跑台运动训练对脊髓损伤大鼠肺功能及HMGB-1表达的影响

目的:探讨跑台运动训练对脊髓损伤(SCI)后大鼠肺功能及高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达的影响.方法:选取96只SD雌鼠,随机分成4组,即正常组、假手术组、脊髓损伤非训练组、脊髓损伤训练组.脊髓损伤训练组大鼠于术后第3天开始进行跑台运动训练.分别在术后第3天、术后第14天检测4组大鼠动脉血气分析,肺组织湿/干重比...     

早期跑台及转轮训练对大鼠脊髓损伤后的功能恢复及ED1表达的影响

目的观察早期跑台及转轮训练对大鼠脊髓损伤后的功能恢复及ED1表达的影响。 方法选取22只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(8只)、训练组(8只)和假手术组(6只)。对照组和训练组制备T9大鼠脊髓挫伤模型,假手术组只进行T9椎板切除术,而不损伤脊髓。去除死亡及造模失败大鼠,最终17只大鼠完成本研究并纳入统计分析,其中对照组6只、训练组5只、假手术组6只。术后第2天开始进行BBB评分,以后每周进行BBB评分。训练组术后第2天开始转轮及跑台训练,每周5次,持续8周;8周后处死各组大鼠,用多聚甲醛心脏灌流固定,包埋后行冰冻切片,损伤处脊髓切片行尼氏染色、ED1及GFAP免疫荧光染色检测脊髓空洞及损伤面积及炎症细胞表达。 结果①术后第2天,假手术组的BBB评分为(20.58±1.44)分,得分最高;对照组和训练组大鼠的后肢失去运动能力或仅残存一个或两个后肢关节轻微运动,2组大鼠的BBB评分差异无统计学意义;评定后训练组开始治疗,术后1周与对照组相比,训练组显示更高的BBB评分(t2,29＝6.13,P<0.001),而术后3周、5周直到术后8周,组间差异均有统计学意义（P<0.05）;术后第7周和第8周时,训练组的BBB评分分别为（13.60±1.71）和（14.60±1.26）分,而对照组评分较低［（11.83±0.72）和（12.17±0.94）分］;但术后2周和4周时,对照组与训练组相比,组间差异无统计学意义（P>0.05）。②组织形态学分析,显示脊髓挫压伤会导致空洞,局部组织结构的丧失,损伤中心白质和灰质均发生变化,空腔会延伸几个毫米,尚存完好的组织淡染并显示部分脱髓鞘变化和小的空腔;假手术组脊髓很完整。与对照组相比,训练组能显著减小损伤面积（P<0.05）,但不能减小空洞面积（P>0.05);脊髓损伤后ED1阳性细胞数明显增多［（1905.08±807.38）个］,主要表达在空洞周围,与对照组相比,训练组的ED1阳性细胞数明显降低［（687.20±458.02）个］,且组间差异有统计学意义(P<0.01)。 结论康复训练可以促进脊髓挫压伤后大鼠运动功能的恢复,其可能机制与康复训练可以减少损伤面积及损伤处炎症有关。     

复方丹参对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的：观察大鼠脊髓损伤后应用复方丹参对细胞凋亡的影响以进一步探讨其对急性脊髓损伤治疗的可能性。方法：成年大鼠随机分为正常组、脊髓损伤后应用复方丹参组和应用生理盐水对照组，损伤1，2，4周后按改良的联合行为评分(combined behavioral score，CBS)方法评价大鼠双后肢神经功能恢复情况，然后在不同时间点(8h，1，3，7，14，28d)处死。用苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果：HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变复方丹参组明显轻于生理盐水组。CBS评分在复方丹参组、生理盐水组7，14，28d时间点间比较差异有显著性意义(t=3．572，4．853，2．495，v=8；P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)；复方丹参组、生理盐水组两组均发现凋亡细胞，且神经细胞凋亡指数在生理盐水组、复方丹参组8h，1，3，7，14，28d时间点间比较差异有显著性意义(t=2．533，1．201，3．342，3．027，2．953，2．282，v=18；P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)。结论：复方丹参能抑制大鼠脊髓损伤后细胞凋亡，并对其继发性损害有多重的保护作用。     

早期跑台训练联合超短波治疗对脊髓损伤大鼠功能恢复的影响

目的 观察早期跑台训练联合超短波治疗对大鼠脊髓损伤（SCI）后4周BBB评分、损伤部位水通道蛋白-4（AQP-4）和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨两种方法单独应用及联合应用对SCI的疗效及作用机制。 方法 选取50只雌性SD大鼠,采用改良Allen′s法制作大鼠SCI模型,造模成功（40只）后按照随机数字表法将其分为假手术组、对照组、超短波组、跑台组和联合组,每组8只。术后4周,用BBB评分法评价大鼠后肢运动功能的恢复情况。术后4周取材,SCI部位行GFAP和AQP-4免疫组化染色,测定蛋白表达的积分光密度值（IOD）,进行比较分析。 结果 假手术组BBB评分为21分。余4组术后1 d的BBB评分为0～1分,随着时间延长,评分逐渐增加,除假手术组外,余4组术后4周的BBB评分显著增高（P<0.05）。与对照组同时间点比较,跑台组、联合组大鼠的BBB评分显著较高（P<0.05）。与超短波组同时间点比较,跑台组术后4周［（12.88±3.04）分］,联合组术后2周［（10.12±1.13）分］、3周［（12.38±1.19）分］及4周［（14.50±1.31）分］的BBB评分较高（P<0.05）。SCI术后4周,超短波组、跑台组及联合组AQP-4 IOD均较对照组低（P<0.05）,联合组AQP-4 IOD较超短波组低（P<0.05）。SCI后4周,超短波组、跑台组、联合组GFAP IOD均较对照组低（P<0.05）。与超短波组比较,联合组GFAP IOD较低（P<0.05）。与跑台组比较,联合组GFAP较低（P<0.05）。 结论 跑台训练、超短波治疗均对大鼠SCI后的运动功能恢复有积极作用,其治疗机制可能与减轻损伤部位的AQP-4和GFAP表达有关,且联合应用的疗效更为优异。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后行为学变化及细胞凋亡的影响

目的：观察三七总皂甙对大鼠脊髓损伤细胞凋亡的保护作用并分析其可能的作用途径。 方法：实验于2005—06／11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。实验共选取64只SD大鼠，随机分为损伤组和三七总皂甙组。每组32只，采用改良Allen’s重物打击法造成大鼠中度脊髓损伤，三七总皂甙组于伤后30min腹腔注射50g／L三七总皂甙（100mg／kg），伤后2，4h用50mg／kg，以后1次／d。剂量200mg/kg，连用12d。损伤组于伤后各时间点腹腔注射等体积生理盐水。观察比较治疗后不同时间大鼠行为评分、斜板试验、组织学检查及脊髓神经细胞凋亡指数变化。 结果：64只SD大鼠全部纳入结果分析。①三七总皂甙组和损伤组大鼠在7d时行为评分分别为2．50&;#177;0．53、1．38&;#177;0．74，14d时分别为3．25&;#177;0．89、1．75&;#177;0．71，两组比较差异有显著性（t=-3．473，-3．742，P〈0．05）。②三七总皂甙组与损伤组1，3，7，14d各时间点斜板最大角度差异均有显著性（t=-4．081，-4．235，-4．245，-4．687，P〈0．05）。③苏木精-伊红染色光镜下发现脊髓组织病理学改变三七总皂甙组明显轻于损伤组。④损伤组大鼠脊髓损伤后1d在灰质及白质中均可见标记阳性细胞，损伤3d后凋亡指数渐增，7d达高峰；三七总皂甙组大鼠脊髓神经细胞凋亡指数较损伤组低，高峰提前，发生在损伤后3d，以后逐渐降低。两组比较差异均有显著性（t=4．196，2.627，7．732，3．547，P〈0．05）。 结论：三七总皂甙能抑制脊髓损伤神经细胞凋亡，对损伤脊髓的神经功能具有保护作用。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠脊髓损伤后应用大剂量甲基的强的松龙对脊髓损伤区细胞凋亡的影响。方法：将大鼠分为脊髓损伤应用大剂量甲基强的松龙治疗组（Ａ组）、单纯脊髓损伤组（Ｂ组）,损伤后１、３、７、１４、２８天驿脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测（ＴＵＮＥＬ）以及Ｂｃｌ－２蛋白免疫反应表达的测定（免疫组化法）,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果：Ａ、Ｂ两组中均发现凋亡细胞及ＢＣＬ－２蛋白阳性表达,Ｂ组细胞凋亡率大于     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后行为学变化及细胞凋亡的影响

目的:观察三七总皂甙对大鼠脊髓损伤细胞凋亡的保护作用并分析其可能的作用途径。方法:实验于2005-06/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。实验共选取64只SD大鼠,随机分为损伤组和三七总皂甙组,每组32只,采用改良Allen’s重物打击法造成大鼠中度脊髓损伤,三七总皂甙组于伤后30min腹腔注射50g/L三七总皂甙(100mg/kg),伤后2,4h用50mg/kg,以后1次/d,剂量200mg/kg,连用12d。损伤组于伤后各时间点腹腔注射等体积生理盐水。观察比较治疗后不同时间大鼠行为评分、斜板试验、组织学检查及脊髓神经细胞凋亡指数变化。结果:64只SD大鼠全部纳入结果分析。①三七总皂甙组和损伤组大鼠在7d时行为评分分别为2.50±0.53、1.38±0.74,14d时分别为3.25±0.89、1.75±0.71,两组比较差异有显著性(t=-3.473,-3.742,P<0.05)。②三七总皂甙组与损伤组1,3,7,14d各时间点斜板最大角度差异均有显著性(t=-4.081,-4.235,-4.245,-4.687,P<0.05)。③苏木精-伊红染色光镜下发现脊髓组织病理学改变三七总皂甙组明显轻于损伤组。④损伤组大鼠脊髓损伤后1d在灰质及白质中均可见标记阳性细胞,损伤3d后凋亡指数渐增,7d达高峰;三七总皂甙组大鼠脊髓神经细胞凋亡指数较损伤组低,高峰提前,发生在损伤后3d,以后逐渐降低。两组比较差异均有显著性(t=4.196,2.627,7.732,3.547,P<0.05)。结论:三七总皂甙能抑制脊髓损伤神经细胞凋亡,对损伤脊髓的神经功能具有保护作用。     

早期运动训练对脊髓损伤大鼠后肢运动功能影响及相关机制研究

目的:探讨早期运动训练对脊髓损伤大鼠后肢运动功能的影响及其相关机制。方法:成年SD雄性大鼠75只,采用改良钳夹法建立大鼠T10损伤模型。术后随机分为假手术组(A组)、脊髓损伤组(B组)、脊髓损伤+跑台训练组(C组),术前3天及术后第2、3、7、14天采用BBB行为功能评定量表对大鼠后肢运动功能进行评分。术后第2、3、5、7天取损伤中心头尾端约1cm的脊髓组织进行脊髓含水量的测定,术后第3天行免疫组化检测脊髓组织损伤段半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和髓过氧化物酶(MPO)的表达情况,行HE染色观察脊髓组织病理学改变。结果:1术前各组大鼠后肢运动功能评分均为21分,术后B组和C组大鼠评分随着时间的延长而逐渐升高,第7天时3组之间差异有显著性意义(P0.05)。2A组大鼠脊髓含水量基本不变,脊髓损伤后第3天,水肿达到高峰,随后逐渐下降,到术后第7天脊髓含水量仍高于A组,且各个时间点差异均有显著性意义(P0.05)。3术后第3天A组大鼠caspase-3少量表达,MPO基本不表达,B组大鼠caspase-3和MPO的表达均高于C组,3组相比差异均有显著性意义(P0.05)。4B组脊髓组织病理学改变较C组重。结论:早期运动训练可以促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复,其机制可能与减轻脊髓损伤后水肿,减少细胞凋亡和炎症反应有关。     

嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后神经元凋亡的影响

目的：了解嗅鞘细胞移植对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响，探讨嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的机制。方法：成年动物脊髓半切损伤模型，进行嗅鞘细胞和培养液移植，在伤后1～14d，应用苏木精一伊红和TUNEL法观测神经细胞存活和细胞凋亡变化。结果：脊髓半切后，神经元数目随时间下降。伤侧和对侧分别在伤后1d和2d，出现以神经元为主的凋亡高峰。7d出现以胶质细胞为主的凋亡高峰，14d凋亡下降。嗅鞘细胞移植可明显降低脊髓损伤后神经细胞凋亡，促进神经细胞存活。     

人脂肪间充质干细胞移植结合跑台训练对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及机制

摘要 目的：探讨人脂肪间充质干细胞（hADSCs）结合跑台训练对脊髓损伤（SCI）大鼠运动功能的影响。 方法：成年雄性SD大鼠60只,采用改良Allen打击法制作T10不完全SCI模型。术后随机分为损伤组（模型组,未行处理）、细胞移植组（细胞组,行细胞移植）、跑台训练组（训练组,行跑台训练）和跑台训练结合细胞移植组（联合组,行跑台训练及细胞移植）。术前及术后采用BBB评分和Tarlov评分行运动功能评定,术后1、2、4周取脊髓行免疫荧光染色检测细胞存活,炎症反应相关细胞（ED1阳性巨噬细胞）,胶质瘢痕[胶质纤维酸性蛋白,GFAP及神经丝蛋白（NF-200）,5-羟色胺（5-HT)]。 结果：治疗组行为学评分及荧光定量检测均优于模型组（P＜0.05）;但联合组最明显,训练组和细胞组间无明显区别（P＞0.05）。 结论：hADSCs移植联合跑台训练对不完全性SCI大鼠运动功能恢复具有协同功效,治疗机制可能与进一步减轻伤后炎症反应,减少损伤面积,促进轴突再生有关。     

硬膜外脊髓电刺激结合减重跑台训练对脊髓损伤大鼠运动功能的影响

目的探讨硬膜外脊髓电刺激（ESCS）结合减重跑台训练对脊髓损伤大鼠运动功能的影响。 方法共选取成年雌性SD大鼠24只，采用改良Allen打击法将其制作成T8～9脊髓损伤模型，将造模成功大鼠随机分为脊髓损伤组(简称模型组，术后未给予特殊处理)、硬膜外电刺激组(简称电刺激组，术后给予硬膜外电刺激)、减重跑台治疗组(简称减重运动组，术后给予减重运动训练)和减重跑台训练结合硬膜外电刺激组(简称治疗组，术后给予减重运动训练及硬膜外电刺激)。于术前及术后采用神经行为学评分（BBB评分）对各组实验大鼠运动功能恢复情况进行评定，并于术后8周时取各组大鼠脊髓损伤节段进行神经丝蛋白（NF200）免疫组化染色分析。 结果减重运动组和治疗组大鼠神经行为学评分（BBB评分）和NF200染色光密度值均显著高于模型组及电刺激组水平（P<0.05）；治疗组大鼠BBB评分显著高于减重运动组（P<0.05），但治疗组和减重运动组NF200免疫组化染色结果间差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论ESCS及减重运动训练均对不完全性脊髓损伤大鼠步行功能恢复具有促进作用，且两者联用具有协同功效，其治疗机制可能与刺激脊髓损伤下位中枢模式发生器神经元有关。     

减重步行训练结合针刺治疗对脊髓损伤大鼠运动功能及Cdh1 mRNA表达的影响

摘要 目的：探讨减重步行训练结合针刺治疗对脊髓损伤（SCI）大鼠运动功能及Cdh1 mRNA表达的影响。 方法：将150只雄性SD大鼠随机分为针刺组（A）、步行训练组(B)、针步组（C）、对照组（D）,每组30只,及假手术组（E）、空白组（F）,每组15只。A、B、C、D组采用切割型脊髓损伤模型法制备SCI模型;E组仅暴露脊髓。并于术后3d开始A、B、C组相应治疗,D、E不予治疗,F组不做任何处理。术后3、5、7、14、21d对大鼠后肢运动功能进行BBB评分;及提取脊髓损伤节段组织总RNA,用实时荧光定量测定PCR检测损伤区Cdh1 mRNA的表达。 结果：21d后治疗组BBB评分明显高于D组,其中C组最高,B组次之,A组最少,各组差异有显著性（P<0.01）;Cdh1 mRNA的表达C组最高,与其他各组有显著差异（P<0.01）;A、B组与D组相比差异有显著性（P<0.01）,A、B组差异无显著性（P>0.05）。 结论：减重步行训练或针刺治疗都对SCI大鼠运动功能及损伤部Cdh1 mRNA的表达具有良性作用,二者结合疗效更为显著。     

早期运动训练对脊髓损伤大鼠痛觉阈值及脊髓后角胶质细胞活化的影响

目的:观察早期运动训练对T10不完全性SCI大鼠机械性及热刺激痛觉阈值、脊髓后角小胶质细胞和星形胶质细胞活化的影响。方法:将24只成年雌性SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、SCI-对照组(SCI-Sed组)和SCI-运动组(SCI-TT组)。SCI-Sed组和SCI-TT组使用改良Allen’s法制作T10不完全SCI模型,Sham组只暴露脊髓。SCI-TT组于SCI第8天行减重平板训练。于SCI术前、术后第1、7、14、21、28、35天使用Von Frey单丝及热刺激痛觉测试仪对大鼠的痛觉阈值进行评估。SCI 5周后,使用免疫组化技术对所有大鼠L4—5脊髓进行染色,观察脊髓后角小胶质细胞及星形胶质细胞活化情况,并对大鼠痛觉阈值与胶质细胞活化之间的相关性进行分析。结果:机械性痛觉阈值评估结果显示,SCI术后第1天,SCI-Sed组和SCI-TT组阈值均较Sham组增加(P0.05);之后两组阈值均低于Sham组(P0.05);第21—35天,SCI-TT组阈值明显高于SCI-Sed组(P0.05)。热刺激痛觉阈值结果显示,SCI术后第1天,SCI-Sed组和SCI-TT组痛觉阈值较Sham组均增加(P0.05);SCI 7天后,两组大鼠痛觉阈值均低于Sham组(P0.05);术后14—35天,SCI-TT组痛觉阈值明显高于SCI-Sed组(P0.05)。小角质细胞及星形胶质细胞免疫组化结果显示,SCI-Sed组和SCI-TT组脊髓后角内的阳性细胞数量多于Sham组(P0.05);而SCI-TT组明显少于SCI-Sed组(P0.05)。相关性分析显示,SCI后第35天,痛觉阈值与脊髓后角胶质细胞活化数量之间呈负相关(P0.001)。结论:早期运动训练对缓解SCI大鼠NP的发生有一定作用,其机制可能与抑制脊髓后角胶质活化相关。     

减重步行训练对不完全脊髓损伤大鼠脚桥核可塑性影响的研究

目的:探索减重步行训练对不完全脊髓损伤大鼠脚桥核可塑性的影响。方法:将雌性SD大鼠24只分为减重步行训练组、未训练组和假手术组,每组8只,用美国NYU脊髓冲击损伤仪制作大鼠T10脊髓不完全损伤模型。采用PET-CT、免疫荧光染色及BBB评分观察减重步行训练对不完全脊髓损伤(iSCI)大鼠中脑运动区(MLR)脚桥核可塑性变化和后肢运动功能的改善。结果:减重步行训练组大鼠的后肢运动功能BBB评分在造模后4周、7周两个时间点的分值均较未训练组高(P0.05)。假手术组大鼠在造模后1周、4周、7周3个时间点的BBB评分值均明显高于训练组和未训练组(P0.01)。虽然训练组18F-氟脱氧葡萄糖(18F-FDG)的标准摄取值(SUV)的平均值较未训练组增高,而且假手术组的SUV值最高,但三组SUV值的差异不具有显著性意义(P0.05)。神经元特异性核抗原(NeuN)免疫荧光染色检测显示训练组、未训练组、假手术组三组间大鼠脚桥核的神经元数量差异无显著性意义(P0.05),而脚桥核2型囊泡谷氨酸转运体(VGLUT2)的积分光密度值(IOD)比较,假手术组IOD表达最高,训练组较未训练组明显增强(P0.01)。结论:减重步行训练能够明显提高iSCI大鼠后肢运动功能及其脚桥核中谷氨酸能信号传递,而且iSCI后大鼠中脑脚桥核的整体代谢及神经元数量无明显改变。因此认为脚桥核的谷氨酸表达增强是减重步行训练使iSCI大鼠后肢步行功能改善的原因之一。减重步行训练能使脚桥核发生神经递质表达层面的可塑性变化。     

Supported treadmill ambulation training after spinal cord injury: a pilot study

OBJECTIVES: To conduct a pilot study of weight-supported ambulation training after incomplete spinal cord injury (SCI), and to assess its safety. DESIGN: Quasiexperimental, repeated measures, single group. SETTING: Veterans Affairs medical center. PATIENTS: Three subjects with incomplete, chronic, thoracic SCIs; 2 classified as D on the American Spinal Injury Association (ASIA) impairment scale and 1 as ASIA impairment scale C. INTERVENTION: Subjects participated in 12 weeks of training assisted by 2 physical therapists. The training consisted of walking on a treadmill while supported by a harness and a pneumatic suspension device. Support started at 40% of body weight and a treadmill speed of.16kmph, and progressed by reducing support and increasing treadmill speed and continuous treadmill walking time up to 20 minutes. Training was conducted for 1 hour per day, 5 days per week for 3 months. Treadmill walking occurred for 20 minutes during the sessions. MAIN OUTCOME MEASURES: Gait function (speed, endurance, walking status, use of assistive device and orthotics); oxygen costs of walking; brain motor control assessment; self-report indices; ASIA classification; muscle function test; and safety. RESULTS: All 3 subjects increased gait speed (.118m/s initially to.318m/s after training 12wk), and gait endurance (20.3m/5min initially to 63.5m/5min). The oxygen costs decreased from 1.96 to 1.33mL x kg(-1) x m(-1) after 12 weeks of training. CONCLUSIONS: This pilot study suggests that supported treadmill ambulation training can improve gait for individuals with incomplete SCIs by using objective gait measures. The self-report indices used have promise as patient-centered outcome measures of this new form of gait training. A larger, controlled study of this technique is warranted.     

Robotic-assisted, body-weight-supported treadmill training in individuals following motor incomplete spinal cord injury

BACKGROUND AND PURPOSE: Performance of therapist-assisted, body-weight-supported treadmill training (BWSTT) to enhance walking ability of people with neurological injury is an area of intense research. Its application in the clinical setting, however, is limited by the personnel and labor requirements placed on physical therapists. Recent development of motorized ("robotic") rehabilitative devices that provide assistance during stepping may improve delivery of BWSTT. CASE DESCRIPTION: This case report describes the use of a robotic device to enhance motor recovery and ambulation in 3 people following motor incomplete spinal cord injury. INTERVENTIONS: Changes in motor impairment, functional limitations, and locomotor disability were monitored weekly during robotic-assisted BWSTT and following transition to therapist-assisted BWSTT with the assistance of one therapist. OUTCOMES: Following this training, 2 patients recovered independent over-ground walking and another improved his gait speed and endurance. DISCUSSION: The use of robotic devices may assist physical therapists by providing task-specific practice of stepping in people following neurological injury.