用Walker 256大鼠乳腺癌细胞建立大鼠胫骨癌痛模型

  目的  探讨用Walker 256大鼠乳腺癌细胞建立大鼠胫骨癌痛模型的可行性。  方法  将36只SD雌性大鼠, 随机分为肿瘤组(n=8)、假手术1(n=10)、假手术2(n=10)和正常对照组(n=8)。将含1 × 105 Walker 256大鼠乳腺癌细胞悬液注入大鼠胫骨上段制备骨癌痛模型, 观察疼痛行为学[包括机械缩足反射阈值(mechanical paw withdrawal threshold, MWT)和热缩足反应潜伏期(paw withdrawal thermal latency, PWTL)]、骨放射学和组织学变化。  结果  疼痛行为学、影像学、组织学观察结果证实, Walker 256大鼠乳腺癌细胞能成功制备大鼠胫骨癌痛模型。肿瘤组造模后第7天开始MWT显著降低, 为(37.59±2.02)g, 与假手术组1、2和正常对照组比较, P < 0.01;第11天PWTL显著降低, 为(6.87±1.00)s, 与假手术组1、2和正常对照组比较, P < 0.01。  结论  用Walker 256大鼠乳腺癌细胞能够成功建立大鼠胫骨癌痛模型。     

鞘内注射地塞米松对神经病理性疼痛的影响

目的:通过大鼠鞘内注射免疫抑制剂地塞米松,探讨其对神经病理性疼痛的影响及机制,为疼痛的治疗提供新的途径。方法:将36只SD大鼠随机分成假手术 盐水治疗组、坐骨神经慢性压迫损伤(CCI) 盐水治疗组、CCI 地塞米松治疗组,每组12只。采用改良CCI法制作神经病理性疼痛模型,假手术 盐水治疗组只暴露坐骨神经而不予结扎,CCI 地塞米松治疗组大鼠于术后即刻、2、4、6、8、10、12天通过鞘内放置的PE-10导管予地塞米松0.5 mg(约0.1 mL),假手术 盐水治疗组和CCI 盐水治疗组大鼠在相同时间点予等容量的0.9%氯化钠。于术后1、3、7、14天测定大鼠的机械痛阈值,并于术后14天将大鼠处死,应用免疫组化技术测定其脊髓星形胶质细胞神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及肿瘤坏死因子-α(TNFα-)的表达。结果:坐骨神经结扎后痛阈下降,术后1、3、7、14天,CCI 盐水治疗组和CCI 地塞米松组的痛阈与假手术 盐水治疗组比较差异有统计学意义(P<0.01);CCI 地塞米松组痛阈与CCI 盐水治疗组比较有统计学意义(P<0.05)。免疫组化测定:假手术 盐水治疗组GFAP染色及TNFα-染色以阴性居多,CCI 盐水治疗组和CCI 地塞米松组GFAP染色为强阳性;CCI 盐水治疗组TNFα-染色弱阳性居多,CCI 地塞米松组TNFα-染色以强阳性居多,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:地塞米松对神经病理性疼痛有明显的治疗作用。     

新发基因突变致成人线粒体神经胃肠脑肌病

  目的  探讨线粒体神经胃肠脑肌病患者的临床表现及基因突变情况。  方法  分析1例成人线粒体神经胃肠脑肌病患者临床资料, 对患者及其家系线粒体病相关基因应用NimbleGen固相芯片进行目标区域捕获测序。  结果  该患者表现为进行性加重的假性胃肠梗阻、脑白质病、恶液质、周围神经病、眼外肌无力及多种代谢紊乱。基因检测发现TYMP基因c.217G>A纯合突变为该患者的致病突变, 患者父母(近亲婚配)及姐姐均为该突变杂合子, 该突变为新发突变。  结论  经基因检测确诊TYMP基因新发突变致成人线粒体神经胃肠脑肌病。     

神经病理性疼痛大鼠脊髓IL-33蛋白表达的变化

目的:观察外周神经慢性压榨性损伤(chronic constrictive injury,CCI)大鼠脊髓白介素-33(interleukin-33,IL-33)表达的变化规律。方法:雄性Wistar大鼠60只,分为手术组和假手术组,每组30只,于CCI前1天、CCI后第1、4、7、14、21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点5只,取L4~6脊髓,采用Western blot方法测定IL-33的蛋白表达变化。结果:手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阈明显降低,脊髓IL-33水平表达增加,明显高于对侧和假手术组术侧;IL-33蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰(P<0.01),于CCI后第21天仍维持于较高水平(P<0.05)。结论:CCI致大鼠脊髓IL-33活化,参与神经病理性疼痛的调控过程。     

N-乙酰天冬氨酰谷氨酸肽酶抑制剂对神经病理性疼痛大鼠脊髓水平瞬时感受器电位香草酸受体1表达的影响

目的:研究鞘内注射N-乙酰天冬氨酰谷氨酸(N-acetylaspartylglutamate,NAAG)肽酶抑制剂(2-PMPA)对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及脊髓水平瞬时感受器电位香草酸受体l(TRPV1)表达的影响。方法:取鞘内置管成功的雄性SD大鼠24只,体重200²50 g,随机分为3组(n=8):假手术组(sham组)、坐骨神经慢性压迫性损伤组(CCI组)和2-PMPA治疗组(2-PMPA组)。sham组只暴露坐骨神经,但不结扎,术后鞘内注射生理盐水;CCI组坐骨神经结扎后鞘内注射生理盐水;2-PMPA组坐骨神经结扎后鞘内注射2-PMPA 100μg。所有组每次给药剂量均为10μl,每日1次,连续7 d。分别于术前及术后7 d时,以热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足阈值(MWT)测定大鼠痛阈,然后处死大鼠,采用免疫荧光和Western blot法测定脊髓水平TRPV1的表达。结果:三组大鼠术后7 d TWL和MWT值分别为(17.8±1.1)、(5.5±1.0)、(12.0±1.4)s和(13.1±1.2)、(4.3±0.9)、(10.5±1.0)g。与sham组比较,CCI组术后7 d时TWL和MWT值均降低,脊髓TRPV1表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与CCI组比较,2-PMPA组术后7 d时TWL和MWT值均升高,脊髓TRPV1表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鞘内注射NAAG肽酶抑制剂可以有效地治疗神经病理性疼痛,其作用机制可能与抑制脊髓水平TRPV1的表达有关。     

儿童原发性脊髓混合性生殖细胞瘤1例及文献复习

  目的  探讨儿童原发性脊髓生殖细胞瘤的临床特点、诊断、治疗及预后。  方法  报道1例儿童原发于脊髓的混合性生殖细胞瘤, 目前国内外未见此类报道, 并对儿童原发性脊髓生殖细胞瘤的相关文献进行复习和分析。  结果  5岁男孩临床主要表现为臀部疼痛进行性加重, 性早熟, 血清及脑脊液甲胎蛋白、β-人绒毛膜促性腺激素明显升高, 磁共振成像示L2-3水平椎管内占位, 组织病理示椎管内混合性生殖细胞瘤(生殖细胞瘤+畸胎瘤)。采用18F-脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层显像可协助显示病灶, 并通过监测最大标准摄取值的变化评估疗效及监测病情有无复发。该患儿放疗效果差, 化疗效果尚好。  结论  儿童生殖细胞瘤原发于脊髓非常罕见, 临床表现与累及的脊髓节段相一致, 应当与原发于脊髓其他肿瘤相鉴别。单纯性儿童原发性脊髓生殖细胞瘤对放、化疗均敏感, 预后较好。     

补体抑制剂对大鼠神经病理性疼痛模型的作用研究

目的:观察补体抑制剂对神经病理性疼痛(NPP)发病的影响,并初步探讨其机制.方法:18只SD大鼠随机分成三组:A组:假手术+术后生理盐水静脉注射;B组:慢性坐骨神经结扎模型(CCI)+术后生理盐水静脉注射;C组:CCI模型+术后眼镜蛇毒因子(CVF)静脉注射.大鼠致伤模型建立后第一天开始根据分组每日尾静脉注射CVF 50μg/kg或等量的生理盐水.分别于术前和术后1、3、5、7天测定大鼠的热痛阈值和机械痛阈值,并于术后7天处死大鼠取腰6、7脊髓节段,测定SOD和MDA的组织含量.结果:CCI模型大鼠术后第1天均出现痛阈下降,给于补体抑制剂CVF干预后大鼠痛阈逐渐恢复而生理盐水对痛阈无影响;与A组相比,B组大鼠术后第7天脊髓SOD活力明显降低而MDA显著升高;C组SOD和MDA变化幅度显著小于B组.结论:CVF显著改善了CCI模型大鼠痛敏状态,可能的机制是CVF维护了脊髓氧化一抗氧化平衡,从而呈现出对脊髓组织的保护作用.     

月经状况对社区妇女肌肉骨骼疼痛的影响

  目的  探讨月经状况对社区女性肌肉骨骼疼痛的影响。  方法  采用统一的调查问卷, 对北京市某社区697名35~64岁常住妇女进行面对面调查。问卷内容包括主要的社会人口学特征、月经状况、近2周内的肌肉骨骼疼痛发生情况, 包括颈部、腰背部、膝部和其他部位, 各部位疼痛发生频率用无、偶尔和经常表示。本研究将经常性的肌肉骨骼疼痛视为严重症状, 分析其影响因素。  结果  腰背部疼痛是社区35~64岁妇女最常见的肌肉骨骼症状(33.4%), 其次为膝部疼痛(31.0%)、颈部疼痛(29.7%)、其他部位肌肉骨骼疼痛(25.6%)。绝经后妇女肌肉骨骼疼痛发生率显著高于绝经前妇女(P < 0.01), 绝经后期早期为肌肉骨骼疼痛发生的高峰阶段, 到绝经后期晚期明显下降。颈部疼痛、腰背部疼痛发生率在绝经过渡期开始增加, 与增龄不相关; 膝部疼痛发生率随体重指数(body mass index, BMI)增加、年龄增长而增加(OR=1.085, 1.050)。超重和肥胖是妇女膝部疼痛发生的危险因素。Logistic回归分析显示, 肥胖妇女(BMI ≥ 28 kg/m²)与正常体重妇女(BMI < 24 kg/m²)相比, 膝部疼痛发生的危险度显著增加(OR=2.256)。  结论  绝经是女性肌肉骨骼疼痛发生的重要影响因素, 增龄和超重与肌肉骨骼疼痛的相关性也不能被忽视。     

鞘内泵入布托啡诺对神经病理性疼痛大鼠脊髓P物质表达的影响

目的:观察鞘内泵入布托啡诺对神经病理性疼痛大鼠脊髓P物质的影响,探讨鞘内泵入布托啡诺治疗神经病理性疼痛的可行性.方法:24只SD大鼠随机分为3组,空白对照组(B组),不实施任何手术;对照组(C组),右肢制备坐骨神经慢性压迫损伤模型(CCI)及鞘内置管后鞘内泵入生理盐水10μL/d;布托啡诺组(TB组),CCI及鞘内置管后泵入布托啡诺24μg/d.C组和TB组术后第4天开始鞘内给药,连续给药7 d.第11天于给药2 h后大鼠灌注固定,采用免疫组化方法检测脊髓背角P物质.结果:成功制作CCI模型,无鞘内导管脱出现象,且注药成功,无疼痛行为学差异.与B组相比,C组和TB组脊髓背角P物质表达明显增加(P＜0.01);与C纽相比,TB组脊髓背角P物质表达明显降低(P＜0.01).结论:鞘内泵入布托啡诺可以通过减少脊髓P物质表达而发挥镇痛作用,布托啡诺可以通过鞘内给药治疗神经病理性疼痛.     

RNA干扰对急性髓系白血病AML1-ETO融合基因表达的抑制作用

目的 应用RNA干扰技术抑制Kasumi-1细胞AML1-ETO融合基因的表达,研究随后出现的细胞增殖和细胞周期变化.方法 体外化学合成针对AML1-ETO融合基因的小干扰RNA(siRNA),并用电穿孔方法将AML1-ETO siRNA转染Kasumi-1细胞,以非特异性的siRNA转染细胞作阴性对照;电转带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体,流式细胞术检测其绿色荧光以确定电转效率;荧光染料实时定量PCR及Western blot检测AML1-ETO siRNA的抑制效应;并应用CCK-8实验法检测细胞增殖率;采用碘化丙锭(PI)法测定细胞周期DNA含量.结果 电转增强EGFP的转染效率可达44.5%;电转AML1-ETO siRNA可以有效抑制AML1-ETO融合基因在mRNA和蛋白水平的表达;电转AML1-ETO siRNA 72 h后细胞增殖率[(47.90±0.02)%]低于对照组[(66.90±0.08)%](P<0.05);PI染色显示AML1-ETO siRNA转染细胞72 h后,G1期细胞比例为38.3%,对照组为31.6%,而处于G2/M期细胞分别为1.8%和2.4%.结论 化学合成的特异性siRNA能抑制AML1-ETO融合基因的表达,siRNA介导的AML1-ETo融合蛋白表达减少阻滞Kasnmi-1细胞在G1期,进而抑制细胞增殖.     

RNA干扰对慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因表达的抑制作用

目的研究RNA干扰(RNAi)效应对慢性粒细胞白血病(CML)bcr／abl融合基因表达的抑制作用。方法体外化学合成针对bcr／abl融合基因的小干扰RNA(siRNA)，并用电穿孔方法将siRNA转染K562细胞株，以未转染的细胞及非特异性的siRNA转染细胞作对照；同时转染带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体作为阳性对照，流式细胞术检测其绿色荧光以确定转染效率；实时定量RT—PCR及Western blot法检测siRNA的抑制效应。MTT法检测细胞增殖抑制率。膜联蛋白V(Annexin V)及碘化丙锭双染法测细胞凋亡率。结果电穿孔的转染效率可达70％；化学合成的siRNA可以抑制bcr／abl融合基因在mRNA和蛋白水平的表达；特异性siRNA可以抑制细胞增殖，转染24h细胞增殖抑制率达47％，48h达56％；特异性siRNA转染细胞24h组凋亡率为15．05％．48h组为19．47％，与对照组(1．00％)比较明显提高。结论在细胞水平上，化学合成的siRNA可以抑制bcr／abl融合基因的表达，为利用RNA干扰作为基因治疗的研究奠定基础。     

淀粉样前体蛋白基因在急性髓系白血病的表达及其生物学行为研究

目的 探讨淀粉样前体蛋白(APP)基因在急性髓系白血病(AML)细胞的表达及其生物学行为.方法 应用实时定量PCR方法(2-ΔCt)检测85例初诊AML和20例非恶性血液病患者(对照)骨髓细胞APP mRNA的表达,并研究其表达水平对AML患者的临床特征和治疗反应的影响;应用实时定量PCR和Western blot方法检测APP基因和蛋白在AML细胞株的表达,并与AML原代细胞亚型的结果相比较;化学合成针对APP基因的小干扰RNA(siRNA),利用脂质体转染HL-60细胞,下调APP基因表达.RNA干扰24、48、72 h后,采用MTT法及锥虫蓝拒染细胞计数检测细胞增殖;瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态;PI染色流式细胞术分析细胞周期;Annexin V/PI双染色流式细胞术及Hoechst染色检测细胞凋亡;RNA干扰48 h,Western blot法检测凋亡相关蛋白NF-κB、bcl-2和caspase-3的表达;MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 APP mRNA表达在AML亚型间差异有统计学意义(P=0.019),伴t(8;21)的M2b表达最高(中位值0.1080),其次是AML-未定型(0.0467)、M3(0.0266)、M2a(0.0221)、M4a(0.0167)、M5b(0.0151)、M4b(0.0025),两两比较分析显示,M2b患者APPmRNA表达显著高于M5b患者(P=0.000).APP mRNA表达水平对AML亚型以外患者临床特征及治疗反应无显著影响(P＞0.05).Kasumi-1细胞APP基因表达显著高于U937细胞(P＜0.05),与AML各亚型原代细胞中的结果相一致.APP-siRNA转染HL-60细胞后,其APP mRNA表达下凋64%,在培养24、48及72 h后检测HL-60细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期及对阿霉素敏感性均无明显变化(P＞0.05).结论 伴t(8;21)异位的M2型白血病高表达APP mRNA,单核细胞白血病低表达APPmRNA.APP基因表达沉默对HL-60细胞的生物学作用无显著影响.     

Inhibition of ABCB1 (MDR1) and ABCB4 (MDR3) expression by small interfering RNA and reversal of paclitaxel resistance in human ovarian cancer cells

Ovarian cancer is currently the most lethal gynecologic malignancy in developed countries, and paclitaxel is a cornerstone in the treatment of this malignancy. Unfortunately, the efficacy of paclitaxel is limited by the development of drug resistance. Clinical paclitaxel resistance is often associated with ABCB1 (MDR1) overexpression, and in vitro paclitaxel resistance typically demonstrates overexpression of the ABCB1 gene. In this study, we demonstrate that paclitaxel-resistant cell lines overexpress both ABCB1 and ABCB4 (MDR3). To evaluate the role of these transporters in paclitaxel-resistant ovarian cancer cells, small interference RNAs (siRNAs) were used to target ABCB1 and ABCB4 RNA in the paclitaxel-resistant SKOV-3TR and OVCAR8TR ovarian cancer cell lines. Treatment of these lines with either chemically synthesized siRNAs or transfection with specific vectors that express targeted siRNAs demonstrated decreased mRNA and protein levels of ABCB1 or ABCB4. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assays of siRNA-treated cells demonstrated 7- to 12.4-fold reduction of paclitaxel resistance in the lines treated with the synthesized siRNA of ABCB1 and 4.7- to 7.3-fold reduction of paclitaxel resistance in the cell lines transfected with siRNA of ABCB1 expressing vectors. ABCB4 siRNA-treated cell lines showed minor reduction in paclitaxel resistance. These results indicate that siRNA targeted to ABCB1 can sensitize paclitaxel-resistant ovarian cancer cells in vitro and suggest that siRNA treatment may represent a new approach for the treatment of ABCB1-mediated drug resistance.     

BAI1 regulates spatial learning and synaptic plasticity in the hippocampus

Synaptic plasticity is the ability of synapses to modulate the strength of neuronal connections; however, the molecular factors that regulate this feature are incompletely understood. Here, we demonstrated that mice lacking brain-specific angiogenesis inhibitor 1 (BAI1) have severe deficits in hippocampus-dependent spatial learning and memory that are accompanied by enhanced long-term potentiation (LTP), impaired long-term depression (LTD), and a thinning of the postsynaptic density (PSD) at hippocampal synapses. We showed that compared with WT animals, mice lacking Bai1 exhibit reduced protein levels of the canonical PSD component PSD-95 in the brain, which stems from protein destabilization. We determined that BAI1 prevents PSD-95 polyubiquitination and degradation through an interaction with murine double minute 2 (MDM2), the E3 ubiquitin ligase that regulates PSD-95 stability. Restoration of PSD-95 expression in hippocampal neurons in BAI1-deficient mice by viral gene therapy was sufficient to compensate for Bai1 loss and rescued deficits in synaptic plasticity. Together, our results reveal that interaction of BAI1 with MDM2 in the brain modulates PSD-95 levels and thereby regulates synaptic plasticity. Moreover, these results suggest that targeting this pathway has therapeutic potential for a variety of neurological disorders.     

不同形式的运动训练对血管性痴呆大鼠学习记忆及前额叶皮质区突触素及突触后致密物-95表达的影响

目的 研究不同形式的运动训练（自主运动、强迫运动和功能性电刺激诱导的运动）对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆功能的恢复及前额叶皮质区突触素（SYP）、突触后致密物-95（PSD-95）表达的影响。 方法 选择Wistar雄性大鼠40只,按随机数字表法分为模型组、假手术组、自主运动组、强迫运动组和功能性电刺激组,每组8只。采用双侧颈总动脉永久性结扎的方法制作VD模型,假手术组大鼠麻醉但不阻断颈总动脉。造模成功1周后,自主运动组大鼠在跑轮上自由运动,每日270m;强迫运动组在电动跑轮上行强迫运动,每日270m;功能性电刺激组采用功能性电刺激模拟大鼠前肢在跑轮上行走时的动作,按9m/min的速度每日运动3次,每次10min;模型组和假手术组造模成功后置于笼中自由活动。5组大鼠均于造模成功3周后,采用新奇事物识别实验测试大鼠学习记忆能力,测试后即刻取大鼠前额叶皮质采用Western blot技术检测上述各组突触素、突触后致密物-95的表达。 结果 自主运动组、强迫运动组和功能性电刺激组大鼠新奇事物认知指数分别为（0.65±0.15）、（0.59±0.12）和（0.62±0.14）,较模型组的（0.45±0.13）均有明显升高,且差异有统计学意义（P<0.05）。自主运动组、强迫运动组和功能性电刺激组大鼠前额叶皮质区PSD-95表达水平分别为（1.01±0.05）、（0.95±0.15）和（1.06±0.09）,较模型组的（0.58±0.15）均有明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 自主运动、强迫运动和功能性电刺激诱导的运动均可改善VD大鼠的学习记忆能力,其可能机制是自主运动、强迫运动和功能性电刺激诱导的运动均可促进前额叶皮质区突触后致密物-95的表达,但对突触素的表达影响不大。     

重组腺病毒介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌的实验研究

目的:研究重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因转染体外培养的人气道平滑肌(HASMCs)的方法。方法:用组织贴块原代培养传代至3～8代的HASMCs,重组绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)以不同的感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染,荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效率,CCK-8法检测其对细胞的毒性。结果:随着MOI增高,转染效率增高。MOI=100时Ad-GFP对HASMCs的感染效率可达(96±0.32)%,以感染后48h达高峰,持续7d仍有绿色荧光表达;转染后的细胞与未转染细胞相比,细胞毒性无统计学差异(P>0.05)。结论:重组腺病毒载体介导的绿色荧光蛋白基因Ad-GFP能高效转染HASMCs,转染后对细胞无毒性,是一种安全的基因载体。     

CIT基因在前列腺癌中的表达特点及其对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的调控作用研究

目的 研究CIT基因在前列腺癌中的表达特点及其对PC-3细胞生物学行为的调控作用。方法 采用回顾性研究,收集哈尔滨医科大学附属肿瘤医院收治的106例前列腺癌患者的临床资料,将前列腺癌旁正常组织作为对照,检测患者CIT基因表达量。根据前列腺癌患者CIT基因表达量中位数,分为低表达组(53例)与高表达组(53例),比较两组患者临床病理特征的差异以探讨CIT基因表达量与患者临床病理特征的关系。对人前列腺癌PC-3细胞进行培养,根据siRNA技术干扰CIT基因的表达,分为正常对照组(细胞未进行任何转染)、阴性对照组(转染非特异性对照序列siRNA)和CIT-siRNA组(转染CIT-siRNA)。通过CCK-8实验检测CIT基因对三组PC-3细胞增殖能力的影响,并采用划痕实验检测细胞迁移能力,通过Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果 相比前列腺癌旁正常组织,CIT基因高表达于前列腺癌组织(P <0. 01)。低表达组与高表达组Gleason评分、N分期、M分期和前列腺特异抗原水平的比较,均存在显著差异(P <0. 05);而两组在年龄、T分期和精囊侵袭上的比较,均无显著差异(P> 0. 05)。在siRNAs细胞转染48 h后,阴性对照组和CIT-siRNA组PC-3细胞中CIT蛋白和mRNA表达量较正常对照组均明显下调(P <0. 01)。CCK-8实验结果显示,siRNAs转染PC-3细胞2、3 d后,阴性对照组和CIT-siRNA组细胞增殖能力较正常对照组均明显下降(P <0. 01)。划痕实验和Transwell实验结果发现,CIT特异性siRNAs转染细胞48 h后,阴性对照组和CIT-siRNA组PC-3细胞迁移距离较正常对照组均明显缩短,且侵袭细胞数量较正常对照组均明显减少(P<0. 01)。结论 CIT基因在前列腺癌组织中具有高表达的特点,通过沉默该基因表达,可有效干扰PC-3细胞生物学行为,提示CIT基因可能是前列腺癌的一种重要致病基因。     

不同强度训练负荷对大鼠认知情绪变化及NMDA受体、PSD-95和KIF-17mRNA和蛋白表达的影响

目的:建立SD大鼠中等和高强度持续训练运动模型,探究不同训练负荷下,大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)、突触后致密物质-95(PSD-95)和驱动蛋白家族蛋白17(KIF-17)表达及认知和情绪功能的变化。方法:实验建立SD大鼠跑台运动模型,分别进行中等和高强度持续训练4周,中等强度运动时采用递增负荷训练,高强度运动时采用高速训练,并设立正常对照组。测量运动后大鼠体质量减轻程度的变化,real-time PCR和Western blotting分别检测不同训练负荷对大鼠海马NMDA受体,PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白表达的影响。结果:相比对照组,中等强度持续运动精神状态明显更佳,高强度持续运动状态萎靡。中等强度持续训练组PSD-95、KIF-17和NMDA受体的m RNA和蛋白的表达显著上升(P0.05),而高强度持续训练组m RNA和蛋白的表达则受到抑制(P0.05)。结论:不同训练负荷对大鼠认知情绪及精神状态有较大影响,可以影响大鼠NMDA受体、PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白的表达。适量的运动训练不仅可以减轻缺氧对海马的损害,更可以有效地改善海马的功能。