血管性血友病因子裂解酶在肾病综合征患者血浆中的变化及其临床意义

目的检测血管性血友病因子裂解酶（vWF-cp,亦称ADAMTS13）与血管性血友病因子（vWF）在肾病综合征（NS）患者血浆中的抗原水平并探讨其临床意义。方法将70例NS患者分为膜性肾病（MN）组和非膜性肾病（non-MN）组,用ELISA法检测MN组、non-MN组和正常对照组血浆ADAMTS13和vWF抗原,比较各组间AD-AMTS13抗原、vWF抗原及vWF/ADAMTS13比值的差异及其与临床指标的关系。结果 （1）与正常对照组相比,两组患者血浆ADAMTS13抗原均明显降低（均P〈0.05）,而vWF抗原均明显升高（均P〈0.05）。vWF/ADAMTS13比值在3组间两两比较,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。（2）相关分析显示,NS患者血浆ADAMTS13抗原与血清总蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）成正相关（均P〈0.01）,与24 h尿蛋白、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）成负相关（P〈0.05或0.01）;血浆vWF抗原与TP、ALB成负相关,与24 h尿蛋白、TG、血浆纤维蛋白原、D-二聚体成正相关（P〈0.05或0.01）;血浆ADAMTS13抗原与vWF抗原之间无明显相关性（P〉0.05）。结论血浆AD-AMTS13抗原水平低下、ADAMTS13和vWF抗原比例失衡可能是NS形成血栓的重要机制之一。     

高血压病患者血浆血管性血友病因子及其裂解酶的变化

目的：探讨高血压病患者血浆血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）水平及血管性血友病因子裂解酶（von Willebrand factor—cleaving protease,vwF—cp）活性变化和临床意义。方法：高血压病患者分为合并高脂血症组32例和单纯高血压病组48例,健康成人组60例。应用免疫比浊法和免疫印迹发光绘图法分别检测血浆vWF水平和vWF-cp活性。结果：高血压病患者血浆vWF水平显著高于健康成人（P〈0．01）,而vWF-cp活性显著低于健康成人（P〈0．01）;高血压病合并高脂血症组血浆vWF水平高于单纯高血压病组（P〈0．05）,而vWF-cp活性差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：血浆vWF水平升高,vWF—cp活性降低可能与高血压病发生、发展、内皮损伤有关,而且高血压病合并高脂血症其内皮损伤程度更重。     

血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS-13）研究进展

近年研究表明：血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS-13）对血栓形成有重要作用。ADAMTS-13最初是在对血栓性血小板减少性紫癜（TTP）的研究中发现。TTP是一种罕见的微血管病变,特征表现有溶血性贫血,血栓形成,肾功能衰竭与发热,而通过对家族及遗传性TTP的研究发现：在急性TTP患者体内缺少足量的ADAMTS13,在TTP患者体内也发现了抑制ADAMTS-13的自身抗体,     

血管性血友病因子裂解酶在血栓性血小板减少性紫癜中的作用研究进展

<正>血栓性血小板减少性紫癜(TTP)是一种以微血管病性溶血性贫血、血小板减少、中枢神经系统症状、发热及肾脏损害为主要临床表现的罕见疾病,发病率约为1/100万^([1-2]),未及时给予治疗时死亡率可达90%([1-2]),未及时给予治疗时死亡率可达90%^([3]).1982年,MOAKE等[4]在TTP患者的血浆中发现了高黏附性的“超大”血管性血友病因子(VWF)多聚体,认为TTP是由血浆中VWF裂解酶缺乏所致.1996年,     

2型糖尿病患者血管并发症与血浆血管性血友病因子裂解酶的关系

目的 检测2型糖尿病患者血浆血管性血友病因子裂解酶（vWF-cp）活性。探讨其在糖尿病血管并发症中的意义。方法将74名2型糖尿病患者根据是否合并有血管并发症分为无并发症组（24例）、微血管并发症组（27例）、大血管并发症组（23例）。观察不同组患者血浆vWF-cp活性水平。并与正常对照组（40例）比较。结果2型糖尿病患者血浆vWF-cp活性水平明显低于正常对照组（P〈0．05）；合并大血管病变组vWF-cp水平明显低于其他糖尿病组（P〈0．05）。结论血浆vWF-cp活性水平下降可能是2型糖尿病患者容易形成血栓的另一重要原因。vWF-cp活性异常可能在糖尿病的临床进展和并发症的发生中起重要作用。     

血栓性血小板减少性紫癜患者血管性血友病因子裂解酶活性的分析

目的通过对2例血栓性血小板减少性紫癜（TTP）患者诊疗经过的回顾及对血管性血友病因子裂解酶（vWF-CP）活性研究,以提高对TTP发病机制及治疗的认识.方法报道2例TTP患者的诊疗经过并作文献复习,采用分析蛋白裂解片段法检测2名患者和正常人血浆vWF-CP活性.结果2例TTP患者均痊愈出院.血浆置换治疗前血浆vWF-CP活性明显低于正常人,而治疗后其活性明显上升.结论vWF-CP活性下降或丧失是TTP的主要病因;血浆置换治疗明显优于血浆输注.     

外周血血管性血友病因子裂解酶在冠状动脉粥样硬化斑块稳定性中的相关性研究

目的探讨外周血血管性血友病因子裂解酶在冠状动脉粥样硬化斑块稳定性中的相关性。方法选取2014年3月至2016年1月在我院进行治疗的冠心病患者共163例,其中稳定型心绞痛患者87例,急性冠状动脉综合征患者76例,急性冠状动脉综合征患者包括不稳定型心绞痛患者47例及急性心梗死患者29例,根据斑块螺旋值对所有患者的斑块种类进行区分,所有患者在入院时进行常规取血,使用酶联免疫吸附法对所有患者的外周血血管性血友病因子裂解酶(von Willebrand factor-cleaving protease,v WF-cp)水平进行测定,统计患者的性别、年龄、不良生活习惯、家族病史等信息,使用向后迭代法对上述因素对斑块种类的影响进行筛选,之后建立逻辑斯特模型,对经过筛选的因素对斑块种类的影响进行分析。结果无斑块患者8例,易损斑块33例,混合斑块47例,硬斑块75例,v WF-cp水平随着CT值的升高而降低;年龄、体重、v WF-cp水平、家族病史、病程、糖尿病等其他疾病及不良生活习惯与斑块种类均呈正相关,为发病危险因素。v WF-cp水平的权重较高,对斑块种类有较强的解释能力。结论外周血v WF-cp与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性具有较强的关联性,v WF-cp的测定能够在一定程度上对患者的具体病情进行解释,对治疗方案的制定及预后判断有所助益。     

血栓性微血管病患者血管性血友病因子裂解酶的检测及意义

目的：探讨血管性血友病因子裂解酶（ vWF-CP）及其抗体在血栓性微血管病的意义。方法：用ELISA法胶原结合试验测定vWF-cp活性，并进行vWF-cp抗体的检测。统计学分析采用SPSS17．0统计软件包，结果以均数±标准差（ x ±s）表示。组间比较采用非配对t检验。结果：30例健康成人血清WF-cp活性水平均值为105．3±15．7％，正常范围为74％～136．7％。9例血栓性微血管病患者vWF-cp活性为59．3±27％，与正常对照组相比，有显著差异（P＜0．001）。其中有5例vWF-cp活性水平明显低于正常范围。所有病人均未检测到抗体。结论：血栓性微血管病患者血浆vWF-cp活性明显低于正常对照组。血栓性微血管病患者vWF-cp活性与临床及病理表现密切相关，有重要意义。 vWF-cp活性下降常提示血栓性微血管病，应引起足够重视。     

PCI 术前术后血管性血友病因子及其蛋白裂解酶水平分析

目的通过检测经皮冠状动脉介入(PCI)术前、术后冠心病患者血浆中血管性血友病因子(vWF)及其裂解酶(vWFcp)水平,了解其与冠心病及PCI术的关系。方法根据冠脉造影结果将研究对象分对照组(造影正常)及PCI组(经造影确诊为冠心病并行PIC术),通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆vWF浓度和及血浆vWF-cp活性水平并进行统计分析。结果术前、术后PCI组血浆vWF水平明显高于对照组,PCI术后血浆vWF水平明显高于PCI术前(P<0.05)。PCI组vWF-cp活性水平较对照组降低,而PCI术后低于PCI术前(P<0.05)。血浆vWF水平随冠心病变严重程度而升高,vWF-cp活性水平随之降低。结论 vWF及vWF-cp水平随冠脉病变严重程度及血栓风险不同呈增高和减低趋势,在急性冠脉综合征的发病过程中可能起重要作用。PCI术后vWF及vWF-cp水平变化,提示介入治疗一定程度上可增加血栓形成风险。     

血管性假性血友病因子裂解酶的检测方法及临床应用的研究进展

血管性假性血友病因子裂解酶是存在于正常人血浆中的一种蛋白水解酶,其主要功能是将血浆中的大分子血管性假性血友病因子多聚体裂解成小分子片段,以调节血管性假性血友病因子连接血管下胶原和血小板并诱导血小板黏附和聚集的作用,从而防止微循环内血小板血栓形成。该酶活性的缺陷导致血浆中血管性假性血友病因子质与量发生改变,与血栓性血小板减少性紫癜、肿瘤等疾病的发生、发展有密切关系。因此,血管性假性血友病因子裂解酶的检测及临床应用的研究对于探索血栓性血小板减少性紫癜等疾病的诊断和治疗,具有重要的临床意义。     

主动脉夹层和急性冠脉综合征患者血浆ADAMTS-9水平比较研究

目的:检测主动脉夹层(AD)和急性冠脉综合征(ACS)患者外周血含Ⅰ型血小板结合蛋白基序(TSP)的解聚蛋白样金属蛋白酶-9(ADAMTS-9)水平,以探索是否能将ADAMTS-9用于AD的鉴别诊断.方法:选择51例确诊AD患者、84例急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者、41例急性非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)患者、65例不稳定性心绞痛(UAP)患者,采集其临床资料,取外周血离心、分离血浆,使用ELISA法检测血浆ADAMTS-9水平.结果:4组受试者在性别、高血压病史、血肌酐水平、血脂水平、体重指数方面无统计学差异;AD组患者发病年龄、合并糖尿病史患者比例及高敏C反应蛋白水平均与其它3组存在显著性差异(均P<0.05):4组患者血浆ADAMTS-9水平分别为277.51±66.74ng/ml、53.73±60.01ng/ml、51.02±44.21ng/ml、64.19±56.64ng/ml,AD组较ACS组明显升高(P<0.05).结论:ADAMTS-9可作为鉴别AD和ACS患者的指标之一.     

急性白血病患者血浆vWF GMP-140检测的临床意义

目的 :探讨内皮及血小板活化功能在急性白血病中的作用。方法 :采用ELISA双抗体夹心法测定 2 8例急性白血病患者在治疗前及缓解后、以及 2 0例健康体检者血浆血管性血友病因子 (vWF)、a颗粒膜蛋白 14 0 (GMP 14 0 )水平。结果 :治疗前急性白血病组vWF及GMP 14 0均显著高于正常人组 (P <0 .0 1) ,缓解后vWF、GMP 14 0水平恢复正常 ,与正常人组比较差异无显著性。结论 :提示在急性白血病存在血小板活化及内皮细胞损伤 ,检测vWF及GMP 14 0的水平变化有助于对急性白血病患者的病情监测 ,对衡量患者预后有指导意义。     

原发性肾病综合征患者血清IL-2、IL-13的研究

目的　探讨原发性肾病综合征患者血清IL- 2、IL -13水平在肾病综合征发病中的作用及其临床意义。方法　采用ELISA法测定30例原发性肾病综合征患者口服强的松(1mg/kg) 8周治疗前后血清IL- 2、IL -13水平变化,并与正常对照组进行比较。同时对30例原发性肾病综合征患者进行肾活体组织检查。结果　30例肾病综合征患者治疗前血清IL 2水平(6 7.16±6 .5 5 )pg/ml,明显低于正常对照组(98.2 9±2 5 .96 )pg/ml(P <0 .0 5 ) ,血清IL 13水平(48.79±3.0 5 )pg/ml明显高于正常对照组(47.13±3.0 6 )pg/ml(P <0 .0 5 ) ;激素治疗后19例患者缓解(激素敏感型) ,11例患者无效(激素抵抗型)。激素敏感型患者治疗后血清IL- 2水平(72 .11±16 .95 )pg/ml与治疗前无显著差异,较正常对照组显著降低(P <0 .0 5 ) ,而治疗后血清IL 13水平(46 .37±3.32 )pg/ml较治疗前显著降低(P <0 .0 5 ) ,与正常对照组无显著差异;激素抵抗型患者治疗后血清IL- 2及IL-13水平均显著升高。结论　肾病综合征患者血清IL-2水平降低,血清IL- 13水平升高,两者均参与炎症过程,IL- 2、IL -13水平变化在一定程度上可提示病情变化,监测治疗效果。     

原发性肾病综合征抗心磷脂抗体的检测

目的：探讨原发性肾病综合征（NS）抗心磷脂抗体（ACL）检测的意义.方法：检测本院肾内科52例原发性肾病综合征患者和20例正常人ACL抗体.测定52例NS患者血栓素B2（TAB2）,抗凝血酶Ⅲ抗体（AT-Ⅲ）,血小板计数（P1t）,血清白蛋白（AIB）和胆固醇（CH）,甘油三酯（TG）,尿蛋白定量及尿FDP.结果：NS组ACL阳性率（34.6%）明显高于对照组（5%）.ACL组阳性（264.62±87.28）TAB2较阴性者（113.12±32.82）明显升高（P＜0.05）,CH、TG、尿蛋白定量及尿FDP明显升高（P＜0.01）,AT-Ⅲ明显降低.18例ACL阳性患者静脉血栓形成8例,34例ACL阴性患者2例血栓形成,有显著差异.结论：ACL在原发性肾病综合征的发病及发展中可能有重要作用,可作为NS患者血栓形成的一项预测.     

脑梗死患者血浆vWF、PLG、D-D含量变化与临床意义

目的通过动态检测血浆血管性假血友病因子(vWF)、纤溶酶原(PLG)活性、D-二聚体(D-D)含量来探讨脑梗死患者病情变化与实验室指标的关系。方法测定48例脑梗死患者发病后第2d、第7d、第21d血浆中vWF、PLG、D-D水平,并与正常对照组36例进行比较。结果急性脑梗死患者发病后第2dvWF显著升高,随后逐渐下降,但是到21d仍然高于对照组;患者组血浆PLG水平第2d略高于对照组,差异无显著性意义(P>0.05),第7、21d均显著低于对照组(P<0.05);D-D含量一直高于对照组。结论测定上述指标可以判断急性脑梗死患者血管内皮细胞功能受损程度及纤溶系统激活情况,对患者病情诊断、治疗及预后均具有指导意义。     

慢性肾脏病患者肾脏vWF和ADAMTS13表达改变及其意义

目的观察血管性血友病因子（vWF）及其裂解酶ADAMTS13在慢性肾脏病不同病理类型中的表达以及与临床指标的相关性。方法采用免疫组织化学分析vWF和ADAMTS13在36例不同病理类型慢性肾炎患者肾脏中的表达,Image J图象分析软件测定vWF和ADAMTS13的阳性染色面积的比例。结果 （1）肾病综合征患者肾小球阳性染色面积vWF/ADAMTS13明显高于慢性肾炎组（P〈0.05）;（2）膜性肾病组ADAMTS13表达明显低于非膜性肾病组（P〈0.05）;（3）vWF/ADAMTS13阳性染色面积比与蛋白尿呈正相关（r=0.512,P〈0.01）。结论慢性肾脏病局部vWF和ADAMTS13表达间平衡失调与慢性肾脏病的临床和病理类型有关,能在一定程度上反映肾脏微循环的变化。     

Von Willebrand factor antigen and ADAMTS13 activity assay in pregnant women and severe preeclamptic patients

The present study examined von Willebrand factor (vWF) levels and ADAMTS13 activity in pregnant and severe preeclamptic women in order to shed light on the prothrombotic state in severe preeclampsia.Thirty healthy women of childbearing age,22 second trimester pregnant women,30 third trimester pregnant women and 10 severe preeclamptic patients were recruited in this study.ADAMTS13 activity was determined by the FRETS-vWF73 assay and vWF antigen (vWF:Ag) levels by an enzyme-linked immunosorbent assay.The results showed that there were statistically significant differences in plasma vWF antigen levels between the severe preeclamptic and third trimester pregnant women,between third and second trimester pregnant women (P<0.05).The third trimester pregnant women had significantly lower plasma ADAMTS13 activity than second trimester pregnant women (P<0.05).Nevertheless,no significant differences in plasma ADAMTS13 activity were found between severe preeclamptic patients and the third trimester pregnant women (P>0.05).In conclusion,plasma ADAMTS13 activity is normal in severe preeclampsia despite the increased vWF:Ag levels.Prothrombotic state is involved in the pathogenesis of severe preeclampsia,as a result of endothelial injury.     

Evaluation and clinical application of a new method for detecting ADAMTS13 activity

Background A severe deficiency of ADAMTS13 activity contributes to the pathogenesis of thrombotic thrombocytopenic purpura （TTP）. Measuring the activity of ADAMTS13 is helpful for the diagnosis of TTP and the prognostic monitor in TTP patients. Most available assays are cumbersome and costly, so not easily adapted to routine laboratories. ADAMTS13 cleaves von Willebrand factor （VVVF） within the domain A2, located between domains A1 and A3. Therefore, specific assays for ADAMTS13 activity could be based on the different structures of VWF before and after the cleavage. Using this hypothesis we try to establish a new and simple method to determine ADAMTS13 activity. Methods First, plasma samples were exposed in denaturing condition to allow cleavage of VWF by ADAMTS13. Then, the ADAMTS13 activity was measured with two novel monoclonal antibodies, SZ-129 and SZ-125, which specifically recognize the VWF A1 and A3 domains by using a two-site sandwich ELISA. Compared with a residual-collagen binding assay （R-CBA）, plasma ADAMTS13 activities in 161 samples were assessed, and the inhibitory activities of ADAMTS13 autoantibody in 24 TTP patients were determined. The relationship of these two assays was analyzed by linear correlation, and the sensitivity and specificity of the new assay was also evaluated. Results Plasma ADAMTS13 activities in normal people and TTP, acute myocardial infarction （AMI）, and idiopathic thrombocytopenic purpura （ITP） patients determined by the new assay were （89.75±7.93）%, （17.63±18.71）%, （68.55±18.08）%, （85.83±9.84）%, respectively. Results were consistent with those of R-CBA, the squared correlation factor was 0.9183 of the two assays. The new assay can easily discriminate a ＂TTP plasma sample from a non-TTP plasma sample （P 〈0.01）, and the coefficient of variation for the new assay was 6.17%. In 23 idiopathic TTP patients, the inhibitor activity of ADAMTS13 autoantibody ranged from 12% to 100%, while no inhibitory activity was detected in one hereditary TTP patient. Conclusion This new and simple assay for ADAMTS13 activity could be used routinely in the clinic to determine the activity of ADAMTS13.     

蛋白聚糖和ADAMTS-1在多囊卵巢综合征患者血清中的表达及其临床意义

目的：探讨蛋白聚糖（Versican）和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）在多囊卵巢综合征（PCOS）患者血清中的表达,阐明二者在PCOS发病中的作用。方法：选取80例PCOS患者（PCOS组）和100名正常体检妇女（对照组）为研究对象,测量2组受试对象身高和体质量,计算体质量指数（BMI）;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测2组受试对象血清中Versican和ADAMTS-1水平,测定2组受试对象血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（LH）、睾酮（T）、空腹血糖（FBG）和空腹胰岛素等水平;采用胰岛素抵抗指数稳态模式评估法（HOMA-IR）评估胰岛素抵抗。采用Pearson直线相关分析法分析Versican和ADAMTS-1与代谢指标的相关性。结果：PCOS组患者血清中Versican水平低于对照组（P=0.004）,PCOS组患者血清中ADAMTS-1水平低于对照组（P<0.01）。Versican和ADAMTS-1预测PCOS的灵敏度、特异度、受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）分别为76.74% vs 63.64%（P=0.018）、52.94% vs 40.73%（P=0.009）和0.675（0.550~0.795）vs 0.714（0.601~0.827）（P=0.032）。PCOS组患者Versican水平与FBG水平呈负相关关系（r=-0.738,P=0.022）,ADAMTS-1水平与FBG水平亦呈负相关关系（r=-0.524,P=0.043）。结论：Versican和ADAMTS-1在PCOS患者外周血中低表达,并与胰岛素抵抗呈负相关关系,在PCOS发生中可能起抑制作用。