳腺癌病人随机分成3组，其中1组为赫赛汀单药组（n=10），首次剂量为赫赛汀负荷剂量4mg／kg静脉注射，以后改为每周2mg／kg静脉注射；2组（n=10）为联合化疗组，其中5例联合泰索帝60mg／m^2，每3周给药1次，另5例联合泰素175mg／m^2，每3周给药1次，维持至治疗结束。赫赛汀的用法为首次化疗前2d给予首次剂量4mg／kg静脉注射，以后每次化疗前2d给予2mg／kg静脉注射，共治疗4次，4周期化疗结束后，每月维持治疗剂量2mg／kg静脉注射，共4次；3组（n=10）为对照组给予常规化疗药物治疗。结果 2组使用赫赛汀治疗的患者客观缓解率（RR）分别为50％和80％，肿瘤进展时间（TTP）分别为10个月和6个月，2组临床疗效与对照组相比有显著差异（P〈0．05）。结论赫 赛汀单药和联合化疗治疗HER-2过度表达的晚期乳腺癌均有明显的临床疗效。     

miR-93反义核苷酸对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究miR-93在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-93反义核苷酸（antisense oligonucleotide,ASO）对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：运用荧光定量PCR定量检测120例乳腺癌组织及对应癌旁组织中miR-93的表达;通过miR-93ASO降低乳腺癌细胞中miR-93的表达,利用MTT、细胞克隆形成实验、流式细胞仪观察miR-93 ASO对乳腺癌细胞产生的生物学效应。实验分为３组：空白对照组,无义干扰组和miR-93 ASO组。结果：在120例乳腺癌病例中,63.33%（76/120）的乳腺癌组织miR-93表达明显高于对应癌旁组织（P<0.05）;miR-93 ASO可以显著降低miR-93的表达（P<0.05）;MTT实验结果显示乳腺癌细胞转染miR-93 ASO 24、48 h和96 h后的细胞存活数量均明显低于空白对照组和无义干扰组（P<0.05）;克隆形成实验结果显示miR-93 ASO组克隆形成率比空白对照组和无义干扰组显著降低（P<0.05）;流式细胞仪检测结果显示转染miR-93 ASO组较2个对照组细胞凋亡指数明显增加（P<0.05）;另外,降低miR-93的表达后发现Bcl2的mRNA和蛋白均明显下降（P<0.05）。结论：miR-93在乳腺癌组织中表达上调,降低miR-93的表达可有效抑制乳腺癌细胞生长、促进细胞凋亡。miR-93有可能成为乳腺癌基因表达调控的新靶点。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与赫赛汀联用对 C-erbB2过表达的乳腺癌SKBR-3细胞株的影响

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人C-erbB2过表达的乳腺癌SKBR-3细胞株的作用及与赫赛汀(Herceptin)联用的可行性。方法SKBR-3细胞培养贴壁后,加入不同浓度的TRAIL、Herceptin、TRAIL联合Herceptin,MTT法检测抑制率,流式细胞术检测凋亡率。结果乳腺癌SKBR-3细胞对TRAIL不敏感,1μg/ml的TRAIL只能杀伤(5.54±1.12)%的细胞,TRAIL与Herceptin联用可增加对肿瘤细胞的抑制率,10、25μg/mlHer-ceptin与1μg/mlTRAIL联用的抑制率分别为(27.82±8.90)%、(36.89±7.60)%,与两药单用相比具有明显差异(均P<0.05)。10μg/mlHerceptin与1μg/mlTRAIL联用的凋亡率为(21.55±3.96)%,与两药单用相比具有明显差异(均P<0.05)。结论乳腺癌SKBR-3细胞株对TRAIL不敏感,但TRAIL与Herceptin联用可增加抗肿瘤作用,可能成为一种对C-erbB2过表达乳腺癌的新的治疗方法。     

miR-7156-3p在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨微小RNA-7156-3p(miR-7156-3p)在乳腺癌中的表达及通过靶向调控Ras相关蛋白Rab-1A(Ras-related protein Rab-1A,RAB1A)对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测miR-7156-3p在乳腺癌患者血清、人正常乳腺上皮细...     

赫赛汀联合顺铂对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用研究

目的:观察抗HER-2人源化单克隆抗体赫赛汀以及赫赛汀联合顺铂对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞裸小鼠移植瘤的抑制作用。方法:成功建立人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型后,随机将荷瘤裸鼠分为五组:①生理盐水组(阴性对照组);②赫赛汀低剂量组;③赫赛汀高剂量组;④顺铂组;⑤赫赛汀高剂量与顺铂联合组。每组15只。赫赛汀按20 mg/kg及40 mg/kg、顺铂按5 mg/kg剂量每周1次尾静脉注射,连续给药6周,观察各组的抑瘤率;利用免疫组化方法检测肿瘤组织中细胞增殖指标Ki-67和NF-kB的表达情况。结果:与阴性对照组相比,赫赛汀能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸小鼠移植瘤的生长(P<0.01);赫赛汀高剂量加顺铂组的抑瘤率均高于赫赛汀高剂量组及顺铂组抑瘤率(P<0.05)。赫赛汀高剂量组肿瘤的Ki-67及NF-kB的LI显著低于阴性对照组组LI(P<0.01);而赫赛汀高剂量加顺铂组肿瘤的Ki-67及NF-kB的LI则均低于赫赛汀高剂量组与顺铂组(P<0.01)。结论:赫赛汀能够抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生长,其可能的机制是通过下调Ki-67、NF-kB的表达而抑制肿瘤的增殖活性。赫赛汀与顺铂间具有协同作用,能更有效地抑制肿瘤生长。     

赫赛汀联合紫杉醇序贯FEC新辅助治疗晚期乳腺癌1例

1病历报告患者,女,51岁。因发现左乳腺肿物5个月于2012年8月20日入院,入院后查乳腺彩超示:左乳实性团块7.5cm×7.0cm×5.5cm,左腋下多发低回声结节,最大2.0cm×1.0cm(图1A)。于2012年8月21日行左乳腺肿物及左腋下淋巴结穿刺术,穿刺病理:(左侧)乳腺侵润性导管癌,Ⅱ级,未见脉管内     

大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡[1]

目的:探究大黄素通过microRNA (miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法:检测大黄素及miR-582-3p异常表达对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。qRT-PCR检测miR-582-3p及MAP3K1的表达。MTT检测乳腺癌细胞增殖,流式细胞术和TUNEL实验检测细胞凋亡。western blot检测增殖标志蛋白Ki-67及凋亡标志蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3在癌细胞中的表达水平。结果:大黄素可以抑制乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231的增殖能力及促进凋亡。western blot结果显示大黄素会抑制细胞中Ki-67及Bcl-2的表达并促进Caspase-3 (cleaved)及Bax的表达。大黄素处理乳腺癌细胞后miR-582-3p的表达显著下调。过表达miR-582-3p会下调大黄素对乳腺癌细胞生物学活性的影响。大黄素还会通过miR-583-3p调节癌细胞中MAP3K1的表达。结论:大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡。     

Bcl-3在人乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响

目的: 探讨Bcl-3在乳腺癌中的表达及沉默后对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法: 选取80例乳腺癌组织及相应癌旁组织,采用免疫组织化学法检测其中Bcl 3蛋白表达,并分析癌组织中Bcl-3表达与临床病理参数间的关系;将乳腺癌MDA-MB-231细胞随机分为空白对照组(常规培养),阴性对照组(转染对照siRNA)和Bcl 3 siRNA组(转染Bcl-3 siRNA)。转染48 h后,免疫印迹法检测各组Bcl-3表达;MTT、平板克隆实验及流式细胞术分别检测各组细胞增殖能力、克隆形成能力和细胞凋亡。结果： Bcl-3蛋白在乳腺癌及相应癌旁组织中阳性表达率分别为72.5%和51.3%。乳腺癌组织中Bcl-3蛋白表达与组织学分级、淋巴结转移及Her 2表达呈正相关(P＜0.05),而与年龄、肿瘤大小、病理分型及雌、孕激素受体无关(P＞0.05)。空白对照组和阴性对照组Bcl-3表达水平明显高于Bcl 3 siRNA组(P均<0.01)。与空白对照组和阴性对照组比较,Bcl-3 siRNA组细胞增殖率和克隆形成率降低,细胞凋亡率增高(P均<0.01)。结论： Bcl 3在乳腺癌组织中呈高表达,其沉默后起抑癌作用,乳腺癌细胞增殖能力及克隆形成率降低、凋亡率增高。     

荜茇明碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨荜茇明碱（PL）对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞;采用活细胞计数试剂盒（CCK‐8）法检测不同浓度的PL对MDA‐MB‐231细胞增殖的影响;流式细胞术检测PL对细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹（Westernblot）法检测PL对MDA‐MB‐231细胞Bcl‐2和Bax蛋白表达水平的影响。结果PL抑制MDA‐MB‐231细胞增殖,并呈现出浓度、时间依赖性。PL诱导MDA‐MB‐231细胞凋亡,而乙酰‐L‐半胱氨酸则抑制了PL诱导的细胞凋亡。Westernblot结果提示随着PL浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl‐2的表达逐渐减少。结论PL对人乳腺癌MDA‐MB‐231细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与Bcl‐2蛋白表达的减少和Bax蛋白表达增加有关。     

羟基喜树碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨羟基喜树碱在体外对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,为乳腺癌的临床用药提供实验依据。方法：将不同浓度（10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）的羟基喜树碱作用于人乳腺癌MCF-7细胞48 h,并设不加羟基喜树碱溶液的MCF-7细胞作为对照组,用MTT法测定MCF-7细胞的增殖情况,用Hoechst33258染色检测MCF-7细胞的凋亡情况,以RT-PCR检测羟基喜树碱对MCF-7细胞Casepase-3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱对细胞增殖均有抑制作用（P〈0.05、P〈0.01）,尤以200μmol/L的抑制作用最明显,其抑制率呈浓度依赖性增加。荧光显微镜观察显示,100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱处理组中可见典型的凋亡形态学改变。与对照组比较,各羟基喜树碱处理组中MCF-7细胞Caspase-3 mRNA表达水平均升高（P〈0.05、P〈0.01）,并呈浓度依赖性升高趋势。结论：羟基喜树碱可在体外抑制MCF-7细胞增殖,并通过Caspase-3途径诱导细胞凋亡,达到抑制肿瘤细胞生长的作用。     

miR-369-3p对缺氧诱导海马神经元细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的探讨miR-369-3p对缺氧诱导的海马神经元细胞(Hhn)增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将Hhn细胞置于持续充入95%N₂+5%CO₂的密闭培养箱中进行缺氧处理48 h (缺氧组),正常培养的细胞作为对照组。将miR-NC、miR-369-3p、anti-miR-NC、anti-miR-369-3p转染至Hhn细胞中,分别记为miR-NC组、miR-369-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-369-3p组;将anti-miR-NC、anti-miR-369-3p、pcDNA3.1、pcDNA3.1-NAMPT分别转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p组、缺氧+pcDNA3.1组、缺氧+pcDNA3.1-NAMPT组;将anti-miR-369-3p质粒分别与si-NC、si-NAMPT共转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-369-3p+si-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p+si-NAMPT组;转染均采...     

miRNA-191对人乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-191在人乳腺癌细胞中的表达情况,研究其对乳腺癌细胞的增殖、侵袭的影响。方法 real-time PCR检测乳腺癌细胞[MDA-MB-231(雌激素受体阴性,ER-)、MCF-7(雌激素受体阳性,ER+)]和正常乳腺上皮细胞(HBL-100)中miR-191表达水平的差异;利用Lipofectamine2000将miR-191抑制体瞬时转染乳腺癌MCF-7,并用real-time PCR检测转染效果;分别用CCK-8法检测MCF-7细胞增殖,流式细胞术检测MCF-7细胞的细胞周期,Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭能力。结果与正常乳腺细胞相比,miR-191在乳腺癌细胞中高表达(P<0.01),且在ER(+)乳腺癌细胞MCF-7中的表达水平高于ER(-)乳腺癌细胞MDA-MB-231(P<0.01),转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖能力(0.65±0.04)较阴性对照组(1.18±0.05)明显受到抑制(F=122.238,P<0.01),侵袭能力(56.67±2.58)较阴性对照组(82.5±5.79)减弱(F=18.734,P<0.01),G0/G1期的细胞比例(73.39±1.10)%较阴性对照组(69.28±2.11)%增加(F=61.060,P<0.01),S期细胞比例(20.9±1.17)%较阴性对照组(25.48±1.19)%减少(F=46.937,P<0.01)。结论 miR-191在人乳腺癌细胞中,特别是ER(+)乳腺癌中高表达,转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖、侵袭能力明显受到抑制。     

塞来昔布对高表达Her-2/neu的人乳腺癌SKBr3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人乳腺癌细胞SKB r3的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法4种不同浓度的塞来昔布处理乳腺癌细胞系SKB r3细胞24、48 h,MTT法测定24、48 h后SKB r3细胞的增殖活性,流式细胞仪（FCM）检测48 h后各浓度塞来昔布诱导细胞凋亡情况及对细胞周期的影响。结果与对照组相比,塞来昔布以时间、剂量依赖性方式抑制SKB r3细胞增殖（P〈0.05）。作用48 h后,塞来昔布诱导SKB r3细胞凋亡并阻断了细胞周期进展,凋亡率随塞来昔布浓度的增加而增加（P〈0.05）,且随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增加、S期及G2/M期细胞比例逐渐下降（P（0.05）。结论塞来昔布抑制高表达Her-2/neu的SKB r3细胞的增殖,诱导其凋亡。     

红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制和凋亡的诱导作用。方法在体外细胞培养下,采用不同质量浓度红三叶异黄酮和5-Fu处理MCF-7细胞,MTT法测定红三叶总异黄酮抑制MCF-7细胞增殖的量-效关系;TUNEL法、流式细胞术分析其细胞凋亡率和周期分布。结果红三叶总异黄酮对MCF-7细胞增殖的抑制作用随药物质量浓度提高和作用时间延长而更加明显,而在低质量浓度时却出现轻微促细胞增殖现象。TUNEL法、流式细胞术分析结果表明,红三叶总异黄酮能诱导MCF-7细胞凋亡,阻滞细胞于G2/M期,降低细胞增殖指数,且这种作用也存在剂量-效应关系。结论红三叶总异黄酮可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,具有抗肿瘤作用。