胆道闭锁患儿巨细胞病毒和乙肝病毒感染状况分析

目的探讨胆道闭锁的巨细胞病毒和乙肝病毒感染情况。方法回顾近年收治的35例胆道闭锁患儿,从临床资料、血清学和病理学方面分析其巨细胞病毒和乙肝病毒感染的状况。结果28例胆道闭锁中CMV IgG抗体阳性7例,CMV IgM抗体阳性5例（同时伴有CMVI如抗体阳性1例）,CMV—DNA阳性10例。35例胆道闭锁中HBsAg阳性5例,抗-HBs阳性10例（均接种过乙肝疫苗）,抗-HBe阳性7例,抗-HBc阳性6例。31例胆道闭锁常规病理切片示不同程度的肝细胞变性坏死、胆汁淤积、胆栓形成、淋巴细胞和粒细胞浸润,以及不同程度的纤维化,组织化学示CMV早期抗原阳性4例,CMV晚期抗原阳性6例,两者同时阳性1例;HBeAg和HBsAg全部阴性。结论胆道闭锁病例有相当高比例的巨细胞病毒和乙肝病毒感染,但这些感染是否导致胆道闭锁的原因,需更深入的研究。术前后应抗病毒治疗,以阻断肝细胞和胆道结构的持续破坏。     

婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞巨细胞病毒早、晚期抗原检测及其临床意义

对15例婴儿肝炎综合征患儿外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞分别进行了巨细胞病毒（CMV）早期抗原（EA）、晚期抗原（LA）检测。结果9例白细胞EA阳性，5例LA阳性，各类白细胞感染无明显选择性。5例CMV抗原阳性者恢复期复查，仅2例阳性。与抗CMVIgM、尿CMV分离、抗CMVIgG双份血清检测等方法对比，9例阳性中8例被此3项检查证实为CMV感染，6例阴性中此3项检查亦阴性，其阳性率明显高于其它检查，示其可作为CMV急性感染的较好诊断方法。     

婴儿巨细胞病毒肝炎肝组织病原和病理检测

目的:对婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎病例作肝组织病原和病理检查,直接诊断CMV的肝脏感染及相应的病理变化.方法:10例肝组织标本,其中5例血清抗CMV-IgM阳性临床诊断为CMV性黄疸肝炎者为实验组,另5例血清抗CMV-IgM阴性为对照组.采用PAP法检测肝组织中CMV-IEA和EA.结果:10例肝组织内检出CMV-IEA和CMV-EA均阳性5例(5/10);CMV肝炎实验组中,检出阳性4例(4/5);对照组阳性1例(1/5).CMV-IEA均位于感染细胞核内,CMV-EA在细胞核和胞浆中均可见,但以胞核为多见,阳性细胞多较集中分布,主要感染细胞为肝细胞、血管内皮细胞、胆管上皮细胞和炎性浸润细胞.10例肝组织内均有不同程度肝细胞肿胀变性或空泡形成,以及炎性细胞浸润,部分病例可见肝细胞内淤胆、汇管区纤维组织增生及肝细胞坏死.结论:对血清抗CMV-IgM阳性、临床诊断为CMV肝炎者与肝组织病原学检查基本相符,而个别血清抗CMV-IgM与肝组织CMV抗原检测不符;CMV抗原阳性组肝细胞损害程度与CMV抗原阴性组无明显差异.     

应用组织芯片技术筛查胆道闭锁的病毒感染研究

目的应用组织芯片技术研究病毒感染与小儿胆道闭锁的关系。方法利用组织芯片技术检测42例胆道闭锁和5例对照组患者肝脏组织中的巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）感染情况。结果在42例胆道闭锁患者肝脏组织中,其中CMV阳性26例（61．9％）,EBV阳性3例（7．14％）,对照组5例中均未检测到以上病毒的存在。结论胆道闭锁与病毒感染之间存在相关性,其中以CMV感染关系最为密切,可能作为其发病机制中的一个促发因素,最终引起胆道闭锁;抗病毒治疗可能会改善CMV感染EHBA预后。     

慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互关系

采用原位末端标记技术对一组慢性病毒性肝炎患者肝细胞凋亡状况进行研究，并探讨其与病毒和Fas抗原表达的关系。结果：31例患者，25例肝组织中检出末端标记阳性细胞，散布于肝小叶和肝窦内，部分炎症坏死灶中和胆管上皮细胞也可检出阳性细胞；组织炎症活动度较大者和病毒抗原阳性者凋亡指数较高；凋亡细胞可为病毒抗原阳性和阴性；Fas抗原阳性与阴性组间凋亡程度无显著差异。这种现象提示肝炎病毒可能主要通过间接途径向感染和非感染病毒的肝细胞传递死亡信号，其机制有待进一步研究。慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互…     

婴儿巨细胞病毒脑炎5例临床分析及文献回顾

目的探讨婴儿巨细胞病毒（CMV）脑炎的临床特征与诊断治疗。方法对我院2005年1月至2008年10月经血和脑脊液CMV抗原及抗体检测确诊的5例CMV脑炎患儿的临床资料进行回顾分析。结果男2例,女3例;月龄2～9个月,平均4.8个月;病程2～55d,平均18.6d。除1例患儿无发热外,其余患儿均以中低热和不规则发热为主要表现,4例有反应差或嗜睡,3例合并发作性抽搐。2例运动和智力较同龄儿落后。无阳性体征。所有病例血清抗CMVIgM阳性,同时脑脊液抗CMVIgM阳性,其中3例血和脑脊液pp65抗原阳性,2例抗CMVIgG阳性。所有病例于2～4周复查血清和脑脊液抗CMVIgM阴性,抗CMVIgG阳性。2例CT示脑萎缩,1例MRI示双小脑、右颞叶出血灶。脑干测听除1例存在单耳明显异常、1例未做外,余均正常。脑脊液检查细胞数正常2例,2例细胞数升高[（130～150）×106/L],间隔1～2d复查细胞数正常。1例病程1个月时脑脊液细胞数为500×106/L,中性粒细胞占80%,多次脑脊液细胞数波动在（60～280）×106/L,以淋巴细胞分类为主。脑脊液均存在蛋白升高,2例糖水平偏低;脑电图明显异常2例,合并肝功能异常3例,1例尿培养曾发现屎肠球菌,均采用更昔洛韦治疗,10mg/（kg·d）,分两次静点,连续治疗2周3例,4周2例,3例患儿停药前复查血清和脑脊液pp65由阳性转为阴性,4例临床明显好转。结论婴儿CMV症状性感染可表现为脑炎,对婴儿出现反应差、抽搐、脑脊液蛋白升高、合并肝功能异常及发育落后者,应注意进行血和脑脊液CMVpp65抗原及CMV抗体检查,应用更昔洛韦治疗,并进行长期随诊。     

巨细胞病毒感染捕获ELISA分析方法的建立和应用

目的：建立CMVIgM抗体捕获ELISA法并用聚合酶链反应（PCR）技术对此方法进行了评价。评价：采用巨细胞病毒（CMV）AD－169株感染人胚肺细胞的方法制备CMV抗原，并采用冻化抗制备法及甘愿酸法制备抗原，羊抗人IgM（μ链）McAb包被酶标板，建立CMVIgM抗体捕获ELISSA法。结果：不同浓度抗μ链McAb包被，包被时间、包被液、封闭液等不同条件，以有抗原浓度、抗CMV抗体酶结合物浓度对此法的建立有不同的影响。PCR法与用最佳条件配合后的本方法CMVIgM抗体检出率无显著差异（P＞0．05）。结论：本法测定CMV－IgM抗体的敏感性和特异性较高，简便、适用，易于推广，可广泛应用于临床。     

CMV-PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染的临床价值

目的 探讨巨细胞病毒PP65抗原（CMV-PP65）检测在预防肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染的临床价值.方法 采用间接免疫荧光法和酶联免疫捕获法检测52例肾移植受者术后CMV-PP65抗原和CMV-IgM抗体.结果 52例肾移植受者中CMV-PP65抗原检测阳性25例,CMV-IgM抗体检测阳性17例,随访3~6个月,共15例发生CMV病,CMV-PP65抗原检测均阳性,CMV-PP65抗原检测的敏感度及阴性预测值均高于CMV-IgM抗体检测;25例患者CMV-PP65抗原检测术后首次出现阳性的平均时间为4.2±3.3周,17例患者CMV-IgM抗体检测术后首次出现阳性的平均时间为8.7±5.8周,两者比较有显著差异性（P〈0.05）.结论 CMV-PP65抗原检测可早期排除和预防肾移植术后CMV感染,值得临床推广应用.     

Fas和FasL在丙型肝炎肝组织中的表达及意义

目的了解丙型肝炎患者肝细胞损伤与Fas抗原表达的关系。方法采用免疾组织化学方法显示Fas抗原与Fas配体（FasL）在丙型肝炎肝组织的分布，并同时运用原位杂交方法，检测肝组织中的丙型肝炎病毒（HCV）RNA。结果Fas抗原主要位于肝细胞胞浆。Fas抗原表达阳性细胞在肝小叶中多呈散在或灶状分布，汇管区周围和碎屑样坏死区内阳性表达较强。FasL大多位于肝内浸润的淋巴细胞，某些病例肝细胞胞浆也可呈弥漫强阳性。Fas抗原表达的阳性率与肝组织炎症程度相关。结论在丙型肝炎患者，Fas抗原表达水平与炎症活动度有关，未发现（HCV）RNA原位杂交阳性细胞与表达Fas抗原的肝细胞之间的对应关系。     

病毒性肝炎合并巨细胞病毒感染的探讨

本文对414例病毒性肝炎病人的血清进行了巨细胞病毒IgM(CMVIgM)检测,发现CMVIgM阳性36例,检出率为8.69%。其中急性肝炎(包括亚急重肝)3/206,阳性率为1.45%,其中成人3/130,阳性率为2.30%;慢迁肝乙型(14/98)为14.2%;慢活肝乙型(11/78)为14.4%;肝硬化为25.0%(8/32)。肝硬化组明显增高。提示CMV感染演变为肝硬化不能排除。在CMVIgM阳性乙肝患者中,病毒活跃复制者占77.77%,CMVIgM阴性乙肝中,病毒复制活跃者占62.76%。抗—HBcIgM、IgG同时阳性伴随CMVIgM阳性者31例,说明以乙肝病毒复制感染率为高。且与抗—HBcIgM、IgG呈伴随关系,更说明与慢肝及病毒活化感染CMV有关。CMVIgM阳性的慢迁肝、慢活肝、肝硬化治愈好转率较CMVIgM阴性的慢迁肝,慢活肝,肝硬化的治愈好转率为低,提示病情较重。     

婴儿肝外胆道闭锁肝组织MRP2及FXR蛋白的表达及其意义

目的探讨肝外胆道闭锁(EHBA)婴儿肝组织中多药耐药相关蛋白2(MRP2)、法尼醇受体(FXR)蛋白的表达及其与胆汁淤积的关系。方法将临床和病理诊断为EHBA的20例患儿肝组织作为EHBA组,肝移植手术中成人供体的肝组织10例作为对照组,比较两组患者肝功能指标;采用免疫组织化学法检测肝组织中MRP2、FXR的表达情况,并进行病理图像分析。结果 EHBA组患儿血清总胆红素、直接胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)浓度明显高于对照组(P<0.05)。对照组和EHBA组肝组织MRP2蛋白吸光度(A)值分别为0.16±0.04和0.10±0.02,对照组和EHBA组肝组织FXR A值分别为0.15±0.06和0.06±0.02,EHBA组肝组织MRP2、FXR表达水平明显低于对照组(P<0.05),MRP2A值与血清γ-GT浓度呈负相关(r=-0.415,P<0.05)。FXR与MRP2的表达呈正相关(r=0.468,P<0.05)。结论 EHBA患儿肝组织MRP2表达降低可减少胆汁流,加重胆汁淤积,MRP2的下调可能与FXR相关。     

MR Cholangiography and Dynamic Examination of Duodenal Fluid in the Differential Diagnosis between Extrahepatic Biliary Atresia and Infantile Hepatitis Syndrome

The common causes of infantile persistent choles-tatic jaundice are infantile hepatitis syndrome (IHS) and extrahepatic biliary atresia (EHBA)[1]. The differential diagnosis between IHS and EHBA is very difficult be-cause there is considerable clinical, biochemical, and histopathologic overlaps between them. Magnetic reso-nance cholangiography (MRC) is a newly-established non-invasive modality used for the diagnosis of EHBA in infants. Their results varied on the accuracy, sensitiv-ity…     

Bile acid metabolism in extrahepatic biliary atresia: lithocholic acid in stored dried blood collected at neonatal screening

Lithocholic acid (LCA) is a potent hepatotoxic compound. Fetal LCA may have a role in the pathogenesis of neonatal cholestasis/extrahepatic biliary atresia (EHBA). Fetal liver efficiently hydroxylates LCA in several positions. This may represent a detox-ification mechanism. In the present study LCA, cholic acid (CA) and chenodeoxycholic acid (CDCA) were quantitated by gas chromatography-mass spectrometry using selected ion monitoring in small amounts of stored dried blood from six newborn infants with EHBA and fourteen con-trols. The blood was collected at neonatal metabolic screening. Mean blood levels (+/- S.E.M.) of LCA were 0.11 +/- 0.04 microM in the in-fants with EHBA and 0.08 +/- 0.02 microM in the control infants. The correspon-ding levels for CA and CDCA were 15.6 +/- 3.6 microM and 7.4 +/- 2.5 microM in the infants with EHBA and 1.7 +/- 0.3 microM and 1.8 +/- 0.4 microM in the controls. The increased levels of CA and CDCA in the infants with liver disease can be explained by cholestasis. The low blood levels of LCA indicate a normal fetal metabolism of this bile acid in EHBA.     

Bile Acid Metabolism in Extrahepatic Biliary Atresia

Lithocholic acid (LCA) is a potent hepatotoxic compound. Fetal LCA may have a role in the pathogenesis of neonatal cholestasis/extrahepatic biliary atresia (EHBA). Fetal liver efficiently hydroxylates LCA in several positions. This may represent a detox-ification mechanism. In the present study LCA, cholic acid (CA) and chenodeoxycholic acid (CDCA) were quantitated by gas chromatography-mass spectrometry using selected ion monitoring in small amounts of stored dried blood from six newborn infants with EHBA and fourteen con-trols. The blood was collected at neonatal metabolic screening. Mean blood levels (±S.E.M.) of LCA were 0.11±0.04 μM in the in-fants with EHBA and 0.08±0.02 μM in the control infants. The corresponding levels for CA and CDCA were 15.6±3.6 μM and 7.4±2.5 μM in the infants with EHBA and 1.7±0.3 μM and 1.8±0.4 μM in the controls. The increased levels of CA and CDCA in the infants with liver disease can be explained by cholestasis. The low blood levels of LCA indicate a normal fetal metabolism of this bile acid in EHBA.     

Comparison of CMV pp65 antigen and IgM antibody detection for early recognition of CMV primary infection and reactivation

Detection of Cytomegalovirus (CMV) pp65 antigen and CMV IgM antibody were compared for the early diagnosis of CMV primary infection or reactivation. Sixty seven immunocompromised patients were studied prospectively for the diagnosis of CMV primary infection or reactivation. CMV IgM antibody was detected in 19 (28.43%) of the 67 immunocompromised patients, whereas pp65 antigen was detected in 20 (29.8%). Among the 19 patients who were positive for both pp65 antigen and CMV IgM antibody, pp65 antigen was detected earlier in 10 of 19 patients. In the remaining 9 patients IgM antibody against CMV was detected simultaneously with the pp65 antigen. The pp65 antigen appeared on an average 16.37 days earlier than that of CMV IgM antibody.     

肾移植受者外周血白细胞CMV抗原阳性细胞数及意义

【目的】探讨肾移植受者外周血白细胞巨细胞病毒(CMV)PP-65抗原阳性细胞数的变化及意义。【方法】用免疫细胞化学法检测外周血白细胞CMV-PP65抗原,术后头3个月每周1次。【结果】273例肾移植受者中124例术后检出CMV-PP65抗原阳性,初次检出CMV-PP65抗原的平均时间为(24.1±11.3)d,每5万白细胞中CMV抗原阳性细胞数均值为7.1±5.8,其中5例CMV抗原阳性细胞数超过10/5万白细胞。无症状性和症状性CMV感染受者初次检出CMV抗原阳性细胞数分别为(6.7±5.6)/5万白细胞、(10.1±9.3)/5万白细胞(P>0.05);峰值水平为(8.1±4.2)/5万白细胞、(26.3±5.7)/5万白细胞(P<0.05);分别有17例(15%)、12例(100%)患者其峰值超过10/5万白细胞(P<0.05)。抗病毒治疗中90例(72.6%)患者CMV抗原阳性细胞数进一步升高。【结论】肾移植受者在CMV感染早期病毒复制能力强,CMV抗原阳性细胞数峰值有助于预测症状性CMV感染。     

肝胆显像、肝功各酶及胆红素对婴儿黄疸的鉴别

目的研究放射性核素肝胆显像、肝功各酶及胆红素的测定对临床难以鉴别的婴儿肝炎综合征（IHS）和先天性胆道闭锁（EHBA）婴儿持续性黄疸的价值。方法采用速率生化分析法检测36例临床难以鉴别IHS和EHBA的婴儿持续性黄疸空腹血清谷草转氨酶（AST）,血清谷丙转氨酶（ALT）,血清乳酸脱氢酶（LDH）,血清谷氨酰转肽酶（GGT）,血清碱性磷酸酶（ALP）,血清总胆红素（TBILI）,血清直接胆红素（DBILI）及血清间接胆红素（IBILI）。并于当天对患儿行肝胆显像。结果肝胆显像诊断IHS灵敏度为85%（17/20）,特异度为100%（16/16） 诊断EHBA灵敏度为100%（16/16）,特异度为85%（17/20）。患儿血清AST、ALT、LDH、GGT、ALP、TBILI、DBILI及IBILI含量高于参考值范围 TBILI及DBILI的含量在EHBA组高于IHS组（P〈0.05）。AST、LDH、ALT、GGT、ALP及IBILI含量在IHS与EHBA组差别无统计学意义（P〉0.05）。结论婴儿持续性黄疸均有肝损害。肝胆显像、血清肝功各酶及胆红素测定能无创、安全、较准确地鉴别IHS与EHBA,提高IHS和EHBA患者的诊断,对于婴儿持续性黄疸治疗的选择有重要意义。     

用间接免疫荧光法和PCR技术重新评价抗CMV－抗体检测的临床意义

为了正确评价临床常用的检测抗巨细胞病毒（ＣＭＶ）抗体的临床意义，用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）和聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了５０例急性黄疸型甲型肝炎患儿血白细胞中ＣＭＶ早期抗原（ＥＡ）和晚期抗原（ＬＡ）、血白细胞及尿沉渣ＣＭＶ－ＤＮＡ，阳性率分别为５８％、２２％、６８％、６２％。同期检测抗ＣＭＶ－ＩｇＧ、抗ＣＭＶ－ＩｇＭ，并观察ＩｇＧ急性期／恢复期是否升高４倍以上（ＩｇＧ↑↑），阳性率分别为８６％、３４％及４６％。仅检测１次ＩｇＧ，１４％的患者会漏诊；动态监测ＩｇＧ，４３．９％的活动性ＣＭＶ感染者会漏判；仅检测１次ＩｇＭ，５８．５％的活动性ＣＭＶ感染者会漏判。７９％的ＩｇＧ阳性患者为活动性感染（ＥＡ、ＬＡ、ＩｇＧ↑↑或ＩｇＭ任何１项阳性）；原发性及继发性活动性ＣＭＶ感染者的ＩｇＧ↑↑、ＥＡ、ＩｇＭ阳性率分别为１００％、４２．９％、２８．６％和４７．０％、７６．５％、４４．１％，表明原发感染诊断主要依靠ＩｇＧ↑↑，而继发活动感染则需多种指标。同期检测了２２名健康ＣＭＶ感染儿童的上述指标，与之无显著差异。