中药乌梅炒炭前后DNA指纹图谱的研究

目的探讨乌梅炒炭炮制前后DNA指纹图谱特征。方法采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品。从10个引物中筛选出能稳定扩增的引物S362(5'-GTCTCCGCAA-3')对不同产地乌梅进行扩增。结果此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱,不同产地的乌梅生品DNA指纹图谱一致,均有900bp、750 bp、650 bp、550 bp、300 bp、200 bp条带;经炮制后的乌梅炭DNA指纹图谱与生品有较大差异,缺少较长碱基对的扩增条带,均多出了400 bp的条带。结论 RAPD技术可作为乌梅生品道地品种的鉴定的参考方法。     

苍术GC指纹图谱研究

目的:建立来自14个地区苍术的GC指纹图谱,为其质量评价提供依据。方法:苍术粉碎后经乙酸乙酯萃取制成萃取液,采用气相色谱法,HP-INNOWax Polyethylene Glycol(30.0m×0.32mm×0.5μm)石英毛细管柱,以FID为检测器,正十五醇为内标,气化室温度270℃,柱温185℃,建立苍术指纹图谱。结果:苍术指纹图谱由10个峰组成,其峰面积大于90%,其精密度、稳定性、重复性均符合指纹图谱研究的技术要求(RSD5%)。结论:不同产地苍术在组分的分布上差异不大,但在成分的比例和量上差异较大,本法重现性好,简单,易行,可作为苍术质量控制的依据。     

麸炒前后苍术HPLC指纹图谱

目的:通过建立生苍术和麸炒苍术的高效液相指纹图谱,比较苍术麸炒前后化学成分的差异,为麸炒苍术炮制机制的研究提供科学依据。方法:采用Agilent 1100 series高效液相色谱仪,Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长270 nm。结果:分别建立了生苍术和麸炒苍术的高效液相指纹图谱,各标定18个共有峰,相似度均大于0.90。麸炒后苍术中包括苍术素醇,(4E,6E,12E)-十四癸三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯和苍术素在内的多个色谱峰的峰面积值下降。结论:运用高效液相法可对苍术麸炒前后化学成分进行分析,实验方法准确可靠。     

苍术薄层色谱指纹图谱研究

目的建立中药苍术的薄层色谱指纹图谱。方法采用硅胶GF254预制板以及硅胶HSGF254预制板,控制室内温度25℃、相对湿度53%,展开剂组成为甲苯-乙酸乙酯（7∶1）,紫外光（254 nm）下观察荧光猝灭斑点。用薄层色谱视频摄像系统拍摄图像,并自动生成色谱轮廓扫描图谱,同时获得积分数据。并对收集的10批药材样品在同一薄层板上平行分析比较。结果不同地区的10批苍术药材的薄层色谱指纹图谱有共同的特征荧光色谱图像。结论苍术的薄层色谱指纹图谱可作为其指纹特征。     

苍术电化学指纹图谱实验研究

目的：建立苍术的电化学指纹图谱,并与白术进行比较。方法：以H2S04-CH3COCH3-MnsO4-KBrO3为化学振荡体系、中药苍术为振荡底物,应用电化学工作站记录电位（E）随时间（t）的变化,绘制化学振荡曲线。结果：得到了苍术的电化学指纹图谱。反应在诱导期活化能为73．28kJ／mol、振荡期活化能为70．69kJ／tool。浓度与诱导时间呈良好的线性关系。苍术与白术的电化学指纹图谱有明显区别。结论：电化学指纹图谱可以用来鉴别苍术与白术,该方法简便、易行,是一种较好的鉴别中草药的方法。     

三七DNA指纹图谱分析

目的:对文山三七和广西三七进行DNA指纹图谱的鉴别研究,了解其间遗传变异的大小,并建立三七品种的检定方法。方法:采用RAPD技术。结果:从45个引物中筛选出23个扩增稳定且谱带清晰的引物,共得到211个遗传标记。DNA指纹图谱显示,样品间有遗传差异,具有不同的遗传特征,据此可进行鉴别。结论:RAPD技术可作为三七鉴别的参考方法。     

野生天麻和栽培天麻的DNA指纹图谱分析

目的:对野生天麻和三种人工栽培天麻进行DNA指纹图谱的鉴别研究,了解其间遗传变异的大小,并建立天麻品种的检定方法。方法:采用RAPD技术。结果:从45个引物中筛选出23个扩增稳定且谱带清晰的引物,共得到209个遗传标记。DNA指纹图谱显示,各样品间有遗传差异,具有不同的遗传特征,据此可进行鉴别。结论:RAPD技术可作为天麻鉴别的参考方法。     

苍术化学指纹图谱建立及其稳定性研究

目的建立苍术的HPLC化学指纹图谱,并考察其聚乙烯炔类成分的稳定性。方法采用Polaris-C18。柱,以乙腈一水溶液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长340nm-,建立苍术聚乙烯炔类成分的HPLC指纹图谱。结幕共有14种聚乙烯炔类成分得到较好分离,且其稳定性良好。结论聚乙烯炔类成分的HPLC指纹图谱可以作为苍术质量控制的一个标准。     

枸杞基因组DNA提取及指纹图谱分析

目的建立一种适于RAPD分析的快速提取枸杞叶片基因组DNA的方法,并利用RAPD技术研究枸杞属植物基因组DNA指纹图谱。方法采用改进的CTAB法提取枸杞冷藏幼叶的基因组DNA,利用RAPD技术对其进行指纹图谱分析。结果改进的CTAB法提取的10份枸杞材料基因组DNA均适于RAPD分析;可提供清晰的RAPD指纹图谱,利用筛选出的2个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到56条带,其中多态性条带44条,多态性百分率为78.6%。结论表明改进的CTAB法提取的枸杞基因组DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析纯化,可以直接用于RAPD分析;RAPD对枸杞属植物进行指纹图谱分析是可行的。     

苍术炒焦前后GC指纹图谱的比较

目的:建立生苍术和焦苍术挥发油的GC指纹图谱,阐明苍术炒焦前后挥发油部位化学成分的变化规律。方法:采用水蒸气蒸馏法制备挥发油;建立气相色谱指纹图谱,检测条件为HP-5石英毛细管柱(0.32 mm×30 m,0.25μm),载气(N2)流速0.8 m L·min-1,进样口温度240℃,进样量1μL,分流进样,分流比20∶1,检测器温度260℃,柱温采用程序升温模式;并对炒焦前后的GC指纹图谱进行比较与分析。结果:在苍术炒焦前后挥发油的GC指纹图谱中有25个共有峰,各共有峰相对保留时间基本相同,但相对峰面积发生了显著变化;其中15~17,19,23~25号峰的峰面积降低率均20%;16号与17号色谱峰的峰面积比值在生品中均3.0,而在焦品中却均3.0;19号与23号色谱峰的峰面积比值在生品中均3.0,而在焦品中却均3.0。鉴定16号峰为β-桉叶醇,19号峰为邻苯二甲酸二异丁酯,23号峰为白术内酯Ⅱ,24号峰为白术内酯Ⅰ,25号峰为白术内酯Ⅲ。结论:苍术生品和焦品的GC色谱特征峰差异明显、结果稳定、专属性强,可作为二者的定性鉴别特征之一,这为阐释焦苍术的降燥减毒机制提供了实验依据。     

用RAPD技术评估苍术居群间的亲缘关系

用ＲＡＰＤ方法分析了苍术不同居群间的亲缘关系。选取１０个１０碱基的随机引物对苍术的１０个居群共８３个个体进行扩增,获得了１００个ＤＮＡ片断。用ＲＰＡＰＤｉｓｔａｎｃｅ软件计算了不同居群间的Ｊａｃｃａｒｄ遗传距离,得距离矩阵,分别用单联法、全联法、类平均法作聚类图,结果表明,该１０个居群可划分为３个类群：即类群１,大别山类群;类群２,南苍术类群（Ｗｕ,Ｌｕ,Ｈｕ,Ｘｕ,Ｃａ,Ｌｉ＿）;类群３,北苍术     

用RAPD技术评估苍术居群间的亲缘关系

用RAPD方法分析了苍术不同居群间的亲缘关系。选取10个10碱基的随机引物对苍术的10个居群共83个个体进行扩增,获得100个 DNA片断。用RAPD istance软件计算了不同居群间的Jaccard遗传距离,得距离矩阵,分别用单联法、全联法、类平均法作聚类图,结果表明,该10个居群可划分为3个类群:即类群1,大别山类群(Ta);类群2,南苍术类群(Wu、L u、Hu、Xu、Ca、L i);类群 3,北苍术类群(Tt、Da、L ao)。在这3个类群中,南、北苍术之间的遗传距离相对较近,大别山类群与南、北苍术之间的距离则较远。根据本试验的结果及前人关于苍术精油成分差异的聚类结果,作者认为大别山类群比较特殊。     

A New Sesquiterpenoid Glycoside from Rhizomes of Atractylodes lancea

Objective To study the water-soluble chemical constituents from the rhizomes of Atratylodes lancea. Methods Two sesquiterpenoid glycosides were purified by column chromatography and their structures were determined by spectroscopic analysis. They were also evaluated for anti-inflammatory activity by determining the inhibitory activity on LPS-induced NO and PGE2 generation in RAW 264.7 cell lines. Results Compound 1 was a new sesquiterpenoid glycoside, named as(1S,4S,5R,7R,10S)-4,11,14-trihydroxyguai-3-one-11-O-β-D-glucopyranoside, but exhibited no appreciable activity. Compound 2 was atractyloside A and showed weak activity. Conclusion The hydroxyl group at C-10 of guaiol-type glycoside could be important for anti-inflammatory activity.     

南苍术与野生白术的开花动态研究

目的了解南苍术与野生白术的开花式样。方法开展野外调查,迁地栽培连续观察和控制授粉试验。结果报道了白术与苍术的开花动态及其与授粉生态之间的关系。结论南苍术花的生物学特性在种质保护方面具有重要的意义。     

茅苍术人工辅助授粉的初步研究

目的：保护江苏省的野生茅苍术资源，增加茅苍术的种群数量。方法：在茅苍术的花期对其实行人工授粉。结果：提高了野生茅苍术的结实率。结论：人工授粉的方法可以辅助茅苍术的雌蕊完成受粉过程，有利于茅苍术在野外顺利繁殖，是保护和扩大茅苍术资源的有效措施。     

南北苍术的RAPD分析及其划分的初步探讨

目的 :用RAPD方法在分子水平上对南北苍术的划分进行初步探讨。方法 :用 4 0个引物对7个居群的南苍术、北苍术及关苍术进行RAPD分析。RAPD分析软件RAPDistancePackage———Version1.0 4中Dice的方法计算任意两个样品间的遗传距离 ,得树系图。结果 :共检测到多态位点 6 0个。聚类分析显示 ,苍术有以地域为界聚类的倾向 ,且南苍术首先与关苍术聚类后再与北苍术聚类。结论 :苍术的化学成分、遗传分化和地理分布有一定的相关性 ,以地域为界划分南北苍术有一定道理     

黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响

目的 研究黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响.方法 选择小鼠腹腔注射尿酸生成的前体物质次黄嘌呤(Hypoxanthine)的方法制备高尿酸血症动物模型,给予黄柏、苍术提取物灌胃(含生药18.75 g/kg·d),连续1周,采用改良尿酸酶Trinder's法测定小鼠血清尿酸值.结果 黄柏与苍术提取物组与别嘌呤醇组均能显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P＜0.01),二者对正常动物血清尿酸水平仅有一定降低的趋势,但无显著性差异.结论 黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠具有明显降低血清尿酸水平作用,是一种有开发前景的降尿酸治疗痛风中药活性成分.     

特征图谱与化学计量学相结合评价南北苍术饮片的差异性

目的:以苍术HPLC特征图谱为基础,结合化学计量学判别方法,分析南苍术和北苍术饮片质量差异。方法:采用HPLC法建立南苍术与北苍术特征图谱,通过对比两者特征峰,并结合主成分分析、偏最小二乘-判别分析,分析18批苍术样品。结果:对比二者特征图谱发现,北苍术4号峰和7号峰成分含量明显高于南苍术,尤以4号峰更为突出,在南苍术中该含量低于检测限;经统计9号峰与7号峰峰面积比值显示,南苍术A9/A7>2,北苍术A9/A7<2,差异明显。主成分分析和偏最小二乘-判别分析均能将9批南苍术和9批北苍术很好的聚为两个不同组别,并明确导致差异的几个主要成分是4、7、8、9号峰所对应的成分。结论:特征图谱与化学计量学方法相结合可以有效区分南苍术与北苍术,为评价南北苍术的差异性提供了一种新的有效参考模式。     

药用植物茅苍术的组织培养

目的针对茅苍术野生资源濒危的情况,系统地探讨了以组织培养为手段进行快速繁殖的途径。方法以叶柄和叶片为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比进行培养。结果较适宜诱导叶柄形成愈伤组织的激素组合是2,4-D 4.0 mg.L-1+Kt 0.4 mg.L-1,叶片适宜诱导愈伤组织的激素组合是2,4-D4.0 mg.L-1+Kt 0.4 mg.L-1;对于芽的增殖,较适宜的激素组合是6-BA2.0mg.L-1+IBA0.4 mg.L-1或6-BA3.0 mg.L-1+IBA0.4mg.L-1;而根的诱导则在MS+IAA0.5 mg.L-1或MS+NAA0.5 mg.L-1培养基上进行最好。结论采用组织培养方式可以进行茅苍术的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供了有效途径。