Thermobifida fusca WSH03-11突变株合成角质酶的发酵条件

以放线菌Thermobifida fusca WSH03—11——高产角质酶突变株为出发菌株，在摇瓶中考察了碳、氮源等条件以及接种量、装液量和初始pH值等环境条件对突变株细胞生长和产角质酶的影响。通过优化发酵条件，突变菌株的角质酶酶活达10．1U／mL，提高了15％。在此基础上，在5L发酵罐中进一步研究了碳源流加对突变株发酵产酶的影响，结果发现，分别在0、24、48h添加1％乙醇，角质酶酶活达到16．4U／mL，细胞干重（DCW）达到3．7g／L，而且发酵时间也由110h缩短到50h。     

产纤溶酶米曲霉的筛选及诱变育种

利用自己设计的筛选方法，从不同的酿造曲样中筛选出1株产纤溶酶酶活较高的米曲霉菌株SA-6，其产纤溶酶酶活为25U／mL。SA-6经过紫外线、^60Co和亚硝基胍诱变，筛选得到突变株NA-25，其产酶酶活为63U／mL，是出发菌株SA-6的2．52倍。突变株NA-25的发酵性状改变，其产纤溶酶的高峰比出发菌株迟了约10h。     

霉菌酸性蛋白酶高产突变菌株9169的选育

对一株宇佐美曲霉进行紫外光、微波和60Co的逐级诱变育种,使酸性蛋白酶产量从2800U/mL提高到7200U/mL.突变株传代多次,产酶性能保持稳定;对突变株与出发株的发酵过程进行了比较研究,发现突变株最大产酶时间提前10h以上,而培养基pH值对产酶有一定影响.     

高产中性纤维素酶菌株的诱变选育和筛选方法

设计了一种根据水解透明圈与菌落直径之比(D／d)以初步判断菌株产酶活力大小的方法,发现菌株的液体发酵酶活的对数(lgE)和菌落透明圈直径与菌落直径之比(D／d)基本上呈线性关系.采用紫外线和γ射线对中性纤维素酶产生菌木霉ZC(39 U／mL)进行了反复诱变和大量筛选,得到了一株高产中性纤维素高产突变菌株BE40-39(99 U／mL),并对出发株ZC和突变株BE40-39的性状进行了比较.     

高产纤维素酶菌株的诱变选育和筛选

用青霉（Penicillium sp．）HK-003为原始菌，经亚硝基胍（NTG）、羟胺复合诱变，根据变异菌株菌落形态变化与产酶高低的关系。结合酶活力检测理化指标，筛选出一株高产稳定的纤维素酶菌株LX-435，其产酶能力由200U／mL提高到415U／mL，较出发菌株提高2．08倍。对该菌种进行了连续8次继代培养，结果表明其遗传性状稳定。     

胆固醇氧化酶发酵研究

对从土壤中筛选到的菌株ＤＧＣ－００７进行ＵＶ诱变,选育到菌株ＤＧＣ－０４８．对影响突变株产酶的条件进行了优化,初步确定了ＤＧＣ－０４８合适的产酶摇瓶培养基组成．在发酵温度为３０℃,培养基起始ｐＨ７．５～８．０的条件下,接种量１０％,发酵４８ｈ,产酶可达３５０μｍｏｌ／（ｍｉｎ·Ｌ）     

枯草杆菌Bacillus sp F26产过氧化氢酶的发酵条件

从内蒙古呼伦贝尔草原的盐碱湖中分离到的一株低度嗜盐嗜碱细菌Bacillus sp F26，能积累高水平过氧化氢酶（CAT）。对Bacillus sp F26发酵产过氧化氢酶的环境与营养条件的研究结果表明，其积累高水平过氧化氢酶的适宜环境条件为：温度37℃，种龄20-22h，接种量5％，装液量50mL／（250mL的摇瓶）。适宜发酵培养基组成（g／L）为：葡萄糖15，牛肉膏10，玉米浆10，酵母膏5，磷酸二氢钾1，氯化镁0．2，氯化钠50，碳酸钠10。采用上述条件进行摇瓶分批发酵实验，发酵20h，过氧化氢酶酶活达到16．32U／mL，细胞干重为4．12g／L。进一步研究发现，在对数生长后期（16h）添加2mmol／L的H2O2可以明显刺激产酶，在5L的发酵罐上进一步以指数速率方式流加H2O2，由于该流加方式可降低H2O2对细胞的毒害作用，过氧化氢酶酶活达到29．89U／mL，与分批发酵相比提高了92．8％。     

啤酒酿造用复合酶的研制

从一系列枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）和淀粉液化芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）出发，经筛选和诱变选育，得到一株淀粉液化芽孢杆菌突变株（ＷＬ－ＢＡ－ｌ），该菌株经三角瓶摇瓶和２０Ｌ发酵后，在３０００Ｌ标准通风罐上进行试验，菌株发酵周期短，发酵液中β－葡聚糖酶约为１２０ｕ／ｍｌ，α－淀粉酶约１５０ｕ／ｍｌ，蛋白酶约１８００ｕ／ｍｌ．发酵液经压滤浓缩后制得液体酶制剂。     

突变黑曲霉高产β-葡萄糖苷酶的培养基优化

对实验室筛选出产β- 葡萄糖苷酶的黑曲霉进行辐射诱变处理得到高产酶突变菌株,同时采用单因素和正交实验对黑曲霉产酶培养基进行优化研究.结果表明:经过X射线辐射诱变的黑曲霉产的β- 葡萄糖苷酶活力提高了18.86 U/mL.该菌株最适宜产酶的培养基为(质量分数%): 麸皮与玉米粉(1∶1)1.5、 (NH 4 ) 2 SO 4 0.15、 KH 2 PO 4 0.2、吐温80 0.1,所得酶活力最大可达到59.86 U/mL.     

多重抗药性突变株中α－淀粉酶高产菌株选育

以解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｅｆａｃｉｅｎｓ）Ａ－４为出发菌株，经诱变处理，选育多重抗药性突变株。研究结果表明，抗药性突变株α－淀粉酶产量提高的正变率和正变幅度明显大于非抗药性突变株，负变率和负变幅度也较高。经ＮＴＧ和ＮＴＧ－ＵＶ诱变处理，获得一株林可霉素、Ｄ－环丝氨酸和万古霉素多重抗性突变株ＬＣＶ＿５（Ｌｉｎ￣ｒ，Ｃｓ￣ｒ，Ｖｍ￣ｒ），其α－淀粉酶活力比出发菌株Ａ－４提高３２．５％，发酵周期短，摇瓶为４０ｈ，酶活力达４６１ｕ／ｍｌ．     

培养基及培养条件对普鲁兰酶的影响

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶的菌株,初步鉴定为芽孢杆菌．通过优化发酵培养基及发酵培养条件,在２５０ｍＬ的摇瓶中可达到４．５μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍＬ）的普鲁兰酶酶活．优化后的发酵培养基成分如下：玉米支链淀粉２ｇ／ｄＬ,蛋白胨２ｇ／ｄＬ,牛肉膏１．５ｇ／ｄＬ,ＮａＣｌ０．５ｇ／ｄＬ,ＭｎＳＯ４２μｍｏｌ／Ｌ．摇瓶发酵工艺条件：接种量１７％,温度３７℃,摇瓶转速２２０ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ６．０,发酵周期３２ｈ．通过２Ｌ容积的发酵罐批式发酵,酶活可稳定在３．３μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍＬ）左右     

黑曲霉产α-转移葡萄糖苷酶固态发酵条件优化

摘要：对产α-转移葡萄糖苷酶的黑曲霉U菌株固态发酵条件进行了优化．结果表明：麸皮和水的质量比为1：1较好，35℃培养48h时产酶量及酶活较高；U菌株生长的最适pH值为6．0；麸皮中的碳源和氮源可以满足该菌株产酶的需要，可以不外加碳源和氮源．     

组成型纤维素酶高产菌的筛选及产酶条件优化

从富含植物纤维素的土样中筛选得到一株组成型纤维素酶产生茵LC-9,结合Biolog微生物自动鉴定仪和16S rDNA序列分析,该茵株鉴定为Bacillus subtilis.通过发酵与产酶条件优化,确定了菌株最佳培养条件.在优化条件下发酵35 h后,内切纤维素酶活力可达1 301.4U/ml,,木聚糖酶活力可达289.2 U/mL.该菌株产酶发酵周期短,无需纤维素类物质的诱导,推测为一株新型组成型多功能纤维素酶高产菌株.     

从白蚁中分离筛选纤维素分解菌及其产酶性质

以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为惟一碳源对白蚁悬液进行富集培养,并从中分离菌株32株,通过纤维素刚果红初筛平板获得透明圈较大的8株菌,在此基础上进行摇瓶复筛,得到1株酶活较高的菌株(B3).同时对其酶促反应温度、稳定性及其酶作用底物进行了测定.结果表明:CMCase的最适酶促反应温度为50 ℃,且在该温度下有较强的稳定性,保温30 min酶活基本保持不变,60 min酶活损失约14%,菌株B3所产纤维素酶对玉米秸秆纤维素粉有较强的水解能力,同时对滤纸和脱脂棉也有一定的降解能力.     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)进行亚硝基胍和60Co诱变,获得一株γ PGA的高产菌株C9.γ PGA质量浓度由9.44g/L提高到19.76g/L,提高了109%.突变株传代10次,质量浓度保持基本稳定.通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化.当发酵培养基中含柠檬酸12g/L、甘油80g/L、L 谷氨酸23g/L、氯化铵7g/L,pH7.0,装液量为50mL/250mL三角瓶,接种体积分数为5%时,37℃摇瓶发酵72h,γ PGA达到23.32g/L.     

原生质体紫外诱变选育鸟苷高产菌株

以一株鸟苷产生菌Bacillus subtilis JSIM-G518为出发菌株,采用原生质体紫外诱变的方法,选育具有核苷水解酶缺失,磺胺胍,德夸菌素、狭霉素C等抗性的突变株,摇瓶的鸟苷产量达到24.0 g/L,比出发菌株提高了30%.该突变株遗传性状稳定,连续传代10次,仍维持较高的鸟苷产量.     

一株曲霉果糖转移酶的发酵条件及转果糖基活性

对一株曲霉果糖转移酶菌株的产酶培养条件进行了研究。确定了最佳培养基组成：初始蔗糖质量浓度15～18g／dL，氮源为酵母膏，K2HPO4对果糖转移酶的产生具有明显的促进作用，添加0．2g／dLCMC能够使果糖转移酶活力提高到原来的1．3倍，在pH5．5，30℃条件下，果糖转移酶最高酶活力为30．42U／mL。HPLC分析结果表明，转糖基产物为总质量的55．8％。     

粗状假丝酵母(Candida valida T2)生产脂肪酶的发酵条件

对粗状假丝酵母产生脂肪酶的培养条件进行了研究。结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜培养基组成为:桐油15mL/L,黄豆粉30g/L,糊精10g/L,硝酸铵10g/L,MgSO4·7H2O1g/L,K2HPO42g/L,Tween800.5g/L;最佳培养为温度30℃、发酵液起始pH6,摇瓶发酵脂肪酶活力达到1467U/mL。     

黑曲霉VVTP84生产果糖转移酶

从产果糖转移酶的 11株菌株中筛选出一株黑曲霉VVTP84菌 .该菌株在含蔗糖的培养基中 ,最佳摇瓶发酵时间为 30h ,pH值为 7.0 ;当蔗糖质量浓度在 2 5 0g/L以内时 ,产酶与蔗糖质量浓度呈正相关 ;MgSO4 ·7H2 O和KH2 PO4 的添加量分别以控制在 1.5 g/L和 1.0 g/L为宜     

新型果蔬加工用酶--粥化酶

以黑曲霉菌株A.niger103为出发株,通过紫外、亚硝基胍等诱变剂进行反复诱变处理,得到一株高产菌株A.niger537,果胶酶酶活提高了130%,同时测定了其纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶及淀粉酶的酶活,分别达到4.76,176.82,832.4,105.73 U/mL.并通过单因素试验研究了营养条件对改变各酶产酶量及其酶系组成的影响.