分离纯化人血清转铁蛋白的一种简便快速方法

人血清转铁蛋白(Transferrin)为β_1-球蛋白,在血清中浓度约为250毫克/100毫升,分子量为77,000。自人工纯化并结晶[2,3]以来,目前较广采用的提取法[4]步骤繁杂,流程长。本文报告一种简易制备高纯度转铁蛋白的方法。 材料与方法 Affi-Gel Blue树脂为Bio-rad公司产品,DE-52树脂为Whatman公司产品。琼脂糖为B.D.H生产,转铁蛋白标准品系Sigma公司产品,兔抗人血浆转铁蛋白抗体为Calbiochem—Behring Corp生产。其余试剂均为国产,分析纯。提取用标本为正常人血清。     

超速离心法分离人血清脂蛋白组分

从流行病学资料和临床证据说明,动脉粥样硬化的进展程度以及它的并发症——冠心病,与血清低密度脂蛋白(LDL)的浓度呈正比关系,而与血清高密度脂蛋白(HDL)的浓度呈负相关。因此,分离、测定血清中各种脂蛋白组分,对于临床诊断及研究脂蛋白各组分的结构、功能及致病机理,都有一定的     

介绍一种快速分离血清法

血液采集后,待凝固后再分离血清,往往需要半小时以上,为使紧急检查的生化项目尽快为临床提供检验结果,介绍一种快速分离血清的方法。方法:采血后立即慢速离心5分钟(1000～1500转/分),然后取出用细玻棒沿管壁将上层剥离一下,再中速离心3分钟(2000～3000转/分),即可分离出血清。为了检查方法的可靠性,我们将40份标本同时分注两管,分别用常规方法和本法分离     

人血清脂蛋白(a)的分离纯化及其抗血清制备

1988年国际 Lp(a)专题会议公认 Lp(a)为动脉粥样硬化危险因子。Lp(a)增高者,心、脑动脉粥样硬化发病率明显高于正常人。本文用超速离心法结合层析分离 Lp(a),以提取的 Lp(a)免疫羊得到抗血清制品和国外产品作了比较,表明制备的 Lp(a)抗血清为专一的高效价的抗血清。LP(a)为动脉粥样硬化的研究和防治开辟了一个新的领域。本研究为 Lp(a)的检测方法和临床应用建立了基础。材料和方法(一)Lp(a)的分离制备取富含 Lp(a)的空腹血清(用奥地利 G M.Kostner 教授     

一种简便和快速的流感病毒浓缩法

浓缩和纯化流感病毒的方法中,比较简便、快速而又不造成病毒颗粒蛋白结构改变的是红细胞吸附释放法,但它易受毒株种类的影响。已知甲、乙型流感病毒从吸附细胞上游离下来是因其神经氨酸破坏了细胞表面受体所致。故可用RDE克服不同毒株间差别,得到较浓和部分纯化的病毒。本文对此作了研究。     

一种快速简便的小鼠骨髓细胞染色体制备方法

小鼠骨髓细胞染色体标本制备是生物遗传学掌握小动物骨优细胞染色体制备技术的常用方法。在检测环境诱裂剂【则方面有其独特性的优点，已广泛应用于科研和生物实验教学。在多年来的实验教学中我们发现，标本制备的成败与否，首先取决于取材虽，而在实验时由于骨位细胞需反复冲洗骨用胶才能获得，既耗时间又易丢失骨切细胞，所以冲洗骨闻腔一直是这一实验的难点，也是影响实验成功的主要原因。为确保实验时取材不丢失及缩短制片时间，我们将传统法门·‘］进行改进，改进后显得快速而简便，实验效果显著，实验成功率由过去的61．23％提高到93…     

抗人球蛋白血清的简易快速制备法

本文介绍了一种抗人球蛋白血清的简易快速制备法,对本法的机理也作了探讨。     

超速离心密度梯度中间区带加样插入法进一步快速分离人血清脂蛋白

本文报告使用HITACHI80P—7系列制备型超速离心机,RP80T—3角度转子,溴化钠(NaBr)不连续密度梯度,密度范围1.00～1.30g/cm~3,采用中间区带加样插入法超离心技术,68000r/min(410.000g)离心3h,转子腔温态8℃,分离正常人血清脂蛋白,短时间一次分离即可获得血清脂蛋白VLDL、LDF、HOL、和LDS(缺乏     

一种简便、快速的PCR模板DNA制备方法

传统的DNA提取、纯化方法多是在SDS等变性剂和蛋白酶K裂解后,经多次酚、氯仿等抽提,然后用乙醇沉淀DNA。     

一种简便快速制备多聚酶链反应模板的方法

在多聚酶链反应时采用一种快速简便的模板ＤＮＡ制备方法。组织块在冰浴中剪碎和匀浆，再用蛋白酶Ｋ降解；细胞则直接用蛋白酶Ｋ处理。离心后，取上清则可直接作为ＰＣＲ的模板。采用此方法制备的模板，经ＰＣＲ扩增，检测宫颈细胞、细胞培养物、口腔肿瘤活检组织中ＨＰＶ６、１１和ＨＳＶ的感染，取得了满意的结果。揭示该方法能从各种细胞和组织中制备ＰＣＲ的模板，而无需用ＳＤＳ－苯酚－氯仿抽提ＤＮＡ。     

人血清脂蛋白的超速离心分离Ⅰ、人血清极低密度及低密度脂蛋白的大量分离

本文报道了用区带转头超速离心分离人血清两种低密度脂蛋白的新方法,该法先用硫酸右旋糖酐粗提,浓缩,得到人血清中极低密度(VLDL)及低密度(LDL)脂蛋白混合液,然后再用溴化钠密度梯度区带超速离心法将VLDL、LDL分开并除去混合液所含少量杂蛋白,从而获得大量纯净VLDL及LDL制品。本法分离效果好,重复性佳,固定离心条件后,     

一次性密度梯度超速离心分离人血清脂蛋白及无脂血清

密度盐溶液配制　　将分析纯之ＮａＣｌ、ＫＢｒ在 12 5℃干燥 2 4ｈ后 ,将ＮａＣｌ配制成密度为 1 0 0 6的溶液 ,而干燥ＫＢｒ用于调定血清密度。1.1.3　人血清标本　　正常人新鲜全血 ,在室温放置 1ｈ使凝固 ,然后在 4℃、5 0 0 0ｒ ｍｉｎ离心 30ｍｉｎ ,取出血清 ,加ＮａＮ3 (终浓度为 0 0 1% )。1.1.4　试剂　　氨基黑 10Ｂ、苏丹黑 10Ｂ均为北京化工厂产品 ,其余试剂均系分析纯。1.2　方法1.2 .1　人血清脂蛋白的快速分离　　取正常人混合血清 ,定量移入烧杯中 ,根据ｄ =ｍ ｖ ,用万分之一分析天平根据称量法测出血清初始密度ｄｏ ,…     

介绍一种简便、快速、大量制备人血清载脂蛋白AⅠ、AⅡ及其抗血清的方法

采用80ml的PC管一次性超速离心分离入血清极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白;用DEAE-52离子交换柱层析同时纯化载脂蛋白AI(ApoAl)、AII(ApoAII)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定ApoAI分子量27000u(原子质量单位)、ApoAII18000u(原子质量单位)。经SDS-PAGE,双向免疫扩散及免疫电泳证实其为纯品。采用上述抗原免疫新西兰白兔制备的抗ApoAI、抗ApoAII血清经双向免疫扩散,免疫电泳证实为单价抗备清。这种分离提纯ApoAI、ApoAII的方法具有简便、快速、价廉、适于大量制备等优点。     

分离鉴别氨基酸的一种简便方法

蛋白质是人体首要营养素,其基本组成原位是氨基酸.组织与体液中的氨基酸处于动态平衡状态.因此,体液中氨基酸含量的变化反映人体营养、发育和健康状况及错综复杂的生物化学变化.临床上氨基酸的分析主要采用色谱法,如高效液相色谱、薄层扫描色谱[1]和离子交换色谱.这些方法不乏先进性和准确性,但因仪器昂贵,操作繁琐,不适于基层医院应用.笔者从简便、经济的角度考虑,研究氨基酸的纸色谱分离鉴定方法,获得较好结果.     

一种简便快速微核测定方法

本文采用人离体血淋巴细胞培养“低渗膨胀法”对不同辐射剂量诱发的淋巴细胞微核进行不同培养时间的观察。结果表明，在所观察的剂量范围内，培养４０ｈ与培养７２ｈ的淋巴细胞微核率均良好的线性关系，其直线方程分别为：Ｙ４０＝１２．１９３２＋０．２３０９Ｄ（ｒ＝０．９６６９，Ｐ＜０．０５），Ｙ７２＝１１．１６９４＋０．２３２０Ｄ（ｒ＝０．９６１９，Ｐ＜０．０５）。培养４０ｈ与培养７２ｈ的微核率，经回归分析其方程为Ｙ＝１．１６９７±０．９９０９ｘ，回归显著性检验二者相关系数为ｒ＝０．９９９８（Ｐ＜０．０１），有良好的相关性。     

一种简便快速微核测定方法

本文采用人离体血淋巴细胞培养“低渗膨胀法”对不同辐射剂量诱发的淋巴细胞微核进行不同培养时间的观察。结果表明，在所观察的剂量范围内，培养４０ｈ与培养７２ｈ的淋巴细胞微核率均良好的线性关系，其直线方程分别为：Ｙ４０＝１２．１９３２＋０．２３０９Ｄ（ｒ＝０．９６６９，Ｐ〈０．０５），Ｙ７２＝１１．１６９４＋０．２３２０Ｄ（ｒ＝０．９６１９，Ｐ〈０．０５）。培养４０ｈ与培养７２ｈ的微核率，经回归分析其方程